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高温季节耐热素对猪生产性能与肉质的影响 被引量:3
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作者 李金友 周明 +2 位作者 季学枫 吴义师 赵瑞莲 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2005年第9期42-43,46,共3页
选取杜×长×大三元杂交肥育猪48头,随机分成3个组。对照组猪喂基础饲粮,试验1组在对照组饲粮基础上加0.5%耐热素A,试验2组在对照组饲粮基础上将食盐的质量分数降到0.2%,再加0.5%耐热素B。试验期为54 d,期间猪舍内最高温度39℃... 选取杜×长×大三元杂交肥育猪48头,随机分成3个组。对照组猪喂基础饲粮,试验1组在对照组饲粮基础上加0.5%耐热素A,试验2组在对照组饲粮基础上将食盐的质量分数降到0.2%,再加0.5%耐热素B。试验期为54 d,期间猪舍内最高温度39℃,最低22℃,平均相对湿度为71.6%。结果表明:两试验组猪的体温均在不同程度上低于对照组猪,但差异不显著(P>0.05)。耐热素A对猪增重有促进作用(P<0.05);耐热素A、B对饲料转化率都有改善作用(P<0.05),其中耐热素A比B的效果更明显。试验1组猪肌肉中脂肪、钙的含量都显著高于试验2组和对照组(P<0.05);试验2组猪肌肉中脂肪、钙的含量亦高于对照组猪(P>0.05)。试验1、2组猪肌肉纤维直径均大于对照组(P>0.05)。3个组猪背膘厚和肌肉pH值无显著的差异(P>0.05)。这说明,耐热素A在减轻高温对猪健康和生产性能的不良影响有明显的效果,且可促进脂肪、钙在肌肉内沉积,对改善猪肉的风味也有一定的积极作用。 展开更多
关键词 饲粮 耐热 高温 生产性能 VC VE MgSO4 肉质
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耐热素对猪饲粮养分消化率的影响
2
作者 李金友 周明 +2 位作者 季学枫 吴义师 赵瑞莲 《江西饲料》 2005年第4期8-11,共4页
杜×长×大三元杂交肥育猪48头被随机分成3组,即对照组、试验1组和试验2组。3组猪试验处理如下:用基础饲粮直接喂对照组猪;在基础饲粮中加0.5%耐热素A后,喂试验1组猪;将基础饲粮中食盐含量降到0.2%,再加0.5%耐热素B后,喂试验2... 杜×长×大三元杂交肥育猪48头被随机分成3组,即对照组、试验1组和试验2组。3组猪试验处理如下:用基础饲粮直接喂对照组猪;在基础饲粮中加0.5%耐热素A后,喂试验1组猪;将基础饲粮中食盐含量降到0.2%,再加0.5%耐热素B后,喂试验2组猪。饲养试验期为54d。试验期间猪舍内最高温度39℃,最低温度22℃、平均相对湿度为71.6%;在对3组猪分别喂3种饲粮3周后开始采集粪样,连续采集1周。结果如下:试验1、2组猪的体温均在不同程度上低于对照组猪,但差异不显著(P>0.05);在高温下,耐热素能较好地维持猪健康状态;试验1组猪饲粮中粗纤维、粗灰分、钙、磷的消化率均显著地高于对照组(P<0.05),试验1组猪饲粮中粗脂肪、粗蛋白、无氮浸出物、干物质的消化率也比对照组高,但不显著(P>0.05)。试验结果表明:耐热素A在高温下对维持猪体健康和提高饲粮养分消化率有积极的作用。 展开更多
关键词 耐热 饲粮养分消化率 养分消化率 猪饲粮 耐热 试验处理 基础饲粮 最高温度 连续采集
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杭州地区2000-2002年副溶血弧菌的分子分型研究 被引量:42
3
作者 张蔚 潘劲草 +1 位作者 孟冬梅 陈坤 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期343-346,共4页
