新生猪肾近曲小管上皮细胞的体外培养与鉴定 被引量：11

1

作者 沈青 姚裕家 +1 位作者 熊英 王峥 《华西医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期440-443,共4页

目的　分离新生猪肾小管上皮细胞进行体外培养 ,为研究围生期肾小管上皮细胞生物学行为特征提供理论基础。方法　采用机械分散结合 型胶原酶 (0 .5 g/ L)消化的方法纯化肾小管片段 ,选择含 10 %的 FCS低糖DMEM培养基 ,置于 5 %CO2 ,37... 目的　分离新生猪肾小管上皮细胞进行体外培养 ,为研究围生期肾小管上皮细胞生物学行为特征提供理论基础。方法　采用机械分散结合 型胶原酶 (0 .5 g/ L)消化的方法纯化肾小管片段 ,选择含 10 %的 FCS低糖DMEM培养基 ,置于 5 %CO2 ,37℃孵箱培养。 0 .2 5 %胰蛋白酶用于肾小管上皮细胞纯化和传代培养。应用细胞形态学 (光镜和电镜 )、免疫细胞化学 (Pan CK和 CK18单抗 )和酶组织化学 (酸性磷酸酶和碱性磷酸酶 )方法进行肾近曲小管上皮细胞鉴定 ;用流式细胞术做细胞纯度鉴定。结果　出生 12～ 2 4小时的新生猪肾小球直径为 5 0～ 70 μm,出生5～ 6天的肾小球直径为 70～ 98μm。新生猪肾近曲小管上皮细胞体外培养对葡萄糖的需求量不高。培养成功并传 6～8代 ,肾小管上皮细胞纯度达 95 %～ 98%。综合形态学、免疫细胞化学和酶组织化学结果 ,支持细胞来源于肾单位的近曲小管。结论　采用机械分散 -酶消化纯化肾小管 ,0 .2 5 %胰蛋白酶纯化肾小管上皮细胞及低糖 DMEM培养新生猪肾近曲小管的方法是可行的。 展开更多

关键词 新生猪 肾近曲小管上皮细胞 体外培养 鉴定

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梗阻性黄疸肾缺血再灌注损害及其机制的研究 被引量：2

2

作者 何宇 李昆 何振平 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第12期1197-1200,共4页

目的　探讨梗阻性黄疸大鼠在短暂性肾缺血再灌注过程中肾功能改变与脂质过氧化反应及肾近曲小管上皮细胞内游离钙离子浓度变化之间的关系。方法　实验大鼠分为正常对照组 (S组 ) 正常肾缺血再灌注组 (SRI组 ) 梗阻性黄疸组 (J组 ) ... 目的　探讨梗阻性黄疸大鼠在短暂性肾缺血再灌注过程中肾功能改变与脂质过氧化反应及肾近曲小管上皮细胞内游离钙离子浓度变化之间的关系。方法　实验大鼠分为正常对照组 (S组 ) 正常肾缺血再灌注组 (SRI组 ) 梗阻性黄疸组 (J组 ) 梗阻性黄疸肾缺血再灌注组 (JRI组 )。在胆道梗阻 1周后行双侧肾动脉夹闭 10min后放开 ,观察再灌注后 0 4 12 2 4h等不同时相点观察肾功能的变化。采用钙离子荧光指示剂Fura 2 /Am负载测定各组 2 4h时相点肾近曲小管上皮细胞内游离钙离子浓度。结果　JRI组内生肌酐清除率随再灌注时间延长持续性下降 ,J组及JRI组肾组织丙二醛水平明显升高同时超氧化物歧化酶含量下降。JRI组肾近曲小管上皮细胞内游离钙离子浓度显著升高。结论　在梗阻性黄疸状态下大鼠肾脏对缺血再灌注损伤的敏感性明显升高 ,缺血再灌注损伤可能与梗阻性黄疸术后急性肾功能衰竭的发生有关。氧自由基及钙超载参与了这一过程。 展开更多

关键词 梗阻性黄疸 肾缺血再灌注损伤 丙二醛 超氧化物歧化酶 肾近曲小管上皮细胞 细胞内游离钙

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多巴胺D1受体通过PKC途径调节肾近曲小管上皮肾胺酶的表达 被引量：2

