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金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分型和分布 被引量:116
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作者 张严峻 张俊彦 +3 位作者 梅玲玲 王志刚 朱敏 王赞信 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第6期682-684,共3页
目的:建立金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测方法。初步研究生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。方法:应用PCR扩增经分离鉴定的金黄色葡萄球菌肠毒素基因SEA-SEJ,电泳检测扩增结果。结果:建立了金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检... 目的:建立金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测方法。初步研究生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的分布状况。方法:应用PCR扩增经分离鉴定的金黄色葡萄球菌肠毒素基因SEA-SEJ,电泳检测扩增结果。结果:建立了金黄色葡萄球菌肠毒素基因PCR检测方法。从生牛奶中分离的29株金黄色葡萄球菌检测到SEA-SED和SEG-SEJ基因,没有检测到SEE基因。毒素基因携带率为65.5%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占37.9%。有SEA基因的占51.7%,含其它传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占17.2%,携带新发现的毒素基因SEG、SEH、SEI和SEJ的菌株占41.4%。结论:建立的PCR检测金黄色葡萄球菌的肠毒素基因的方法可用于金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型和分布的研究。研究表明,生牛奶中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,而且携带新发现的肠毒素基因的较多。 展开更多
关键词 肠毒素基因 金黄色葡萄球菌肠毒素 PCR检测方法 PCR扩增 基因携带率 SEA基因 生牛奶 分布状况 分离鉴定 电泳检测 基因类型 基因分型 E基因 步研究 菌株 SEB SEC SED SEG 带毒率 新发
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中国食源性金黄色葡萄球菌耐药及肠毒素特征 被引量:16
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作者 李孟寒 李莹 +9 位作者 闫琳 杨舒然 李凤琴 徐进 汪滢 李辉 裴紫薇 白瑶 柳江山 王伟 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期574-578,共5页
目的了解2017年中国食源性金黄色葡萄球菌(金葡菌)耐药和肠毒素特征。方法2017年收集全国29个省市食源性金葡菌397株,并测定其抗生素耐药性、肠毒素基因和产肠毒素情况。结果96.5%(383/397)金葡菌对受试的13种抗生素呈不同程度耐药,其... 目的了解2017年中国食源性金黄色葡萄球菌(金葡菌)耐药和肠毒素特征。方法2017年收集全国29个省市食源性金葡菌397株,并测定其抗生素耐药性、肠毒素基因和产肠毒素情况。结果96.5%(383/397)金葡菌对受试的13种抗生素呈不同程度耐药,其中青霉素(PEN)耐药率最高(94.7%);30.2%(120/397)金葡菌为多重耐药,米面制品和面包来源金葡菌多重耐药率最高,分别为37.4%和37.3%;共存在72种耐药谱。284株金葡菌检出了20种肠毒素基因,其中sea、seb、sec和sed等常见肠毒素基因检出82株(20.7%,82/397),其中sea(14.9%)基因检出率明显高于seb^sed基因(χ2=74.534,P<0.05),90%以上的菌株均能产生SE-A^SE-D肠毒素。结论2017年中国29个省市食源性金葡菌耐药水平较高,多重耐药现象严重,且同时携带多种肠毒素基因并能产肠毒素。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐药性 多重耐药 肠毒素基因 肠毒素 食源性致病菌
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金黄色葡萄球菌临床分离株肠毒素基因的调查分析 被引量:17
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作者 曹虹 王敏 +4 位作者 郑荣 李先平 王芳 蒋云生 杨一芬 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期738-741,745,共5页
