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肺炎球菌荚膜多糖和溶血素结合疫苗的制备及其免疫原性的研究 被引量：5
1
作者 陈泽宇 陈兵 +2 位作者 王正敏 戴文佳 邓月 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期906-910,共5页
目的研制肺炎球菌荚膜多糖(PS)与肺炎球菌溶血素(蛋白)偶联结合疫苗。方法用PCR扩增肺炎球菌溶血素(Pn)基因,将其克隆入表达载体pET-28a质粒中,然后转化大肠杆菌JM109(DE3)宿主细胞,并以IPTG诱导进行蛋白质表达,对所得蛋白质用固相Ni-NT... 目的研制肺炎球菌荚膜多糖(PS)与肺炎球菌溶血素(蛋白)偶联结合疫苗。方法用PCR扩增肺炎球菌溶血素(Pn)基因,将其克隆入表达载体pET-28a质粒中,然后转化大肠杆菌JM109(DE3)宿主细胞,并以IPTG诱导进行蛋白质表达,对所得蛋白质用固相Ni-NTA树脂作纯化,再用SDS-PAGE鉴定表达的纯化蛋白(rPn)。以福尔马林脱毒rPn,去除其溶血活性,然后用氨基还原法将脱毒的rPn与PS(19F血清型)偶联结合,加入铝佐剂制备成疫苗。以该疫苗腹腔注射接种小鼠,用ELISA法检测小鼠血清中抗PS及抗Pn的抗体水平。结果成功扩增和克隆了Pn基因,经诱导表达得到rPn蛋白,纯化后纯度达90％以上。PS与Pn结合物经凝胶层析柱分离,其洗脱峰较PS与Pn二峰明显前移。用该结合疫苗免疫的小鼠血清中抗PS(19F)抗体及抗Pn抗体的效价均明显高于阴性对照组(P＜0．01)。结论用基因工程技术制备的肺炎球菌溶血素作为蛋白载体,脱毒后与肺炎球菌多糖偶联而成的结合疫苗能在小鼠体内诱导出明显的免疫应答反应。 展开更多
关键词 肺炎球菌 肺炎球菌溶血素 多糖和蛋白结合疫苗 免疫应答
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肺炎球菌溶血素
2
作者 陈敏 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 1999年第1期4-6,共3页
肺炎球菌溶血素（PLY）是一种多功能肺炎球菌毒力因子,在肺炎球菌感染的早期发病机理中似能促进细菌肺内生长和扩散。PLY通过其对呼吸道上皮和内皮细胞的毒性,破坏肺组织屏障,促进肺炎球菌生长和扩散。由于PLY对免疫和炎症细胞的直接抑... 肺炎球菌溶血素（PLY）是一种多功能肺炎球菌毒力因子,在肺炎球菌感染的早期发病机理中似能促进细菌肺内生长和扩散。PLY通过其对呼吸道上皮和内皮细胞的毒性,破坏肺组织屏障,促进肺炎球菌生长和扩散。由于PLY对免疫和炎症细胞的直接抑制作用及对补体的激活,因此能阻止从肺间质和血液中清除细菌。PLY能刺激局部和全身性免疫应答,并能增强肺炎球菌多糖（PS）的免疫原性,因此PLY-PS结合物可构成菌苗的基础,这种菌苗不仅能诱生针对肺炎球菌PS的保护性和持久性免疫应答,而且亦能产生使呼吸道粘膜免受毒性损害的中和性抗PLY抗体。 展开更多
关键词 肺炎球菌溶血素 肺炎球菌 多糖 免疫原性 疫苗
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肺炎球菌溶血素溶血活性致大鼠脑损伤机制研究
3
作者 禚志红 刘敏 王怀立 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第1期30-33,共4页
目的溶血活性是肺炎球菌溶血素(pneumolysin,PLY)的重要生物学特性之一。运用不同溶血活性的PLY建立脑损伤模型,探讨溶血活性对PLY致大鼠脑损伤的作用机制。方法 4周龄大鼠,经左侧颈内动脉注入等剂量溶血活性缺失的PLY[PLY(-)]及溶血活... 目的溶血活性是肺炎球菌溶血素(pneumolysin,PLY)的重要生物学特性之一。运用不同溶血活性的PLY建立脑损伤模型,探讨溶血活性对PLY致大鼠脑损伤的作用机制。方法 4周龄大鼠,经左侧颈内动脉注入等剂量溶血活性缺失的PLY[PLY(-)]及溶血活性正常的PLY[PLY(+)],观察脑组织神经损伤情况及炎症因子水平。结果 PLY(+)组脑组织神经元烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)[(122.495±4.852)%]及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)水平[(135.697±2.727)%]较PLY(-)组及等渗盐水(NS)对照组[(80.467±2.460)%,(89.622±3.226)%]均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),PLY(-)组NSE[光度值(102.081±2.150)%]及GFAP水平[光度值(96.323±4.113)%]也高于对照组(NSE光度值80.467±2.460,GFAP光度值89.622±3.226),差异有统计学意义(P<0.05);PLY(+)组TNF-α及IL-6水平[(103.902±3.221)、(52.030±1.817)ng/mL]较PLY(-)组[(94.152±3.032)、(41.628±2.972)ng/mL]及NS对照组[(69.986±3.567)、(21.246±3.118)ng/mL]均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),PLY(-)组TNF-α[(94.152±3.032)ng/mL]及IL-6水平[(41.628±2.972)ng/mL]也较NS对照组[(69.986±3.567)ng/mL,(21.246±3.118)ng/mL]明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论溶血活性在肺炎链球菌造成脑损伤过程中具有重要作用,并且一定程度上可促进炎性因子释放。 展开更多
关键词 肺炎球菌溶血素 脑损伤 溶血活性
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肺炎球菌溶血素的纯化及其免疫效果
4
作者 郭京蓉 王建华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期430-433,共4页
目的从6B、9V、14、19F型肺炎球菌培养物中纯化肺炎球菌溶血素(PLY),并检测其免疫原性和保护作用。方法采用自溶、硫酸铵沉淀及三步柱层析法纯化PLY,并检测PLY免疫NIH小鼠后血清抗体滴度及其保护效果。结果纯化的6B、9V、14、19F型PLY... 目的从6B、9V、14、19F型肺炎球菌培养物中纯化肺炎球菌溶血素(PLY),并检测其免疫原性和保护作用。方法采用自溶、硫酸铵沉淀及三步柱层析法纯化PLY,并检测PLY免疫NIH小鼠后血清抗体滴度及其保护效果。结果纯化的6B、9V、14、19F型PLY纯度依次为83.4%、99.2%、70.1%和76.6%;9V型PLY表观相对分子质量为52840,与文献报道的53000相一致。从4种血清型肺炎球菌中纯化的PLY均能诱导小鼠产生高且稳定持久的抗体滴度。各免疫组小鼠分别感染6B、9V、14、19F型肺炎球菌,存活率均显著高于对照组。结论4种血清型PLY均具有良好的免疫原性和保护作用。 展开更多
关键词 肺炎球菌溶血素 纯化 免疫原性 保护效果
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肺炎球菌溶血素和CbpA免疫接种诱导的抗肺炎球菌作用
5
作者 姚娟 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 2002年第5期227-227,共1页
关键词 肺炎球菌溶血素 CbpA 免疫接种 抗肺炎球菌作用 胆碱结合蛋白A
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