3

作者 王少雄 杨剑 +4 位作者 陈彩宇 韩愈 任红梅 何多芬 曾春雨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期2558-2561,共4页

目的研究多巴胺D1类受体对Wistar-Kyoto(WKY)大鼠肾近曲小管上皮细胞(renal proximal tubule,RPT)中肾胺酶(renalase)的表达与活性的影响及其作用机制。方法以WKY大鼠RPT细胞株为实验对象,采用RT-PCR方法检测D1类受体激动剂fenoldopam对... 目的研究多巴胺D1类受体对Wistar-Kyoto(WKY)大鼠肾近曲小管上皮细胞(renal proximal tubule,RPT)中肾胺酶(renalase)的表达与活性的影响及其作用机制。方法以WKY大鼠RPT细胞株为实验对象,采用RT-PCR方法检测D1类受体激动剂fenoldopam对renalase mRNA转录水平的影响,免疫印迹法(Western blot)测定蛋白表达的变化,尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NADH)氧化法检测renalase活性。结果多巴胺D1类受体激动剂fenoldopam(10-6 mol/L)作用24 h可显著上调WKY大鼠RPT细胞renalase的mRNA[(1.09±0.07)vs(0.67±0.11)]和蛋白[(1.12±0.10)vs(0.73±0.05)]表达水平(P<0.05)。与对照组相比,fenoldopam(10-6 mol/L)刺激24 h后,RPT细胞renalase的NADH氧化活性也明显增高[(3.98±0.06)vs(3.55±0.13),P<0.05]。fenoldopam上调WKY大鼠RPT细胞的renalase的转录、蛋白合成和活性,并呈一定的浓度依赖性。fenoldopam对renalase的上调作用可以被蛋白激酶C抑制剂(protein kinase C inhibitor,PKCI,即PKC抑制肽19-31,10-6 mol/L)所阻断。结论多巴胺D1类受体能够增强WKY大鼠RPT细胞中renalase的表达水平与活性,该调解作用与PKC信号途径有关。 展开更多

关键词 多巴胺D1类受体 肾胺酶 肾近曲小管上皮细胞 蛋白激酶C

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转化生长因子β1在氟中毒肾脏损害发生机制中的意义 被引量：1

4

作者 刘钰 刘建 +2 位作者 曾光 朱万胜 王自英 《中国地方病防治》 CAS 2018年第4期386-387,共2页

地方性氟中毒是广泛的一种地方性疾病。有学者研究发现长期摄入过量氟可导致典型的氟骨症、氟斑牙改变。肾脏作为氟的一种主要排泄器官,氟主要损害肾近曲小管上皮细胞,使细胞的膜性结构受到严重破坏。氟剂量越大,损伤程度越大,同时过量... 地方性氟中毒是广泛的一种地方性疾病。有学者研究发现长期摄入过量氟可导致典型的氟骨症、氟斑牙改变。肾脏作为氟的一种主要排泄器官,氟主要损害肾近曲小管上皮细胞,使细胞的膜性结构受到严重破坏。氟剂量越大,损伤程度越大,同时过量氟可诱导肾组织细胞凋亡。近年来,关于氟中毒肾损害研究越来越多,但目前对于过量氟所致肾损害机制尚不十分明确。笔者本研究旨在分析转化生长因子β1（TGF-β1）在氟中毒肾脏损害发生机制中的意义. 展开更多

关键词 转化生长因子Β1 地方性氟中毒 肾脏损害 发生机制 肾近曲小管上皮细胞 肾损害机制 地方性疾病 TGF-β

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中毒性急性肾衰早期肾近曲小管上皮细胞细胞骨架的改变 被引量：1