目的检测临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)肠毒素基因,了解肠毒素基因的携带情况与SA耐药的关系。方法采用聚合酶链反应检测SA mecA基因和肠毒素基因,了解肠毒素基因在SA中分布的状况,并对其进行耐药性分析。结果 67株甲氧西林耐药的SA(MR... 目的检测临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)肠毒素基因,了解肠毒素基因的携带情况与SA耐药的关系。方法采用聚合酶链反应检测SA mecA基因和肠毒素基因,了解肠毒素基因在SA中分布的状况,并对其进行耐药性分析。结果 67株甲氧西林耐药的SA(MRSA)和57株甲氧西林敏感的SA(MSSA)肠毒素基因携带率(100%vs 83.5%)无明显差异(χ2=0.203,P>0.05)。肠毒素基因检出率为93.5%(116株),其中SEA、SEB、SEC、SED和SEF的检出率分别为90.5%、6.9%、61.3%、5.2%和25.9%,未检测出SEE基因。同时检出2种及2种以上的肠毒素基因的菌株有78株(67.2%),以携带SEA+SEC、SEA+SEF和SEA+SEC+SEF基因为主,检出率分别为33.6%、7.8%和13.8%。与携带一种肠毒素基因的菌株耐药率相比,携带多种肠毒素基因的菌株耐药率呈上升趋势,其中携带SEA+SEC+SEF的菌株对复方新诺明的耐药率为75.0%,高于单独携带SEA(28.6%)、SEA+SEC(38.7%)的耐药率,具有统计学差异(P<0.05)。携带SEA+SEC+SEF、SEA+SEF、SEA的菌株对阿米卡星耐药率分别为75.0%、77.0%和21.5%,前两者与携带SEA的菌株相比有显著差异(P<0.05)。结论临床分离的SA中携带多种肠毒素基因的菌株在耐药率上高于只携带一种肠毒素基因的菌株,提示肠毒素在SA耐药中起重要作用。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 耐药性
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PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素D基因 被引量:12
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作者 云泓若 李月琴 周天鸿 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 1999年第5期84-87,共4页
根据金黄色葡萄球菌肠毒素 D 基因的序列,设计相应的引物,建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素 D 基因的 P C R 技术利用该方法可从含有肠毒素 D 基因的金黄色葡萄球菌中扩增出 P C R产物扩增产物具有特异性,长为316 个碱... 根据金黄色葡萄球菌肠毒素 D 基因的序列,设计相应的引物,建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素 D 基因的 P C R 技术利用该方法可从含有肠毒素 D 基因的金黄色葡萄球菌中扩增出 P C R产物扩增产物具有特异性,长为316 个碱基对经限制性核酸内切酶 Hh I Ⅰ酶切证实扩增产物为 S E D 基因片段 P C R 敏感度实验显示:建立的检测金黄色葡萄球菌肠毒素 D 基因的 P C R 技术具有快速敏感简易和特异性强等特点。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因
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腹泻儿童沙门菌的耐药性研究及肠毒素基因与临床关系分析 被引量:16
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作者 陈庆法 陈强 +4 位作者 余晓君 周红平 柯江维 朱春晖 段荣 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2011年第18期5360-5365,共6页
目的研究近年来本地区沙门菌肠炎患儿的临床特征、耐药状况及肠毒素与临床特征的关系,为临床病情的判断与治疗提供依据。方法我院2004年4月至2009年12月从儿童腹泻患者粪便中分离的沙门菌80株,采用血清学凝集试验确定沙门菌血清型,再采... 目的研究近年来本地区沙门菌肠炎患儿的临床特征、耐药状况及肠毒素与临床特征的关系,为临床病情的判断与治疗提供依据。方法我院2004年4月至2009年12月从儿童腹泻患者粪便中分离的沙门菌80株,采用血清学凝集试验确定沙门菌血清型,再采用Kerby-Bauer纸片扩散法检测其对抗菌药物的敏感性;同时对肠毒素基因(spvA、spvB、rck)进行PCR检测,分析沙门菌肠炎患儿的临床特征与肠毒素的关系。结果发热、腹泻为本病的主要临床表现。鼠伤寒沙门菌是小儿沙门菌肠炎的主要血清型(70/80,87.5%),其他血清型的沙门菌呈散发。80株沙门菌均对亚胺培南、美罗培南敏感,但对其他抗生素均有不同程度的耐药。66株沙门菌为多重耐药菌株,17株为可疑产β-内酰胺酶(ESBLs)菌株,8株为可疑产头孢菌素水解酶(AMPC)菌株,鼠伤寒沙门菌的多重耐药率明显高于其他血清型的沙门菌(χ2=30.921,P=0.001)。所有沙门菌均含有spvA基因,少数沙门菌含有spvB及rck基因,spvB阳性者高热的比率较spvB阴性者高(χ2=7.544,P=0.006),spvB阳性者排黏液血便的比率较spvB阴性者高(χ2=6.163,P=0.013)。结论沙门菌肠炎患儿以发热、腹泻为主要临床表现,鼠伤寒沙门菌是其主要病原菌,鼠伤寒沙门菌的多重耐药率明显高于其他血清型的沙门菌,spvB阳性菌株临床上更易表现为高热及排黏液血便,临床上需根据药敏结果合理使用抗生素。 展开更多
