槐杞黄颗粒对糖尿病肾病大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制 被引量：1

1

作者 王利元 刘红 +2 位作者 李晶 白梦婷 吴悠 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第5期1290-1297,共8页

【目的】观察槐杞黄颗粒对糖尿病肾病(DKD)大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制。【方法】(1)体内实验:采用高脂肪饲料喂养结合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法构建DKD大鼠模型。实验设正常组,模型组,槐杞黄颗粒低、中、高剂量组及氯沙坦组,每... 【目的】观察槐杞黄颗粒对糖尿病肾病(DKD)大鼠及高糖环境下肾细胞的保护机制。【方法】(1)体内实验:采用高脂肪饲料喂养结合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法构建DKD大鼠模型。实验设正常组,模型组,槐杞黄颗粒低、中、高剂量组及氯沙坦组,每组10只大鼠。给予对应处理后,测定尿微量白蛋白、空腹血糖、血清肌酐、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等主要生化指标,分别采用苏木素-伊红(HE)染色、高碘酸希夫(PAS)染色和马松(Masson)染色观察肾组织病理改变。(2)体外实验:构建高糖诱导肾小管上皮细胞HK2模型。实验分为正常糖组、高糖组和槐杞黄颗粒组及甘露醇组。给予对应处理后,MTT法检测细胞增殖情况,采用2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法和MitoSOX/Hoechst 33342染色法分别检测细胞内、线粒体活性氧簇(ROS)的生成,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测炎症小体相关蛋白NOD样受体蛋白3(NLRP3)、裂解型半胱天冬酶3(cleaved-Caspase-3)和白细胞介素1β(IL-1β)及肾纤维化相关蛋白纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)的表达。【结果】(1)在体内实验中,槐杞黄颗粒可显著改善DKD大鼠尿微量白蛋白排泄、血清肌酐异常,高血糖和脂质代谢紊乱,减轻肾脏组织病理损害;(2)在体外实验中,槐杞黄颗粒可显著抑制高糖诱导HK2细胞增殖和ROS的过量产生,降低高糖诱导HK2细胞NLRP3炎症小体的激活和肾纤维化相关蛋白FN和ColⅣ的表达。【结论】槐杞黄颗粒可有效改善DKD大鼠,其对高糖环境下肾细胞的保护机制可能与抑制ROS生成、NLRP3炎症小体活化及纤维化蛋白高表达有关。 展开更多

关键词 槐杞黄颗粒 糖尿病肾病 活性氧簇(ROS) NLRP3炎症小体 大鼠 肾小管上皮细胞(hk2)

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下调miR-153促进高糖诱导的肾小管上皮细胞-间充质转化 被引量：4

2

作者 王筱霞 姜珍珍 +6 位作者 汪年松 陈玉强 李军辉 范瑛 刘玉梅 鲍宏达 程东生 《中国中西医结合肾病杂志》 2013年第10期850-854,I0001,共6页

目的:探讨miR-153调控高糖诱导肾小管上皮细胞(HK2)-间充质转化(EMT)的机制,为研究糖尿病肾病(DN)间质纤维化机制提供新思路。方法:采用生物信息学方法预测调控Snail的候选miRNAs;在db/db小鼠肾组织中验证所有候选miRNAs的表达并分别与S... 目的:探讨miR-153调控高糖诱导肾小管上皮细胞(HK2)-间充质转化(EMT)的机制,为研究糖尿病肾病(DN)间质纤维化机制提供新思路。方法:采用生物信息学方法预测调控Snail的候选miRNAs;在db/db小鼠肾组织中验证所有候选miRNAs的表达并分别与Snail做pearson相关性分析,筛选出与Snail负相关最显著的miRNA;以高糖诱导的HK2细胞为载体,转染该miRNA mimics 72 h后,采用real-time PCR、western blot方法,观察该miRNAs、Snail以及E-cadherin的表达改变。结果:调控Snail的候选miRNAs共7个,分别是:miR-153、miR-30e、miR-30d、miR-30b、miR-384-5p、miR-30a、miR-30c;与db/m相比,miR-153、miR-30d及miR-30e在db/db小鼠肾皮质中表达显著下调(P<0.05),其中miR-153与Snail表达水平负相关最显著(r=-0.501 56);高糖诱导HK2细胞下调miR-153,肾小管上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达减少;过表达miR-153抑制HK2细胞表达Snail,而E-cadherin水平增加。结论:MiR-153可能通过靶基因Snail参与调控高糖诱导的HK2细胞EMT。 展开更多

关键词 近端肾小管上皮细胞(hk2) 上皮细胞-间充质转化(EMT) miR-153 SNAIL 生物信息学

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大黄酸和大黄素在体外对人肾小管上皮细胞的毒性作用研究 被引量：24

