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MYL3基因在肉牛肌肉生长过程中的功能研究 被引量：6
1
作者 刘瑞莉 吴磊 +3 位作者 袁玮 柏学进 吕娟娟 董雅娟 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期221-228,共8页
为了探究肌球蛋白轻链3(Myosin light chain 3,MLC1v或MYL3)基因对骨骼肌转录调控的影响,鉴定其与肌肉生长发育的功能关系。克隆获得MYL3基因,采用生物信息学方法分析基因结构;利用荧光定量PCR技术研究MYL3基因在不同组织及不同时期的... 为了探究肌球蛋白轻链3(Myosin light chain 3,MLC1v或MYL3)基因对骨骼肌转录调控的影响,鉴定其与肌肉生长发育的功能关系。克隆获得MYL3基因,采用生物信息学方法分析基因结构;利用荧光定量PCR技术研究MYL3基因在不同组织及不同时期的表达情况;应用免疫组化方法,定位MYL3基因在背最长肌中表达的位置;应用蛋白免疫印迹方法,研究MYL3蛋白在不同组织及不同时期的表达情况。结果表明:克隆得到布莱凯特黑牛MYL3基因(序列号:NM_001076501.2)CDS序列全长为600 bp,具有完整的阅读框,编码199个氨基酸;进化树分析发现其同源性较高;基因表达分析显示,在心脏中表达量最高,在背最长肌中表达量次之,其他组织几乎不表达,不同时期MYL3基因的表达量随月龄的增加逐渐增加;蛋白表达分析显示,MYL3蛋白主要在骨骼肌肌原纤维的粗肌丝中表达,不同时期蛋白的表达量随月龄的增加逐渐增加。因此,推测MYL3在促进骨骼肌生长发育过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肌球蛋白调节轻链3 布莱凯特黑牛 鲁西黄牛 背最长肌
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LncRNA SNHG1通过miR-101-3p/MYLIP轴调节宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移的研究 被引量：2
2
作者 白小英 曹蕾 +3 位作者 张卫霞 陈琳 胡海燕 杨婷 《中国计划生育和妇产科》 2023年第4期38-43,60,I0001,共8页
目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因1(SNHG1)对宫颈癌(cervical cancer, CC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测人正常宫颈上皮细胞(H8)和人CC细胞(Hela、Caski、C-... 目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因1(SNHG1)对宫颈癌(cervical cancer, CC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测人正常宫颈上皮细胞(H8)和人CC细胞(Hela、Caski、C-33A、SiHa)中SNHG1、microRNA-101-3p(miR-101-3p)、肌球蛋白调节轻链相互作用蛋白(MYLIP)的mRNA和蛋白表达。体外培养Hela细胞,使用Lipofectamine 3000试剂将si-SNHG1、anti-miR-101-3p及其阴性对照si-NC、inhibitor-NC转染到Hela细胞中,分为对照(Control)组、si-NC组、si-SNHG1组、si-SNHG1+anti-NC组、si-SNHG1+anti-miR-101-3p组。转染48 h后,qRT-PCR检测细胞中SNHG1、miR-101-3p和MYLIP mRNA的表达水平,Western blot检测细胞中MYLIP蛋白表达;CCK-8法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;通过双荧光素酶报告(DLRA)和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证Hela细胞中SNHG1、miR-101-3p和MYLIP的调控作用。结果 CC细胞系(Hela、Caski、C-33A、SiHa)中SNHG1、MYLIP mRNA和蛋白水平升高,miR-101-3p表达水平降低(P<0.05)。敲低SNHG1可显著上调miR-101-3p表达,降低MYLIP表达,抑制Hela细胞增殖、迁移和侵袭,并促进Hela细胞凋亡(均P<0.05);下调miR-101-3p可显著减弱SNHG1敲低的促凋亡和抗迁移、侵袭作用(均P<0.05)。DLRA和RIP实验证实SNHG1可以靶向并结合Hela细胞中的miR-101-3p, MYLIP是miR-101-3p的靶标。结论 SNHG1敲低可能是通过上调miR-101-3p来抑制MYLIP表达,进而抑制CC细胞增殖、迁移和侵袭,并促进CC细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因1 microRNA-101-3p 肌球蛋白调节轻链相互作用蛋白 增殖 凋亡 迁移