关键词 沙门菌 鼠伤寒 儿童 临床特征 多重耐药 院内感染 肠毒素基因
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食物中毒和食品中金黄色葡萄球菌肠毒素基因分型研究 被引量:14
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作者 诸葛石养 苏爱荣 《实用预防医学》 CAS 2017年第1期55-57,共3页
目的对食物中毒及食品样品中金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因分型,比较两种分离株肠毒素基因分布及分型差异。方法用PCR法测定金黄色葡萄球菌肠毒素基因(SEA-SEJ)。结果 129株食品分离株中75株检出肠毒素基因(58.14%),78株食物中毒分离株... 目的对食物中毒及食品样品中金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因分型,比较两种分离株肠毒素基因分布及分型差异。方法用PCR法测定金黄色葡萄球菌肠毒素基因(SEA-SEJ)。结果 129株食品分离株中75株检出肠毒素基因(58.14%),78株食物中毒分离株中73株检出肠毒素基因(93.59%),食物中毒分离株肠毒素基因检出率明显高于食品分离株(P<0.01),食品分离株中主要流行肠毒素基因为SEI(21.71%),食物中毒分离株中主要流行肠毒素基因为SEA(41.03%)。结论金黄色葡萄球菌食物中毒和食品分离株肠毒素基因的分型和分布上存在差异。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 食品
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6种食品防腐剂对金黄色葡萄球菌抑菌效果及肠毒素基因表达的影响 被引量:13
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作者 王琼 唐俊妮 +1 位作者 汤承 陈娟 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第21期151-156,共6页
目的:探索6种食品防腐剂——亚硝酸盐、苯甲酸钠、ε-聚赖氨酸、壳聚糖、茶多酚、Nisin对1株引起食物中毒的金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用,以及对该菌株所含不同肠毒素基因在m RNA水平表达的影响。方法:按照GB 2760—2014《食品添加剂... 目的:探索6种食品防腐剂——亚硝酸盐、苯甲酸钠、ε-聚赖氨酸、壳聚糖、茶多酚、Nisin对1株引起食物中毒的金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用,以及对该菌株所含不同肠毒素基因在m RNA水平表达的影响。方法:按照GB 2760—2014《食品添加剂使用标准》限量标准的质量浓度,分别添加6种不同的防腐剂在金黄色葡萄球菌SA003初始接菌量约为105 CFU/m L的TSB液体培养基中,37℃培养24 h后进行菌落计数;同时收集菌体用于RNA提取,将提取的RNA进行反转录后,采用荧光定量聚合酶链式反应方法检测各肠毒素基因在m RNA水平上的相对表达量。结果:在国标最大限量条件下,不同添加剂对金黄色葡萄球菌SA003的抑菌作用强弱顺序分别为:Nisin>茶多酚>壳聚糖>ε-聚赖氨酸>苯甲酸钠>亚硝酸盐。6种防腐剂均能抑制肠毒素sea、sed、seg、sei、selj、selm、selr和selu基因在转录水平上的表达,但作用效果存在差异。结论:在TSB液体培养基中添加一定剂量的防腐剂不仅能抑制金黄色葡萄球菌的生长,还能够显著降低肠毒素基因的表达量。 展开更多
关键词 食品防腐剂 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 表达
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临床患者标本金黄色葡萄球菌肠毒素基因及耐药性的检测分析 被引量:12
8
作者 汪永禄 王多春 +4 位作者 张萍 陶勇 王利 王艳 阚飙 《公共卫生与预防医学》 2013年第2期18-22,共5页
目的了解临床标本分离的金黄色葡萄球菌的产肠毒素携带情况及耐药现状。方法应用mini-VIDAS仪器检测金黄色葡萄球菌肠毒素、PCR扩增肠毒素基因sea~see(sea、seb、sec、sed、see)、seg~sej(seg、she、sei、sej)和tsst基因,电泳检测扩... 目的了解临床标本分离的金黄色葡萄球菌的产肠毒素携带情况及耐药现状。方法应用mini-VIDAS仪器检测金黄色葡萄球菌肠毒素、PCR扩增肠毒素基因sea~see(sea、seb、sec、sed、see)、seg~sej(seg、she、sei、sej)和tsst基因,电泳检测扩增产物,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测用检测头孢西丁方法,药敏试验采用琼脂稀释法进行。