3

作者 笪红远 江振洲 +2 位作者 王翠芬 张陆勇 刘国卿 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期102-105,共4页

目的在体外比较大黄酸和大黄素作用于人肾小管上皮细胞(HK-2)的毒性表现和差异,并初步探讨其肾毒性机制。方法采用MTT法观察细胞生长抑制作用;透射电镜观察细胞内超微结构变化;流式细胞仪观察细胞凋亡情况;检测乳酸脱氢酶(LDH)和N-乙酰-... 目的在体外比较大黄酸和大黄素作用于人肾小管上皮细胞(HK-2)的毒性表现和差异,并初步探讨其肾毒性机制。方法采用MTT法观察细胞生长抑制作用;透射电镜观察细胞内超微结构变化;流式细胞仪观察细胞凋亡情况;检测乳酸脱氢酶(LDH)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)释放水平。结果大黄酸和大黄素均可明显抑制HK-2细胞增殖;电镜观察均可见细胞核不规则,出现了染色质的浓缩和边集;流式细胞仪观察大黄素和大黄酸均能诱导细胞凋亡;大黄素组LDH和NAG释放水平均高于大黄酸组。结论大黄酸和大黄素均能诱导HK-2细胞凋亡,具有明显的细胞毒性作用,并且大黄素对HK-2细胞的毒性作用强于大黄酸。 展开更多

关键词 大黄素 大黄酸 人肾小管上皮细胞(hk-2) 凋亡

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雷公藤多苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡及CXCL10/CXCR3轴的影响 被引量：5

4

作者 李明霞 乔海霞 +3 位作者 王晓玲 贾丽媛 胡利梅 任卫东 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期139-143,共5页

目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖... 目的 探讨雷公藤多苷(TG)对高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2凋亡及CXC趋化因子配体10(CXCL10)/CXC趋化因子受体3(CXCR3)轴的影响。方法 体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,并分为对照组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养基)、高糖组(含25 mmol/L葡萄糖培养基)和12.5、25、50 mg/L TG组(分别用12.5、25、50 mg/L的TG和25 mmol/L葡萄糖培养基)。四甲基偶氮唑盐比色法检测HK-2细胞活力;流式细胞术检测HK-2细胞凋亡情况;2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测HK-2细胞活性氧(ROS)水平;黄嘌呤氧化酶法检测HK-2细胞超氧化物歧化酶(SOD)水平;酶联免疫吸附试验检测HK-2细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;蛋白免疫印迹法检测HK-2细胞凋亡蛋白[胱天蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9]以及CXCL10、CXCR3蛋白表达。结果 与对照组比较,高糖组HK-2细胞活力、SOD水平显著降低,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达升高(P<0.05);与高糖组比较,12.5、25、50 mg/L TG组HK-2细胞活力、SOD水平升高,凋亡率、ROS、TNF-α、TGF-β1水平及Caspase-3、Caspase-9、CXCL10、CXCR3蛋白表达降低,且高剂量效果更好(P<0.05)。结论 TG可抑制高糖诱导的HK-2细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,其机制可能与抑制CXCL10/CXCR3轴有关。 展开更多

关键词 雷公藤 趋化因子CXCL10 受体 CXCR3 细胞凋亡 氧化性应激 雷公藤多苷 高糖 人肾小管上皮细胞hk-2

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线粒体未折叠蛋白反应在棕榈酸诱导肾小管上皮细胞脂质聚集中的作用

5

作者 温睿智 杜晓刚 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期419-427,共9页

目的探讨线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein reaction,UPR^(mt))对肾小管上皮细胞(human kidney 2,HK-2)脂代谢的影响。方法采用棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导HK-2细胞内脂质聚集,分别予siRNA抑制UPR^(mt)或巴多索隆... 目的探讨线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein reaction,UPR^(mt))对肾小管上皮细胞(human kidney 2,HK-2)脂代谢的影响。方法采用棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导HK-2细胞内脂质聚集,分别予siRNA抑制UPR^(mt)或巴多索隆(the 2-cyano-3,12-dioxooleana-1,9-dien-28-oic acid,CDDO)增强UPR^(mt)。油红染色观察细胞内脂质聚集情况,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)测定线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),Mito-SOX测定线粒体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,Western blotting检测HSP60、LONP1、CLPP、ACOX1、PPARα、PGC1α、CPT1α蛋白表达。结果PA诱导HK-2细胞脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多及UPR^(mt)关键蛋白HSP60、LONP1表达降低;抑制UPR^(mt)可加剧PA导致的脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多,HSP60、LONP1表达进一步降低;增强UPR^(mt)可缓解PA导致的脂质聚集、MMP降低、ROS产生增多以及HSP60、LONP1表达降低。结论PA诱导的HK-2细胞脂质聚集可能与线粒体功能障碍有关,UPR^(mt)在该过程中对HK-2细胞具有保护作用。 展开更多

