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题名重组抗CD38单克隆抗体的质量研究
被引量：4
- 1
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作者
付志浩
陈伟
李萌
武刚
崔永霏
孙亮
王兰
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机构
中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室卫生部生物技术产品检定方法及标准化重点实验室
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出处
《药物分析杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第1期23-29,共7页
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基金
国家"重大新药创制"科技重大专项课题(2018ZX09736016-007)
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文摘
目的:针对抗白细胞分化抗原38(cluster of differentiation 38,CD38)单抗的关键质量属性建立质控方法。方法:采用肽图法进行鉴别;采用还原/非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate,CE-SDS)和尺寸排阻色谱(size exclusion-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)进行纯度控制;采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis,iCIEF)测定电荷异质性;采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定结合活性;采用补体依赖的细胞毒作用(complement dependent cytotoxicity,CDC)和抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)的方法测定生物学活性。其他各项指标均应符合2015年版《中华人民共和国药典》以及其他相关要求。结果:肽图检测具有特征图谱,起到很好的鉴别作用。还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和百分比为(97.87±0.72)%,非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为(97.70±0.35)%;SEC-HPLC单体的峰面积百分比为(99.15±0.01)%,高分子量物质的峰面积百分比为(0.47±0.002)%,低分子量物质的峰面积百分比为(0.37±0.01)%。iCIEF分析的主要亚型的峰面积百分比为(63.54±0.37)%,酸性亚型的峰面积百分比为(23.07±0.50)%,碱性亚型的峰面积百分比为(13.38±0.12)%。结合活性的半最大效应浓度(concentration for 50%of maximal effect,EC_(50))值为(7.35±0.06)ng·mL^(-1)。CDC活性EC_(50)值为(270.67±12.42)ng·mL^(-1),ADCC活性EC_(50)值为(8.71±1.04)ng·mL^(-1)。结论:针对抗CD38单抗的质量属性,研究建立质控方法并进行质量研究,确保产品的安全、有效和质量可控,对抗CD38单抗的质量控制具有借鉴意义。
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关键词
抗CD38单抗
单链跨膜糖蛋白
肽图鉴别
纯度测定
生物学活性
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Keywords
anti-CD38 mAb
single-chain transmembrane glycoprotein
peptide mapping identification
purity determination
biological activity
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分类号
R917
[医药卫生—药物分析学]
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题名重组抗白细胞介素23单克隆抗体的质量研究
被引量：4
- 2
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作者
付志浩
武刚
李萌
崔永霏
王兰
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机构
中国食品药品检定研究院单克隆抗体产品室
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出处
《中国新药杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第19期1738-1745,共8页
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基金
国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2018ZX09736008-006):自身免疫疾病治疗的单抗类生物类似药质量评价和国家标准品建立。
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文摘
目的:针对白细胞介素-23单克隆抗体(抗IL-23单抗)的关键质量属性建立质控方法。方法:采用基于反向高效液相色谱法(RP-HPLC)的肽图法进行鉴别;采用还原/非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳(CE-SDS)和分子排阻色谱(SEC-HPLC)进行纯度控制;采用成像毛细管等电聚焦电泳(icIEF)测定电荷异质性;采用RP-HPLC测定轻链95位天冬氨酸异构体(light chain isoAsp95,LC isoAsp95);采用基于U2OS IL23R/IL12RB1二聚化分析细胞的化学发光法测定生物学活性。其他各项指标均应符合《中华人民共和国药典》2015年版以及其他相关要求。结果:肽图检测具有特征图谱,起到很好的鉴别作用。还原CE-SDS的重链、非糖基化重链(nonglycosylated heavy chain,NGHC)和轻链峰面积之和百分比为(97.84±0.12)%,非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为(97.23±0.11)%;SEC-HPLC单体的峰面积百分比为(99.26±0.005)%,总聚集体峰面积百分比为(0.71±0.005)%。icIEF分析的主峰的峰面积百分比为(73.83±0.29)%,酸性峰的峰面积百分比为(24.03±0.34)%,碱性峰的峰面积百分比为(2.10±0.09)%;供试品LC isoAsp95的百分比为(3.37±0.52)%;供试品相对于参比品的相对生物学活性为(102.25±8.47)%。结论:针对抗IL-23单抗的质量属性,研究建立质控方法并进行质量研究,确保产品的安全有效且质量可控,对抗IL-23单抗的质量控制具有借鉴意义。
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关键词
抗白细胞介素23单克隆抗体
银屑病
肽图鉴别
纯度测定
生物学活性
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Keywords
anti-interleukin-23 monoclonal antibodies
psoriasis
peptide mapping identification
purity determination
biological activity
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分类号
R917
[医药卫生—药物分析学]
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题名阿胶肽图前处理胶原蛋白酶解条件研究
被引量：2
- 3
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作者
童芯锌
叶茂
张涵
白静
国锦琳
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机构
成都中医药大学中药材标准化教育部重点实验室
中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地
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出处
《成都中医药大学学报》
2018年第3期14-17,共4页
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基金
成都中医药大学科研基金(030021075)
四川省中医药管理局(2016Q056)
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文摘
目的:建立标准化的阿胶蛋白酶解条件。方法:分别通过加热法、超声法及液氮碾磨法提取阿胶蛋白;通过二氯甲烷-环己烷萃取和超滤法纯化阿胶蛋白;采用序列分析级胰酶进行酶解,分别考察4个酶解参数(温度、时间、酶的剂量和pH值)对酶解结果的影响,通过Tricine-SDS-PAGE法检测酶解效果。结果:超声法溶解阿胶样品效果相对较好,酶解参数最佳条件为:酶解温度38℃,pH 8. 0,酶解时间12 h以上,底物与酶体积比在4:1~1:1范围内,计算酶活为0. 1~0. 4 mU (mg/μmol)。结论:建立了标准化的阿胶肽图前处理胶原蛋白胰酶酶解条件,为基于肽图谱法阿胶鉴别及质量控制方法的建立打下基础。
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关键词
阿胶
肽图鉴别
酶解条件
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Keywords
Asini Corii Colla
Peptide mapping
Hydrolysis condition
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分类号
R282.71
[医药卫生—中药学]
R284.2
[医药卫生—中医学]
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