目的了解杭州地区2000-2002年副溶血弧菌临床和环境分离菌株的分子流行病学特征。方法对172株2000年和2002年从临床食物中毒患者和散发腹泻病例以及外环境(小水产品)中分离的副溶血弧菌菌株进行血清分型。对40株临床来源O3:K6型菌株及... 目的了解杭州地区2000-2002年副溶血弧菌临床和环境分离菌株的分子流行病学特征。方法对172株2000年和2002年从临床食物中毒患者和散发腹泻病例以及外环境(小水产品)中分离的副溶血弧菌菌株进行血清分型。对40株临床来源O3:K6型菌株及环境来源O3:KUT (K抗原未分型)型菌株,应用PCR技术进行耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关基因 (trh)的检测,并进行核糖体基因分型(ribotyping)、随机扩增多态性DNA分析(RAPD)、肠道细菌重复基因间共同序列PCR(ERIC-PCR)等。结果在调查的13起副溶血弧菌引起的食物中毒中,tdh 阳性、trh阴性的O3:K6血清型引起的有11起(84.6%);tdh阳性、trh阴性的O4:K8菌引起有2起 (15.4%)。在散发腹泻病例中,tdh阳性、trh阴性的O3:K6、O4:K8和O1:KUT菌株分别占26.5%(9/ 34)、17.6%(6/34)和38.2%(13/34),未能分型的占17.6%(6/34)。在水产品中分离的菌株中,37株分属7种O血清型,其中未见有O3:K6和O4:K8血清型;另外有9株未能分型;其中除1株O1:KUT 菌株trh阳性外,其余tdh和trh均为阴性。绝大部分食物中毒患者和散发腹泻病例分离的O3:K6菌株在ribotyping、ERIC-PCR及RAPD三种指纹上均属于一种密切相关的克隆群,而环境分离的 O3:KUT菌株与临床分离的O3:K6菌株间,在三者指纹上均有明显差异。结论临床来源和小水产品来源的副溶血弧菌菌株间血清型分布有显著差别;一群关系密切、tdh阳性、trh阴性的O3:K6血清型菌株在杭州地区呈优势流行。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 细菌分型技术 耐热直接溶血 耐热直接溶血相关溶血
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副溶血性弧菌所致食物中毒的研究进展 被引量:17
4
作者 李庆山 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第2期461-463,共3页
关键词 副溶血性弧菌 食物中毒 耐热溶血(TLH) 耐热直接溶血(TDH) 耐热直接相关溶血(TRH)
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双重PCR检测携带有tl和tdh基因的副溶血弧菌毒力菌株 被引量:14
5
作者 吴彩云 蔡俊鹏 +4 位作者 杨汝德 陈清 罗立新 吴后波 俞守义 《水产科学》 CAS 北大核心 2004年第5期5-9,共5页
在常规PCR技术的基础上优化条件 ,建立并完善双重PCR技术 ,并通过检测阳性对照和待检样品 ,进一步确定其检测的可行性。结果表明在常规PCR方法中为阳性的样品 ,包括阳性对照以及待检样品 ,在双重PCR方法中也呈现阳性 ,为阴性的样品在本... 在常规PCR技术的基础上优化条件 ,建立并完善双重PCR技术 ,并通过检测阳性对照和待检样品 ,进一步确定其检测的可行性。结果表明在常规PCR方法中为阳性的样品 ,包括阳性对照以及待检样品 ,在双重PCR方法中也呈现阳性 ,为阴性的样品在本方法中则也呈现阴性 ;能在血平板中出现溶血圈的在本法中也被印证含有tdh基因。由此证实本方法确实能对tl和tdh两种基因同时进行检测 ,成功地证明了同时检测tl和tdh两种基因的双重PCR方法的可行性。该法不但具有常规PCR的优点 ,而且还能节省耗材和时间 。 展开更多
关键词 双重PCR 副溶血弧菌 耐热溶血 水产食品 毒力 菌株
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用斑点ELISA检测副溶血弧菌的耐热溶血毒(TDH)和TDH类似毒(TRH) 被引量:9
6
作者 蒋燕群 倪语星 《上海医学检验杂志》 1997年第3期143-144,共2页
本文用斑点ELISA和溶血试验分别检测26株副溶血弧菌(VibrioParahaemolyticus,VP)的耐热溶血毒(TDH)和TDH类似溶血毒(TRH),TDH的阳性检出率分别为80.8%(21/26)和73.1%(19/26)TRH的阳性检出率分别为19.2%(5/26)和7... 本文用斑点ELISA和溶血试验分别检测26株副溶血弧菌(VibrioParahaemolyticus,VP)的耐热溶血毒(TDH)和TDH类似溶血毒(TRH),TDH的阳性检出率分别为80.8%(21/26)和73.1%(19/26)TRH的阳性检出率分别为19.2%(5/26)和7.7%(2/26)。经卡方检验,两试验在统计学上无显著性差异(P>0.05)。实验结果表明,斑点ELISA比溶血试验稳定,影响因素少。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 斑点ELISA 耐热溶血 TDH类似毒
