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槲皮素-7-硫酸酯钠体外抗氧化作用 被引量：2
1
作者 沈渠深 左长清 +3 位作者 姚银辉 余秋梦 潘文嘉 戴忠 《中国医药导报》 CAS 2013年第18期14-16,共3页
目的探讨槲皮素-7-硫酸酯钠(SQMS)的体外抗氧化活性。方法取小鼠肝组织,匀浆,体外孵育,分光光度法检测不同浓度SQMS(0.10、0.25、0.50 mmol/L)对肝组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。结果与... 目的探讨槲皮素-7-硫酸酯钠(SQMS)的体外抗氧化活性。方法取小鼠肝组织,匀浆,体外孵育,分光光度法检测不同浓度SQMS(0.10、0.25、0.50 mmol/L)对肝组织中丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。结果与空白组相比,不同浓度SQMS(0.10、0.25、0.50 mmol/L)均能显著降低肝组织中MDA的含量;中、高浓度SQMS(0.25、0.50 mmol/L)能显著升高肝组织T-AOC;低、中浓度SQMS(0.10、0.25 mmol/L)对肝组织SOD活力有显著升高作用。结论 SQMS具有较强的体外抗脂质过氧化作用及抗氧化能力,其抗氧化可能与提高SOD活力有关。 展开更多
关键词 槲皮素-7-硫酸酯钠 肝组织匀浆 体外 抗氧化
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离子对RP-HPLC法检测肝匀浆中的槟榔碱 被引量：1
2
作者 蔡拓 陈翠梅 +1 位作者 刑协淼 安飞云 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期48-50,共3页
目的探讨肝组织匀浆中槟榔碱合适的提取与测定方法。方法肝组织匀浆槟榔碱用等体积15%(w/v)的高氯酸提取后,在碱性条件下用乙醚萃取,岛津LC-20AT色谱仪测定。流动相由40∶60的乙腈与1%SDS溶液(含0.1%三乙胺,磷酸调pH至2.7)组成。结果在... 目的探讨肝组织匀浆中槟榔碱合适的提取与测定方法。方法肝组织匀浆槟榔碱用等体积15%(w/v)的高氯酸提取后,在碱性条件下用乙醚萃取,岛津LC-20AT色谱仪测定。流动相由40∶60的乙腈与1%SDS溶液(含0.1%三乙胺,磷酸调pH至2.7)组成。结果在本实验条件下,在0.5～40 ng的剂量范围内,峰面积与槟榔碱含量呈明显的正相关。等体积的15%高氯酸能有效的沉淀肝匀浆蛋白(98.3%±0.92%)与抽提槟榔碱(90.6%±2.1%),在碱性条件下,乙醚萃取3次。样品回收率达80%以上。结论离子对RP-HPLC法可作为槟榔碱测定的敏感方法,最低检出限度可达1 ng;15%高氯酸沉淀匀浆蛋白、氨水碱化后乙醚萃取的样品处理适合于组织匀浆等生物材料中槟榔碱的提取。 展开更多
关键词 肝组织匀浆 槟榔碱 离子对RP-HPLC法
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损伤肝组织匀浆与骨髓间充质干细胞的分化
3
作者 侯军霞 梅浙川 蒋明德 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第27期4963-4967,共5页
背景:目前认为,骨髓间充质干细胞能否分化为肝细胞与微环境关系密切。目的:探讨急性酒精性肝损伤组织匀浆对骨髓间充质干细胞的诱导分化作用。方法:分别用正常和损伤肝脏组织匀浆诱导骨髓间充质干细胞分化,在第0,3,7,10,14,21天用RT-PCR... 背景:目前认为,骨髓间充质干细胞能否分化为肝细胞与微环境关系密切。目的:探讨急性酒精性肝损伤组织匀浆对骨髓间充质干细胞的诱导分化作用。方法:分别用正常和损伤肝脏组织匀浆诱导骨髓间充质干细胞分化,在第0,3,7,10,14,21天用RT-PCR和Westernblot法检测甲胎蛋白、白蛋白的表达。