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肌球蛋白调节性轻链在慢性心力衰竭大鼠心室肌的表达变化 被引量：3
3
作者 吴钢 黄从新 +2 位作者 江洪 陈静茹 凃欣 《微循环学杂志》 2011年第4期17-18,22,I0001,I0002,共5页
目的:检测肌球蛋白调节性轻链(MYL2)在慢性心衰大鼠心室肌的表达变化。方法:建立腹主动脉缩窄大鼠慢性心衰模型,采用免疫组化染色和集成光学密度(IOD)定量观测MYL2在心室肌的表达及其表达程度,并与假手术组对照分析。结果:心衰组大鼠左... 目的:检测肌球蛋白调节性轻链(MYL2)在慢性心衰大鼠心室肌的表达变化。方法:建立腹主动脉缩窄大鼠慢性心衰模型,采用免疫组化染色和集成光学密度(IOD)定量观测MYL2在心室肌的表达及其表达程度,并与假手术组对照分析。结果:心衰组大鼠左室收缩末压(LVSP)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax)显著低于假手术组,左室舒张末压(LVEDP)显著高于假手术组(P均<0.01)。免疫组化染色示心衰组心室肌MYL2表达显著低于假手术组;心衰组染色标本的平均IOD为(47.12±12.08)×106,假手术组为(97.77±36.21)×106,前者显著低于后者(P<0.01)。结论:心室肌MYL2表达的显著降低可能是慢性心衰发生的重要机制。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 肌球蛋白调节性轻链 大鼠 动物模型
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肌球蛋白轻链在肺动脉高压内皮祖细胞衰老中的作用机制
4
作者 刘斌 张一帅 +1 位作者 李廷波 彭军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期163-163,共1页
目的探讨非肌肉型肌球蛋白调节轻链（nmMLC20）在肺动脉高压内皮祖细胞（EPCs）衰老中的作用及机制.方法建立低氧诱导的肺动脉高压动物模型和体外EPC衰老模型,采用法舒地尔或基因沉默等进行干预.测定大鼠右心室收缩压（RVSP）,右心重构... 目的探讨非肌肉型肌球蛋白调节轻链（nmMLC20）在肺动脉高压内皮祖细胞（EPCs）衰老中的作用及机制.方法建立低氧诱导的肺动脉高压动物模型和体外EPC衰老模型,采用法舒地尔或基因沉默等进行干预.测定大鼠右心室收缩压（RVSP）,右心重构指数,肺血管重构,外周血EPCs衰老率,EPCs中NOX2mRNA和蛋白表达和p-nmMLC20水平等指标.结果肺动脉高压大鼠外周血来源EPCs衰老率明显增加伴随NOX2表达和p-nmMLC20水平升高.上述现象能被法舒地尔逆转;低氧处理后,EPCs衰老率增加伴随NOX2表达和p-nmMLC20水平升高,上述现象可被法舒地尔或MLC20 siRNA逆转.结论肺动脉高压时,nmMLC20以磷酸化形式促进NOX2表达,提高活性氧水平,进而加速了EPCs衰老. 展开更多
关键词 非肌肉型肌球蛋白调节轻链 肺动脉高压 内皮祖细胞 衰老 NADPH氧化酶 法舒地尔
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核肌球蛋白轻链在心肌缺血/再灌注中的作用机制
5
作者 张一帅 刘斌 +2 位作者 罗秀菊 李廷波 彭军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期199-199,共1页
目的：探讨核肌球蛋白调节轻链（NMLC20）在心肌缺血/再灌注损伤中的作用及其对NOX2的表达机制.方法建立SD大鼠心肌缺血/再灌注或心肌细胞低氧/复氧损伤模型,并用ML7或基因沉默等进行干预.检测心肌梗死损伤,NOX2mRNA和蛋白表达水平以... 目的：探讨核肌球蛋白调节轻链（NMLC20）在心肌缺血/再灌注损伤中的作用及其对NOX2的表达机制.方法建立SD大鼠心肌缺血/再灌注或心肌细胞低氧/复氧损伤模型,并用ML7或基因沉默等进行干预.检测心肌梗死损伤,NOX2mRNA和蛋白表达水平以及胞质、胞核MLC20蛋白和磷酸化水平等指标.利用免疫共沉淀、DNApull-down和荧光素报告酶基因等评估MLC20对NOX2的表达调节机制.结果IR处理后,大鼠心肌损伤增加伴随NOX2表达和p-NMLC20水平升高,胞质p-MLC20水平降低.上述现象能被ML-7逆转;HR处理后,心肌细胞凋亡增加伴随NOX2表达和p-NMLC20水平升高,胞质p-MLC20水平降低,上述现象可被ML-7或MLC20siRNA逆转;免疫共沉淀等结果显示p-NMLC20能与RNApolII形成复合物,通过结合NOX2基因启动子区域特定序列促进NOX2表达.结论心肌缺血/再灌注时,核肌球蛋白通过其调节轻链磷酸化,与RNA聚合酶II形成转录起始复合物,进而识别结合NOX2基因启动子特定序列促进NOX2表达. 展开更多
关键词 核肌球蛋白调节轻链 缺血/再灌注 NADPH氧化酶 肌球蛋白轻链激酶 心肌 大鼠
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