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深圳市副溶血性弧菌血清型及毒力基因特征研究 被引量:9
7
作者 刘李 许欣 +1 位作者 段永翔 鞠长燕 《中国热带医学》 CAS 2009年第8期1399-1400,1436,共3页
目的了解从深圳市食源性疾病患者和环境中分离的副溶血性弧菌的血清型和毒力基因特征。方法2006~2008年从食源性疾病患者和海水、海产品等外环境分离到133株副溶血性弧菌,按GB/T4789.7-2008进行血清学鉴定,用PCR技术检测耐热直接溶血... 目的了解从深圳市食源性疾病患者和环境中分离的副溶血性弧菌的血清型和毒力基因特征。方法2006~2008年从食源性疾病患者和海水、海产品等外环境分离到133株副溶血性弧菌,按GB/T4789.7-2008进行血清学鉴定,用PCR技术检测耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)。结果133株副溶血性弧菌中,以O3(43.6%)、O1(16.5%)、O4(16.5%)群为主。84.4%(76/90)的食源性疾病样本分离株携带毒力基因tdh,无单独携带trh基因的菌株;79.1%(34/43)的环境样本分离株不携带tdh和trh毒力基因,无同时携带两种基因的菌株。结论近年来引起深圳市食源性疾病的副溶血性弧菌主要为tdh阳性、trh阴性菌株,在外环境中检出的绝大多数副溶血性弧菌tdh基因和trh基因均为阴性;O3仍为主要的流行群。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 食源性疾病 耐热直接溶血基因 耐热直接溶血相关溶血基因 聚合酶链反应
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用PCR检测副溶血性弧菌耐热溶血素基因 被引量:2
8
作者 周志江 刘纯杰 +3 位作者 黄上媛 中野克重 佐藤久聪 齐藤博 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第3期252-255,共4页
根据副溶血性弧菌的耐热溶血素基因(tdh)设计了2对引物,经聚合酶链式反应(PCR)检测,所有18株神奈川试验阳性副溶血性弧菌均呈阳性反应,而6株神奈川试验阴性副溶血性弧菌呈阴性反应,其他9种(34株)弧菌和8株其他... 根据副溶血性弧菌的耐热溶血素基因(tdh)设计了2对引物,经聚合酶链式反应(PCR)检测,所有18株神奈川试验阳性副溶血性弧菌均呈阳性反应,而6株神奈川试验阴性副溶血性弧菌呈阴性反应,其他9种(34株)弧菌和8株其他革兰氏阴性菌也呈阴性反应。检测敏感性可达2CFU的副溶血性弧菌。 展开更多
关键词 PCR 副溶血性弧菌 耐热溶血基因
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市售生食水产品污染副溶血性弧菌的病原学分析 被引量:5
9
作者 袁媛 孙永 +4 位作者 张钧 李春 撒楠 栗薇薇 胡万富 《安徽预防医学杂志》 2013年第4期233-235,239,共4页
目的通过对2011~2012年合肥市售生食水产品中分离的副溶血性弧菌血清型、毒力基因和耐药性的研究,了解生食海产品污染的副溶血性弧菌的病原学特征。方法按GB/T4789.7-2008方法进行分离鉴定,用PCR技术检测不耐热溶血素(tlh)基因、耐热... 目的通过对2011~2012年合肥市售生食水产品中分离的副溶血性弧菌血清型、毒力基因和耐药性的研究,了解生食海产品污染的副溶血性弧菌的病原学特征。方法按GB/T4789.7-2008方法进行分离鉴定,用PCR技术检测不耐热溶血素(tlh)基因、耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)。药敏试验采用K-B法。结果两年检获的65株副溶血性弧菌分属11个血清群,以O2(41.54%)、O1(12.31%)、O3(12.31%)群为主。65株菌均不携带tdh和trh毒力基因,tlh基因全部阳性。药敏结果显示,65株菌对15种抗生素显示出较高的青霉素(100.0%)和氨苄西林(95.4%)耐药性。结论近年来合肥市售生食水产品中污染的副溶血性弧菌以O2血清型为主,tdh基因和trh基因均为阴性。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 血清群 耐热直接溶血基因 耐热直接溶血相关溶血基因 耐药性