结果 55株金黄色葡萄球菌中40株携带肠毒素基因,占72.73%,主要为sea型14.55%(8/55)、sec型12.73%(7/55)、seb型9.10%(5/55),同时携带≥2种肠毒素的占9.09%(5/55);另外,19株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有17株(89.47%)携带肠毒素基因,以sea为主,占26.32%(5/19);甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)36株,肠毒素基因携带率63.89%(23/36),毒素基因以sec为主,占16.67%(6/36)。金黄色葡萄球菌除对呋喃妥因敏感外,对青霉素、苯唑西林等11种抗菌素均有耐药性,且MRSA的耐药性MSSA的强。结论应重视对金黄色葡萄球菌肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌素,以利于医院MRSA感染的控制。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 MRSA 耐药性
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金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布的研究 被引量:12
9
作者 王营 于宏伟 +1 位作者 郭润芳 贾英民 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期84-88,共5页
为了研究g型肠毒素基因(SEg)i、型肠毒素基因(SEi)在金黄色葡萄球菌菌株中的分布状况,本试验以分离自人化脓组织、生牛乳等8种不同来源的371株金黄色葡萄球菌菌株作为研究对象,利用PCR技术对肠毒素基因的分布进行检测。结果表明:267株... 为了研究g型肠毒素基因(SEg)i、型肠毒素基因(SEi)在金黄色葡萄球菌菌株中的分布状况,本试验以分离自人化脓组织、生牛乳等8种不同来源的371株金黄色葡萄球菌菌株作为研究对象,利用PCR技术对肠毒素基因的分布进行检测。结果表明:267株金黄色葡萄球菌检出含有肠毒素基因,总检出率为71.97%。其中SEg基因的总检出率为67.93%,SEi基因的总检出率为57.68%。各来源间金黄色葡萄球菌肠毒素的检出率不同,且同一来源的菌株其SEg和SEi的检出率也不同,表明不同来源以及不同肠毒素的基因型在金黄色葡萄球菌中的分布存在差异。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 分布
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金黄色葡萄球菌食品分离株肠毒素基因分布及分型研究 被引量:10
10
作者 张红芝 朱召芹 +4 位作者 陈海丽 崔琳 刘钥 孙双福 顾其芳 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2012年第5期417-420,共4页
目的对2006—2009年上海市Staphylococcus aureus(S.aureus)食品分离株进行肠毒素基因检测和基因分型研究,以了解肠毒素基因的分布规律及S.aureus的流行特点。方法利用PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素基因,包括5种传统肠毒素基因... 目的对2006—2009年上海市Staphylococcus aureus(S.aureus)食品分离株进行肠毒素基因检测和基因分型研究,以了解肠毒素基因的分布规律及S.aureus的流行特点。方法利用PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素基因,包括5种传统肠毒素基因(SEA-SEE)和4种新型肠毒素基因(SEG-SEJ);利用脉冲场凝胶电泳法对49株食品分离株进行基因分型。结果本研究发现49株食品分离株中有19株含有肠毒素基因,16株含有传统肠毒素SEA和SEC,且SEC占93.8%,并检测到新型肠毒素SEG、SEI、SEJ和SEH。PFGE法基因分型显示5株菌不能被分型,其余44株可分为28个基因型,表现为基因型的多样性,且分离自不同时间的菌株具有相同的带型。结论应加强食品中S.aureus的监测分析,为其引起的食物中毒的预防和控制提供科学依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 脉冲场凝胶电泳 食源性致病菌
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霍乱弧菌几种肠毒素基因的检测研究 被引量:8
11
作者 张政 朱水荣 +2 位作者 黄良 陈秀英 莫顺堂 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1095-1096,共2页
目的 了解我省分离的霍乱弧菌中几种主要肠毒素基因的携带情况。方法 以地高辛标记基因探针 ,对我省历年分离的 91株霍乱弧菌 (包括EVC和VCO13 9)作霍乱肠毒素基因探针杂交检测。结果 EVC流行株和VCO13 9菌株中 ,普遍存在ctxAB、Zot... 目的 了解我省分离的霍乱弧菌中几种主要肠毒素基因的携带情况。方法 以地高辛标记基因探针 ,对我省历年分离的 91株霍乱弧菌 (包括EVC和VCO13 9)作霍乱肠毒素基因探针杂交检测。结果 EVC流行株和VCO13 9菌株中 ,普遍存在ctxAB、Zot、Ace等毒素基因 ,该 3种基因的携带率分别达到10 0 %,98 86 %,96 5 9%;而EVC非流行菌株则均不携带上述3种毒素基因。结论 提示EVC流行株和VCO13 9菌株具备较强的产毒能力 ,流行性强 ,应重点加强监测与研究。从ctxAB基因的RFLP杂交图谱分析 ,EVC流行株和VCO13 9在遗传特征上具相近的特点 ,结果均显示 2条阳性杂交带。 展开更多
