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5-氮杂胞苷诱导间充质干细胞分化为成肌细胞的实验研究 被引量：15
1
作者 王劲 郭朝华 +6 位作者 张勇 李军 冉新泽 徐辉 粟永萍 罗成基 程天民 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期207-211,共5页
目的　探讨 5 -氮杂胞苷 ( 5 -Aza)诱导间充质干细胞 (MSCs)分化为成肌细胞的相关机制。　方法　分离纯化 4～ 6周龄Balb C小鼠骨髓MSCs,以不同浓度 5 -Aza作用 ,用四唑盐(MTT)法测定细胞生长活力 ;逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)鉴定... 目的　探讨 5 -氮杂胞苷 ( 5 -Aza)诱导间充质干细胞 (MSCs)分化为成肌细胞的相关机制。　方法　分离纯化 4～ 6周龄Balb C小鼠骨髓MSCs,以不同浓度 5 -Aza作用 ,用四唑盐(MTT)法测定细胞生长活力 ;逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)鉴定肌形成调节因子 5 (Myf5 )、成肌素 (myogenin)表达 ;免疫组织化学染色鉴定结蛋白 (desmin)、肌凝蛋白 (myosin)表达 ;观察细胞形态变化。　结果　 1,3μmol L 5 -Aza对细胞增殖无明显影响 ,2 0 μmol L 5 -Aza对细胞有毒性作用 ,影响其增殖。 10 μmol L 5 -Aza诱导后 6h ,MSCs表达Myf5 ,9h达最高 ;5 μmol L5 -Aza诱导后9h ,MSCs表达Myf5 ,12h达高峰。 10 μmol L5 -Aza诱导后 2 4h ,MSCs表达myogenin ,48h达最高 ;5 μmol L5 -Aza诱导后 6d ,MSCs表达myogenin ,且为高峰。 10 μmol L5 -Aza诱导后 7d ,部分细胞表达desmin ;14d部分细胞表达myosin。 10 μmol L5 -Aza诱导后 9d ,部分细胞胞体明显增粗 ,14～ 16d后可见有肌管样细胞出现。　结论　 5 -Aza诱导MSCs向成肌细胞定向分化 ,可能是因其产生的去甲基化作用使MSCs中处于转录失活阶段的肌分化调控基因Myf5等得以表达 ,从而调控MSCs向肌细胞系定向分化并逐步表达myogenin ,最后分化为肌管样细胞的过程。 展开更多
关键词 5-氮杂胞苷 诱导 间充质干细胞 成肌细胞 实验研究 创伤 修复 细胞分化 肌形成蛋白 5-氮杂胞苷
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长期失神经支配人环杓后肌的肌形成蛋白和转化生长因子β1的表达 被引量：2
2
作者 张贤 郑宏良 陈世彩 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期675-680,共6页
目的探讨肌肉再生潜力指标肌形成蛋白（myogenin）和纤维化相关因子转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）蛋白表达水平在长期失神经环杓后肌的变化规律，为临床开展晚期喉神经修复时限的选择提供理论依据。方法... 目的探讨肌肉再生潜力指标肌形成蛋白（myogenin）和纤维化相关因子转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）蛋白表达水平在长期失神经环杓后肌的变化规律，为临床开展晚期喉神经修复时限的选择提供理论依据。方法不同时限喉返神经损伤患者的环杓后肌标本按神经损伤时限分为4组：0．5年以上组（12例）、1年以上组（10例）、2年以上组（8例）、3年以上组（8例）。对照组为正常肌肉（12例）。通过免疫组化荧光染色及蛋白质印迹法观察长期失神经后环杓后肌肌形成蛋白和TGF-β1表达相互变化趋势。结果免疫组化荧光染色显示失神经0．5年以上组肌形成蛋白在肌细胞核有较高水平表达，1年以上组表达最高，2年以上组表达水平下降，3年以上组基本无表达。TGF-β1在失神经0．5年以上组肌细胞质有较高表达，1年以上组表达最高，2年以上组表达下降，3年以上组基本无表达。肌形成蛋白和TGF-β1的蛋白质印迹法结果显示，失神经组与对照组差异有统计学意义（F值分别为332．205和106．192，P值均〈0．001）。肌形成蛋白失神经0．5年以上组表达为对照组的7．12倍，失神经1年以上达到高峰，为对照组的15．58倍，随后缓慢下降，失神经3年以上组为对照组1．21倍。TGF-β1失神经0．5年以上组的表达为对照组的4．80倍，失神经1年以上组达到高峰，为对照组的10．59倍，随后缓慢下降，失神经3年以上组为对照组1．20倍。肌形成蛋白与TGF-β1表达有正相关趋势。结论失神经2年内既是环杓后肌肌再生能力较好时期，同时也是肌肉向纤维化转变重要时期。 展开更多
关键词 喉肌 去神经支配 肌形成蛋白 转化生长因子Β1
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肌形成蛋白在人体失神经骨骼肌表达的形态学
3
作者 黄汉伟 徐建光 顾玉东 《福建医科大学学报》 2004年第1期18-20,F002,共4页
目的　研究肌形成蛋白在人体失神经骨骼肌中的表达规律。　方法　成人骨骼肌 1 8例 ,正常骨骼肌 3例 ,失神经时间 1 2个月内骨骼肌 9例 ,1 3～ 2 4个月 6例。免疫组织化学染色方法 (ABC法 )研究肌形成蛋白在骨骼肌内的表达。　结果　正... 目的　研究肌形成蛋白在人体失神经骨骼肌中的表达规律。　方法　成人骨骼肌 1 8例 ,正常骨骼肌 3例 ,失神经时间 1 2个月内骨骼肌 9例 ,1 3～ 2 4个月 6例。免疫组织化学染色方法 (ABC法 )研究肌形成蛋白在骨骼肌内的表达。　结果　正常骨骼肌未见肌形成蛋白表达 ,失神经人体骨骼肌内肌形成蛋白蛋白表达在肌纤维细胞核与肌卫星细胞细胞核 ;失神经 1年内可见到肌形成蛋白阳性染色细胞核 ,之后阳性肌细胞核明显减少 ,具有统计学意义 (P<0 .0 5 )。　结论　人体骨骼肌失神经 1年后再生反应明显降低 ,提示人体骨骼肌失神经后应该尽早修复。 展开更多
关键词 肌形成蛋白 肌 骨骼 周围神经
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