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大鼠肺纤维化模型间质成纤维细胞和肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶2及膜型基质金属蛋白酶mRNA的表达 被引量：18
1
作者 卢韶华 张农 +5 位作者 张秀荣 吴浩 方磊 生玮 张月娥 许祖德 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期527-530,共4页
目的　探讨肺间质成纤维细胞和肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )和膜型基质金属蛋白酶 (MT1 MMP)mRNA在肺纤维化中的表达及意义。方法　清洁级SD大鼠 5 0只 ,随机分为10组 ,实验组 5组气管内注射盐酸博莱霉素A5,对照组 5组代以等... 目的　探讨肺间质成纤维细胞和肺泡巨噬细胞基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )和膜型基质金属蛋白酶 (MT1 MMP)mRNA在肺纤维化中的表达及意义。方法　清洁级SD大鼠 5 0只 ,随机分为10组 ,实验组 5组气管内注射盐酸博莱霉素A5,对照组 5组代以等剂量生理盐水。于注射后 1d、3d、7d、14d、2 8d分离和提取肺间质成纤维细胞及肺泡巨噬细胞 ,应用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)方法 ,观察其MMP 2及MT1 MMPmRNA的动态变化。结果　 (1)博莱霉素作用后 1d成纤维细胞MMP 2基因转录就明显增强 ,达对照组的 2 0 5倍 (t=10 6 6 7,P <0 0 1) ,且一直维持于高水平 ,直到用药 2 8d才略下降。而此过程中肺泡巨噬细胞MMP 2mRNA的转录极微弱 ,仅于实验第 1d较对照组增高(t=3 2 7,P <0 0 5 )。 (2 )成纤维细胞和肺泡巨噬细胞MT1 MMPmRNA的转录均有增强 ,前者于实验第 14d和第 2 8d时分别为对照组的 2 1倍 (t=4 82 3,P <0 0 1)和 1 8倍 (t=4 0 16 ,P <0 0 1) ,后者于第 2 8d时为对照组的 2 4倍 (t=5 85 1,P <0 0 1)。结论　 (1)成纤维细胞不单纯是肺纤维化效应细胞 ,其通过MMP 2基因转录的增强 ,参与了肺基膜结构的损伤 ,参与了肺间质纤维化的启动机制。(2 )实验中后期成纤维细胞和肺泡巨噬细胞MT1 MMP表达增强 ,有助于MMP 展开更多
关键词 肺间质纤维化 肺间质纤维细胞 巨噬细胞 基质金属蛋白酶2 膜型基质金属蛋白酶 mRNA
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JNK信号通路在TGF-β_1诱导肺间质成纤维细胞基质分泌中的作用 被引量：3
2
作者 许烨 祁娟 曾玉 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2007年第6期484-487,共4页
目的:探讨C-Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase,JNK)、P38信号通路的激活在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导人肺间质成纤维细胞基质分泌中的作用及意义。方法:将肺间质成纤维细胞株分为TGF-β1组、TGF-β1+SB203580组、TGF-... 目的:探讨C-Jun氨基末端激酶(c-Jun NH2-terminal kinase,JNK)、P38信号通路的激活在转化生长因子β1(TGF-β1)体外诱导人肺间质成纤维细胞基质分泌中的作用及意义。方法:将肺间质成纤维细胞株分为TGF-β1组、TGF-β1+SB203580组、TGF-β1+DMSO组、TGF-β1+SB600125组、正常对照组。采用免疫印迹法(Western blot)测定总JNK(T-JNK)、磷酸化JNK(p*-JNK)、总P38(T-P38)、磷酸化38(p*-P38)、纤维连接蛋白(FN)、层连粘蛋白(LN)水平的表达变化,采用3H-thymidine incorporation(3H-TdR)检测细胞增殖水平。结果:正常体外培养的肺间质成纤维细胞经TGF-β1刺激后p*-JNK水平显著升高,p*-P38蛋白表达无明显变化;FN、LN蛋白表达水平在TGF-β1诱导48 h后表达显著升高,JNK的特异性化学抑制剂SB600125可以减少p*-JNK、FN、LN蛋白表达水平和细胞增殖水平,P38的特异性化学抑制剂SB203580对上述指标表达无影响。结论:JNK信号通路在TGF-β1诱导的肺间质成纤维细胞分泌基质过程中被激活,并且参与TGF-β1诱导的肺间质成纤维细胞分泌基质过程。 展开更多
关键词 JNK P38 转化生长因子Β1 肺间质成纤维细胞
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矽肺模型大鼠肺间质成纤维细胞MMP-2和MMP-9的表达 被引量：3
3
作者 王海涛 刘昊 +3 位作者 颜京霞 田艳霞 江小华 高俊玲 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第19期1751-1753,共3页
