糖络宁对高血糖大鼠血清外泌体中miR-322和IRE1α-RIDD表达的影响 被引量：6

1

作者 姚伟洁 杨鑫伟 +4 位作者 李潇 朱笳悦 韩朔 冯欣 许利平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1654-1661,共8页

目的探讨糖络宁通过高血糖大鼠血清外泌体抑制细胞凋亡的机制。方法SD大鼠分为对照组、模型组和糖络宁(10.9 g/kg)组。除对照组外,其余组大鼠ip链脲佐菌素诱导高血糖大鼠模型。给药组大鼠ig药物,对照组和模型组大鼠ig等体积蒸馏水,1次/d... 目的探讨糖络宁通过高血糖大鼠血清外泌体抑制细胞凋亡的机制。方法SD大鼠分为对照组、模型组和糖络宁(10.9 g/kg)组。除对照组外,其余组大鼠ip链脲佐菌素诱导高血糖大鼠模型。给药组大鼠ig药物,对照组和模型组大鼠ig等体积蒸馏水,1次/d,连续12周。给药结束后,收集大鼠血清,采用差异离心法提取血清外泌体,使用大鼠雪旺细胞RSC96内化外泌体,将RSC96细胞分别与对照组、模型组、糖络宁组的大鼠血清外泌体共培养24h。采用CCK-8法测定RSC96细胞活力;采用Western blotting法测定RSC96细胞中肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、磷酸化IRE1α(p-IRE1α)和蛋白质二硫键异构酶(protein disulfide isomerase A6,PDIA6)蛋白表达;采用qRT-PCR法测定外泌体中miR-322 mRNA表达,RSC96细胞中miR-322、IRE1α及IRE1依赖性衰解(IRE1-dependent decay,RIDD)底物CD59、蛋白激酶D2(protein kinase D2,PKD2)、A类清道夫受体(scavenger receptor class A,SCARA)、蛋白水解酶D(peptidase D,PEPD)m RNA表达。结果与对照组比较,模型组血清外泌体数量显著增加(<0.01),外泌体及RSC96细胞中miR-322m RNA水平显著降低(<0.05、0.01),RSC96细胞活力显著降低(<0.01),RSC96细胞IRE1α蛋白和mRNA表达水平显著升高(<0.01),PDIA6蛋白表达水平显著降低(<0.01),RIDD底物CD59、PKD2、SCARA和PEPD m RNA表达水平显著降低(<0.01);与模型组比较,糖络宁组血清外泌体数量明显降低(<0.05),外泌体及RSC96细胞中mi R-322 m RNA水平显著升高(<0.05、0.01),RSC96细胞活力显著增加(<0.05),RSC96细胞IRE1α蛋白和mRNA表达水平显著降低(<0.05),PDIA6蛋白表达水平显著升高(<0.01),RIDD底物CD59、PKD2、SCARA和PEPD mRNA表达水平显著升高(<0.05、0.01)。结论糖络宁通过增加高血糖大鼠血清外泌体中miR-322 mRNA水平,从而抑制IRE1α-RIDD诱导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 糖络宁 内质网应激 外泌体 RSC96细胞 肌醇酶1α miR-322

原文传递

ALPPS术后肝再生与内质网应激IRE1α-XBP1通路的关系研究 被引量：2

2

作者 龚奇 徐锋 +1 位作者 赵亮 戴朝六 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2019年第10期1162-1169,共8页

目的探讨内质网应激在联合肝脏分割和门静脉结扎二步肝切除术(ALPPS)一期手术后肝再生过程中的作用。方法将72只C57bl/6小鼠随机均分为ALPPS组、门静脉结扎组(PVL组)和假手术组(Sham组),每组24只,分别行ALPPS一期手术、单纯PVL和假手术... 目的探讨内质网应激在联合肝脏分割和门静脉结扎二步肝切除术(ALPPS)一期手术后肝再生过程中的作用。方法将72只C57bl/6小鼠随机均分为ALPPS组、门静脉结扎组(PVL组)和假手术组(Sham组),每组24只,分别行ALPPS一期手术、单纯PVL和假手术。3组小鼠分别在术后第1、2、4及7天各取材6只,检测各组小鼠的肝重体质量比,并取肝脏组织行免疫组织化学染色以计算Ki-67阳性细胞比,行Western blot法以检测肌醇酶1α(IRE1α)和X盒连接蛋白1(XBP1)蛋白的表达水平。结果①肝重体质量比:术后第4天和第7天时,同时点下Sham组、PLV组和ALPPS组的肝重体质量比依次增加,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。②Ki-67阳性细胞比:术后第2天时,Sham组、PLV组和ALPPS组的Ki-67阳性细胞比依次增加,3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);术后第4天时,ALPPS组与PVL组的Ki-67阳性细胞比仍高于Sham组(P<0.05)。③XBP1和IRE1α的表达水平:术后第2天和第4天时,与Sham组和PVL组比较,ALPPS组的XBP1和IRE1α的表达水平均较高(P<0.05);术后第7天时,与Sham组比较,ALPPS组的XBP1和IRE1α的表达水平较高(P<0.05);与PVL组比较,ALPPS组的XBP1的表达水平较高(P<0.05)。结论在小鼠体内ALPPS术式诱导的肝再生较传统的PVL术式引起的肝再生更具有优势,这可能是因为ALPPS术后更为明显的内质网应激激活状态,导致IRE1α-XBP1的表达上调,从而参与了肝细胞细胞周期的调控,进而促进了肝细胞的增殖,促进了快速肝再生。 展开更多

关键词 肝再生 内质网应激 增殖 联合肝脏分割和门静脉结扎二步肝切除术 X-框结合蛋白1 肌醇酶1α

原文传递

封闭内质网蛋白激酶IRE1α对肠道发育的影响

3

作者 陶正贤 李昕昕 +1 位作者 冯娇娇 袁栎 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1489-1491,共3页