关键词 线粒体未折叠蛋白反应(UPR^(mt)) 棕榈酸(PA) 肾小管上皮细胞(hk-2) 脂质聚集 活性氧(ROS)

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新疆鼠尾草酚酸类成分对HK-2细胞氧化损伤的保护作用及机制研究 被引量：4

6

作者 王晓梅 任春晖 +2 位作者 王新玲 米仁沙·牙库甫 胡君萍 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第19期2348-2353,共6页

目的研究新疆鼠尾草酚酸类成分对高糖高脂诱导的人肾小管上皮细胞HK-2氧化损伤的保护作用,并初步探讨其可能机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型组、卡格列净片组(阳性对照组,15μmol/L)、新疆鼠尾草酚酸纯化物组(10.8μg/mL)和4个单... 目的研究新疆鼠尾草酚酸类成分对高糖高脂诱导的人肾小管上皮细胞HK-2氧化损伤的保护作用,并初步探讨其可能机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型组、卡格列净片组(阳性对照组,15μmol/L)、新疆鼠尾草酚酸纯化物组(10.8μg/mL)和4个单体成分组(丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸,均为50μmol/L)。除对照组外,其余各组均建立高糖高脂损伤细胞模型(500μmol/L棕榈酸+30 mmol/L葡萄糖处理48 h)并加药培养48 h。检测各组细胞的凋亡率以及细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量和谷胱甘肽(GSH)活性,并检测上述5组(丹参素组、原儿茶醛组、咖啡酸组除外)细胞中核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)、醌NADH脱氢酶1(NQO1)蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组细胞的凋亡率显著升高(P<0.01);细胞中MDA含量显著升高(P<0.01),GSH含量和SOD活性显著降低(P<0.01);细胞中Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达显著下调(P<0.01),Keap1蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,各给药组细胞的凋亡率及细胞中MDA含量均显著降低(P<0.01),各给药组细胞中GSH含量及酚酸纯化物组、原儿茶醛组、迷迭香酸组细胞中SOD活性均显著升高(P<0.01);酚酸纯化物组细胞中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达以及迷迭香酸组Nrf2蛋白表达均显著上调(P<0.01),酚酸纯化物组和迷迭香酸组细胞中Keap1蛋白表达均显著下调(P<0.01)。结论新疆鼠尾草酚酸类成分可减轻高糖高脂所致肾小管上皮细胞的氧化应激损伤,其作用可能与其激活Keap1/Nrf2通路、抑制氧化应激反应相关。 展开更多

关键词 新疆鼠尾草 酚酸类成分 人肾小管上皮细胞hk-2 氧化损伤 Kelch样ECH相关蛋白1 核转录因子E2相关因子2

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覆盆子酮对高糖诱导的HK-2损伤的影响

7

作者 赵丽君 樊耀华 徐文华 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期196-199,共4页

目的研究覆盆子酮对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK)-2损伤的影响及其可能作用机制。方法采用HG诱导HK-2细胞建立肾小管上皮细胞损伤模型,随机分组为NG组、HG组、HG+覆盆子酮低剂量组、HG+覆盆子酮中剂量组、HG+覆盆子酮高剂量组、H... 目的研究覆盆子酮对高糖(HG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK)-2损伤的影响及其可能作用机制。方法采用HG诱导HK-2细胞建立肾小管上皮细胞损伤模型,随机分组为NG组、HG组、HG+覆盆子酮低剂量组、HG+覆盆子酮中剂量组、HG+覆盆子酮高剂量组、HG+si-NC组、HG+si-circ_0068087组、HG+覆盆子酮+pcDNA组、HG+覆盆子酮+pcDNA-circ_0068087组;采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;利用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测circ_0068087的表达量。结果与NG组比较,HG组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高,MDA水平和circ_0068087表达明显量升高,SOD活性明显降低(P<0.05);与HG组比较,HG+覆盆子酮低剂量组、HG+覆盆子酮中剂量组、HG+覆盆子酮高剂量组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显降低,MDA的水平和circ_0068087的表达量明显降低,SOD活性明显增加(P<0.05),呈剂量依赖性;与HG+si-NC组比较,HG+si-circ_0068087组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显降低,SOD活性明显升高,MDA水平明显降低(P<0.05);与HG+覆盆子酮+pcDNA组比较,HG+覆盆子酮+pcDNA-circ_0068087组细胞增殖抑制率和细胞凋亡率明显升高,MDA水平明显升高,SOD活性明显降低(P<0.05)。结论覆盆子酮可通过抑制circ_0068087表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡、氧化应激从而减轻HG诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 人肾小管上皮细胞hk-2 覆盆子酮 circ_0068087 细胞增殖 细胞凋亡 氧化应激