目的:探讨肺间质成纤维细胞MMP-2和MMP-9在S iO2致肺纤维化中的表达及意义.方法:清洁级W istar大鼠50只,随机分为对照组和实验组,实验组气管内注射S iO2悬液,对照组代以等剂量生理盐水.注射后1,3,7,14和28 d分离和提取肺间质成纤维细胞... 目的:探讨肺间质成纤维细胞MMP-2和MMP-9在S iO2致肺纤维化中的表达及意义.方法:清洁级W istar大鼠50只,随机分为对照组和实验组,实验组气管内注射S iO2悬液,对照组代以等剂量生理盐水.注射后1,3,7,14和28 d分离和提取肺间质成纤维细胞,应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,观察其MMP-2,MMP-9蛋白及其mRNA的动态变化.结果:①S iO2作用后1 d成纤维细胞MMP-2表达增高,7 d达高峰,为对照组的3.887倍(t=23.667,P<0.001);MMP-9在S iO2作用后1 d表达增高,7 d达对照组的3.103倍(t=11.399,P<0.001);②MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的转录从S iO2作用后1 d就开始升高.结论:受S iO2刺激后,肺间质成纤维细胞上调MMP-2和MMP-9的表达,损伤肺泡基底膜,启动肺纤维化的发生. 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶 肺间质成纤维细胞 肺间质纤维化 矽肺
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抑癌基因PTEN与特发性肺间质纤维化 被引量：3
4
作者 刘春雨 高占成 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期200-205,共6页
特发性肺间质纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IFP）是一种呈慢性进展不可逆和致死性的特发性间质性肺病，肺间质成纤维细胞广泛增殖，细胞外基质沉积并最终导致肺结构重塑或破坏。其发病机制仍不明确，临床表现具有异质性，尚... 特发性肺间质纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis，IFP）是一种呈慢性进展不可逆和致死性的特发性间质性肺病，肺间质成纤维细胞广泛增殖，细胞外基质沉积并最终导致肺结构重塑或破坏。其发病机制仍不明确，临床表现具有异质性，尚缺乏早期诊断方法。 展开更多
关键词 特发性肺间质纤维化 抑癌基因PTEN pulmonary 肺间质成纤维细胞 细胞外基质沉积 间质性肺病 肺结构重塑 慢性进展
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博莱霉素致肺间质成纤维细胞MMP-2/TIMP-1表达失衡
5
作者 马万里 叶红 +2 位作者 辛建保 陶晓南 白明 《细胞生物学杂志》 CSCD 2005年第6期684-688,共5页
观察博莱霉素对肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,探讨博莱霉素引起肺纤维化的机制。体外培养肺间质成纤维细胞,并向培养基中加入博莱霉素,在作用不同时间后收集样本,采用酶谱图... 观察博莱霉素对肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,探讨博莱霉素引起肺纤维化的机制。体外培养肺间质成纤维细胞,并向培养基中加入博莱霉素,在作用不同时间后收集样本,采用酶谱图测定细胞培养上清液中MMP-2酶活性、ELISA测定TIMP-1量,免疫组织化学法检测细胞中MMP-2、TIMP-1的原位表达,RT-PCR法检测MMP-2和TIMP-1的mRNA水平。结果发现,博莱霉素在2h、12h促进MMP-2的分泌,24h后无促分泌作用;而2￣48h,MMP-2的原位表达及mRNA均不受博莱霉素的影响;博莱霉素从12h开始促进TIMP-1及mRNA的表达,并持续至48h。结果表明博莱霉素可引起肺间质成纤维细胞MMP-2/TIMP-1表达失衡,并可能参与肺纤维化的发生。 展开更多
关键词 博莱霉素 肺间质成纤维细胞 MMP-2 TIMP-1
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瞬时转染SARS-CoVM基因对大鼠肺成纤维细胞生长特性及生物学功能的影响
6
作者 刘乾 陈琦 +3 位作者 蒋涛 王震 闫明霞 许祖德 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期595-599,共5页
目的通过观察转染SARS-CoV M基因的大鼠肺间质成纤维细胞(fibrob last,FB)生长及功能的改变,初步探讨SARS病毒通过肺组织损伤而引发肺纤维化的可能机制和途径。方法碱裂解法扩增纯化质粒,酶消化法分离大鼠肺间质成纤维细胞;采用脂质体... 目的通过观察转染SARS-CoV M基因的大鼠肺间质成纤维细胞(fibrob last,FB)生长及功能的改变,初步探讨SARS病毒通过肺组织损伤而引发肺纤维化的可能机制和途径。方法碱裂解法扩增纯化质粒,酶消化法分离大鼠肺间质成纤维细胞;采用脂质体介导的方法瞬时转染M基因入FB;采用RT-PCR法和W estern b lot鉴定转染结果;四唑盐(MTT)比色法和流式细胞技术(FCM)检测转染后的大鼠肺成纤维细胞的生长情况;采用半定量RT-PCR和Realtim e PCR检测转染后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)基因转录水平的变化。结果与转染空载体的成纤维细胞相比,转染M基因的成纤维细胞在转染48 h时生长明显增强,G0/G1期比例下降,S期比例增高;转染M基因后MMP-2的转录明显增强。结论成功地将携带有M基因的真核表达质粒瞬时转染入大鼠肺间质成纤维细胞,目的基因在肺间质成纤维细胞中表达并具有与SARS-CoV M相似的抗原性;SARS-CoV M蛋白可能促进肺间质成纤维细胞生长;并促进MMP-2的表达。 展开更多
关键词 SARS-CoVM蛋白 瞬时转染 基质金属蛋白酶-2 肺间质成纤维细胞 肺纤维化 大鼠
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