5

作者 罗正茂 张训 侯凡凡 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期228-231,共4页

目的 :了解中毒性急性肾衰 (ARF)早期肾近曲小管上皮细胞 (PTC)细胞骨架微丝和微管的改变 ,并探讨其改变的机制。方法 :采用皮下注射氯化汞建立中毒性ARF模型 ,用免疫组化和电镜法观察中毒 6h和 12hPTC细胞骨架微丝和微管的改变 ,并用... 目的 :了解中毒性急性肾衰 (ARF)早期肾近曲小管上皮细胞 (PTC)细胞骨架微丝和微管的改变 ,并探讨其改变的机制。方法 :采用皮下注射氯化汞建立中毒性ARF模型 ,用免疫组化和电镜法观察中毒 6h和 12hPTC细胞骨架微丝和微管的改变 ,并用高效液相色谱法测试细胞内ATP水平。结果 :免疫组化显示微丝随着中毒时间的延长 ,PTC刷状缘损伤逐渐加重 ,胞浆内有片状肌动蛋白分布 ;电镜示中毒 6h微绒毛变成球形小体 ,中毒 12h微绒毛部分缺失 ;免疫组化微管示中毒 6hPTC严重受损 ,着色变浅、不规则 ,中毒 12h着色部分恢复 ;细胞内ATP水平随着中毒时间延长而逐渐下降。结论 :中毒性ARF时 ,PTC细胞骨架微丝和微管发生变化 ,微丝的改变可能与细胞内ATP水平相关。 展开更多

关键词 急性肾功能衰竭 肾近曲小管上皮细胞 细胞骨架

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水通道蛋白与放射性损伤 被引量：1

6

作者 孙成英 赵玉霞 《中国辐射卫生》 2011年第1期124-126,128,共4页

长期以来，人们普遍认为细胞内外的水分子是以简单的跨膜扩散方式来通过脂质双层膜，但某些细胞如红细胞、。肾近曲小管上皮细胞对渗透压引起的水通透性很高，很难单纯以简单扩散来解释。Agre（t991年）在研究红细胞膜上人类RH抗原时时... 长期以来，人们普遍认为细胞内外的水分子是以简单的跨膜扩散方式来通过脂质双层膜，但某些细胞如红细胞、。肾近曲小管上皮细胞对渗透压引起的水通透性很高，很难单纯以简单扩散来解释。Agre（t991年）在研究红细胞膜上人类RH抗原时时意外发现水通道蛋白（Aquaporins，AQPs），Preston（1992年）等[1]先后完成对AQPlDNA分子结构和功能鉴定， 展开更多

关键词 水通道蛋白 放射性损伤 肾近曲小管上皮细胞 扩散方式 红细胞膜 水通透性 RH抗原 功能鉴定

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尿液中-γGT与NAG mAlb联合检测对糖尿病肾病早期诊断的意义

7

作者 周永年 《山西医药杂志》 CAS 2006年第4期373-374,共2页

关键词 糖尿病肾病 NAG活性 Γ-GT N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 早期诊断 联合检测 肾近曲小管上皮细胞 谷氨酰转移酶 尿液

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复方积雪草有效组分对人肾小管上皮细胞补体C_3表达的影响 被引量：13

8

作者 朱晓玲 王永钧 +2 位作者 杨汝春 张迎华 陈洪宇 《中国中西医结合肾病杂志》 2007年第3期131-134,共4页

目的:探讨复方积雪草有效组分——积雪草苷/大黄素干预肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人肾近曲小管上皮细胞(HPTEC)补体C3mRNA及蛋白的表达水平。方法:采用HPTEC,模型组TNF-α10ng/ml诱导,治疗组在TNF-α诱导的同时,以不同浓度的积雪草... 目的:探讨复方积雪草有效组分——积雪草苷/大黄素干预肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人肾近曲小管上皮细胞(HPTEC)补体C3mRNA及蛋白的表达水平。方法:采用HPTEC,模型组TNF-α10ng/ml诱导,治疗组在TNF-α诱导的同时,以不同浓度的积雪草苷、大黄素以及积雪草苷合大黄素进行干预,于24h后分别提取细胞RNA及上清,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶链免疫方法(ELISA)分别检测HPTECC3mRNA和蛋白的表达。结果:正常HPTEC具有C3mRNA和蛋白表达,经TNF-α诱导后C3表达明显上调,用不同浓度的积雪草苷、大黄素以及积雪草苷合大黄素干预后,C3mRNA及蛋白水平表达出现不同程度的下调,呈一定的剂量依赖关系和协同作用。结论:复方积雪草有效组分能够抑制炎性细胞因子TNF-α上调所致的肾局部C3过度产生。 展开更多

