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TRAIL受体在膀胱癌中的表达及意义 被引量：4
1
作者 张志超 张智清 +3 位作者 张强 张立国 曾革非 郭应禄 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期616-618,共3页
目的　了解肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 (TRAIL)受体在膀胱癌组织中的表达及意义。　方法　采用RT PCR及Northernblot方法检测TRAIL受体在膀胱癌组织及正常膀胱粘膜中的表达。　结果　死亡受体DR4、DR5在膀胱癌组织及正常膀胱粘膜中... 目的　了解肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 (TRAIL)受体在膀胱癌组织中的表达及意义。　方法　采用RT PCR及Northernblot方法检测TRAIL受体在膀胱癌组织及正常膀胱粘膜中的表达。　结果　死亡受体DR4、DR5在膀胱癌组织及正常膀胱粘膜中呈强表达 ,假受体DcR 1在正常膀胱粘膜呈强表达 ,假受体DcR 2未见表达。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 癌 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体
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全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体单克隆抗体蛋白高效表达体系的建立及其功能性分析 被引量：2
2
作者 石佳宁 韩晓健 +2 位作者 吕福莲 毕冬梅 金艾顺 《国际免疫学杂志》 CAS 2015年第5期403-408,共6页
目的建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体（TRAIL）-R1单克隆抗体（TR1-404）蛋白体系，并评价TR1-404抗体蛋白功能特性。方法构建pcDNA3．4载体抗体质粒，转染Expi293F^TM细胞，表达抗体蛋白。收集细胞培养上清，... 目的建立高效表达全人源抗人肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体（TRAIL）-R1单克隆抗体（TR1-404）蛋白体系，并评价TR1-404抗体蛋白功能特性。方法构建pcDNA3．4载体抗体质粒，转染Expi293F^TM细胞，表达抗体蛋白。收集细胞培养上清，使用ProteinA／G纯化抗体蛋白。利用双抗体夹心和间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体蛋白浓度及特异性。流式细胞分析检测TRl_404与Hela细胞和HCT116细胞表面TRAIL-R1的结合能力。MTT法检测在不同时间点TR1-404、TRAIL及二者联合作用对Hela细胞和HCT116细胞生存和增殖的影响。Annexin V／PI双染色检测Hela细胞和HCT116细胞凋亡。结果成功构建pcDNA3．4载体抗体质粒和建立Expi293F^TM细胞蛋白高效表达系统。精制的TR1-404抗体既与重组TRAIL-R1抗原特异性结合，也能与Hela和HCT116细胞表面的TRAIL-R1结合。发现TR1-404联合TRAIL作用于Hela细胞，肿瘤细胞凋亡效果显著提高。而在HCT116细胞中，TRAIL与TR1-404的联合作用未见显著提高。结论成功建立抗体蛋白高效表达系统。TR1-404抗体特异性与TRAIL-R1抗原结合。TR1-404抗体提高TRAIL诱导的Hela细胞凋亡作用。本研究为TRAIL—R1靶向的抗肿瘤治疗研究提供新方法。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体 单克隆抗体 凋亡
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肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体及其I型受体单克隆抗体联合体内外抗肿瘤作用 被引量：3
3
作者 黄晶晶 孙欣 +2 位作者 李亚英 韩晓建 金艾顺 《国际免疫学杂志》 CAS 2018年第1期7-12,共6页
目的建立高效表达肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（tumor necrosis factor related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）单克隆抗体和TRAIL蛋白的方法，并验证抗体TR1-419与TRAIL的体内外联合抗肿瘤作用。方法利用Expi293蛋白表达系统... 目的建立高效表达肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（tumor necrosis factor related apoptosis—inducing ligand，TRAIL）单克隆抗体和TRAIL蛋白的方法，并验证抗体TR1-419与TRAIL的体内外联合抗肿瘤作用。方法利用Expi293蛋白表达系统表达抗体，采用ProteinG进行抗体蛋白的纯化。利用原核表达系统表达SUMO-Strep—TRAIL蛋白并通过N^2＋“柱及Strep两步亲和层析获得高纯度的TRAIL蛋白。流式细胞术检测抗体与肿瘤细胞表面TRAIL—R1的特异性结合能力。采用MTT法验证制备的TRAIL联合TR1-419单抗蛋白对肿瘤细胞的杀伤活性。通过Western blot初步检测TRAIL联合TR1-419抗体体外杀伤肿瘤的机制。建立裸鼠肿瘤模型，验证TRAIL联合TR1-419体内抗肿瘤作用。结果成功建立了Expi293抗体蛋白高效表达系统及TRAIL蛋白原核表达系统。TR1-419单抗特异性结合表达TRAIL—R1的HeLa细胞；TRAIL显示抗肿瘤作用。TRAIL联合TR1-419作用于HeLa细胞，明显提高TRAIL杀伤肿瘤细胞的活性，同时激活Caspase8，启动凋亡信号转导通路。体内实验证明了TR1-419可增强TRAIL的抑制肿瘤生长作用。结论通过建立高效表达方法制备TR1-419抗体及TRAIL蛋白，并验证TR1-419可通过活化Caspase-8提高TRAIL在体内外抗肿瘤作用，为抗肿瘤免疫治疗提供新策略。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体受体I 单克隆抗体 细胞凋亡
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