结果与结论:骨髓间充质干细胞在正常及损伤的肝脏组织匀浆诱导下均表现为类上皮样改变。两组均从第3天开始检测到甲胎蛋白的表达,并在第7天左右达到高峰,之后表达逐渐减少,第14天时量很少;在第7天检测到白蛋白的表达,且随时间延长表达量逐渐增加,mRNA水平与蛋白水平表达一致。表明肝细胞在诱导培养下逐渐从幼稚到成熟。但正常和损伤肝组织匀浆诱导的肝细胞甲胎蛋白和白蛋白的表达量差异无显著性意义(P>0.05)。结果说明急性酒精性肝损伤组织匀浆可以诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化,其诱导效果与正常肝脏组织匀浆相近。 展开更多
关键词 肝组织匀浆 骨髓间充质干细胞 细胞分化 肝细胞 酒精性肝损伤 干细胞
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肝匀浆上清液诱导人脐带间充质干细胞分化为肝样细胞 被引量：8
4
作者 马欣 薛改 +2 位作者 刘建芳 李建立 侯艳宁 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第45期7877-7884,共8页
背景:前期实验证明大鼠肝组织匀浆上清液能诱导人脐带间充质干细胞发生形态学变化,但诱导后细胞是否具有肝细胞的表型和功能特征尚不清楚。目的:以人脐带间充质干细胞为研究对象,对肝组织匀浆上清液定向诱导分化后细胞是否具有肝细胞的... 背景:前期实验证明大鼠肝组织匀浆上清液能诱导人脐带间充质干细胞发生形态学变化,但诱导后细胞是否具有肝细胞的表型和功能特征尚不清楚。目的:以人脐带间充质干细胞为研究对象,对肝组织匀浆上清液定向诱导分化后细胞是否具有肝细胞的表型和功能特性进行初步验证。方法:选取第3代人脐带间充质干细胞,采用肝组织匀浆上清液作为诱导培养基,进行如下分组:单纯肝组织匀浆上清液作为阴性对照组,QSG-7701人肝细胞株作为阳性对照组,基础培养的人脐带间充质干细胞作为标准对照组;肝组织匀浆上清液处理3,5,7 d诱导组;在蛋白水平和转录水平对肝细胞特异性标志物甲胎蛋白、角蛋白18和色氨酸2,3-加双氧酶进行检测。结果与结论:经肝组织匀浆上清液诱导后,细胞形态发生了显著变化,随诱导时间延长梭形干细胞逐渐减少,细胞呈三角形,多角形或不规则形。肝组织匀浆上清液诱导干细胞3,5,7 d后肝细胞标志物甲胎蛋白、人细胞角蛋白18和色氨酸2,3-加双氧酶在蛋白和mRNA水平均显著高于标准对照组(P<0.01)。实验结果提示在体外经肝组织匀浆上清液诱导后,人脐带间充质干细胞能够分化为具有肝细胞特异性标记的肝样细胞,并具有部分肝细胞功能。 展开更多
关键词 干细胞 脐带脐血干细胞 人脐带间充质干细胞 诱导分化 肝组织匀浆上清液 肝样细胞 甲胎蛋白 人细胞角蛋白 细胞角蛋白18 其他基金 干细胞图片文章
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两种肝组织匀浆上清液诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的比较 被引量：5
5
作者 闫成 薛改 +2 位作者 吴丽颖 刘建芳 侯艳宁 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第19期2993-2998,共6页
背景:前期研究证明正常大鼠肝组织匀浆上清液可诱导人脐带间充质干细胞定向分化为具有部分肝细胞功能的肝样细胞,而肝纤维化大鼠肝组织匀浆上清液的诱导可行性及与前者诱导效果的比较尚不明确。目的:比较正常肝组织及纤维化肝组织微环... 背景:前期研究证明正常大鼠肝组织匀浆上清液可诱导人脐带间充质干细胞定向分化为具有部分肝细胞功能的肝样细胞,而肝纤维化大鼠肝组织匀浆上清液的诱导可行性及与前者诱导效果的比较尚不明确。目的:比较正常肝组织及纤维化肝组织微环境诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化的能力。方法:采用腹腔注射3%硫代乙酰胺生理盐水溶液(200 mg/kg,2次/周,共4周)的方法制备SD大鼠肝纤维化模型,取肝纤维化大鼠及正常大鼠肝脏制备肝组织匀浆上清。