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ATP6L对人肝癌细胞HCCLM3侵袭能力的影响及其机制
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作者 张萦斐 何传超 +3 位作者 毛凯 黄拼搏 金少文 肖治宇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1886-1888,共3页
目的观察ATP6L表达变化对人肝癌细胞HCCLM3侵袭能力等肿瘤生物学特性的影响，并探讨其作用机制。方法构建ATP6L-RNAi真核表达载体ATP6L-sh与阴性对照载体Con-sh，并分别转染至HCCLM3细胞，建立稳定干扰ATP6L的细胞株和阴性对照细胞株，... 目的观察ATP6L表达变化对人肝癌细胞HCCLM3侵袭能力等肿瘤生物学特性的影响，并探讨其作用机制。方法构建ATP6L-RNAi真核表达载体ATP6L-sh与阴性对照载体Con-sh，并分别转染至HCCLM3细胞，建立稳定干扰ATP6L的细胞株和阴性对照细胞株，通过细胞侵袭实验（Transwell）检测人肝癌细胞HCCLM3的体外侵袭能力变化，通过Westernblot实验、明胶酶谱测定、原位荧光酶谱测定等实验技术，检测ATP6L—sh和Con—sh两株细胞ATP6L蛋白表达水平、上清液基质金属蛋白酶（MMP）-2的活性以及胞内组织蛋白酶B（CathepsinB）活性的变化。结果与阴性对照细胞株比较，稳定干扰ATP6L表达的ATP6L-sh细胞株ATP6L蛋白表达水平明显下调，体外侵袭能力明显减弱。ATP6L—sh细胞与对照细胞分泌上清液中MMP-2活性分别为1．81±0．18、18．40±1．26（P〈0．05）；细胞内CathepsinB活性分别为228．6±21．1、471．7±21．4（P〈0．05），活性均明显降低。结论ATP6L在肿瘤侵袭过程中发挥重要作用，抑制ATP6L蛋白表达可有效降低肝癌细胞HCCLM3的侵袭能力，ATP6L蛋白对肿瘤细胞侵袭能力的影响可能与调控MMP-2和CathepsinB活性有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞hcclm3 ATP6L 侵袭 基质金属蛋白酶_2 组织蛋白酶B
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