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共载siRNA与多西他赛的透明质酸修饰的还原敏感型纳米粒质量评价 被引量：4
1
作者 李亚楠 王珏 +2 位作者 李霁 沈雁 涂家生 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期429-436,共8页
研究和评价共载特异性抑制环氧化酶（COX-2）表达的小干扰RNA（siRNA）和多西他赛（DTX）的透明质酸修饰二硫键交联的聚乙酰亚胺（PEIss）与聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）形成的还原敏感型肿瘤靶向纳米粒（DTX/si COX-2/HRPSP NPs）的... 研究和评价共载特异性抑制环氧化酶（COX-2）表达的小干扰RNA（siRNA）和多西他赛（DTX）的透明质酸修饰二硫键交联的聚乙酰亚胺（PEIss）与聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）形成的还原敏感型肿瘤靶向纳米粒（DTX/si COX-2/HRPSP NPs）的体外质量。首先,通过溶剂挥发法制备DTX/si COX-2/HRPSP NPs,同时制备不含二硫键交联的透明质酸修饰的PEI-PLGA纳米粒（DTX/si COX-2/HPP NPs）作为对照。结果显示,两者NPs呈核壳圆形,粒径处于150～200 nm之间,体外释放实验表明,DTX/si COX-2/HRPSP NPs中的DTX在24 h内呈现缓释行为,且HRPSP NPs在p H 5.0中8 h时的累积释药量较p H 7.4中释药量高10%～25%,证明酸性条件更有利于纳米粒中DTX的释放,具有肿瘤微环境敏感性。体外细胞摄取实验表明,当N/P比为40/1,孵育时间在14～16 h时,纳米粒的摄取量最高,受体靶向抑制试验显示,HRPSP NPs能特异性结合CD44受体,具有肿瘤细胞靶向性。最后,通过Western blot方法测定不同纳米粒对细胞内Bcl-2,bax,caspase-3和COX-2蛋白的相对表达效率。结果显示,实验组与对照组相比,促凋亡蛋白bax和caspase-3显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2显著下降,COX-2蛋白的表达也相应降低,尤其以DTX/si COX-2/HRPSP NPs组最为明显（P〈0.01）,实现了小分子药物和siRNA协同特异性治疗的目的。 展开更多
关键词 COX-2 小分子干扰RNA 多西他赛 纳米粒 还原敏感 凋亡 聚乙酰亚胺 聚乳酸-羟基乙酸共聚物
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超顺磁Fe3O4/SiO2-聚乙烯亚胺复合微球的制备及基因传递应用 被引量：1
2
作者 张庆云 李荣荣 +2 位作者 邓桂茹 朱辉 杨晓英 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第16期2570-2575,共6页
背景:在基因治疗中选择合适、低毒、对人体和环境无害的载体,使基因高效地转移至靶向部位并有效表达相关产物尤为关键。目的:制备超顺磁性Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球。方法:通过乳化溶剂挥发法制备Fe3O4纳米粒子聚集体,再利用stobe... 背景:在基因治疗中选择合适、低毒、对人体和环境无害的载体,使基因高效地转移至靶向部位并有效表达相关产物尤为关键。目的:制备超顺磁性Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球。方法:通过乳化溶剂挥发法制备Fe3O4纳米粒子聚集体,再利用stober法合成超顺磁性Fe3O4/SiO2核壳型微球,进一步在该微球表面修饰聚乙酰亚胺,得到超顺磁性Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球,并对其进行透射电镜、Zeta电位和磁性等结构性能表征。将Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球与Plasmid DNA按照不同的质量比(29∶1,39∶1,49∶1,59∶1,68∶1,78∶1,88∶1)混合,通过凝胶电泳测定该复合微球与绿色荧光蛋白基因的结合能力。将Plasmid DNA分别与Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺、聚乙酰亚胺混合,通过共聚焦荧光显微镜观测其在HeLa细胞中转染绿色荧光蛋白基因的情况。结果与结论:成功合成了Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球,分散性良好,粒径分布均匀,约为100 nm,表面电荷为21.07 mV,饱和磁化强度为28.05 emu/g,为超顺磁性。随着复合微球与Plasmid DNA质量比的不断增加,越来越多的Plasmid DNA质粒被吸附在Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球上,此时Plasmid DNA质粒过量,当质量比达到59∶1时,所有的pDNA质粒都被吸附在复合微球上;质量比大于59∶1时,复合微球过量,因此质量比为59∶1时二者均无过量,结果较好,用于HeLa细胞转染。与聚乙酰亚胺相比,Fe3O4/SiO2-聚乙酰亚胺复合微球可显著提高Plasmid DNA的转染效率。 展开更多
关键词 生物材料 纳米材料 超顺磁性 FE3O4 SiO2-聚乙酰亚胺复合微球 基因传递 PLASMID DNA质粒
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