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芽胞杆菌肽聚糖水解酶的功能研究进展 被引量：3
1
作者 王丹丹 郭淑元 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期45-52,共8页
长久以来,肽聚糖水解酶都被认为是破坏性的角色,如噬菌体利用它裂解宿主以释放病毒粒子,一些细菌分泌它来溶解竞争对手等。但近几年来,随着研究的不断深入发现,在细胞生长代谢过程中,它的积极作用更为重要。综述了芽胞杆菌肽聚糖水解酶... 长久以来,肽聚糖水解酶都被认为是破坏性的角色,如噬菌体利用它裂解宿主以释放病毒粒子,一些细菌分泌它来溶解竞争对手等。但近几年来,随着研究的不断深入发现,在细胞生长代谢过程中,它的积极作用更为重要。综述了芽胞杆菌肽聚糖水解酶在细胞整个生命过程中的功能,包括细胞生长、分裂、能动性、芽胞形成及萌发、蛋白分泌、信息传递、先天性免疫以及致病性各个方面,为研究芽胞杆菌及其他微生物中肽聚糖水解酶和细胞代谢调节奠定了理论基础。 展开更多
关键词 芽胞杆菌 肽聚糖 肽聚糖水解酶 功能
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肽聚糖水解酶基因缺失对解淀粉芽胞杆菌活菌数量及产碱性蛋白酶的影响 被引量：4
2
作者 徐小健 朱宝悦 +4 位作者 李昕悦 张金方 刘文龙 路福平 李玉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1506-1517,共12页
为了探究肽聚糖水解酶对解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)活细胞数量以及碱性蛋白酶产量的影响,对解淀粉芽胞杆菌TCCC111018中的5个肽聚糖水解酶基因(lytC、lytD、lytE、lytF、lytG)分别进行敲除。通过分析对比基因缺失前后... 为了探究肽聚糖水解酶对解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)活细胞数量以及碱性蛋白酶产量的影响,对解淀粉芽胞杆菌TCCC111018中的5个肽聚糖水解酶基因(lytC、lytD、lytE、lytF、lytG)分别进行敲除。通过分析对比基因缺失前后的生物量以及碱性蛋白酶酶活力发现,敲除菌株BAΔlytC、BAΔlytE在60 h的活菌数分别达到1.67×10^(6)CFU/mL、1.44×10^(6)CFU/mL,分别高出对照菌株BAΔupp 32.5%、14.3%;其碱性蛋白酶酶活力分别为20264 U/mL、17265 U/mL,比对照菌株分别提高了43.1%、27.3%。该结果表明肽聚糖水解酶的缺失可以有效维持解淀粉芽胞杆菌活细胞数量和提高碱性蛋白酶的酶活力,为进一步构建工业酶生产宿主提供了新的思路和研究策略。 展开更多
关键词 解淀粉芽胞杆菌 肽聚糖水解酶 基因敲除 活菌数量 碱性蛋白酶
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氮离子注入选育高自溶干酪乳杆菌及其肽聚糖水解酶的RT-qPCR分析 被引量：1
3
作者 崔文明 吕加平 +5 位作者 王小鹏 赵莉君 祝超智 张秋会 李苗云 赵改名 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期43-49,共7页
通过采用低能N^+注入对干酪乳杆菌116-a进行诱变,以筛选得到高自溶的干酪乳酸菌突变体,并采用实时荧光定量PCR检测N-乙酰胞壁质酶和N-乙酰氨基葡糖胺糖苷酶在野生菌体和突变体中的表达差异。结果显示:经过离子能量30 keV N^+注入诱变,... 通过采用低能N^+注入对干酪乳杆菌116-a进行诱变,以筛选得到高自溶的干酪乳酸菌突变体,并采用实时荧光定量PCR检测N-乙酰胞壁质酶和N-乙酰氨基葡糖胺糖苷酶在野生菌体和突变体中的表达差异。结果显示:经过离子能量30 keV N^+注入诱变,在注入剂量0.5×10^15 ions/cm^2时,筛选得到遗传稳定性良好的最大正突变菌株,其自溶度为56.3%,最大正突变菌株自溶度比野生型菌株的自溶度提高了25.7%。实时荧光定量PCR检测发现,N-乙酰氨基葡糖苷酶和N-乙酰胞壁质酶在突变体中的表达量比野生菌体中的表达量均有所上调,其中N-乙酰氨基葡糖苷酶表达量上调了约55倍,而N-乙酰胞壁质酶的表达量仅上调2.8倍。因此,N-乙酰氨基葡糖苷酶在干酪乳杆菌116-a自溶中起着重要作用,该酶表达量的上调可以有效提高菌体的自溶。 展开更多
关键词 干酪乳酸菌 自溶 离子注入 肽聚糖水解酶
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日照海域分泌肽聚糖水解酶菌株的筛选、初步鉴定及抑菌活性测定
4
作者 李淼 侯灵芝 +3 位作者 徐兴浩 王肖肖 郑明灿 刘昂 《济宁医学院学报》 2020年第4期233-237,共5页
目的筛选能分泌肽聚糖水解酶的菌株并测定其抑菌活性,为研发新型抗菌药物提供素材。方法从日照海域潮间带沉积物中筛选能水解肽聚糖,并且可以在以金黄色葡萄球菌为唯一营养物的液体培养基中生长的菌株,16S rRNA基因序列测定并同源性比对... 目的筛选能分泌肽聚糖水解酶的菌株并测定其抑菌活性,为研发新型抗菌药物提供素材。方法从日照海域潮间带沉积物中筛选能水解肽聚糖,并且可以在以金黄色葡萄球菌为唯一营养物的液体培养基中生长的菌株,16S rRNA基因序列测定并同源性比对,确定其分类地位;诱导产酶,离心培养液得到的上清作为粗酶液,观测粗酶液对金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果筛选出8株分泌肽聚糖水解酶且能够在以金黄色葡萄球菌为唯一营养物的液体培养基中生长的菌株。16S rRNA基因序列同源性比对分析表明,这8株菌均属于芽孢杆菌属。其粗酶液菌均对金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用。与对照组相比,粗酶液处理后菌落形成单位下降比率在(61.9±7.7)%^(95.0±2.4)%。显微镜下观察,粗酶液处理后的葡萄球菌轮廓变得不清晰,数量减少。结论海洋潮间带中存在能够分泌肽聚糖水解酶的菌株,本实验筛选的8株菌粗酶液均表现出较强的抑制金黄色葡萄球菌的活性,且粗酶液对金黄色葡萄球菌有裂解活性。 展开更多