关键词 霍乱弧菌 毒素基因探针 杂交 肠毒素基因 霍乱毒素
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奶牛乳房炎源性产色葡萄球菌的肠毒素基因检测 被引量:9
12
作者 赵华男 瞿玥 +2 位作者 韩博 李树梅 高健 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第5期24-27,共4页
前期流行病学调查结果显示,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)是引起我国奶牛乳房炎的主要致病菌之一,而产色葡萄球菌分离率最高的一种CNS。为探明奶牛乳房炎源性产色葡萄球菌肠毒素基因的分布特征,本试验采用PCR方法,对来源于我国11个省份20个... 前期流行病学调查结果显示,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)是引起我国奶牛乳房炎的主要致病菌之一,而产色葡萄球菌分离率最高的一种CNS。为探明奶牛乳房炎源性产色葡萄球菌肠毒素基因的分布特征,本试验采用PCR方法,对来源于我国11个省份20个奶牛场临床乳房炎奶样中分离鉴定的36株产色葡萄球菌进行9种肠毒素基因的检测,同时对生物被膜的产生能力及生物被膜相关调控基因(ica A、ica D和bap)进行检测。结果显示,在36株产色葡萄球菌中,33株携带至少一种肠毒素基因,占比92%;18株携带两种及以上肠毒素基因,占比50%。检出率较高的肠毒素基因依次为seh(50%)、sei(47%)、sea(36%)和sec(25%)。生物被膜检测结果显示,29株产色葡萄球菌具有生物被膜产生能力,占比81%;此外,36株产色葡萄球菌中,19株携带生物被膜相关调控基因(53%),以ica D基因为主。在奶牛乳房炎源性产色葡萄球菌中,肠毒素基因的高检出率显示其具有较强的乳房炎致病潜力,同时可对奶制品安全生产造成隐患。产色葡萄球菌较强的生物被膜产生能力能够使其对抗生素的耐药性增强,从而降低乳房炎的治疗效果。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 产色葡萄球菌 肠毒素基因 生物被膜
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2009—2018年广州市即食食品中金黄色葡萄球菌污染情况和菌型特征 被引量:9
13
作者 周勇 吴新伟 +5 位作者 胡玉山 伍业健 刘俊华 侯水平 张欣强 张健 《中国食品卫生杂志》 CSCD 北大核心 2021年第4期444-450,共7页
目的分析2009—2018年广州市零售即食食品中金黄色葡萄球菌污染情况,以及菌株肠毒素基因、耐药表型特征。方法从广州市辖11个区的农贸市场、超市随机购买零售即食食品,增菌后分离金黄色葡萄球菌。对所有菌株进行多位点序列分型(MLST)、... 目的分析2009—2018年广州市零售即食食品中金黄色葡萄球菌污染情况,以及菌株肠毒素基因、耐药表型特征。方法从广州市辖11个区的农贸市场、超市随机购买零售即食食品,增菌后分离金黄色葡萄球菌。对所有菌株进行多位点序列分型(MLST)、抗生素敏感性试验,并检测24种肠毒素基因。对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行葡萄球菌染色体盒(SCCmec)分型。结果2009—2018年广州市采集的1399份即食食品中共分离出157株金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)(检出率为11.22%),其中熟猪肉中金葡菌检出率(17.95%)相比非熟肉食品中金葡菌检出率(9.43%)差异有统计学意义(P<0.001);抗生素敏感性检测结果显示7株金葡菌为MRSA,检出率为0.5%;157株金葡菌对青霉素的耐药率高达83.43%,其次是四环素(55.41%)、红霉素(41.40%)、氯霉素(29.30%)、克林霉素(21.02%)、复方新诺明(20.40%)及庆大霉素(14.01%);对环丙沙星、苯唑西林及头孢西丁的耐药率均≤10.0%,对万古霉素、达托霉素、利奈唑胺均敏感。即食食品中优势克隆复合体(CC)为CC59(25.48%),其次为CC6(17.83%)、CC398(10.83%)。菌株特征分析结果发现对3种或3种以上抗菌药耐药的菌株占比,CC59和CC398大于CC6(P<0.001),而所有CC6菌株都携带seg,sei,sem,sen,seo及seu,远高于CC59(P<0.001)。结论广州市即食食品中的优势菌群是CC59、CC6和CC398,这3种优势克隆群在国内临床患者和食物中毒分离株中也很常见,需要公共卫生部门引起重视,加强对市售即食食品中金葡菌的监测。 展开更多
关键词 即食食品 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 多位点序列分型