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副溶血性弧菌不耐热溶血素的生物信息学分析与分子动力学模拟
10
作者 张德福 于振兴 +4 位作者 张明 吕欣然 张永勤 张国清 励建荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期251-257,I0009-I0012,共11页
副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码... 副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性人畜共患致病菌,可引发人类胃肠炎等食源性疾病。副溶血性弧菌具有多种毒力因子,热不稳定溶血素(thermolabile hemolysin,TLH)即是其中之一。该研究对副溶血性弧菌的tlh基因进行了克隆及测序,对tlh基因编码的TLH蛋白进行了生物信息学分析及结构和功能预测。结果表明,TLH蛋白由418个氨基酸组成,预测分子质量为47.36 kDa。在TLH蛋白中确定了几个保守的结构域和基序,包括SGNH水解酶结构域和GDSL基序;对TLH蛋白的三维结构进行了同源建模及验证,在此基础上通过分子动力学模拟分析其稳定性、与4-硝基苯基月桂酸酯(p-nitrophenylaurate,PNPL)的相互作用能力及结合底物对结构紧密度和残基灵活性的影响,揭示了催化三联体Ser153-His390-Asp393周边是一个重要的药物靶点活性口袋,具有高度保守的残基序列,并在底物结合后表现出残基灵活性差异。该研究分析了副溶血性弧菌TLH蛋白的性质和结构,可以为保障水产品的安全性、提高水产品原料安全评价水平提供理论支持。 展开更多
关键词 基因克隆 副溶血性弧菌 耐热溶血(tlh) 生物信息学分析 分子动力学模拟
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基于多重PCR的副溶血弧菌大流行菌群及其毒力基因检测方法的建立与评价 被引量:4
11
作者 韩艳青 侯凤伶 +4 位作者 张淑红 申玉学 史红 关文英 申志新 《疾病监测》 CAS 2016年第9期750-754,共5页
目的基于多重聚合酶链反应(PCR)建立一种快速方便的检测副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的方法。方法结合副溶血弧菌"大流行菌群"的群特异鉴定方法 GS-PCR,与副溶血弧菌致病相关的耐热直接溶血素基因(tdh)和耐... 目的基于多重聚合酶链反应(PCR)建立一种快速方便的检测副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的方法。方法结合副溶血弧菌"大流行菌群"的群特异鉴定方法 GS-PCR,与副溶血弧菌致病相关的耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)序列设计引物,建立并优化多重PCR检测方法。用已知的大流行菌株和非大流行临床分离株,对其进行特异性、灵敏度等性能的评价。并对224株食品分离株和3株临床分离株副溶血弧菌进行了再鉴定。结果副溶血弧菌"大流行菌群"有群特异PCR标识基因和tdh扩增条带。而其他细菌扩增结果呈阴性。检测灵敏度可达到105CFU/ml。对实验室保存的224株食品分离株和3株临床分离株进行再鉴定表明,其中5株为副溶血弧菌"大流行菌群",其中3株为tdh阳性、trh阴性,2株tdh、trh均阴性。结论本研究所建立的多重PCR方法特异性好、灵敏度高。为副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的快速大规模检测提供良好的技术支持。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 大流行菌群 耐热直接溶血 耐热直接溶血相关溶血 群特异PCR 多重PCR