关键词 积雪草苷/大黄素 人肾近曲小管上皮细胞 肿瘤坏死因子-Α 补体C3

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葛根素对人肾近曲小管上皮细胞ABCG2表达影响 被引量：12

9

作者 张洪长 张莹 +2 位作者 律广富 王恩鹏 陈新 《上海中医药杂志》 2016年第3期74-77,共4页

目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对... 目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对HK2细胞的影响;检测ALP活性,观察HK2细胞内酶促反应状态;荧光定量PCR法、Western blotting法检测对照组与给药组HK2细胞内ABCG2基因蛋白表达。结果葛根素对HK2细胞有促进增殖作用(P<0.05);100 mg/L葛根素组ALP活性最佳(P<0.01)。荧光定量PCR和Western blotting法检测结果显示,葛根素组HK2细胞内ABCG2基因及蛋白表达明显高于对照组,其中100 mg/L葛根素组HK2细胞内ABCG2最为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素能够增加HK2细胞内ABCG2基因蛋白的表达,这可能是葛根素调节痛风患者血尿酸水平的重要分子机制之一。 展开更多

关键词 葛根素 痛风 人肾近曲小管上皮细胞 三磷酸腺苷结合盒转运体G2

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镉对人肾近曲小管上皮细胞毒性的实验研究 被引量：7

10

作者 马静 易建华 +1 位作者 李鑫 吴文婧 《公共卫生与预防医学》 2010年第4期15-17,共3页

目的探讨氯化镉对人肾近曲小管上皮细胞的毒性效应。方法将细胞分成对照组与实验组,计数细胞死亡率,绘制细胞生长曲线,检测乳酸脱氢酶（LDH）活力和丙二醛（MDA）含量。结果随着氯化镉浓度的增高,细胞死亡率、培养液内LDH活力、MDA含量... 目的探讨氯化镉对人肾近曲小管上皮细胞的毒性效应。方法将细胞分成对照组与实验组,计数细胞死亡率,绘制细胞生长曲线,检测乳酸脱氢酶（LDH）活力和丙二醛（MDA）含量。结果随着氯化镉浓度的增高,细胞死亡率、培养液内LDH活力、MDA含量均升高,组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,与染毒剂量作相关分析,相关系数分别为0.858、0.878、0.931,有明显的相关性（P〈0.01）。结论镉对体外培养人肾近曲小管上皮细胞有明显的毒性效应。 展开更多

关键词 人肾近曲小管上皮细胞 镉 毒性效应

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Janus激酶抑制剂对高糖诱导的肾小管上皮细胞转分化的作用 被引量：5

11

作者 张勉之 张敏英 +5 位作者 赵松 段建召 张艳秋 左春霞 程项阳 段惠军 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期364-369,共6页

目的评估Janus激酶抑制剂AG490对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),分别给予高糖和高糖+AG490干预,Western blot检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘素(E-C... 目的评估Janus激酶抑制剂AG490对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞株(HKC),分别给予高糖和高糖+AG490干预,Western blot检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙粘素(E-Cadherin)及信号蛋白STAT1、STAT3、磷酸化STAT1(p-STAT1)和p-STAT3的表达,酶联免疫吸附法测定细胞上清液中TGF-β1和Ⅰ型胶原的分泌,逆转录聚合酶链反应检测TGF-β1 mRNA表达。结果与低糖对照组比较,高糖培养的HKC中α-SMA、p-STAT1和p-STAT3表达明显上调,E-Cadherin表达明显下调,TGF-β1 mRNA表达增加,细胞培养上清液中TGF-β1和Ⅰ型胶原分泌增加。AG490明显下调p-STAT1和p-STAT3表达的同时,明显抑制高糖刺激HKC中α-SMA表达的升高,减轻E-Cadherin表达下降程度,降低TGF-β1 mRNA表达及TGF-β1和Ⅰ型胶原的分泌。结论JAK参与了高糖诱导的HKC转分化,并刺激TGF-β1和细胞外基质分泌,JAK抑制剂AG490能有效拮抗其作用。 展开更多

关键词 人肾近曲小管上皮细胞株 细胞外基质 转化生长因子Β1

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万古霉素诱导人肾小管上皮细胞损伤及其Smad4表达的研究

