不同强度运动干预2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的变化

1

作者 胡淑娟 程平 +4 位作者 张啸 丁一庭 刘璇 蒲锐 汪献旺 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期269-278,共10页

背景:羧酸酯酶1及炎症因子在调节脂质代谢以及葡萄糖稳态方面起着至关重要的作用,然而有关不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响尚待揭示。目的:探究不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症... 背景:羧酸酯酶1及炎症因子在调节脂质代谢以及葡萄糖稳态方面起着至关重要的作用,然而有关不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响尚待揭示。目的:探究不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响。方法:取32只8周龄雄性SD大鼠,适应性喂养1周后随机分为正常对照组(n=12)和造模组(n=20),造模组大鼠利用高脂膳食和一次性注射链脲佐菌素制备2型糖尿病模型,建模成功后随机分为糖尿病对照组(n=6)、中等强度运动组(n=6)和高强度间歇运动组(n=6),后2组适应性跑台运动5 d后分别进行对应强度的跑台运动,每天1次,每次50 min,每周训练5 d。连续运动6周后,检测大鼠血糖与血脂相关指标,苏木精-伊红染色观察骨骼肌组织形态学变化,qRT-PCR检测骨骼肌羧酸酯酶1与炎症因子的mRNA表达,Western-blotting及免疫荧光染色检测骨骼肌中羧酸酯酶1与炎症因子的蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组相比,糖尿病对照组大鼠空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数均升高(P<0.05),胰岛素活性降低(P<0.05),骨骼肌中的羧酸酯酶1、NEK7、白细胞介素18的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05)。②与糖尿病对照组相比,中等强度运动组和高强度间歇运动组大鼠空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数均降低(P<0.05),胰岛素活性升高(P<0.05);中等强度运动组大鼠骨骼肌中的NEK7 mRNA表达降低(P<0.01),羧酸酯酶1、NEK7、白细胞介素18蛋白表达降低(P<0.05);高强度间歇运动组大鼠骨骼肌中的羧酸酯酶1、NEK7、NLRP3、白细胞介素18 mRNA表达降低(P<0.05),羧酸酯酶1、白细胞介素18蛋白表达降低(P<0.05)。③苏木精-伊红染色显示,相较于糖尿病对照组,中等强度运动组大鼠肌纤维间隙变小,内部空洞减少,细胞结构趋于完整;高强度间� 展开更多

关键词 中等强度有氧运动 高强度间歇运动 2型糖尿病 羧酸酯酶1 炎症因子

ATP结合盒转运蛋白B1与羧酸酯酶1基因多态性对达比加群酯药物谷浓度的影响 被引量：1

2

作者 张咪 陈婷 +2 位作者 刘志宏 宋洪涛 胡涛桃 《解放军药学学报》 CAS 2023年第2期100-106,共7页

目的探讨ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)及羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与服用达比加群酯的患者药物谷浓度的相关性。方法选取2018年3月-2021年11月在福州某医院诊断为非瓣膜性房颤的69例患者作为研究对象。检测患者ABCB1及CES1的单核苷酸多... 目的探讨ATP结合盒转运蛋白B1(ABCB1)及羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与服用达比加群酯的患者药物谷浓度的相关性。方法选取2018年3月-2021年11月在福州某医院诊断为非瓣膜性房颤的69例患者作为研究对象。检测患者ABCB1及CES1的单核苷酸多态性位点以及基因型,采用抗Ⅱa因子显色法测定患者服用达比加群酯后药物的谷浓度,分析ABCB1及CES1基因多态性与谷浓度的相关性,进一步研究相关位点对谷浓度达标的影响。结果本研究共发现11个单核苷酸多态性位点,且ABCB1 rs2235013与ABCB1 rs2235033处于连锁不平衡状态(D’=0.96,r2=0.82)。但ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度无显著影响(P>0.05)。CES1 rs2302719突变型(TG,GG)患者的达比加群谷浓度高于野生型(TT)(51.98±8.06 vs 42.44±3.88,57.71±9.06 vs 42.44±3.88),并且CES1 rs2302719突变型(TG,GG)是患者谷浓度达标的保护因素,结果具有统计学意义(P<0.05)。结论ABCB1基因多态性对达比加群谷浓度的影响还需进一步探索。CES1 rs2302719次要等位基因(G)可增加达比加群谷浓度,并且不良反应的发生率可能更低。 展开更多

