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类叶升麻苷对叠氮钠诱导的PC12细胞线粒体凋亡的保护作用 被引量：2
1
作者 高莉 李建梅 +1 位作者 阿娜古丽·马合木提 闫明 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1626-1630,共5页
目的探究类叶升麻苷对叠氮钠诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞线粒体凋亡的保护作用。方法分别采用倒置显微镜和噻唑蓝(MTT)比色法观察和检测不同浓度(50、100、200 mmol/L)叠氮钠损伤4 h后对PC12细胞存活率的影响,以及不同浓度(1、10... 目的探究类叶升麻苷对叠氮钠诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞线粒体凋亡的保护作用。方法分别采用倒置显微镜和噻唑蓝(MTT)比色法观察和检测不同浓度(50、100、200 mmol/L)叠氮钠损伤4 h后对PC12细胞存活率的影响,以及不同浓度(1、10、100μmol/L)类叶升麻苷对叠氮钠损伤(100 mmol/L,4 h)后共孵育24 h PC12细胞存活率的影响。采用酶标法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)渗漏率,ELISA法检测细胞色素C氧化酶(COX)活性,Annexin/PI法检测细胞凋亡率,Western blot法检测Bax、Bcl-2、caspase-3、caspase-9蛋白表达。结果叠氮钠对PC12细胞的损伤程度呈剂量依赖性,100 mmol/L孵育4 h时,细胞线粒体还原MTT的能力为对照组的(62.76±2.38)%,细胞轴突消失、变圆。不同剂量类叶升麻苷与损伤后PC12细胞共孵育24 h后,呈剂量依赖性地提高叠氮钠所致PC12细胞存活率下降以及轴突重新生成,恢复叠氮钠诱导的细胞凋亡现象,并升高Bcl-2蛋白表达和COX活性,降低Bax、caspase-3、caspase-9蛋白表达。结论类叶升麻苷可能通过维持PC12细胞线粒体的功能和微管结构,从而抑制叠氮钠诱导的PC12细胞线粒体凋亡。 展开更多
关键词 类叶升麻苷 肾上腺嗜铬细胞瘤(pc12)细胞 叠氮钠 线粒体 凋亡
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当归芍药散含药血清调控UPP途径对Aβ_(1-40)损伤PC12细胞的保护作用及机制 被引量：3
2
作者 陈云慧 夏军 +8 位作者 刘兴隆 淮文英 刘丹 张天娥 谢永美 游宇 岳雯 唐宋琪 彭伟 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第24期17-25,共9页
目的:探讨当归芍药散(DSS)含药血清对β淀粉样蛋白(Aβ)1-40损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用及对泛素-蛋白酶体途径(UPP)的调控作用机制。方法:采用Aβ_(1-40)干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、DSS含... 目的:探讨当归芍药散(DSS)含药血清对β淀粉样蛋白(Aβ)1-40损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的保护作用及对泛素-蛋白酶体途径(UPP)的调控作用机制。方法:采用Aβ_(1-40)干预PC12细胞制备损伤模型。实验分为空白组、模型组、DSS含药血清高、中、低剂量组(10%、5%、2.5%)。细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞Aβ和磷酸化(p)-Tau蛋白含量,免疫荧光细胞化学(ICC)标记UPP重要靶点泛素(Ub)、泛素连接酶E3(E3)、26S蛋白酶体、泛素羧基端水解酶1(UCHL1)和UCHL3蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Ub、E3、26S、UCHL1、UCHL3 mRNA和蛋白的表达。结果:根据CCK-8实验结果,筛选5μmol·L^(-1)、48 h为PC12细胞损伤最佳造模条件。与空白组比较,模型组细胞存活率降低(P<0.05)、凋亡率升高(P<0.05),Aβ及p-Tau表达升高(P<0.05),Ub蛋白及mRNA表达升高,26S、E3、UCHL1+3蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,DSS中剂量组细胞存活率升高(P<0.05);DSS各剂量组细胞凋亡率下降(P<0.05);DSS各剂量组Aβ含量降低(P<0.05),DSS高、中剂量组p-Tau含量降低(P<0.05);DSS各剂量组Ub mRNA表达降低(P<0.05),DSS各剂量组26S mRNA表达升高(P<0.05),DSS中剂量组UCHL1 mRNA表达升高(P<0.05),DSS高、中剂量组E3和UCHL 3mRNA表达升高(P<0.05);DSS各剂量组Ub蛋白表达降低,DSS高、中剂量组26S、E3、UCHL1+3蛋白表达升高,以DSS中剂量效果最佳。结论:DSS含药血清可提高细胞存活率、降低细胞凋亡率、清除Aβ和p-Tau蛋白沉积,对Aβ_(1-40)损伤PC12细胞有保护作用,其作用可能是通过调控UPP降低Ub表达及升高26S、E3、UCHL1及UCHL3表达来发挥。 展开更多
关键词 当归芍药散 阿尔茨海默病(AD) 泛素-蛋白酶体途径(UPP) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(pc12)细胞
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雌激素减轻Aβ_(25-35)所致PC12细胞毒活性的机制探讨
3
作者 罗蔓 谢瑞满 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1196-1198,共3页
目的观察17β-雌激素对Aβ25-35所致PC12细胞毒活性影响的可能机制。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察雌激素对Aβ25-35损伤的PC12细胞的Bcl-2 mRNA及BaxmRNA表达的影响。结果用Aβ25-35处理PC12细胞24 h,与对照组相比,Bcl-2... 目的观察17β-雌激素对Aβ25-35所致PC12细胞毒活性影响的可能机制。方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察雌激素对Aβ25-35损伤的PC12细胞的Bcl-2 mRNA及BaxmRNA表达的影响。结果用Aβ25-35处理PC12细胞24 h,与对照组相比,Bcl-2 mRNA的表达水平降低,Bax mRNA的表达水平升高;而Aβ25-35加17β-雌激素引起Bcl-2 mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组增高,Bax mRNA的表达水平较单纯Aβ处理组降低。结论17β-雌激素在Aβ25-35所致PC12细胞毒性的神经保护作用中,其机制是通过上调Bcl-2基因的表达与下调Bax基因的表达来实现的。 展开更多
关键词 17β雌激素 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pc12细胞) 凋亡 β-淀粉样蛋白25-35片段
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