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葛根异黄酮调控LncRNA TTTY15对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响

8

作者 王绪臻 王晓华 +1 位作者 李晓燕 黄雯静 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期213-216,共4页

目的探讨葛根异黄酮对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响与机制。方法采用高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2建立糖尿病肾病模型,随机分为NG组、HG组、HG+葛根异黄酮L组、HG+葛根异黄酮M组、HG+葛根异黄酮H组、HG+si-NC组、HG+si-TTTY15组... 目的探讨葛根异黄酮对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响与机制。方法采用高糖诱导人肾小管上皮细胞HK-2建立糖尿病肾病模型,随机分为NG组、HG组、HG+葛根异黄酮L组、HG+葛根异黄酮M组、HG+葛根异黄酮H组、HG+si-NC组、HG+si-TTTY15组、HG+葛根异黄酮+pcDNA组、HG+葛根异黄酮+pcDNA-TTTY15组;噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;利用试剂盒检测超氧化物歧物酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-10水平;qRT-聚合酶链反应(PCR)法检测TTTY15表达量。结果与NG组比较,HG组细胞增殖抑制率和细胞凋亡、TTTY15表达及MDA、TNF-α、IL-1β水平显著升高,SOD活性和IL-10水平显著降低(P<0.05);与HG组比较,HG+葛根异黄酮L组、HG+葛根异黄酮M组、HG+葛根异黄酮H组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低、TTTY15表达量及MDA、TNF-α、IL-1β水平显著降低,SOD活性和IL-10水平显著升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与HG+si-NC组比较,HG+si-TTTY15组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及MDA、TNF-α、IL-1β水平显著降低,SOD活性和IL-10水平显著升高(P<0.05);与HG+葛根异黄酮+pcDNA组比较,HG+葛根异黄酮+pcDNA-TTTY15组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及MDA、TNF-α、IL-1β水平显著升高,SOD活性和IL-10水平显著降低(P<0.05)。结论葛根异黄酮可通过抑制TTTY15表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡、氧化应激、炎症反应从而减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多

关键词 人肾小管上皮细胞hk-2 葛根异黄酮 LncRNA TTTY15 细胞增殖 凋亡

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痛风宁含药血清对尿酸诱导HK-2中尿酸盐转运体的影响 被引量：4

9

作者 李保林 王建辉 +7 位作者 蔡唐彦 郭洁梅 滕方舟 朱亚菊 林建平 毛骁 肖艳 苏友新 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期53-59,共7页

目的:从肾脏尿酸盐转运体角度探讨痛风宁降低血尿酸的机制。方法:将人肾小管上皮细胞(HK-2)随机分为正常组,模型组,痛风宁低、中、高剂量组(7. 65,15. 3,30. 6 g·kg-1),苯溴马隆组(50μmo1·L-1),分别予不同培养液进行干预。... 目的:从肾脏尿酸盐转运体角度探讨痛风宁降低血尿酸的机制。方法:将人肾小管上皮细胞(HK-2)随机分为正常组,模型组,痛风宁低、中、高剂量组(7. 65,15. 3,30. 6 g·kg-1),苯溴马隆组(50μmo1·L-1),分别予不同培养液进行干预。于干预24 h后收集HK-2及上清液,采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组HK-2中尿酸盐转运蛋白1(URAT1),葡萄糖转运体9(GLUT9),有机阴离子转运体1(OAT1),有机阴离子转运体3(OAT3)和三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)蛋白及mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达显著升高(P <0. 01),ABCG2蛋白及mRNA表达显著下降(P <0. 01);与模型组比较,痛风宁各剂量组和苯溴马隆组URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达均明显下降(P <0. 01),且痛风宁各剂量组优于苯溴马隆组,痛风宁各剂量组ABCG2蛋白及mRNA表达显著升高(P <0. 01);与痛风宁中剂量组比较,痛风宁低、高剂量组URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达明显升高,ABCG2蛋白及mRNA表达明显下降(P <0. 01)。OAT1和OAT3蛋白及mRNA于各组均无表达。结论:痛风宁可通过下调HK-2中URAT1,GLUT9蛋白及mRNA表达,上调ABCG2蛋白及mRNA表达,调节肾小管对尿酸的重吸收和分泌,促进尿酸在肾脏的排泄,降低血尿酸水平。提示对肾脏尿酸转运体蛋白的调节可能是痛风宁发挥利湿排浊功效而降低血尿酸的具体机制之一,OAT1和OAT3蛋白及mRNA在体外培养的HK-2中无表达。 展开更多