关键词 非瓣膜性房颤 达比加群酯 药物谷浓度 ATP结合盒转运蛋白B1 羧酸酯酶1

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羧酸酯酶1和2基因多态性在药物代谢中的研究进展 被引量：4

3

作者 刘帅兵 缪丽燕 《中国临床药学杂志》 CAS 2015年第3期206-210,共5页

人类羧酸酯酶属于α/β水解酶家族,负责许多内源性和外源性化合物的水解,广泛位于药物代谢的主要组织,例如肝脏和小肠等。人羧酸酯酶主要有羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)。单核苷酸多态性(SNPs)对药物代谢酶的表达和(或)活性有重要的影响,... 人类羧酸酯酶属于α/β水解酶家族,负责许多内源性和外源性化合物的水解,广泛位于药物代谢的主要组织,例如肝脏和小肠等。人羧酸酯酶主要有羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)。单核苷酸多态性(SNPs)对药物代谢酶的表达和(或)活性有重要的影响,这可能解释部分药物反应的个体差异。本篇综述主要介绍了由CES1和CES2单核苷酸多态性导致的CES酶多态性。对于含有酯键的药物,一些有意义的SNP可能影响CES酶的功能从而影响其药动学,进而对其药理和毒理作用发挥重要影响。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 羧酸酯酶2 药物代谢 单核苷酸多态性

原文传递

CES1基因多态性影响达比加群酯血药浓度及有效性与安全性的研究

4

作者 李菁冉 阎雨 《海峡药学》 2023年第1期64-69,共6页

目的评估CES1基因多态性与口服达比加群酯后达比加群血药浓度及有效性、安全性的相关性,为临床提供循证依据,促进药物合理使用与上市后风险管理。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方和中国生物医学文... 目的评估CES1基因多态性与口服达比加群酯后达比加群血药浓度及有效性、安全性的相关性,为临床提供循证依据,促进药物合理使用与上市后风险管理。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方和中国生物医学文献(CBM)数据库,检索日期截自建库至2022年7月9日。按纳入、排除标准筛选文献,提取资料。结果共纳入9项研究,其中7项研究对象为长期服用达比加群酯患者(2560例患者),2项为单剂量生物等效性临床研究(188名健康志愿者)。结论中国人群CES1 rs2244613和rs8192935等位基因频率与欧洲人群均有较大差异。CES1 rs2244613次要等位基因携带者(AC或CC型)相比非携带者(AA型),达比加群血药浓度降低,C/D值降低,出血风险显著降低;CES1 rs8192935次要等位基因携带者(CT或TT型)相比非携带者(CC型)达比加群血药浓度降低。CES1基因多态性与达比加群酯疗效无显著相关性。 展开更多

关键词 达比加群酯 羧酸酯酶1 基因多态性 血药浓度 有效性 安全性

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调血脂类中药及中药单体对羧酸酯酶1体外活性抑制作用研究 被引量：4