目的探讨肌醇酶1α(IRE1α)在非洲爪蟾胚胎发育中的作用。方法利用全胚胎原位杂交法检测IRE1α在胚胎发育晚期的表达;设计合成特异性封闭IRE1α的反义寡核苷酸(MO),通过显微注射方法实现基因封闭。结果 IRE1α在胚胎发育晚期高表达于胰... 目的探讨肌醇酶1α(IRE1α)在非洲爪蟾胚胎发育中的作用。方法利用全胚胎原位杂交法检测IRE1α在胚胎发育晚期的表达;设计合成特异性封闭IRE1α的反义寡核苷酸(MO),通过显微注射方法实现基因封闭。结果 IRE1α在胚胎发育晚期高表达于胰腺。在体外翻译系统中,IRE1αMO可以阻断IRE1α蛋白质的合成。封闭IRE1α对胚胎发育早期无明显影响;但在发育晚期导致肠道结构消失,胚胎发育明显异常。结论 IRE1α对非洲爪蟾胚胎发育早期无影响,但在晚期导致肠道发育异常。 展开更多

关键词 肌醇酶1α 非洲爪蟾 胚胎发育

原文传递

内质网应激通路需肌醇酶1α/X盒结合蛋白1在中性粒细胞弹力蛋白酶诱导的气道黏液分泌中的作用 被引量：3

4

作者 李琪 周向东 +2 位作者 曾曼 Victor P.KOLOSOV Juliy M.PERELMAN 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期21-27,共7页

目的·探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应在中性粒细胞弹力蛋白酶(neutrophil elastase,NE)诱导人气道上皮细胞黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)分泌中的作用及机制。方法·培养人气道上皮细胞HBE16,分别给予... 目的·探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应在中性粒细胞弹力蛋白酶(neutrophil elastase,NE)诱导人气道上皮细胞黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)分泌中的作用及机制。方法·培养人气道上皮细胞HBE16,分别给予活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyrate,4-PBA)预处理,或分别转染需肌醇酶1α(inositol-requiring kinase 1α,IRE-1α)小干扰RNA(siRNA)、X盒结合蛋白1(X-boxbinding protein 1,XBP-1)siRNA,再予以NE刺激;同时设单纯NE组和空白对照组。试剂盒检测ROS的生成水平;Westernblotting检测干预后ERS相关信号分子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(phosphorylated protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,pPERK)、活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)、磷酸化IRE-1α(pIRE-1α)及XBP-1蛋白表达量的变化;实时荧光定量PCR检测剪切的XBP-1(XBP-1s)mRNA水平;ELISA和免疫荧光检测MUC5AC在各组细胞中的蛋白表达情况。结果·与空白对照组相比,NE刺激24 h后细胞ROS含量增加,GRP78、ATF6、pPERK及pIRE-1α蛋白水平均显著升高(均P<0.05),XBP-1s mRNA及蛋白表达也明显增加(均P<0.05),同时MUC5AC蛋白表达增加(均P<0.05);NAC及4-PBA预处理后均使上述ERS相关蛋白表达较单纯NE组降低(均P<0.05),MUC5AC蛋白水平降低(均P<0.05);转染IRE-1αsiRNA或XBP-1 siRNA,细胞中MUC5AC蛋白表达也较单纯NE组明显降低,同时XBP-1s mRNA及蛋白表达也有明显下降(均P<0.05)。结论·NE通过产生ROS引起ERS反应,诱导MUC5AC蛋白表达及分泌增加,ERS通路IRE-1α/XBP-1在其中发挥着一定的作用。 展开更多

关键词 内质网应激 需肌醇酶1α X盒结合蛋白1 中性粒细胞弹力蛋白酶 活性氧 黏蛋白5AC

下载PDF 职称材料

颅脑爆震伤后脑组织SOD-1、NOS1和IRE1α表达变化研究 被引量：3

5

作者 刘颖 柳云恩 +6 位作者 张玉彪 佟昌慈 施琳 丛培芳 史秀云 金红旭 侯明晓 《创伤与急危重病医学》 2017年第4期210-214,共5页

目的分析颅脑爆震伤(bTBI)后,不同时间点小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD-1)、一氧化氮合酶(NOS1)和内质网跨膜蛋白肌醇酶1α(IRE1α)的表达变化,探讨相关因子与时间的关系。方法健康昆明小鼠63只随机分为模型组和正常对照组。按照伤后... 目的分析颅脑爆震伤(bTBI)后,不同时间点小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD-1)、一氧化氮合酶(NOS1)和内质网跨膜蛋白肌醇酶1α(IRE1α)的表达变化,探讨相关因子与时间的关系。方法健康昆明小鼠63只随机分为模型组和正常对照组。按照伤后时间将模型组分为3 h组、6 h组、12 h组、24 h组、48 h组、7 d组和14 d组。采用Evans blue染色、Western-blot和Real-time PCR方法,观察大脑损伤及测定伤后各组小鼠脑组织中SOD-1、NOS1和IRE1α的含量及m RNA的表达变化。结果与正常对照组相比,模型组小鼠脑组织Evans blue染色呈明显蓝色。与对照组相比,模型组小鼠脑组织各个时间点氧化应激指标SOD-1、NOS1和IRE1α含量的表达均显著增高,48 h后表达量有所降低,但仍高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SOD-1、NOS1和IRE1α等指标参与脑爆震伤的发生和发展,监测相关指标变化对阐明b TBI致脑损伤的发生机制具有一定的意义。 展开更多