将第3代人脐带间充质干细胞进行分组诱导培养:1标准对照组:加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基。2纤维化肝组织匀浆组:加入含体积分数为10%胎牛血清及50 g/L纤维化肝组织匀浆的DMEM/F12培养基。3正常肝组织匀浆组:加入含体积分数为10%胎牛血清及100 g/L正常肝组织匀浆的DMEM/F12培养基。诱导开始后于倒置显微镜下观察各组细胞形态学变化;取标准对照组及诱导7 d的匀浆组细胞采用Western Blot法检测CK18、AFP、CYP3A4、CYP2E1、CYP2D6、TPH2的表达情况,采用ELISA法测定各组细胞培养液中白蛋白水平。结果与结论:与标准对照组长梭形成纤维样细胞相比,诱导7 d时,肝纤维化匀浆组及正常匀浆组细胞形态变化明显,呈类圆形,胞体丰满。与标准对照组相比,两匀浆组细胞均可表达肝细胞标志物CK18和AFP。标准对照组细胞可表达少量CYP2E1,两匀浆组细胞表达CYP3A4、CYP2E1、CYP2D6、TPH2等肝细胞功能蛋白,且CYP2E1的表达量较标准对照组明显增加(P<0.01),而两匀浆组间上述蛋白的相对表达量差异无显著性意义(P>0.05)。同时,两匀浆组细胞分泌白蛋白的能力较标准对照组亦明显增强(P<0.01),两匀浆组相比差异无显著性意义(P>0.05)。实验结果显示正常肝组织和纤维化肝组织微环境均可诱导人脐带间充质干细胞向肝细胞分化,在达到相同诱 展开更多
关键词 肝硬化 脐带 间质干细胞 肝细胞 细胞分化 干细胞 脐带脐血干细胞 肝纤维化 肝组织匀浆上清液 微环境 人脐带间充质干细胞 诱导分化 细胞色素P450酶 白蛋白
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体外诱导人脐带间充质干细胞定向分化为肝细胞的研究 被引量：2
6
作者 薛改 韩华 +3 位作者 陈泽纱 吴红海 刘建芳 侯艳宁 《肝脏》 2016年第9期733-737,共5页
目的对肝组织勻浆上清液（LHS）体外诱导人脐带间充质干细胞（hUCMSC）定向分化为肝细胞的功能特性进行检测.方法选取第3代hUCMSC,采用LHS作为诱导培养基,实验分为对照组和LHS处理诱导组,每组有3、5、7d三个时间点;诱导后对细胞进行AFP... 目的对肝组织勻浆上清液（LHS）体外诱导人脐带间充质干细胞（hUCMSC）定向分化为肝细胞的功能特性进行检测.方法选取第3代hUCMSC,采用LHS作为诱导培养基,实验分为对照组和LHS处理诱导组,每组有3、5、7d三个时间点;诱导后对细胞进行AFP、CK18、TPH2、CYP3A4、Alb、HGF的免疫荧光细胞化学染色;并测定诱导前后CYP3A酶活性、Alb、HGF和尿素的分泌量.结果LHS诱导3d后细胞表达肝特异性蛋白AFP、CK18、TPH2、CYP3A4、Alb和HGF;对照组hUCMSC不同时间点CYP3A酶特异性代谢底物咪达唑仑的代谢量为0.026-0.030ng/mg,LHS诱导3、5和7d后细胞代谢量分别为（30.14±1.19）、（50.20±6.24）和（120.85±15.52）ng/mg,与对照组相比显著升高（P〈0.01）;对照组细胞3、5和7dHGF的分泌量分别为（0.24±0.14）、（0.42±0.20）和（0.18±0.15）ng/mg,LHS诱导后细胞HGF的分泌量分别为（4.06±1.35）、（3.35±0.17）和（3.83±0.42）ng/mg,与对照组相比显著升高（P〈0.01）;LHS诱导后各组细胞尿素分泌量增加14倍以上,与对照组相比显著升高（P〈0.01）;对照组3、5和7dAlb的分泌量分别为（22.66±2.99）、（16.99±2.90）和（15.37±1.86）ng/mg,诱导3、5和7d后Alb的分泌量分别为（36.40±3.53）、（46.66±2.50）和（54.82±4.28）ng/mg,与对照组相比显著升高（P〈0.05或P〈0.01）.结论在体外经LHS诱导后,hUCMSC能够分化为具有成熟肝细胞功能的肝细胞. 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 诱导分化 肝组织匀浆上清液 肝细胞
