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血管内皮生长因子基因治疗肢体动脉梗塞病的实验研究 被引量：29
1
作者 盛琴慧 朱国英 +8 位作者 周爱儒 高炜 霍勇 冷冰 朱小君 牛大地 马大龙 陈光慧 汤健 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期129-132,共4页
目的验证血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗肢体动脉梗塞病的有效性和安全性。方法构建重组ＶＥＧＦ基因的真核表达载体ｐｃＤ２／ＶＥＧＦ。有效性试验：制备肢体动脉梗塞病的猴模型，通过肌肉基因缝线法和肌内多点注射法导入ＶＥ... 目的验证血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗肢体动脉梗塞病的有效性和安全性。方法构建重组ＶＥＧＦ基因的真核表达载体ｐｃＤ２／ＶＥＧＦ。有效性试验：制备肢体动脉梗塞病的猴模型，通过肌肉基因缝线法和肌内多点注射法导入ＶＥＧＦ基因，对照组转等量空载质粒。安全性试验：将超剂量和治疗剂量的ＶＥＧＦ基因分别导入５只小鼠（１０００μｇ，为小鼠治疗剂量２０μｇ的５０倍）、１０只大鼠（２０００μｇ，为治疗剂量的１０倍）和５只猴（２０００μｇ，治疗剂量）体内观察其毒副作用，并采用ＰＣＲ法和间接ＥＬＩＳＡ法进行分子遗传学和免疫学的评估。结果转ＶＥＧＦ基因后１周血管造影即显示，结扎点附近有较多充盈小血管，远端动脉开始充盈，２周时更为明显，１月后新生小血管最为丰富，可见远端动脉明显充盈，血管计数显示ＶＥＧＦ组（１周时５／１００ｃｍ２、１月１２／１００ｃｍ２）明显多于对照组（１周１／１００ｃｍ２、１月４／１００ｃｍ２）。生化等检查，证明ＶＥＧＦ基因对肝肾功能等无明显影响，未见肿瘤或其它病理变化。导入的ＶＥＧＦ基因可在局部肌肉组织中保存４个月以上，不累及其它各脏器组织，且无循环抗体产生。结论肌肉导入ＶＥＧＦ基因治疗肢体动脉梗塞病是有效和? 展开更多
关键词 肢体动脉梗塞病 基因治疗 内皮生长因子
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包载治疗基因的聚合物纳米粒子:I.纳米粒子制备及动物模型基因治疗实验研究 被引量：4
2
作者 杨菁 宋存先 +7 位作者 孙洪范 武莉 唐丽娜 冷希岗 王彭延 徐意瑶 李拥军 管珩 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期438-442,共5页
以可生物降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(Poly-dl-lactic-co-glycolic,PLGA)为原料,采用多相乳化技术制备载VEGF纳米粒子。并对纳米粒子的粒径,VEGF含量,体外释放等进行了测定。VEGF纳米粒子和VEGF裸质粒被注射到兔下肢缺血模型的缺血部... 以可生物降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(Poly-dl-lactic-co-glycolic,PLGA)为原料,采用多相乳化技术制备载VEGF纳米粒子。并对纳米粒子的粒径,VEGF含量,体外释放等进行了测定。VEGF纳米粒子和VEGF裸质粒被注射到兔下肢缺血模型的缺血部位,通过RT-PCR,免疫组化和血管造影等技术来验证基因治疗的效果,评价VEGF纳米粒子作为基因载体在动物模型基因治疗中的效率。制备的VEGF纳米粒子的平均粒径约为300nm,包埋效率在96%以上,纳米粒子中VEGF含量约4%。可在体外维持恒定释放约两周。两周基因注射结果表明VEGF-NP治疗组与裸质粒VEGF治疗组的毛细血管密度明显高于对照组,VEGF纳米粒子组(81.22permm2),对照组(29.54mm2),两者有显著性差异(P<0.05)。RT-PCR结果显示VEGF纳米粒子组表达(31.79au*mm)明显高于VEGF裸质粒组(9.15au*mm)。在动物模型中VEGF纳米粒子是比裸质粒DNA更好的基因载体系统,结果显示了纳米粒子可望在人类基因治疗中得到很好的应用。 展开更多
关键词 包载基因 聚合物纳米粒子 纳米粒子 制备工艺 动物模型 基因治疗 肢体动脉梗塞病 手术治疗
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