关键词 颅脑爆震伤 超氧化物歧化酶 一氧化氮合酶 内质网跨膜蛋白肌醇酶1α

下载PDF 职称材料

糖络宁对高糖环境下大鼠背根神经节细胞IRE1α-CHOP通路的影响观察 被引量：1

6

作者 辛竞妍 贾晓颖 +5 位作者 张晨 朱雨菲 李矜 吴长江 谢文莹 张涛静 《北京中医药》 2022年第7期733-737,共5页

目的探讨糖络宁对高糖环境下大鼠背根神经元(DRGn)细胞肌醇酶1α(IRE1α)-转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)通路的影响。方法将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为糖络宁组25只、正常对照组35只,分别以糖络宁组方生药2.5 g/(kg·d)和蒸馏水灌... 目的探讨糖络宁对高糖环境下大鼠背根神经元(DRGn)细胞肌醇酶1α(IRE1α)-转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)通路的影响。方法将60只清洁级雄性SD大鼠随机分为糖络宁组25只、正常对照组35只,分别以糖络宁组方生药2.5 g/(kg·d)和蒸馏水灌胃,用于制备糖络宁含药血清及正常对照血清。取新生SD胎鼠DRGn制备细胞悬液,将DRGn细胞在6孔板进行接种,随机分为正常(A)组(予空白血清培养)、模型(B)组(予75 mmol/L葡萄糖+空白血清培养)、中药(C)组(予75 mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养)、miR-211抑制剂(D)组(予75 mmol/L葡萄糖+空白血清培养+miR-211抑制剂)、miR-211抑制剂对照(d)组(予75 mmol/L葡萄糖+空白血清培养+miR-211抑制剂阴性对照)、激动剂中药(E)组(予75 mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养+miR-211激动剂)、激动剂中药对照(e)组(予75mmol/L葡萄糖+糖络宁含药血清培养+miR-211激动剂阴性对照)。培养24 h后,q-PCR检测miR-211、IRE1α、p-IRE1α、XBP1、CHOP基因表达;荧光探针法测定DRGn细胞ROS水平,黄嘌呤氧化酶技术检测SOD活性,硫代巴比妥法测定MDA含量。结果各组ROS、SOD、MDA、miR-211 mRNA、IRE1α、XBP1、CHOP比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。与A比较,B组ROS、MDA及miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA表达高,SOD水平低(P<0.01)。与B组比较,C组和D组ROS、MDA及miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA表达低,C组SOD水平高于B组(P<0.01);d组ROS、SOD、MDA、miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA与B组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,E组ROS、MDA及miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA表达高,SOD水平低(P<0.01);e组ROS、SOD、MDA、miR-211、IRE1α、XBP1、CHOP mRNA与C组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖络宁通过下调miR-211表达降低IRE1α-CHOP通路活性。 展开更多

关键词 糖络宁 糖尿病周围神经病变 背根神经节 肌醇酶1α-C/EBP同源蛋白通路 大鼠

下载PDF 职称材料

需肌醇酶1α及受其调控的依赖性衰减(IRE1α-RIDD)在免疫调节及自身免疫性疾病中的研究进展 被引量：1

7

作者 张卫娟 孙剑 +2 位作者 杨金萍 阳石坤 桂明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期757-761,共5页

内质网(ER)是蛋白质合成、折叠和修饰以及脂质合成和钙离子储存的重要细胞器。ER功能失调导致错误折叠或未折叠蛋白质在ER管腔中的积累,触发未折叠蛋白反应(UPR),需肌醇酶1α(IRE1α)是UPR分支中最保守的信号通路,切割编码转录因子XBP1... 内质网(ER)是蛋白质合成、折叠和修饰以及脂质合成和钙离子储存的重要细胞器。ER功能失调导致错误折叠或未折叠蛋白质在ER管腔中的积累,触发未折叠蛋白反应(UPR),需肌醇酶1α(IRE1α)是UPR分支中最保守的信号通路,切割编码转录因子XBP1的mRNA,导致XBP1剪接和激活。IRE1还通过受调控的IRE1依赖性衰减(RIDD)切割相关的mRNA或微小RNA(miRNA)。已有研究证明IRE1α-RIDD途径与免疫反应相关,但其信号级联与免疫协调的机制仍然不清楚,我们总结了IRE1α-RIDD对免疫细胞分化、成熟和免疫反应中细胞因子的表达等在免疫反应中的作用以及参与自身免疫性疾病的分子机制。 展开更多

关键词 需肌醇酶1α(IRE1α) 受调控的IRE1依赖性衰减(RIDD) 免疫反应 自身免疫性疾病 综述

下载PDF 职称材料

淫羊藿总黄酮改善自然衰老大鼠睾丸支持细胞分泌功能衰退的作用 被引量：9

8

作者 陈茜 张长城 +3 位作者 韩贵芳 马娜 袁丁 赵海霞 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期208-215,共8页