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基因分型技术在食物中毒调查中的溯源应用 被引量:9
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作者 张颖 庞杏林 +3 位作者 陈守义 李钏华 何洁仪 景钦龙 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第3期512-514,共3页
目的:运用基因分型技术分析金黄色葡萄球菌的分子特征,为流行病学溯源提供有效手段。方法:对一起由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒进行常规鉴定后,用荧光定量PCR检测特异耐热核酸酶基因(nuc)和5种常见肠毒素基因(sea,seb,sec,sed,see),... 目的:运用基因分型技术分析金黄色葡萄球菌的分子特征,为流行病学溯源提供有效手段。方法:对一起由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒进行常规鉴定后,用荧光定量PCR检测特异耐热核酸酶基因(nuc)和5种常见肠毒素基因(sea,seb,sec,sed,see),并应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分型和聚类分析。结果:23株分离菌的nuc基因检测均为阳性,其中22株检测出sea肠毒素基因,21株细菌属于同一个PFGE型别。结论:此次食物中毒由同一株金黄色葡萄球菌引起,基因分型技术可以显示食物中毒诊断证据链,为流行病学调查和溯源提供可靠依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 荧光定量PCR 脉冲场凝胶电泳
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浙江省猪源产肠毒素大肠杆菌分子流行病学调查 被引量:2
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作者 陈怡洁 袁秀芳 +7 位作者 徐丽华 余斌 苏菲 叶十一 卢碧凯 蒋利明 张晖 李军星 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1651-1657,1709,共8页
本研究旨在调查浙江省猪源产肠毒素性大肠杆菌的流行情况和毒力基因特征。采用标准细菌学方法对大肠杆菌进行分离,并用聚合酶链反应(PCR)方法检测大肠杆菌的毒力基因。2014-2021年共分离到137个携带ETEC黏附素或肠毒素基因的大肠杆菌菌... 本研究旨在调查浙江省猪源产肠毒素性大肠杆菌的流行情况和毒力基因特征。采用标准细菌学方法对大肠杆菌进行分离,并用聚合酶链反应(PCR)方法检测大肠杆菌的毒力基因。2014-2021年共分离到137个携带ETEC黏附素或肠毒素基因的大肠杆菌菌株,其中禁抗后平均每年分离到的菌株数量是禁抗前的2倍。肠毒素基因检测结果表明,STb(129/137,94.2%)最常见,其次是STa(64/137,46.7%)和LT(62/137,45.3%);黏附素基因以F18(56/137,40.9%)最占优势,其次为K88(28/137,20.4%),未检测到K99和987P及F41等黏附素。上述137个临床分离株中共检测到16种不同的毒力因子模式,平均每8.6个菌株产生一种不同的毒力因子模式;其中39.4%的菌株仅携带肠毒素基因,检测不到经典的黏附素基因,而1.5%的菌株则与之相反。共有81株菌同时检测到肠毒素和黏附素基因,占检出总数的59.1%。在所有被检测的生长阶段,肠毒素STb均为检出率最高的肠毒素,且随着日龄增加检出率逐渐降低。黏附素F18随着仔猪日龄的增加检出率不断提高;K88黏附素在各个生长阶段均能检出,尤其在产房仔猪中检出率最高。口腔灌服不同毒力因子模式ETEC菌株对小鼠的致死率介于0~40%,攻毒7 d后不同组的小鼠肠内容物中攻毒菌株的带菌率介于0~100%。综上所述,饲料禁抗后浙江省腹泻猪群中ETEC分离率明显上升,所携带的肠毒素以STb为主,黏附素以F18为主。菌株的毒力因子模式复杂,对小鼠的致病力及在小鼠体内的持续存活能力有明显差异,说明小鼠作为猪源ETEC的传播媒介作用在不同菌株间存在较大差异。 展开更多
关键词 肠毒素性大杆菌(ETEC) 毒力因子 黏附素基因 肠毒素基因 分子流行病学
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生牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测与分布 被引量:6
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作者 李婉芬 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第5期843-844,893,共3页