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副溶血性弧菌毒力因子及耐药机制研究进展 被引量:5
12
作者 张健 朱秋华 +9 位作者 张明 王丽卫 董浩 曾仙童 白梧桐 郭晓华 申照华 宋钢 张德福 励建荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期301-307,共7页
副溶血性弧菌是水产品中主要的致病菌之一,既可造成养殖水产品的疾病与死亡,也可引起人类的胃肠炎等疾病,不仅具有潜在的食品安全隐患,也对消费者健康造成潜在危害。该文主要阐述了副溶血性弧菌的毒力因子耐热直接溶血素(thermostable d... 副溶血性弧菌是水产品中主要的致病菌之一,既可造成养殖水产品的疾病与死亡,也可引起人类的胃肠炎等疾病,不仅具有潜在的食品安全隐患,也对消费者健康造成潜在危害。该文主要阐述了副溶血性弧菌的毒力因子耐热直接溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)以及分泌系统T3SS1、T3SS2在菌株体内的作用机理,并对副溶血性弧菌产生耐药性的5种机制——产生生物被膜、质粒介导耐药、产生灭活酶或钝化酶类、外排泵主动排出抗菌药物、药物靶点发生改变进行了综述。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 耐热直接溶血 T3SS 耐药机制 质粒
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宁波副溶血性弧菌临床株毒力基因与多位点序列分型研究 被引量:4
13
作者 高红 宋启发 +2 位作者 徐景野 郑剑 沈玄艺 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期240-243,共4页
目的了解宁波地区副溶血性弧菌临床分离株毒力基因分布以及分子分型特征。方法收集来源于食物中毒和散发腹泻患者副溶血弧菌菌株,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关... 目的了解宁波地区副溶血性弧菌临床分离株毒力基因分布以及分子分型特征。方法收集来源于食物中毒和散发腹泻患者副溶血弧菌菌株,利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh),利用多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)进行分子分型。结果2006—2012年共分离临床株248株,选择48株进行毒力基因和MLST分型研究。42株tdh+,为93.75%;11株trh+,为22.92%。48株菌株可分为9个ST型和一个未分型,ST3有32株,占66.67%;ST265有5株,占10.42%;ST120有3株,占6.25%。ST3克隆群中tdh+/trh-菌株有25株,占78.16%。与全国其他地区比较,在宁波临床株中发现ST262。结论 tdh+型是宁波地区副溶血性弧菌优势菌株。有9种ST型,以ST3克隆为主,其次为ST265和ST120。ST3克隆中以tdh+/trh-型为主。另发现1个独特的ST262菌株。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 耐热直接溶血基因 耐热直接溶血相关溶血基因 多位点序列分型
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海盐县副溶血性弧菌血清分型和毒力基因携带状况分析 被引量:3
14
作者 孙明华 周晓红 +2 位作者 徐佩华 张孝艳 徐静妤 《预防医学》 2017年第10期1030-1032,共3页