目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对衰老睾丸支持细胞(Sertoli细胞)分泌功能衰退的影响,并从肌醇需酶1α(IRE1α)/ X盒结合蛋白1(XBP1)信号通路探讨其分子机制。方法将36只SPF级18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组和TFE 10及40 mg·kg^-1... 目的研究淫羊藿总黄酮(TFE)对衰老睾丸支持细胞(Sertoli细胞)分泌功能衰退的影响,并从肌醇需酶1α(IRE1α)/ X盒结合蛋白1(XBP1)信号通路探讨其分子机制。方法将36只SPF级18月龄SD雄性大鼠随机分为自然衰老组和TFE 10及40 mg·kg^-1组,每组12只;另取10只2月龄大鼠作为壮龄对照组。每天定时ig 给TFE 1次,每5 d间隔2 d再继续ig给药,给药共计4个月。计算睾丸指数;HE染色观察睾丸组织形态;实时定量PCR和Western 印迹法检测睾丸组织中胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、骨形态形成蛋白 4(BMP4)及干细胞因子(SCF)mRNA 和蛋白表达水平;检测睾丸组织中磷酸化 IRE1α(p-IRE1α)和XBP1蛋白表达水平;免疫荧光法检测睾丸组织内Sertoli细胞数量和p-IRE1α定位。结果与壮龄对照组比较,自然衰老组大鼠睾丸指数显著降低(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE 40 mg·kg^-1组睾丸指数显著升高(P<0.05)。HE结果显示,自然衰老组睾丸曲细精管的形态结构紊乱,部分生精细胞发生脱落;TFE给药组能改善睾丸曲细精管的形态结构。实时定量PCR结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组Sertoli细胞分泌因子GDNF和SCF mRNA表达水平均显著下调(P<0.01);Western印迹结果显示,GDNF,BMP4和SCF蛋白显著下调(P<0.01)。与自然衰老组相比,TFE给药组分泌因子mRNA和蛋白表达水平均显著上调(P<0.05,P<0.01)。Western印迹结果显示,与壮龄对照组比较,自然衰老组睾丸组织中p-IRE1α和XBP1蛋白表达均显著下调(P<0.01);与自然衰老组相比,TFE给药组p-IRE1α和XBP1蛋白表达显著上调(P<0.01)。免疫荧光结果显示,壮龄对照组、自然衰老组和TFE给药组Sertoli细胞数量无显著差异。不仅在生精细胞胞质广泛表达,在Sertoli细胞胞质亦有表达。结论 TFE可显著改善自然衰老所致大鼠睾丸Sertoli细胞分泌功能衰退,其机制可能与调节IRE1α/XBP1信号通路有关。 展开更多

关键词 淫羊藿总黄酮 衰老 睾丸 SERTOLI细胞 肌醇需酶1α/ X盒结合蛋白1信号通路

下载PDF 职称材料

血必净注射液经肌醇需求酶1α信号通路影响组织因子凝血活性 被引量：8

9

作者 柴彦 李静远 +1 位作者 柴艳芬 姚咏明 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期159-163,共5页

目的：探讨不同浓度血必净注射液对内毒素诱导大鼠内皮细胞组织因子（tissue factor, TF）凝血活性的影响。方法：随机将内皮细胞分为对照组、脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）组（500 ng/ml）、血必净组（1、5、25 μl /ml）、LPS＋... 目的：探讨不同浓度血必净注射液对内毒素诱导大鼠内皮细胞组织因子（tissue factor, TF）凝血活性的影响。方法：随机将内皮细胞分为对照组、脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）组（500 ng/ml）、血必净组（1、5、25 μl /ml）、LPS＋血必净组（1、5、25 μl/ml），培养24、48和72 h后采用CCK-8法检测细胞增殖；留取上清，检测乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase，LDH）释放量；以刺激72 h为观察点，采用Western blot技术检测肌醇需求酶1α（inositol-requiring enzyme 1α，IRE1α）、未剪接型X盒结合蛋白（unspliced-box binding protein-1, uXBP-1）、剪接型X盒结合蛋白（spliced-box binding protein-1, sXBP-1）及蛋白质二硫化物异构酶（protein disulfide isomerase，PDI）的表达水平；加入Ca2＋、凝血因子（coagulation factor，F）Ⅶ和FⅩ，用发色底物法检测活化FⅩa水平。结果：与对照组相比，LPS组细胞增殖能力下降，LDH释放增多（P〈0.05）, IRE1α、uXBP1、sXBP1、PDI表达均上调，差异具有统计学意义（P〈0.05）。与对照组相比，血必净组细胞增殖能力增强，LDH释放减少（P〈0.05或P〈0.01），随着时间增加，此效应逐渐增强；LPS＋血必净组较LPS组细胞增殖活性升高，LDH释放下降（P〈0.05或P〈0.01），RE1α、uXBP1、sXBP1和PDI表达均明显减弱（P〈0.01），FⅩa产生随IRE1α、XBP1、PDI表达水平降低而减少（P〈0.05），其中LPS＋5 μl/ml血必净组降低FⅩa效果尤为明显（P〈0.05）。结论：血必净注射液能通过阻断IRE1α-XBP1通路，降低PDI的表达，影响内皮细胞TF凝血活性。 展开更多

关键词 脓毒症 肌醇需求酶1α 蛋白质二硫化物异构酶 活化凝血因子X 组织因子

原文传递

平喘宁调节IRE-1α-XBP-1s信号轴干预哮喘大鼠气道炎症的机制研究

10

作者 彭帅 蔡旻 +4 位作者 程悦 查君君 丁鹤影 刘晓莹 方向明 《中医药导报》 2024年第2期1-7,19,共8页

目的:探究平喘宁对哮喘大鼠气道炎症的防治作用及机制。方法:将105只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组,每组15只。以卵清蛋白联合氢氧化铝复制... 目的:探究平喘宁对哮喘大鼠气道炎症的防治作用及机制。方法:将105只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组、平喘宁高剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁低剂量组,每组15只。以卵清蛋白联合氢氧化铝复制大鼠哮喘模型,造模21 d后,各给药组分别灌胃给予相应药物,正常组、模型组灌胃给予等体积的生理盐水,1次/d,连续4周。4周后,在进行哮喘激发试验后2 h内解剖大鼠并取出肺组织,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。HE染色观察肺组织中平滑肌厚度、炎症细胞浸润程度等相应病理的改变;ELISA法检测BALF中IL-5、IL-17水平;RT-qPCR法检测肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA、Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量;Western blotting法检测肺组织中IRE-1α、XBP-1s、NF-κB p65蛋白相对表达量。结果:HE染色结果显示,与模型组比较,各给药组(平喘宁低剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁高剂量组、地塞米松组、桂龙咳喘宁组)大鼠肺组织病理情况都有不同程度的缓解。ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均明显降低(P<0.01),且平喘宁具有剂量依赖性;平喘宁低、中剂量组大鼠BALF中IL-5、IL-17水平均高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01);平喘宁高剂量组大鼠BALF中IL-5水平明显高于地塞米松组和桂龙咳喘宁组(P<0.01),而IL-17水平与地塞米松组和桂龙咳喘宁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显升高(P<0.01),Hgsnat mRNA、Pdgfrb mRNA、Scara3 mRNA相对表达量均明显降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肺组织IRE-1αmRNA、XBP-1s mRNA、NF-κB p65 mRNA相对表达量均明显降低(P<0.01),Hgsnat 展开更多