目的:应用多重聚合酶链反应(PCR),检测生牛奶中16种金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)基因的分布状况。方法:应用多重PCR的方法,对55个生牛奶样本中经分离鉴定的金黄色葡萄球菌菌株进行肠毒素基因SEA-SE lQ扩增,电泳检测扩增结果。利用16S rRNA... 目的:应用多重聚合酶链反应(PCR),检测生牛奶中16种金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)基因的分布状况。方法:应用多重PCR的方法,对55个生牛奶样本中经分离鉴定的金黄色葡萄球菌菌株进行肠毒素基因SEA-SE lQ扩增,电泳检测扩增结果。利用16S rRNA基因片段在多重PCR中作为内部阳性参照,同时,所有菌株经反向乳胶凝集试验(reverse passive latex agglutination,RPLA)测定传统的肠毒素型SEA-SED。结果:从生牛奶中分离鉴定的金黄色葡萄球菌,含传统的毒素基因类型SEA-SEE,SEG-SEI基因的菌株仅占25.45%,携带新发现的毒素基因SE lJ-SE lQ的菌株占56.36%。毒素基因携带率为56.36%,同时携带2种及以上毒素基因的菌株占25.45%。结论:应用多重PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因型,具有敏感、快速、特异的特点,同时适用于传统和新型毒素基因。研究表明,生牛奶中分离的金黄色葡萄球菌带毒素基因阳性率高,而且携带新发现的肠毒素基因的亦占多数,应予以重视。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 多重聚合酶链反应 葡萄球菌肠毒素(SEs)
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奶牛源金黄色葡萄球菌新疆分离株生物被膜、肠毒素基因与毒力的检测及其相关性分析 被引量:7
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作者 伍晔晖 孟庆玲 +4 位作者 乔军 李静 蔡扩军 王登峰 才学鹏 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第11期2693-2698,共6页
【目的】检测奶牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)新疆分离株生物被膜、肠毒素基因分布与毒力,分析其内在联系。【方法】采用微量滴定板测定法(MPA)、PCR方法和寇氏改良法分别测定164株S.aureus新疆分离株生物被膜(BF)形成能... 【目的】检测奶牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)新疆分离株生物被膜、肠毒素基因分布与毒力,分析其内在联系。【方法】采用微量滴定板测定法(MPA)、PCR方法和寇氏改良法分别测定164株S.aureus新疆分离株生物被膜(BF)形成能力、肠毒素基因分布、小鼠半数致死量(LD50)和脏器载菌量,观察其病理组织学变化。【结果】164株S.aureus BF阳性率为83.4%,以弱BF(BF^+)菌株为主;肠毒素基因检出率为96.3%,传统肠毒素see和新型肠毒素seg检出率最高,分别为57.3%和81.1%;强BF菌株(BF^3+)LD50要高于弱BF菌株(BF^+)和阴性菌株(BF^-),但其脏器载菌量低于BF^-菌株(P<0.05)。【结论】奶牛源S.aureus新疆分离株BF阳性菌株所占比例较高,其肠毒素基因携带率也较高。毒力研究表明,S.aureus分离株BF^3+菌株脏器载菌量低于BF^-菌株(P<0.05),且随着BF形成能力的增强毒力相应减弱。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 生物被膜 肠毒素基因 半数致死量
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食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因分布、耐药性及分型研究 被引量:3
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作者 吴健灏 李欣 +3 位作者 徐馨雨 俞佳莉 乔雪飞 盛峰松 《实用预防医学》 CAS 2023年第3期257-261,共5页
目的对2017—2021年上海市松江区不同食品来源的金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因检测、药敏试验和脉冲场凝胶电泳分子分型,以了解金黄色葡萄球菌病原特征。方法利用PCR方法检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因,微量肉汤稀释法进行药物敏感试验,... 目的对2017—2021年上海市松江区不同食品来源的金黄色葡萄球菌进行肠毒素基因检测、药敏试验和脉冲场凝胶电泳分子分型,以了解金黄色葡萄球菌病原特征。方法利用PCR方法检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因,微量肉汤稀释法进行药物敏感试验,脉冲场凝胶电泳进行基因分型。结果108株食源性金黄色葡萄球菌中有39株检出肠毒素基因,检出率为36.1%,其中sea(28.02%,11/39)、seb(41.0%,16/39)、sec(33.3%,13/39)、sed(12.8%,5/39);药敏试验结果显示氨苄西林(83.3%)、青霉素(80.6%)和红霉素(42.6%)耐药率最高;最低为万古霉素(100.0%)、达托霉素(98.1%)和庆大霉素(94.4%),且有15株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,20株表现出多重耐药,其中1株最高耐受6类抗生素。脉冲场凝胶电泳分子分型结果显示108株金黄色葡萄球菌中有11株不能分型,其他97株共分为19簇,包括77种型别,呈现多样性。结论2017—2021年上海市松江区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带率较高、多重耐药性情况需引起重视,并加强食品中金黄色葡萄球菌的监测,为食品安全风险评估和食源性疾病的预防提供科学依据。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 药物敏感 耐药性 脉冲场凝胶电泳 分子分型