关键词 痛风宁含药血清 尿酸盐 人肾小管上皮细胞(hk-2) 尿酸盐转运体

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高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞损伤及机制的研究 被引量：3

10

作者 邓茜 孙惠力 +3 位作者 曾又佳 徐华 龚永慧 李顺民 《新中医》 CAS 2014年第1期164-167,共4页

目的：观察高糖诱导人近端肾小管上皮细胞（HK-2）损伤及机制。方法：细胞生长融合至约80％时，用DMEM低糖培养基无血清同步化48h，然后分为以下7组。①正常糖对照组（5．5mM低糖DMEM培养基，NG）；②高糖1组（15mM高糖DMEM培养基，HG1... 目的：观察高糖诱导人近端肾小管上皮细胞（HK-2）损伤及机制。方法：细胞生长融合至约80％时，用DMEM低糖培养基无血清同步化48h，然后分为以下7组。①正常糖对照组（5．5mM低糖DMEM培养基，NG）；②高糖1组（15mM高糖DMEM培养基，HG1）；③高糖2组（30mM高糖DMEM培养基，HG2）；④高糖3组（45mM高糖DMEM培养基，HG3）；⑤高糖4组（60Inm高糖DMEM培养基，HG4）；⑥等渗1组（30mM甘露醇DMEM培养基，HMl）；⑦等渗2组（45mM甘露醇DMEM培养基，HM2）。观察不同糖浓度（5．5～45mM）刺激HK-2细胞24h，观察IκBα和p65蛋白表达规律。MTT比色法检测细胞活力。Westernblot法检测IκBα和p65蛋白表达。结果：高糖2组、高糖3组、高糖4组浓度呈依赖性对HK-2活力存在显著的抑制作用（P〈0．05，P〈0．01）；高糖2组、高糖3组浓度的甘露醇对HK-2活力没有明显的抑制作用（P〉0．05）。IκBα蛋白表达随着葡萄糖浓度的升高而依次降低，而p65蛋白表达呈浓度依赖性升高，高糖2组、高糖3组的葡萄糖与正常糖对照组比较，差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论：高糖诱导的HK-2毒性损伤呈一定的浓度依赖关系，其机制与NF—κB通路的激活有关，与渗透压作用无明显关联。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 近端肾小管上皮细胞(hk-2) IΚBΑ P65 高糖诱导

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急性肾损伤模型中miRNA-21对肾小管上皮细胞保护作用的研究 被引量：2

11

作者 徐小桐 王正书 +2 位作者 张昕 杜娟 杨晓农 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期32-36,292,共6页

为了研究马兜铃酸(AA)模拟的肾小管上皮细胞系HK-2细胞急性肾损伤(AKI)过程中,miRNA-21(miR-21)和肾损伤分子-1(KIM-1)之间的调控关系,以及探讨miR-21对AA引起的AKI的影响,试验选用HK-2细胞,采用不同浓度的30,60,120μmol/L AA处理24 h... 为了研究马兜铃酸(AA)模拟的肾小管上皮细胞系HK-2细胞急性肾损伤(AKI)过程中,miRNA-21(miR-21)和肾损伤分子-1(KIM-1)之间的调控关系,以及探讨miR-21对AA引起的AKI的影响,试验选用HK-2细胞,采用不同浓度的30,60,120μmol/L AA处理24 h后,提取各组细胞总RNA,经过逆转录后进行实时荧光定量检测KIM-1 mRNA和miR-21的转录水平。为了确认miR-21是否对KIM-1具有转录后调控作用,通过将miR-21模拟物转染进入HK-2细胞,实时荧光定量PCR检测KIM-1的mRNA转录水平,同时检测miR-21模拟物的表达,探讨miR-21对AA引起的急性肾损伤细胞是否具有保护作用。结果表明:与未处理的对照组相比,AA对HK-2细胞处理后可以促进KIM-1 mRNA和miR-21的过表达(P<0.05)。而高浓度的AA(120μmol/L)则促进KIM-1 mRNA表达明显下降,而miR-21仍上调表达。miR-21模拟物的过表达,明显下调了KIM-1 mRNA的表达水平。低浓度的AA处理HK-2细胞后,miR-21和KIM-1表达均上调。当AA浓度达到一定程度后,上调的miR-21开始抑制KIM-1 mRNA的表达,最终通过负反馈调节产出作用。说明高浓度AA通过调控miR-21表达来抑制KIM-1 mRNA的表达水平,从而对AKI起到保护作用。 展开更多

关键词 急性肾损伤(AKI) 肾损伤分子-1(KIM-1) MIRNA-21 肾小管上皮细胞系hk-2 马兜 铃酸(AA)