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异钩藤碱在猫体内代谢产物结构的研究 被引量：1
7
作者 余俊先 谢笑龙 +3 位作者 吴芹 黄燮南 孙安盛 石京山 《四川生理科学杂志》 2001年第3期136-,共1页
研究异钩藤碱(isorhynchophylline,Isorhy)的心血管药理效应已有较深入的研究,但在动物体内的代谢情况未见报道,本研究观察了该药在猫体内的代谢情况.方法:麻醉猫静脉注射Isorhy 10mg/kg后,在不同的时间点采血样20ml,血浆样品以氢氧化... 研究异钩藤碱(isorhynchophylline,Isorhy)的心血管药理效应已有较深入的研究,但在动物体内的代谢情况未见报道,本研究观察了该药在猫体内的代谢情况.方法:麻醉猫静脉注射Isorhy 10mg/kg后,在不同的时间点采血样20ml,血浆样品以氢氧化钠和乙醚预处理.将另外的猫麻醉后取其肝脏,按1∶5比例用0.2M磷酸缓冲液(pH=7.35～7 .45)匀浆后离心(15000g,4℃)20min,取上清液加Isorhy成0.2mg/ml上清液,于37℃孵化3 h后,以血浆样品同法预处理该上清液,用HPLC法测定Isorhy的体内代谢物的相对浓度.以H PLC-MS法测定Isorhy代谢物分子离子峰的质荷比(m/z);在HPLC上分离并收集代谢物的色谱峰流分,60℃减压蒸馏24小时,再用HPLC-MS测定Isorhy代谢物加热裂分化合物分子离子峰质荷化(m/z).根据m/z得出分子量(MW),推测二者的化学结构.结果:血浆样品和孵化的肝组织匀浆上清液在HPLC上有明显的代谢产物峰,二者在HPLC的保留时间相同(tR8.2±0.1min),而原药Isorhy的tR＝11.9± 0.1min.Isorhy iv给药0.5h后开始产生代谢物,相对浓度变化范围为0.38～0.89u g/ml.HPLC-MS显示Isorhy代谢产物(metabolite)的分子离子峰MW＝386,该代谢物60℃减压蒸馏24小时后样品的分子离子峰MW＝300.结论:1.异钩藤碱在猫体内有明显的代谢产物;2.猫血浆和肝脏上清液中的异钩藤碱代谢物为同一物质,提示Isorhy可能主要经肝脏代谢;3.代谢物的分子量(MW)为386,是异钩藤碱的加氢还原产物;4.代谢物的物理性质不稳定,加热会裂分为另外的化合物,其MW为300. 展开更多
关键词 异钩藤碱 体内代谢产物 代谢情况 药理效应 血浆样品 肝组织匀浆 分子离子峰 化学结构 色谱峰 METABOLITE
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Al^(3+)联合柠檬酸对小鼠肝脏组织氧化损伤的影响
8
作者 吕琼霞 刘玉梅 +1 位作者 邓雯 陈晓光 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第S1期280-280,共1页
通过检测不同剂量的Al3+、柠檬酸及其联合对小鼠肝组织匀浆液中SOD、GSH-Px活性及H2O2、MDA含量的变化,探讨Al3+、柠檬酸及其联合对小鼠肝组织氧化损伤的影响。将80只健康雄性BALB/C小鼠,随机分为8组:对照组;柠檬酸组;Al3+低、中、高剂... 通过检测不同剂量的Al3+、柠檬酸及其联合对小鼠肝组织匀浆液中SOD、GSH-Px活性及H2O2、MDA含量的变化,探讨Al3+、柠檬酸及其联合对小鼠肝组织氧化损伤的影响。将80只健康雄性BALB/C小鼠,随机分为8组:对照组;柠檬酸组;Al3+低、中、高剂量组;Al3+联合柠檬酸低、中、高剂量组。染毒前对每组小鼠分别称重记录,按照以下相应剂量采用腹腔注射染毒, 展开更多
关键词 AL 氧化损伤 匀浆液 肝组织匀浆 含量值 注射量 分光光度计测定
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