12

作者 高瑞 肖晓琳 +1 位作者 许建春 宋玮 《现代药物与临床》 CAS 2024年第1期8-13,共6页

目的 研究万古霉素诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤及其Smad同源物4(Smad4)表达,并探讨其潜在的作用机制。方法 使用不同终浓度(0、1、2、3、4、5 mmol/L)的万古霉素溶液作用于HK-2细胞24 h,显微镜下观察万古霉素对细胞形态的影响;蛋白... 目的 研究万古霉素诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)损伤及其Smad同源物4(Smad4)表达,并探讨其潜在的作用机制。方法 使用不同终浓度(0、1、2、3、4、5 mmol/L)的万古霉素溶液作用于HK-2细胞24 h,显微镜下观察万古霉素对细胞形态的影响;蛋白质免疫印迹法检测Smad4、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2的蛋白水平;TUNEL法检测HK-2细胞凋亡情况;CCK8法检测HK-2细胞活力来研究万古霉素对肾脏的毒性作用。构建Smad4过表达质粒,通过CCK8法和TUNEL实验检测Smad4过表达对万古霉素诱导的HK-2细胞损伤的影响。结果 与对照组比较,随着万古霉素浓度升高,HK-2细胞逐渐变形,数量逐渐减少;细胞活力显著降低,凋亡率显著增加(P<0.05、0.01)。与对照组比较,促凋亡蛋白Bax表达显著增高,而抗凋亡蛋白Smad4、Bcl-2表达则显著降低(P<0.05、0.01、0.001)。过表达Smad4后,使万古霉素诱导的HK-2的细胞活力显著增加,凋亡率显著降低(P<0.05、0.001)。结论 万古霉素能够诱导人肾小管上皮细胞损伤,其作用机制可能与调控Smad4的蛋白降解密切相关。 展开更多

关键词 万古霉素 人肾近曲小管上皮细胞 肾损伤 Smad同源物4 B淋巴细胞瘤-2 B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白

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血必净对百草枯诱导人肾近曲小管上皮细胞-2氧化应激和炎症水平的影响 被引量：3

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作者 张万里 余兴蓉 +4 位作者 田昕 洪广亮 曹凯强 项公强 卢中秋 《中国中西医结合急救杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期143-146,共4页

目的观察血必净注射液对百草枯诱导的人肾近曲小管上皮细胞-2(HK-2)氧化应激和炎症水平的影响。方法常规培养HK-2细胞,按随机数字表法分为空白对照组、百草枯中毒模型组、血必净预处理组、血必净对照组。采用高效液相色谱法(HPLC)检测... 目的观察血必净注射液对百草枯诱导的人肾近曲小管上皮细胞-2(HK-2)氧化应激和炎症水平的影响。方法常规培养HK-2细胞,按随机数字表法分为空白对照组、百草枯中毒模型组、血必净预处理组、血必净对照组。采用高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内百草枯含量;采用化学比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)水平。结果随时间延长,百草枯中毒模型组和血必净预处理组HK-2细胞内百草枯含量逐渐升高,作用48 h达峰值,且血必净预处理组HK-2细胞内百草枯含量较百草枯中毒模型组明显降低(mg/L :4.26±0.20比5.77±0.18, P<0.05)。与空白对照组比较,百草枯中毒模型组MDA.TNF-a和IL-6含量明显升高[MDA(nmo<mg): 4.47±0.10 比 2.21 ±0.08, TNF-a (ng/L): 206.91 ± 13.22 比 98.14±5.67), IL-6(ng/L):253.33±5.22 比 116.97± 13.54,均 P<0.05〕,SOD 活性明显降低(U/mg : 33.30±0.62 比 41.58±0.17, P<0.05)。与百草枯中毒模型组比较,血必净预处理组HK-2细胞内MDA、TNF- a和IL-6含量明显降低〔MDA(nmol/mg):2.92 ±0.17 比 4.47 ±0.10, TNF-a (ng/L): 166.29 ±15.47 比 206.91 ± 13.22, IL-6 (ng/L ): 209.39 ±3.18 比253.33 ±5.22,均 P<0.05〕,SOD 活性明显升高(U/mg : 38.10±0.67 比 33.30±0.62, P<0.05)。结论血必净可降低HK-2细胞内百草枯含量以及细胞氧化应激和炎症因子水平。 展开更多