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氟伐他汀及高糖对人肾小管上皮细胞klotho蛋白表达的影响 被引量：2

12

作者 蒋娟娟 刘佳 +4 位作者 舒洁 赵秀芬 钱军 邢昌赢 王笑云 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期1558-1561,共4页

目的探讨高糖(HG)及氟伐他汀对人肾小管上皮细胞2(HK-2)klotho蛋白表达的影响及机制。方法正常糖(NG,5.5mmol/L),HG(25.0mmol/L)培养HK-2,不同浓度氟伐他汀(0.1、1.0、10μmol/L)伴/不伴甲羟戊酸(MVA)、焦磷酸牛龙牛儿基牛龙牛儿酯(GGPP... 目的探讨高糖(HG)及氟伐他汀对人肾小管上皮细胞2(HK-2)klotho蛋白表达的影响及机制。方法正常糖(NG,5.5mmol/L),HG(25.0mmol/L)培养HK-2,不同浓度氟伐他汀(0.1、1.0、10μmol/L)伴/不伴甲羟戊酸(MVA)、焦磷酸牛龙牛儿基牛龙牛儿酯(GGPP)、焦磷酸法尼酯(FPP),干预不同时间(0、12、24、48h),Western blot检测klotho、RhoA蛋白表达。结果与NG培养比较,HG刺激HK-2表达klotho蛋白量明显减少(P<0.05);氟伐他汀干预后部分恢复(与HG刺激比较,P<0.05);此作用可被MVA、GGPP逆转,FPP不能逆转。HK-2RhoA蛋白量在HG刺激下增加(与NG培养比较,P<0.05),氟伐他汀干预后表达减少(P<0.05)。结论 HG抑制HK-2klotho蛋白表达;氟伐他汀上调HK-2表达klotho蛋白,机理可能与其抑制RhoA/Rho激酶信号通路有关。 展开更多

关键词 氟伐他汀 KLOTHO RHOA 人肾小管上皮细胞2(hk-2)

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高糖环境下不同浓度黄芩苷对人肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 孙韬 黄竹娟 苏宁 《中国民族民间医药》 2016年第21期29-31,共3页

目的:研究在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预对人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:本研究通过体外实验,分别检测在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预24h、48h、72h上皮细胞增殖及凋亡情况,并同时设立阴性对照组(低糖组)、阳性对照组(高糖组)... 目的:研究在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预对人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:本研究通过体外实验,分别检测在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预24h、48h、72h上皮细胞增殖及凋亡情况,并同时设立阴性对照组(低糖组)、阳性对照组(高糖组)和阳性药物对照组(RGZ)。结果:24h、48h时间点,黄芩苷干预下的上皮细胞以促进增殖、抑制凋亡为主要表现;72h时间点,低剂量黄芩苷(50、100μmol/L)干预下的上皮细胞仍以促进增殖、抑制凋亡为主要表现,但高剂量黄芩苷组别(200μmol/L)干预下的上皮细胞以抑制增殖、促进凋亡为主要表现。在高糖环境下黄芩苷可抑制上皮细胞凋亡,与阳性药物对照(RGZ)的趋势一致。结论:黄芩苷可能通过抑制细胞凋亡的药理作用,发挥对肾脏的保护作用。 展开更多

关键词 黄芩苷 人肾小管上皮细胞(hk-2) 细胞凋亡 糖尿病

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糖耐康对TGF-β_1诱导的HK-2细胞VEGF mRNA表达的影响 被引量：1

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作者 朱春晖 康开彪 +4 位作者 杨丽霞 李晓东 刘铜华 吴丽丽 孙文 《西部中医药》 2013年第9期13-15,共3页

目的:通过观察糖耐康药物血清干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,进一步探讨其在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养... 目的:通过观察糖耐康药物血清干预转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA的表达,进一步探讨其在防治肾间质纤维化方面的作用。方法:将HK-2细胞用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基培养;实验分为6组:空白对照组、单纯TGF-β1诱导组(TGF-β110 ng/mL)、空白血清对照组(TGF-β110 ng/mL+10%空白血清)、干预1组(TGF-β110 ng/mL+5%糖耐康药物血清)、干预2组(TGF-β110 ng/mL+10%糖耐康药物血清)、干预3组(TGF-β110 ng/mL+20%糖耐康药物血清)。药物干预24小时后,荧光定量PCR检测VEGF mRNA的表达。结果:HK-2细胞经TGF-β1诱导后,VEGF mRNA的表达显著上升,与空白对照组相比有统计学意义(P<0.05),经糖耐康药物血清干预后,VEGF mRNA的表达逐步下降,与单纯TGF-β1诱导组相比有统计学意义(P<0.05)。结论:糖耐康能够抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞VEGF mRNA的表达,在一定程度上具有抑制肾小管上皮细胞纤维化的作用。 展开更多