目的了解海盐县副溶血性弧菌的优势血清型及毒力基因携带状况。方法收集2015—2016年海盐县腹泻和食物中毒患者(人源株)、食物中毒调查样品(食源株)和海产品(海产株)中分离的96株副溶血性弧菌株,根据GB/T 4789.7—2013《食品微生物检验... 目的了解海盐县副溶血性弧菌的优势血清型及毒力基因携带状况。方法收集2015—2016年海盐县腹泻和食物中毒患者(人源株)、食物中毒调查样品(食源株)和海产品(海产株)中分离的96株副溶血性弧菌株,根据GB/T 4789.7—2013《食品微生物检验副溶血性弧菌检验》进行血清分型试验,并采用荧光定量PCR检测耐热直接溶血素基因(tdh)、耐热直接溶血素相关基因(trh)和不耐热直接溶血素基因(tlh)。结果 96株菌株的血清型以O3∶K6和O4∶K8为主,分别占35.42%(34株)和33.33%(32株)。人源株中检出的O3∶K6和O4∶K8型合计占人源株菌株数的87.76%,食源株中检出的占76.67%;海产株中未检出O3∶K6和O4∶K8型。96株菌株tlh基因均阳性,阳性率为100.00%;58株tdh基因阳性,阳性率为60.42%;1株trh基因阳性,阳性率为1.04%。人源株的毒力基因携带率为93.88%,高于食源株的43.33%(P<0.05);海产株中均未检出tdh和trh基因。O4∶K8型菌株毒力基因携带率为87.50%,O3∶K6型菌株毒力基因携带率为76.47%;O3∶K6和O4∶K8型菌株的毒力基因携带率合计为81.82%,高于其他血清型菌株的16.67%(P<0.05)。结论海盐县2015—2016年副溶血性弧菌的优势血清型是O3∶K6和O4∶K8,血清型与毒力基因携带有一定程度关联,O4∶K8血清型毒力基因携带率最高,其次为O3∶K6血清型。 展开更多
关键词 副溶血性弧菌 耐热直接溶血基因 耐热直接溶血基因 耐热直接溶血相关基因
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全基因组数据应用于多克隆副溶血弧菌感染暴发的病原学分析 被引量:5
15
作者 张巍巍 李颖 +8 位作者 王群 赵林 冯宝立 蒋会婷 郝帅 李清 张颖 马红梅 逄波 《疾病监测》 CAS 2020年第6期518-522,共5页
目的应用实时荧光PCR方法和基因组重测序分析等技术对一起副溶血弧菌(VP)导致的腹泻暴发事件进行病原学分析。方法收集暴发事件的病例信息,采集病例样本,使用实时荧光PCR方法筛选常见腹泻致病菌,分离鉴定VP并进行血清型鉴定,检测菌株毒... 目的应用实时荧光PCR方法和基因组重测序分析等技术对一起副溶血弧菌(VP)导致的腹泻暴发事件进行病原学分析。方法收集暴发事件的病例信息,采集病例样本,使用实时荧光PCR方法筛选常见腹泻致病菌,分离鉴定VP并进行血清型鉴定,检测菌株毒力基因,采用微量肉汤稀释法检测菌株对抗菌药物的敏感性,使用全基因组测序技术进行菌株的遗传学分析。结果9份肛拭子共分离出13株VP菌株,其中O4∶KUT血清型7株(trh-/tdh+),O1∶KUT血清型6株(5株trh+/tdh+,1株trh-/tdh-)。在检测的30种抗菌药物中,所有菌株仅对氨苄西林耐药,对其他29种抗菌药物均敏感。在基于全基因组序列的遗传学分析中,13株VP形成4个相互独立且遗传距离较远的分支,Lineage 1(O4∶KUT、trh-/tdh+,2株)、Lineage 2(O1∶KUT、trh-/tdh-,1株)、Lineage 3(O1∶KUT、trh+/tdh+,5株)和Lineage 4(O4∶KUT、trh-/tdh+,5株),其中3例患者由来源于3个不同遗传分支的VP混合感染。结论本次事件由多血清型、多克隆的VP感染导致,基因组重测序技术在腹泻病暴发的病原分析中有较好的应用前景。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 暴发 多克隆 基因组重测序 耐热相关溶血基因
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快速检测致病性副溶血弧菌的Dot-ELISA方法的建立 被引量:4
16
作者 王艳 何再平 +3 位作者 黄忠荣 张磊萍 王权 蒋蔚 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期48-52,共5页