关键词 支气管哮喘 平喘宁 炎症 肌醇依赖酶1α 剪接型X-盒结合蛋白1 核转录因子kappa B p65 大鼠

下载PDF 职称材料

NAMPT在多发性骨髓瘤中的作用机制及其临床意义

11

作者 王亚茹 马艳萍 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期138-145,共8页

目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在多发性骨髓瘤中的作用机制及其临床价值。方法:采用RT-q PCR和Western blot方法检测多发性骨髓瘤细胞和正常骨髓单个核细胞中NAMPT的表达水平,同时通过细胞增殖与凋亡实验、小干扰RNA沉默、过表... 目的:探讨烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)在多发性骨髓瘤中的作用机制及其临床价值。方法:采用RT-q PCR和Western blot方法检测多发性骨髓瘤细胞和正常骨髓单个核细胞中NAMPT的表达水平,同时通过细胞增殖与凋亡实验、小干扰RNA沉默、过表达实验和染色质免疫共沉淀实验分析NAMPT的生物学功能。结果:多发性骨髓瘤细胞系(MM1R、MM1S、U266和RPMI-8226)中NAMPT m RNA和蛋白的表达水平较正常骨髓单个核细胞均显著升高(P<0.001),且在U266细胞中最明显。与Si-NC组相比,Si-NAMPT组转染24、48、72 h均显著抑制U266细胞增殖(P=0.006,P<0.001,P=0.001),转染48 h时U266细胞凋亡率升高显著(P<0.001)。与Flag-NC组比较,Flag-NAMPT组U266细胞增殖均显著升高(P=0.003,P=0.002,P<0.001),转染48 h时细胞凋亡率明显降低。在U266细胞中NAMPT的表达在转录水平受到XBP1的调控。用硼替佐米处理XBP1或NAMPT稳定敲除或经MKC3946预处理的U266细胞后细胞增殖率均显著下降,BAX m RNA和蛋白水平显著升高,BCL-2 m RNA和蛋白水平显著下调,Caspase-3裂解度显著下降,Caspase-3/7活性急剧增加(P<0.05)。结论:NAMPT在多发性骨髓瘤细胞系中高表达,促进多发性骨髓瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡。在U266细胞中NAMPT受IRE1α-XBP1信号通路的转录调控。稳定敲除NAMPT或阻断IRE1α-XBP1通路可显著提高U266细胞对硼替佐米的敏感性。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 烟酰胺磷酸核糖转移酶 硼替佐米 X-盒结合蛋白1 肌醇需要酶1α

下载PDF 职称材料

毛蕊花糖苷调节IRE1α/TXNIP/NLRP3信号通路对重症急性胰腺炎模型大鼠肺损伤的影响

12

作者 文才 周菁 万小琴 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第5期391-398,共8页

目的探讨毛蕊花糖苷(acteoside,ACT)调节肌醇需求酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)/硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerizati... 目的探讨毛蕊花糖苷(acteoside,ACT)调节肌醇需求酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)/硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)通路对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠肺损伤的影响。方法大鼠随机分为SAP组、正常组、毛蕊花糖苷低剂量(ACT-L)组和高剂量(ACT-H)组、乌司他丁组、ACT-H+空载体组、ACT-H+IRE1α过表达腺病毒载体(Ad-IRE1α)组,每组12只。除正常组外,其他组大鼠均通过向胆胰管注入5%牛磺胆酸钠溶液的方式构建SAP模型,建模成功后给药2天,一天一次。检测血清脂肪酶、淀粉酶水平及肺湿重/干重比值的变化;HE染色检测胰腺、肺组织病理变化并评估病理评分;试剂盒检测肺组织中活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;ELISA检测肺组织中白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平;蛋白质印迹检测肺组织中IRE1α、TXNIP、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)蛋白水平。结果与正常组相比,SAP组大鼠胰腺水肿,有大量细胞坏死以及炎症细胞浸润,肺组织炎症细胞浸润明显,肺泡充血、肺泡壁水肿严重,胰腺、肺组织病理评分、血清中脂肪酶、淀粉酶水平、肺湿重/干重比值、肺组织中MDA、ROS水平、IL-18、IL-1β水平及IRE1α、TXNIP、NLRP3、caspase-1蛋白升高,肺组织中SOD水平降低(P<0.05);与SAP组相比,ACT-L组、ACT-H组、乌司他丁组大鼠胰腺及肺组织损伤有所改善,胰腺、肺组织病理评分、血清中脂肪酶、淀粉酶水平、肺湿重/干重比值、肺组织中MDA、ROS水平、IL-18、IL-1β水平及IRE1α、TXNIP、NLRP3、caspase-1蛋白降低,肺组织中SOD水平升高(P<0.05);与ACT-H+空载体组相比,ACT-H+Ad-IRE1α组大鼠胰腺及肺组织损伤加剧,胰腺、肺组织病理 展开更多

关键词 毛蕊花糖苷 肌醇需求酶1α 硫氧还蛋白相互作用蛋白 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 重症急性胰腺炎 肺损伤 炎症 氧化应激