关键词 糖耐康 转化生长因子-Β1 人肾小管上皮细胞(hk-2) VEGF mRNA

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四环素对纳米细菌感染的人肾小管上皮细胞HK-2中CaSR、Claudin-14表达的影响 被引量：1

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作者 申茂磊 高存祥 +5 位作者 郑丽英 王勤章 徐浩 郝志强 傅家豪 钱彪 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第19期2607-2611,共5页

目的:研究四环素对纳米细菌(NB)感染的人肾小管上皮细胞HK-2中钙敏感受体(CaSR)、紧密连接蛋白14(Claudin-14)表达的影响,为抑制肾结石的形成提供参考。方法:将HK-2细胞分为空白对照组、NB组和四环素组(NB+四环素),每组3个复孔,各组分... 目的:研究四环素对纳米细菌(NB)感染的人肾小管上皮细胞HK-2中钙敏感受体(CaSR)、紧密连接蛋白14(Claudin-14)表达的影响,为抑制肾结石的形成提供参考。方法:将HK-2细胞分为空白对照组、NB组和四环素组(NB+四环素),每组3个复孔,各组分别加入相应NB和药物后共培养24 h。采用透射电子显微镜观察各组细胞的形态和超微结构变化,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western blot法分别检测细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白的表达水平。结果:与空白对照组比较,NB组细胞膜结构破损,胞核裸露在外,微绒毛基本消失,线粒体数量较少,结构肿胀,细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05);四环素组细胞膜结构完整,微绒毛结构稍紊乱,局部绒毛消失,部分线粒体结构肿胀不明显,细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与NB组比较,四环素组细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:NB可能通过上调HK-2细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白的表达促进肾结石的形成,而四环素可能通过作用于NB降低CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白的表达抑制肾结石的形成。 展开更多

关键词 四环素 纳米细菌 人肾小管上皮细胞hk-2 钙敏感受体 紧密连接蛋白14

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不同微囊冷冻保存HK-2细胞效果比较 被引量：1

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作者 潘广林 任宏涛 +1 位作者 顾玉兰 孙志杰 《动物医学进展》 CSCD 2008年第10期31-35,共5页

观察不同类型微囊冻存细胞的效果,为微囊冻存选择合适的冷冻保护剂。应用高压脉冲静电液滴发生器制作液化的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊和海藻酸钠-钙胶珠包被人肾小管上皮细胞(HK-2);用二甲基亚砜和甘油作为冷冻保护剂冷冻... 观察不同类型微囊冻存细胞的效果,为微囊冻存选择合适的冷冻保护剂。应用高压脉冲静电液滴发生器制作液化的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊和海藻酸钠-钙胶珠包被人肾小管上皮细胞(HK-2);用二甲基亚砜和甘油作为冷冻保护剂冷冻未包被的HK-2细胞、APA微囊包被的HK-2细胞、胶珠包被的HK-2细胞;解冻后用MTT法测定细胞活性、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量、Hochest33258荧光染料测定DNA含量。结果表明,解冻后液化微囊内HK-2细胞的细胞活性、蛋白质含量、DNA含量均显著高于胶珠内细胞(P<0.05),但与未包被组差异不显著(P>0.05)。DMSO作为冷冻保护剂,细胞活性及细胞蛋白质含量均高于甘油组(P<0.05),但两者在DNA含量上无差异(P>0.05)。液化微囊与DM-SO合用时,细胞活性及细胞蛋白质含量、DNA含量均高于液化微囊与甘油合用时(P<0.05)。液化微囊解冻后稳定性优于胶珠。液化微囊冷冻保存效果优于胶珠,DMSO适于微囊冷冻。 展开更多

关键词 微囊化 冷冻保存 人肾小管上皮细胞hk-2

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T-2毒素对人肾小管上皮细胞HK-2体外增殖和凋亡的影响

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作者 鲜婷婷 韩小敏 +4 位作者 韩春卉 李凤琴 徐文静 张宏元 屠康 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期86-92,共7页