本研究选用硝酸纤维素膜作固相载体,以出现明显清晰斑点者判为阳性结果,成功建立了检测致病性副溶血弧菌耐热直接溶血素(direct heat hemolysin,TDH)的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)方法。根据棋盘试验,确定免疫血清最佳工作浓度为1:... 本研究选用硝酸纤维素膜作固相载体,以出现明显清晰斑点者判为阳性结果,成功建立了检测致病性副溶血弧菌耐热直接溶血素(direct heat hemolysin,TDH)的斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)方法。根据棋盘试验,确定免疫血清最佳工作浓度为1:100,酶标二抗最佳工作浓度为1:1000。特异性检测结果表明,TDH阳性的副溶血弧菌可以呈现明显清晰斑点,而不能产生TDH的副溶血弧菌及其他对照菌(如嗜水气单胞菌、大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌)均无斑点显示。该方法与PCR方法的符合率为82.5%。本研究所建立的Dot-ELISA检测方法简便、快速,特异性和敏感性较高,适合基层和现场的初步筛选。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 耐热直接溶血 DOT-ELISA 检测
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PCR检测副溶血弧菌耐热直接溶血素和耐热直接相关溶血素基因的研究 被引量:2
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作者 鲁开国 胡智慧 +3 位作者 生菊 陶秀莲 王伟栋 王慧 《中国卫生检验杂志》 CAS 1995年第2期83-85,共3页
副溶血弧菌(V·P)是沿海一带食物中毒和急性腹泻的重要病原菌,该菌在我市散发性感染性腹泻弧菌科病原菌中占绝对优势。目前国内外对V.p的分子流行病学研究甚为活跃,大量研究表明:V.p的耐热溶血素(TDH)和耐热相关溶血素(TRH)是目前... 副溶血弧菌(V·P)是沿海一带食物中毒和急性腹泻的重要病原菌,该菌在我市散发性感染性腹泻弧菌科病原菌中占绝对优势。目前国内外对V.p的分子流行病学研究甚为活跃,大量研究表明:V.p的耐热溶血素(TDH)和耐热相关溶血素(TRH)是目前公认的致病因子,因此研究这两类溶血素的分布和致病机理具有重要的实用和理论价值。为了研究V.p致病的基因本质,我们采用PCR技术建立了tdh和trh的检测方法,对不同来源V.p的tdh、trh携带状况进行了检测分析,现将结果报告如下。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 耐热溶血 聚合酶链反应 病原菌
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副溶血性弧菌致病性及耐药性分析 被引量:2
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作者 蔡心安 《检验医学与临床》 CAS 2005年第5期196-197,共2页
目的了解宿州地区副溶血性弧菌的肠道感染情况。方法对两年中分离到的302株副溶血性弧菌进行溶血素和抗生素敏感性测定,并对患者的临床资料进行统计分析。结果两年中共检测急性腹泻患者的粪便标本3165份,检出副溶血性弧菌302株,检出率为... 目的了解宿州地区副溶血性弧菌的肠道感染情况。方法对两年中分离到的302株副溶血性弧菌进行溶血素和抗生素敏感性测定,并对患者的临床资料进行统计分析。结果两年中共检测急性腹泻患者的粪便标本3165份,检出副溶血性弧菌302株,检出率为9.5%。其中脲酶阳性48株,占副溶血性弧菌的15.9%。以7~9月副溶血性弧菌检出最多(252株),占副溶血性弧菌总检出数的83.4%。对302株副溶血性弧菌溶血素检测结果表明,耐热溶血素(TDH)阳性213株,占70.5%;不耐热溶血素(TRH)阳性43株,占14.2%。副溶血性弧菌对痢特灵(FR)的耐药率为66.3%,其次是氨苄西林(AMP),为61%。结论脲酶阴性与阳性副溶血性弧菌均有较强的致病性。 展开更多
关键词 弧菌 副溶血性/致病力 抗药性 微生物 副溶血性弧菌 致病性 耐药性分析 耐热溶血 急性腹泻患者 脲酶阳性 检测结果 敏感性测定
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副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测 被引量:2
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作者 赵永刚 战文斌 +2 位作者 萨仁高娃 王君玮 王志亮 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期10-14,共5页