下载PDF 职称材料

跨膜蛋白IRE1α参与系统性红斑狼疮发病的研究进展

13

作者 刘莹莹 邓丹琪 《皮肤病与性病》 2024年第1期15-18,共4页

系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的全身性自身免疫疾病。目前已知该疾病是遗传、感染、环境等因素共同作用的集合体,各种免疫细胞、炎症细胞因子以及异常的信号通路参与其中。然而,现有的研究对其病因的认识仍存在很大程度的局限性。肌... 系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的全身性自身免疫疾病。目前已知该疾病是遗传、感染、环境等因素共同作用的集合体,各种免疫细胞、炎症细胞因子以及异常的信号通路参与其中。然而,现有的研究对其病因的认识仍存在很大程度的局限性。肌醇需要酶1α(inositol requiring enzyme 1α,IRE1α)是一种内质网(ER)I型跨膜蛋白,几乎表达于所有哺乳动物的细胞和组织,具有胞质激酶和核糖核酸酶活性,是ER应激的压力感受器,与造成免疫紊乱的多种生理和病理条件有关,多项研究已证明其在自身免疫性疾病中发挥着关键作用。本文主要围绕IRE1α如何参与SLE发生发展作一综述。 展开更多

关键词 肌醇需要酶1α 跨膜蛋白 系统性红斑狼疮

下载PDF 职称材料

“扶正益肝”针灸穴方基于肌醇需求酶1信号通路改善顺铂致小鼠肝损伤的机制

14

作者 于冬冬 王建明 +6 位作者 韩乐 杜雪源 晁利芹 张欢欢 吴昊 王晴晴 刘文姣 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期686-692,共7页

目的:基于与肝细胞内质网应激反应相关的肌醇需求酶(IRE)-1信号通路,探讨“扶正益肝”针灸穴方改善顺铂(DDP)所致小鼠肝损伤的作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和艾灸组,每组10只。一次性腹腔注射DDP(10 mg/kg... 目的:基于与肝细胞内质网应激反应相关的肌醇需求酶(IRE)-1信号通路,探讨“扶正益肝”针灸穴方改善顺铂(DDP)所致小鼠肝损伤的作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和艾灸组,每组10只。一次性腹腔注射DDP(10 mg/kg)复制肝损伤模型。针刺组和艾灸组分别选取“大椎”“肝俞”“肾俞”“足三里”进行针刺、艾灸治疗,每次6 min,1次/d,治疗7 d。采用TUNEL染色检测肝细胞凋亡情况,免疫组织化学法、Western blot法检测肝组织中磷酸化(p)-IRE-1α、葡萄糖调节蛋白(Grp)78、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-12的表达,实时荧光定量PCR法检测肝组织中Grp78、Caspase-12 mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠肝细胞凋亡率升高(P<0.05),肝组织中p-IRE-1α、Grp78、Caspase-12阳性表达和蛋白表达升高(P<0.05),Grp78、Caspase-12 mRNA相对表达量升高(P<0.05)。与模型组比较,针刺组、艾灸组小鼠肝细胞凋亡率降低(P<0.05),肝组织中p-IRE-1α、Grp78、Caspase-12阳性表达和蛋白表达降低(P<0.05),Grp78、Caspase-12 mRNA相对表达量降低(P<0.05)。结论:“扶正益肝”针灸穴方可能通过调控IRE-1信号通路,抑制内质网应激的过度激活,减轻肝细胞凋亡,从而改善DDP化疗所致的肝损伤。 展开更多

关键词 针灸 顺铂 肝损伤 内质网应激 肌醇需求酶-1α

原文传递

缺氧激活IRE1a/JNK通路调控小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡研究 被引量：1

15

作者 史薪炜 钱骏 +3 位作者 袁超 史阳阳 王玮 孙凯 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1083-1089,共7页

目的探究缺氧是否通过肌醇依赖酶1α(inositol requires enzymes1α,IRE1α)介导的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)激活应激活化蛋白激酶(JNK)通路参与调控小鼠肺动脉平滑肌细胞的增殖和凋亡。方法体外培养小鼠肺动脉平... 目的探究缺氧是否通过肌醇依赖酶1α(inositol requires enzymes1α,IRE1α)介导的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)激活应激活化蛋白激酶(JNK)通路参与调控小鼠肺动脉平滑肌细胞的增殖和凋亡。方法体外培养小鼠肺动脉平滑肌细胞系(MPASMCs),构建缺氧MPASMCs模型,分别检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、ERS关键基因葡萄糖调节蛋白78(GRP78)以及JNK通路基因的表达;用siRNA转染敲低IRE1α表达,用JNK通路特异性抑制剂SP600125抑制JNK通路,XBP-1s质粒转染增加XBP-1s表达,CCK8实验以及增殖细胞核抗原(PCNA)检测观察细胞增殖水平,流式细胞分型以及凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)检测观察细胞凋亡水平。结果缺氧培养后的MPASMCs中HIF-1α表达明显上调;在缺氧后GRP78、磷酸化IRE1α(P-IRE1α)以及磷酸化JNK(P-JNK)表达量均上升,提示IRE1α介导的ERS以及JNK通路被激活,Si-IRE1a抑制IRE1α表达后,P-JNK表达减低,说明JNK通路被抑制;缺氧组PCNA蛋白水平上调,结合CCK8实验提示细胞增殖水平上调,缺氧组促凋亡蛋白BAX表达下调,凋亡抑制基因BCL-2蛋白水平下调,结合流式细胞分型结果提示凋亡水平减低,SiIRE1a抑制IRE1α表达后,上述变化被延缓;用SP600125处理细胞后,也可部分延缓缺氧所引起的促增殖抗凋亡改变;常氧状态下过表达XBP-1s激活了JNK通路,同时出现了类似缺氧的改变。结论缺氧激活IRE1α介导的内质网应激,进而通过JNK通路促进小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖并抑制其凋亡。 展开更多