关键词 血必净 百草枯 氧化应激 炎症 人肾近曲小管上皮细胞-2

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普罗布考抑制氧化低密度脂蛋白诱导的人肾近曲小管上皮细胞转分化的作用及机制研究 被引量：2

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作者 朱冰冰 迟杨峰 +3 位作者 王浩 刘育军 王云满 彭文 《临床肾脏病杂志》 2015年第10期620-625,共6页

目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，Ox-LDL）诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用，并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-... 目的研究普罗布考对氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，Ox-LDL）诱导的人肾近曲小管上皮细胞HK-2转分化的保护作用，并探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1（lectin-like oxidized low-density lipoprotein receptor-1，LOX-1）及氧化应激在其中的作用和相互关系。方法采用不同浓度Ox-LDL（0-100ug／ml）孵育HK-2细胞，并予普罗布考（20umol／L）和LOX-1抑制剂多聚肌苷酸（250ug／m1）干预。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞增殖情况，用DCFH—DA法检测活性氧（reactive oxygen species，ROS）活性，生化比色法检测一氧化氮（nitric oxide，N0）浓度，Western blot检测E-钙粘素（cadherin）、a平滑肌动蛋白（a-smooth muscle actin，a-SMA）、LOX-1、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（Nicotinamide adenine dinucleotide 2＇-phosphate reduced tetrasodium salt，NADPH）氧化酶4（NOX4）表达。结果12．5～200ug／ml浓度范围内的Ox-LDL对HK-2细胞的增殖无明显影响，25-100ug／ml的Ox-LDL以浓度依赖方式促进HK-2细胞LOX-1、a-SMA蛋白表达上升，E-cadherin下降。而多聚肌苷酸、普罗布考能使LOX-1、a-SMA蛋白表达抑制，E-cadherin表达上调。50ug／ml的Ox-LDL能促进NOX4表达上调，ROS活性增加（451．5ug／ml kg839．8ug／ml，P〈0．05），NO含量略增加（46．0umol／L比46．2umol／L），但无统计学意义（P〉0．05）。而多聚肌苷酸、普罗布考能使NOX4表达下调，ROS活性下降，但对NO浓度无明显影响。结论Ox-LDL可诱导HK-2细胞转分化，其机制可能与其结合LOX-1促进氧化应激有关，而普罗布考可以通过降低LOX-1，抑制氧化应激损伤，从而延缓HK-2细胞转分化的进程。 展开更多

关键词 肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化 人肾近曲小管上皮细胞 氧化低密度脂蛋白 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1 活性氧

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镉通过氧化应激机制诱导LLC-PK1细胞损伤 被引量：2

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作者 方鑫 李海玲 安彩艳 《中国医药科学》 2014年第3期34-36,共3页

目的探讨镉诱导猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)毒性及氧化应激在其中的作用。方法用不同浓度的氯化镉刺激细胞9h和25μmol/L的氯化镉刺激细胞不同时间,采用Formazan分析细胞存活率反映镉对细胞的损伤程度;以还原型谷胱甘肽(GSH)为靶点,... 目的探讨镉诱导猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)毒性及氧化应激在其中的作用。方法用不同浓度的氯化镉刺激细胞9h和25μmol/L的氯化镉刺激细胞不同时间,采用Formazan分析细胞存活率反映镉对细胞的损伤程度;以还原型谷胱甘肽(GSH)为靶点,影响GSH浓度的两个试剂BSO和NAC,观察镉诱导细胞损伤中氧化应激的作用。结果随着氯化镉染毒时间延长,细胞存活率下降,同样,随着剂量的增加,细胞的存活率逐渐也下降。同时BSO加重镉诱导的细胞损伤,NAC完全抑制镉诱导的细胞损伤。结论氯化镉对LLC-PK1细胞具有明显的毒性,细胞损伤是通过氧化应激介导,且与细胞内的谷胱甘肽的水平有着密切关系。 展开更多

关键词 氯化镉 猪肾近曲小管上皮细胞 氧化应激

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新型TiO_2纳米管透析膜与传统透析膜对细胞生长状态的影响 被引量：2

