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题名结合流式细胞仪检测技术的菌体原位PCR扩增
被引量：5
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作者
吴彩云
蔡俊鹏
杨汝德
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机构
华南理工大学食品与生物工程学院
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期399-401,共3页
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基金
国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 0 70 5 91)~~
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文摘
建立一套原位PCR检测方法 ,联合流式细胞仪作为检测工具 ,作为基因水平转移研究中的基因监控手段。通过常规PCR反应以确定靶基因的基本扩增参数 ;细菌菌体经过多聚甲醛PBS液固定和溶菌酶处理后进行原位PCR扩增 ,产物洗涤后迅速用流式细胞仪进行荧光检测 ,并辅以荧光显微镜镜检。扩增样品在荧光显微镜的蓝光激发下发出明亮的黄绿色荧光 ,与空白对照中的无扩增菌体的自发荧光可明显区分。流式细胞仪检测结果也显示 ,阴性菌与阳性菌的荧光强度有明显区别。完成了对目标细菌的原位PCR扩增 ,并成功地应用流式细胞仪对原位PCR扩增菌体实施了检测。由此表明isPCR
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关键词
原位聚合酶链式反应(isPCR)
流式细胞仪
副溶血弧菌(Vp)
耐热的直接溶血素基因(tdh)
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Keywords
In situ PCR (isPCR), Flow cytometry, Vibrio parahaemolyticus, Thermostable direct haemolysin(tdh)
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分类号
Q819
[生物学—生物工程]
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