探讨T-2毒素对人肾小管上皮细胞HK-2体外增殖和凋亡的影响。将体外培养的HK-2细胞,经不同浓度的T-2毒素作用72 h后,分别测定T-2毒素对HK-2细胞增殖抑制率、细胞形态、DNA片段化、细胞凋亡率、细胞周期分布和caspase-3活性的影响。结果表... 探讨T-2毒素对人肾小管上皮细胞HK-2体外增殖和凋亡的影响。将体外培养的HK-2细胞,经不同浓度的T-2毒素作用72 h后,分别测定T-2毒素对HK-2细胞增殖抑制率、细胞形态、DNA片段化、细胞凋亡率、细胞周期分布和caspase-3活性的影响。结果表明,T-2 毒素对HK-2细胞具有增殖抑制作用,抑制率随浓度升高而增大,IC 50 值为49.34 nmol/L。T-2毒素在10~40 nmol/L可剂量依赖性的诱导HK-2细胞凋亡,且20 nmol/L下HK-2细胞即可出现染色质固缩等凋亡细胞的典型特征。同时,10~40 nmol/L,T-2毒素可通过引起G 2 /M期阻滞影响细胞的周期分布。此外,T-2毒素在10~40 nmol/L下可引起caspase-3活性剂量依赖性增强,与对照组相比,最大可提高1.93倍( P <0.05)。因此,该研究为阐明T-2毒素的肾脏毒性作用机制提供了理论依据。 展开更多

关键词 T-2毒素 人肾小管上皮细胞hk-2 体外细胞增殖 细胞凋亡

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转录因子Sp1促进肾小管上皮间质转化的体外实验研究

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作者 周美兰 娄未娟 +2 位作者 姬丽华 梁维 何丽洁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1273-1275,共3页

目的:研究转录因子Sp1促进肾小管上皮间质转化(EMT)以及肾脏纤维化的作用和机制。方法:用30 mL/L浓度的低氧培养肾小管上皮细胞HK-2,采用Real-time PCR及Western blot法分别检测细胞中转录因子Sp1,E-cadherin和α-SMA的mRNA和蛋白表达... 目的:研究转录因子Sp1促进肾小管上皮间质转化(EMT)以及肾脏纤维化的作用和机制。方法:用30 mL/L浓度的低氧培养肾小管上皮细胞HK-2,采用Real-time PCR及Western blot法分别检测细胞中转录因子Sp1,E-cadherin和α-SMA的mRNA和蛋白表达水平。构建SP1基因的小干扰RNA载体,并将其转染低氧处理的HK-2肾小管上皮细胞。Real time PCR及Western blot法检测转录因子SP1对HK-2细胞EMT标志物的影响。结果:低氧处理后的HK-2细胞上皮标志物E-cadherin表达显著下降,而间皮标志物α-SMA的表达显著增加,提示HK-2细胞发生EMT。同时发现低氧处理后HK-2中转录因子Sp1的mRNA水平和蛋白水平表达逐渐增加。将Sp1的小干扰RNA载体转染HK-2细胞,得到下调Sp1表达的肾小管上皮细胞系。结果显示,与对照组相比,敲减Sp1的低氧处理的HK-2细胞中上皮细胞标志物E-cadherin表达未见显著下降,而间质细胞标志物α-SMA的表达未见显著增加,提示此时的HK-2细胞未发生EMT。结论:转录因子Sp1可促进HK-2肾小管上皮细胞的EMT。 展开更多

关键词 转录因子SP1 肾小管上皮细胞系hk-2 EMT 纤维化

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应用微阵列芯片分析草酸钙结晶肾损伤中LncRNA表达谱的差异 被引量：2

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作者 张彩虹 谌卫 +6 位作者 袁继行 张杰 马文杰 刘敏 王田田 蔡杰 郭志勇 《中国中西医结合肾病杂志》 2016年第1期14-17,I0002,共5页

目的:利用微阵列芯片对结晶组小鼠和正常组小鼠的基因表达谱进行比对分析,筛选出差异基因,探讨lncRNA与肾结石的关系。方法:将6只C57BL/6雄性小鼠随机分为结晶组和正常组,两组腹腔分别注射50 mg/kg生理盐水和100 mg/kg乙醛酸盐。7 d处... 目的:利用微阵列芯片对结晶组小鼠和正常组小鼠的基因表达谱进行比对分析,筛选出差异基因,探讨lncRNA与肾结石的关系。方法:将6只C57BL/6雄性小鼠随机分为结晶组和正常组,两组腹腔分别注射50 mg/kg生理盐水和100 mg/kg乙醛酸盐。7 d处死全部小鼠,对两组小鼠的肾组织,提取总RNA后进行差异lncRNA的筛选、聚类分析以及小鼠lncRNA与人同源性分析,采用实时定量RT-PCR验证人鼠同源性lncRNA。结果:芯片结果显示差异表达lncRNA共376个,其中结晶组表达上调154个,下调222个;差异表达mRNA共3 062条,上调1 914条,下调1 148条。结论:Sprr2c、CHCHD4P4可能参与肾结石发生的调控。 展开更多

关键词 草酸钙结晶 长链非编码RNA 人近曲肾小管上皮细胞(hk-2) 微阵列芯片

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