关键词 肺高压 内质网应激 肌醇依赖酶1α 应激活化蛋白激酶

原文传递

肝胃百合汤对胃溃疡大鼠IRE1α信号通路的影响

16

作者 阳凌峰 林瑞芳 +2 位作者 杨颖 谢欣 喻斌 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第20期2798-2802,2816,共6页

目的基于肌醇需求酶1α(IRE1α)信号通路探讨肝胃百合汤对吲哚美辛所致胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用及机制。方法将36只SD大鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组、肝胃百合汤组,每组9只。肝胃百合汤组和奥美拉唑组分别给予7.29 g/(kg&#... 目的基于肌醇需求酶1α(IRE1α)信号通路探讨肝胃百合汤对吲哚美辛所致胃溃疡大鼠胃黏膜的保护作用及机制。方法将36只SD大鼠随机分为空白组、模型组、奥美拉唑组、肝胃百合汤组,每组9只。肝胃百合汤组和奥美拉唑组分别给予7.29 g/(kg·d)肝胃百合汤和3.6 mg/(kg·d)奥美拉唑灌胃,空白组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,连续灌胃1周后,模型组、奥美拉唑组、肝胃百合汤组给予80 mg/kg吲哚美辛灌胃诱导胃溃疡,造模3 h后处死大鼠,观察并计算胃溃疡指数,HE和TUNEL染色观察胃黏膜损伤及胃组织细胞凋亡情况,Western blot法检测胃组织内质网应激相关蛋白[葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、IRE1α、磷酸化肌醇需求酶1α(p-IRE1α)、凋亡信号激酶1(ASK1)、胱天蛋白酶12(Caspase-12)]表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜出现严重缺损,腺体结构紊乱,大量细胞死亡和炎性细胞浸润,胃组织细胞凋亡明显,胃组织中GRP78、p-IRE1α/IRE1α、ASK1、Caspase-12蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,肝胃百合汤组和奥美拉唑组大鼠胃黏膜损伤明显减轻,胃溃疡指数均明显降低(P均<0.05),凋亡细胞明显减少,胃组织中GRP78、p-IRE1α/IRE1α、ASK1、Caspase-12蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论肝胃百合汤可能通过抑制IRE1α信号通路介导的内质网应激,减轻胃黏膜细胞凋亡,从而发挥胃黏膜保护作用。 展开更多

关键词 胃溃疡 肝胃百合汤 内质网应激 细胞凋亡 肌醇需求酶1α

下载PDF 职称材料

维甲酸诱导基因I在DSS诱导的慢性肠炎小鼠结肠组织中的表达 被引量：2

17

作者 吴玉丹 戴发亮 +4 位作者 董仕桢 郭腾飞 高磊 常永超 高强 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2018年第5期575-579,共5页

目的:探讨维甲酸诱导基因I(RIG-I)在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠慢性结肠炎中的表达及意义。方法:选择健康清洁级8~10周龄C57BL/6雌性小鼠,随机分为对照组(n=8,正常饮用无菌蒸馏水)和慢性炎症组(n=8),先给予10 g/L DSS溶液自由饮用7 d... 目的:探讨维甲酸诱导基因I(RIG-I)在葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠慢性结肠炎中的表达及意义。方法:选择健康清洁级8~10周龄C57BL/6雌性小鼠,随机分为对照组(n=8,正常饮用无菌蒸馏水)和慢性炎症组(n=8),先给予10 g/L DSS溶液自由饮用7 d,然后正常饮用无菌蒸馏水14 d作为1个周期,循环3个周期后建立小鼠慢性结肠炎模型,于第70天用颈椎脱臼法处死小鼠并取结肠组织标本。肠道炎症程度通过测定结肠长度、HE染色和疾病活动指数评分等方法评估。采用荧光定量PCR技术检测小鼠结肠组织中炎性因子(IL-6、IL-8和TNF-α),IRE1α和RIG-I mRNA表达水平,免疫组化法和蛋白印迹法检测小鼠结肠组织中RIG-I、磷酸化(p)-IRE1α蛋白的表达。结果:对照组小鼠无肠炎表现,而慢性炎症组小鼠结肠出现炎症表现。与对照组相比,慢性炎症组中IL-6、IL-8和TNF-αmRNA的表达量增加,IRE1α和RIG-I mRNA表达量降低(P<0.01)。免疫组化结果显示RIG-I蛋白主要表达于小鼠结肠上皮细胞胞质及间质细胞胞质中,p-IRE1α主要在结肠上皮细胞刷状缘、浆细胞等细胞的胞质中表达,蛋白定量结果显示慢性炎症组RIG-I、p-IRE1α蛋白低于对照组(P均<0.001)。结论:RIG-I可能通过减低IRE1-RIDD-RIG-I在小鼠结肠炎的发生和发展中起重要作用。 展开更多