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北京市顺义区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素分型方法研究 被引量:7
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作者 王园园 李颖 +2 位作者 朱美娟 邵占涛 王彦波 《首都公共卫生》 2015年第3期123-125,共3页
目的研究北京市顺义区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素的分布状况,比较食物中毒和食品监测来源菌株的肠毒素型别差异。方法对顺义区2013-2014年分离的34株食源性金黄色葡萄球菌进行増菌,应用PCR方法鉴定肠毒素sea-see、seg-sej基因,同时采用... 目的研究北京市顺义区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素的分布状况,比较食物中毒和食品监测来源菌株的肠毒素型别差异。方法对顺义区2013-2014年分离的34株食源性金黄色葡萄球菌进行増菌,应用PCR方法鉴定肠毒素sea-see、seg-sej基因,同时采用ELISA方法检测肠毒素SEA-SEE。结果 34株金黄色葡萄球菌中有19株携带肠毒素,阳性率是55.9%;检出的肠毒素类型有SEA(23.5%)、SEB(29.4%)、SEC(20.6%)、SED(26.5%)、SEE(23.5%)、SEH(3.2%)、SEG(9.7%)。中毒样本与监测样本菌株的毒素检出率分别为72.7%、47.8%,但两者差异无统计学意义(χ2=1.87,P>0.05)。结论顺义区食源性金黄色葡萄球菌肠毒素基因携带率高,有SEA、SEB、SEC、SED、SEE、SEH、SEG多种类型。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 毒力因子 食源性致病菌
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金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测和耐药性分析 被引量:7
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作者 邱海蓉 黄燕颖 +1 位作者 汤礼泽 王家学 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第11期1318-1320,共3页
目的了解金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)临床分离株的肠毒素基因携带情况和耐药现状。方法 PCR扩增SA肠毒素编码基因sea、seb、sec、sed、see和sef,电泳检测扩增结果。K-B法检测SA临床菌株对药物敏感性,头孢西丁法检测耐甲... 目的了解金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)临床分离株的肠毒素基因携带情况和耐药现状。方法 PCR扩增SA肠毒素编码基因sea、seb、sec、sed、see和sef,电泳检测扩增结果。K-B法检测SA临床菌株对药物敏感性,头孢西丁法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结果 89株临床菌株中,68株肠毒素基因阳性,阳性率为76.4%,sea、seb、sec、sed、see和sef检出率分别为58.4%、5.6%、43.8%、3.4%、2.2%和14.6%,36株(40.4%)同时检测到2种或2种以上肠毒素基因。MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)分别占42.7%(38/89)和57.3%(51/89),MRSA肠毒素基因携带率(92.1%,35/38)明显高于MSSA的携带率(64.7%,33/51),差异有统计学意义(P<0.05)。金黄色葡萄球菌除对万古霉素、利奈唑胺和呋喃妥因敏感外,对青霉素、苯唑西林等9种抗菌药物均有耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强。结论应重视对金黄色葡萄球菌肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌药物,以利于医院MRSA感染的控制。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 肠毒素基因 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药性
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