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作者 朱文 李继伟 +3 位作者 刘剑峰 谭聪 崇保和 杨学兵 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期15-21,共7页

研究采用阳极氧化法制备新型高强度的TiO2纳米管阵列薄膜,通过对纳米管底部进行腐蚀获得两端通透的TiO2纳米管阵列薄膜。在纳米管阵列薄膜表面和高分子透析膜表面种植HK-2细胞和HUVEC细胞,成功制备具有生理功能的生物膜材料。采用MTT方... 研究采用阳极氧化法制备新型高强度的TiO2纳米管阵列薄膜,通过对纳米管底部进行腐蚀获得两端通透的TiO2纳米管阵列薄膜。在纳米管阵列薄膜表面和高分子透析膜表面种植HK-2细胞和HUVEC细胞,成功制备具有生理功能的生物膜材料。采用MTT方法对比研究了TiO2纳米管阵列薄膜、聚醚砜(PES)、混合纤维素以及再生纤维素4种薄膜材料黏附细胞的活性;利用荧光显微镜观察4种材料对两种细胞黏附的影响;同时使用扫描电镜观察细胞在4种薄膜材料上的生长形态。结果表明,TiO2纳米管阵列薄膜最有利于细胞的黏附及增殖,且细胞活性最高,PES薄膜的效果次之,再生纤维素薄膜最不适合细胞的增殖及黏附;荧光显微镜观察证实TiO2纳米管阵列薄膜相比高分子薄膜更能促进细胞的黏附及生长,证实所制备的TiO2纳米管阵列薄膜能够很好地与两种细胞相容,克服了传统透析材料的不足,改善了细胞与材料的黏附,是用于生物人工肾研究较为理想的候选材料。 展开更多

关键词 TIO2纳米管阵列 高分子透析膜 人肾近曲小管上皮细胞 血管内皮细胞 细胞活性

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高糖对肾小管上皮细胞系细胞因子表达的影响 被引量：1

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作者 赵松 史永红 段惠军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第11期1236-1240,共5页

目的观察高糖诱导肾小管上皮细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-Cadherin)的改变及酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490对其的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞系(HKC),分别给予高糖和AG490干预,采用... 目的观察高糖诱导肾小管上皮细胞中转化生长因子β1(TGF-β1)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-Cadherin)的改变及酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490对其的影响。方法体外培养人肾近曲小管上皮细胞系(HKC),分别给予高糖和AG490干预,采用免疫沉淀和Western blot检测JAK2磷酸化的表达;Western blot检测α-SMA、E-cadherin及信号蛋白STAT1、STAT3等的水平;ELISA法测定细胞上清液中TGF-β1和Ⅰ型胶原的分泌;RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。结果与低糖组比较,高糖培养HKC中α-SMA、p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达明显上调,E-Cadherin表达明显下调,TGF-β1mRNA表达增加;细胞上清液中TGF-β1、Ⅰ型胶原分泌增加。AG490明显抑制高糖刺激HKC中α-SMA表达的升高,减轻E-Cadherin表达下降程度,降低TGF-β1mRNA表达及TGF-β1、Ⅰ型胶原的分泌。结论JAK/STAT信号途径可能参与高糖诱导的HKC中TGF-β1和细胞外基质的分泌。 展开更多

关键词 人肾近曲小管上皮细胞系 细胞外基质 转化生长因子Β

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鱼胆毒素致肾小管上皮细胞损伤的药物干预研究 被引量：1

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作者 杨蝶 谭玉利 +1 位作者 谭州科 杨亦彬 《贵州医药》 CAS 2014年第3期208-211,共4页