关键词 结肠炎 维甲酸诱导基因-I 肌醇需求酶1α 小鼠

下载PDF 职称材料

IRE1α-miRNA信号通路介导运动干预阿尔茨海默病 被引量：1

18

作者 邝程斌 夏杰 徐波 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1155-1166,共12页

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)下游肌醇必需酶1α(inositol-requiring enzyme-1α,IRE1α)的过度激活,以及具有多种细胞生理调控功能的微RNA(microRNA,miRNA)异常表达,是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的共性... 内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)下游肌醇必需酶1α(inositol-requiring enzyme-1α,IRE1α)的过度激活,以及具有多种细胞生理调控功能的微RNA(microRNA,miRNA)异常表达,是阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的共性病理特征。研究发现,IRE1α和miRNA并非单独介入AD病理进程。IRE1α可通过调节miR-200、miR-7、miR-17和miR-34的表达,参与Aβ沉积、Tau蛋白过度磷酸化和神经细胞凋亡等多数AD脑内病变。提示IRE1α-miRNA信号失常是AD病理机制之一。运动能预防和延缓AD,但其具体机制尚不清晰。研究发现,运动能通过调节IRE1α-miRNA信号通路干预AD,其具体作用机制包括:(1)运动通过提高AD脑能量代谢适应,缓解脑IRE1α信号过度激活。(2)运动能调节脑内miRNA表达,发挥表观遗传学效应,延缓Aβ和Tau蛋白集聚等病理进程。(3)IRE1α-miRNA通路及其下游蛋白质变化介导运动抵抗AD发展。本文将对IRE1α-miRNA与AD病理关系及其运动反馈机制进行综述,旨在对AD诊断及治疗的策略提供依据和思路。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 肌醇必需酶1α 微RNA 运动干预

下载PDF 职称材料

N-乙酰半胱氨酸对大鼠压力负荷性心力衰竭保护作用研究 被引量：1

19

作者 宋宏界 李艳华 +3 位作者 王宇奇 张健 赵川 王翠兰 《临床军医杂志》 CAS 2019年第3期228-230,233,共4页

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠压力负荷性心力衰竭的保护作用。方法将30只普通级8周龄雄性SD大鼠分入对照组、模型组和NAC给药组。所有大鼠术后干预3周,饲养至第7周后,测量每组剩余大鼠心脏质量,并计算心脏质量指数(HWI),通过实时... 目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠压力负荷性心力衰竭的保护作用。方法将30只普通级8周龄雄性SD大鼠分入对照组、模型组和NAC给药组。所有大鼠术后干预3周,饲养至第7周后,测量每组剩余大鼠心脏质量,并计算心脏质量指数(HWI),通过实时聚合酶链反应和Western blot技术检测黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、肌醇依赖酶1α(IRE1α)、超氧化物歧化酶-1(SOD-1)和氧化应激Nrf2/Keap1通路关键基因及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠心脏质量、HWI显著增加,氧化应激指标MDA5与IRE1αmRNA及蛋白表达均明显升高,SOD-1 mRNA及蛋白表达显著降低,氧化应激通路Nrf2与Keap1 mRNA及蛋白表达均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,给药组大鼠心脏质量、HWI显著降低,MDA5与IRE1αmRNA及蛋白水平明显降低,而SOD-1 mRNA及蛋白水平明显升高,Nrf2与Keap1 mRNA及蛋白平均明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NAC对大鼠压力负荷性心力衰竭有保护作用,其作用机制可能通过调控氧化应激Nrf2/Keap1通路有关。 展开更多

关键词 N-乙酰半胱氨酸 氧化应激 心力衰竭 黑色素瘤分化相关基因5 肌醇依赖酶1α 超氧化物歧化酶-1 Nrf2/Keap1通路

下载PDF 职称材料

外源性胰岛素对CPB致兔胰岛素抵抗时胰腺组织IRE1α-XBP1信号通路的影响 被引量：1

20

作者 李正芬 綦欣竹 +2 位作者 毛安群 刘庆 张英 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期818-822,共5页

目的评价外源性胰岛素对体外循环(CPB)致兔胰岛素抵抗时胰腺组织肌醇需酶1α(IRE1α)-X-盒结合蛋白1(XBP1)信号通路的影响.方法选取健康成年新西兰大白兔40只,雌雄不拘,体重2.5~3.0 kg.采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)、CPB... 目的评价外源性胰岛素对体外循环(CPB)致兔胰岛素抵抗时胰腺组织肌醇需酶1α(IRE1α)-X-盒结合蛋白1(XBP1)信号通路的影响.方法选取健康成年新西兰大白兔40只,雌雄不拘,体重2.5~3.0 kg.采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)、CPB组、胰岛素组(I组)和生理盐水对照组(NS组).CPB组建立CPB;I组从建立CPB开始至术后1d持续静脉输注胰岛素1.2 ml/h,根据血糖(维持7.2~8.3 mmol/L)调节胰岛素输注速率;NS组从建立CPB开始至术后1d持续静脉输注等容量生理盐水.分别于CPB前(T1)、主动脉开放后15 min(T2)、主动脉开放后30 min(T3)和主动脉开放后60 min(T4)时,取左股动脉血标本,分离血浆,采用氧化酶法检测血糖浓度,采用放免法检测胰高血糖素浓度,计算胰岛素抵抗指数;T4时处死大鼠,取胰腺组织,采用Wes-tern blot法检测IRE1α、XBP1、c-Jun氨基末端调节激酶(JNK)和caspase-12的表达水平,采用实时荧光定量PCR法测定IRE1α、XBP1、JNK和caspase-12的mRNA表达水平,HE染色观察病理学结果.结果与C组比较,CPB组、I组和NS组T2-4时血糖和胰高血糖素的浓度、胰岛素抵抗指数升高,T4时胰腺组织IRE1α、XBP1、JNK和caspase-12及其mRNA的表达上调(P<0.05).与CPB组和NS组比较,I组T2-4时血糖和胰高血糖素的浓度、胰岛素抵抗指数降低,T4时胰腺组织IRE1α、XBP1、JNK和caspase-12及其mRNA表达下调(P<0.05),胰腺组织病理学损伤减轻.CPB组和NS组上述各指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论外源性胰岛素减轻CPB致兔胰岛素抵抗的机制可能与抑制胰腺组织IRE1α-XBP1信号通路有关. 展开更多

关键词 胰岛素 心肺转流术 胰岛素抗药性 肌醇需酶1α X-盒结合蛋白1

原文传递