关键词 肽聚糖水解酶 溶菌酶 金黄色葡萄球菌 芽孢杆菌
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耻垢分枝杆菌MSMEG_6281过表达对菌株生长和形态的影响
5
作者 姜涛 任丽萍 +2 位作者 臧师竹 张翠丽 辛毅 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1547-1554,共8页
【目的】耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mc2155,mc2155)MSMEG_6281为结核分枝杆菌自溶素Rv3717的同源蛋白,通过建立过表达MSMEG_6281的耻垢分枝杆菌菌株,推测该蛋白对耻垢分枝杆菌肽聚糖代谢的影响。【方法】利用RT-PCR方法检... 【目的】耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis mc2155,mc2155)MSMEG_6281为结核分枝杆菌自溶素Rv3717的同源蛋白,通过建立过表达MSMEG_6281的耻垢分枝杆菌菌株,推测该蛋白对耻垢分枝杆菌肽聚糖代谢的影响。【方法】利用RT-PCR方法检测乙胺丁醇(Ethambutol,EMB)作用后MSMEG_6281基因的表达变化;以耻垢分枝杆菌基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆MSMEG_6281基因,构建分枝杆菌表达质粒p VV16-MSMEG_6281,进一步建立MSMEG_6281过表达的耻垢分枝杆菌菌株;利用生长曲线检测MSMEG_6281过表达对耻垢分枝杆菌生长的影响;利用扫描电子显微镜分析MSMEG_6281过表达引起的耻垢分枝杆菌形态变化。【结果】EMB处理引起MSMEG_6281基因表达上调;构建了过表达MSMGE_6281的耻垢分枝杆菌菌株(mc2155/p VV16-MSMEG_6281);过表达MSMGE_6281的耻垢分枝杆菌生长缓慢,菌体形态由短杆状转变为长杆状。【结论】MSMGE_6281的过表达可改变耻垢分枝杆菌形态。MSMGE_6281的功能与细胞壁肽聚糖水解相关,在mc2155细胞壁形态维持方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 MSMEG_6281 耻垢分枝杆菌 细胞形态 肽聚糖水解酶
原文传递
大肠杆菌O157中肽聚糖水解酶MpaA的克隆、表达、纯化及晶体学研究
6
作者 马银良 刘爽 +2 位作者 崔亚琦 康现江 刘秀华 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第4期412-416,共5页
采用分子克隆方法将来源于大肠杆菌O157的mpaA基因构建入pET-21b(+)表达载体.诱导MpaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达,通过Ni亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析三步法纯化得到高纯度蛋白.使用气象扩散法进行蛋白质晶... 采用分子克隆方法将来源于大肠杆菌O157的mpaA基因构建入pET-21b(+)表达载体.诱导MpaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达,通过Ni亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析三步法纯化得到高纯度蛋白.使用气象扩散法进行蛋白质晶体生长的初步筛选与优化,得到MpaA蛋白质单晶,并使用X射线衍射仪进行衍射数据的收集与处理.MpaA晶体分辨率为0.26nm,属于P31空间群,晶胞参数为a=5.989 3nm,b=5.989 3nm,c=12.987 0nm,β=90.000°.MpaA晶体衍射数据的收集为后续结构解析和催化机制的阐明提供了基础. 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 肽聚糖水解酶 MpaA 晶体
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肽聚糖水解酶——一种潜在抗葡萄球菌的武器
7
作者 王英利 赵克强 《畜牧兽医科技信息》 2016年第3期7-9,共3页
金黄色葡萄球菌是引起人类和动物食源性疾病的主要病因。由于耐抗生素葡萄球菌的出现,使得这一类疾病的治疗越发困难,迫切需要发展一些替代类药物。大量研究表明,肽聚糖水解酶(PHs)可控制和治疗这一菌属引起的感染。肽聚糖水解酶可快速... 金黄色葡萄球菌是引起人类和动物食源性疾病的主要病因。由于耐抗生素葡萄球菌的出现,使得这一类疾病的治疗越发困难,迫切需要发展一些替代类药物。大量研究表明,肽聚糖水解酶(PHs)可控制和治疗这一菌属引起的感染。肽聚糖水解酶可快速的水解并引起金黄色葡萄糖球菌死亡。通常PHs对水解金黄色葡萄球菌的细胞壁成分具有较高的特异性,也能够裂解其他种类的葡萄球菌,对人类表皮葡萄球菌和其他的葡萄球菌同样具有杀灭作用。一些PHs可增强抗生素的杀菌和抑菌活性,因此,PHs无论是在酶学方面还是在抗生素方面都可被视为一种潜在的药物。一些研究表明,可以用异源性的表达系统来产生该酶类,如大肠杆菌表达系统。但我们更需要发展更有效的大规模生产此类酶的技术。 展开更多
关键词 葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 抗生素抗性 肽聚糖水解酶
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