目的观察不同药物对鱼胆毒素(鲤醇硫酸酯钠)致人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法从新鲜草鱼胆汁中提取鲤醇硫酸酯钠,通过体外培养HK-2细胞系,应用MTT法评价鲤醇硫酸酯钠对HK-2细胞增殖抑制作用,并观察丹参、地塞米松、氨氯地... 目的观察不同药物对鱼胆毒素(鲤醇硫酸酯钠)致人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法从新鲜草鱼胆汁中提取鲤醇硫酸酯钠,通过体外培养HK-2细胞系,应用MTT法评价鲤醇硫酸酯钠对HK-2细胞增殖抑制作用,并观察丹参、地塞米松、氨氯地平、水飞蓟宾、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)多种药物对鲤醇硫酸酯钠染毒HK-2细胞的干预效果。结果 (1)HK-2细胞存活率随着鲤醇硫酸酯钠浓度的增加和时间的延长而降低;(2)丹参可促进HK-2细胞增殖,HK-2细胞经丹参预处理再鲤醇硫酸酯钠染毒24h后,细胞存活率显著增加,并随丹参浓度的增加而增加(P<0.01),但地塞米松、氨氯地平、水飞蓟宾、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)干预鲤醇硫酸酯钠染毒HK-2细胞后,其细胞存活率无明显增加。结论丹参可有效降低鱼胆汁毒素致肾小管上皮细胞的损伤,提高细胞活力。 展开更多

关键词 鱼胆毒素 鲤醇硫酸酯钠 人肾近曲小管上皮细胞 药物干预 丹参

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镉诱导肾细胞凋亡及其对PI3K/Akt和ERK1/2信号通路的影响 被引量：1

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作者 吴晓丽 任香梅 《热带医学杂志》 CAS 2013年第12期1452-1455,共4页

目的镉(Cd)诱导猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)凋亡及其对胞内蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)表达的影响。方法应用不同浓度Cd(0、10、20、40、50μmol/L)作用LLC-PK112 h和40μmol/L Cd作用LLC-PK1不同时间(0、3、6、1... 目的镉(Cd)诱导猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)凋亡及其对胞内蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)表达的影响。方法应用不同浓度Cd(0、10、20、40、50μmol/L)作用LLC-PK112 h和40μmol/L Cd作用LLC-PK1不同时间(0、3、6、12、24 h),采用蛋白免疫印迹法检测细胞内蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)及其磷酸化蛋白表达水平。结果镉可上调PI3K/Akt和ERK1/2的表达;当加入N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理后对镉引起的ERK1/2上调具有抑制作用,但对镉引起的PI3K/Akt上调的抑制作用不明显。结论镉诱导肾细胞凋亡可能与活化PI3K/Akt和ERK1/2通路有关,NAC拮抗镉性肾细胞凋亡的机制可能与抑制镉引起的ERK1/2表达上调有关。 展开更多

关键词 猪肾近曲小管上皮细胞 镉 P13K Akt ERKL 2

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α-亚麻酸对高糖损伤LLC-PK_1细胞的保护作用及其机制探讨 被引量：1

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作者 姜明霞 郑锦锋 +4 位作者 虞伟 吕桂兰 许琦 周轶南 翟成凯 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期191-194,共4页

目的建立猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)的高糖损伤模型,观察α-亚麻酸(ALA)对高糖损伤LLC-PK1细胞的保护作用并探讨其作用机制。方法 CCK-8试剂盒测定葡萄糖对LLC-PK1细胞增殖的影响,流式细胞术测定不同浓度ALA干预高糖损伤LLC-PK1的... 目的建立猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)的高糖损伤模型,观察α-亚麻酸(ALA)对高糖损伤LLC-PK1细胞的保护作用并探讨其作用机制。方法 CCK-8试剂盒测定葡萄糖对LLC-PK1细胞增殖的影响,流式细胞术测定不同浓度ALA干预高糖损伤LLC-PK1的凋亡率和活性氧(ROS)含量。结果高糖环境可以抑制体外培养的LLC-PK1细胞的增殖,形成体外高糖损伤模型;经适当浓度(50～100μmol/L)的ALA干预后,前干预组和持续干预组细胞的凋亡率显著低于阳性对照组(P<0.05);当ALA浓度为10～100μmol/L时,持续干预组LLC-PK1细胞内ROS含量显著低于阳性对照组(P<0.05),当ALA浓度为50μmol/L时,前干预组LLC-PK1细胞内ROS含量显著低于阳性对照组(P<0.05)。结论高糖损伤LLC-PK1模型为研究DN肾小管上皮细胞的防治干预提供了良好的体外研究平台,ALA有望成为预防肾小管高糖损伤的保护剂,减少活性氧的产生可能是ALA保护肾小管上皮细胞的作用机制之一。 展开更多

关键词 Α-亚麻酸 高糖损伤 猪肾近曲小管上皮细胞

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