通过PCR技术从副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus,VP)基因组DNA上扩增耐热溶血素基因tdh,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建重组表达质粒pPICZaA-tdh,经限制性内切酶SacI线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris,P.pastor... 通过PCR技术从副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus,VP)基因组DNA上扩增耐热溶血素基因tdh,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建重组表达质粒pPICZaA-tdh,经限制性内切酶SacI线性化后电转化毕赤酵母(Pichia pastoris,P.pastoris)GS115,经PCR和测序鉴定耐热溶血素基因成功整合到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行tdh的表达,SDS-PAGE分析证明重组TDH(thermostable direct hemolysin,TDH)的分子质量约为23ku,经Western blotting鉴定VP抗体能与表达的TDH发生特异反应,说明tdh基因在毕赤酵母中的表达是准确的。溶血实验证明了表达的TDH具有溶血活性。本研究首次应用毕赤酵母表达耐热溶血素基因tdh,在培养基中获得分泌表达的耐热溶血素,为研究tdh基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 耐热溶血 分泌表达 毕赤酵母 溶血活性
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乙醇促进副溶血性弧菌直接耐热溶血素的基因表达 被引量:2
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作者 吴葵 吴清平 +1 位作者 张菊梅 乐贤松 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第5期43-48 123,123,共7页
研究乙醇对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)直接耐热溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)产生和它的编码基因tdh表达的影响。以0.5%、1.0%、2.0%、4.0%、8.0%乙醇处理2株带有tdh副溶血性弧菌ATCC33847和SZ32,研究对副溶... 研究乙醇对副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)直接耐热溶血素(thermostable direct hemolysin,TDH)产生和它的编码基因tdh表达的影响。以0.5%、1.0%、2.0%、4.0%、8.0%乙醇处理2株带有tdh副溶血性弧菌ATCC33847和SZ32,研究对副溶血性弧菌有氧或者无氧生长的影响。选取1.0%乙醇处理来研究TDH产量和tdh表达变化。使用TDH抗血清试剂盒测定副溶血性弧菌培养液上清中TDH水平;使用荧光定量PCR方法分析tdh基因表达状况。低浓度(0.5%、1.0%、2.0%)乙醇存在时,副溶血弧菌菌株的生长未受到显著影响,乙醇浓度4.0%时副溶血性弧菌生长受到明显抑制,8%时未见有细菌生长。1.0%乙醇处理副溶血性弧菌培养液上清中TDH水平较未处理显著上升。胞内tdh表达水平升高,ATCC33847在有氧和无氧时分别升高到6.6倍和5.7倍,SZ32在有氧和无氧时分别升高到5.9倍和8.6倍。乙醇能够促进tdh基因表达从而使得TDH蛋白产量升高。本研究还比较了甲醇、乙醇、正丙醇对tdh表达的影响,发现它们对tdh表达均具有促进作用但相互之间没有明显差异。 展开更多
关键词 乙醇 副溶血性弧菌 直接耐热溶血
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