5

作者 王汇滨 许汉卿 +5 位作者 马佳睿 张昕彤 贺智承 于青 邹立伟 刘东春 《中国现代中药》 CAS 2021年第7期1240-1244,共5页

目的:采用羧酸酯酶1(hCE1)特异性化学发光探针D-荧光素甲基醚(DME),在人肝微粒体(HLM)体系中测定18种调血脂类中药及12种中药单体对hCE1活性的抑制作用。方法:在HLM体系中,取不同中药饮片70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取层(简称酯层)与残... 目的:采用羧酸酯酶1(hCE1)特异性化学发光探针D-荧光素甲基醚(DME),在人肝微粒体(HLM)体系中测定18种调血脂类中药及12种中药单体对hCE1活性的抑制作用。方法:在HLM体系中,取不同中药饮片70%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取层(简称酯层)与残留水层及中药单体化合物,分别与hCE1特异性探针DME在37℃条件下共同孵育,通过测定探针底物代谢产物的相对光单位(RLU)值计算酶活力(Eres),判断提取物及中药单体对hCE1的抑制程度。结果:绿茶酯层、女贞子水层、干姜酯层、甘草次酸、胡椒水层、决明子水层、红花酯层、决明子酯层、柴胡水层、制何首乌水层、胡椒酯层、蒲黄酯层对hCE1有较强的抑制作用(Eres<20%),质量浓度为20μg·mL–1时hCE1酶活力分别为0.35%、0.89%、3.69%、5.26%、5.64%、6.34%、7.79%、12.04%、13.70%、15.35%、16.66%、18.89%。结论:绿茶、女贞子、干姜、甘草、胡椒、决明子、红花、柴胡、制何首乌、蒲黄中的化学成分对hCE1有较强的抑制作用。服用这些药物或食物,如饮茶时,需要注意其羧酸酯酶抑制作用会影响hCE1参与代谢的药物的血药浓度及药效。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 D-荧光素甲基醚 高脂血症 人肝微粒体 用药安全

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羧酸酯酶1基因多态性在药物反应性中的研究进展

6

作者 杨婉花 刘亮明 《医学综述》 CAS 2023年第16期3134-3139,共6页

哺乳动物羧酸酯酶(CES)是丝氨酸水解酶超家族的关键酶,其中CES1可直接影响多种内源性酯类、含酯类药物的代谢结果。经过CES1代谢的酯类药物的疗效存在显著个体差异,主要表现为同样的药物剂量在不同的患者应用中可能有效或无效,甚至出现... 哺乳动物羧酸酯酶(CES)是丝氨酸水解酶超家族的关键酶,其中CES1可直接影响多种内源性酯类、含酯类药物的代谢结果。经过CES1代谢的酯类药物的疗效存在显著个体差异,主要表现为同样的药物剂量在不同的患者应用中可能有效或无效,甚至出现不良反应,而药物反应性不同与CES基因多态性密切相关。因此,遗传学和代谢学的组合研究在患者的药物精准治疗中具有指导意义,而细化CES1基因分型在提高患者药物治疗的有效性、避免不良反应方面具有重要的预测意义。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 基因多态性 药物代谢 药物反应性

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羧酸酯酶单核苷酸多态性与个体化药物治疗的研究进展 被引量：2

7

作者 徐艳娇 杨金玉 +2 位作者 余早勤 张程亮 刘东 《中南药学》 CAS 2017年第8期1106-1110,共5页

人类羧酸酯酶(carboxylesterases,CESs)属于丝氨酸酯酶超家族,在人体中主要包含羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)2种亚型。CES负责多种药物的代谢,如部分血小板凝集抑制剂、精神兴奋剂、抗肿瘤药等,由于CES的单核苷酸多态性(SNP)在人类基因组... 人类羧酸酯酶(carboxylesterases,CESs)属于丝氨酸酯酶超家族,在人体中主要包含羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)2种亚型。CES负责多种药物的代谢,如部分血小板凝集抑制剂、精神兴奋剂、抗肿瘤药等,由于CES的单核苷酸多态性(SNP)在人类基因组中广泛存在,其对药物代谢酶基因的表达和(或)酶活性的高低有着重要影响,从而最终影响着药物在体内的代谢过程。本文综述了CES1和CES2相关SNP所致酶活性的改变,以及由于其多态性导致代谢药物体内过程改变的相关药物基因组学研究,以期为临床治疗和研究提供参考。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 羧酸酯酶2 药物代谢 单核苷酸多态性

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基于BODIPY母核的羧酸酯酶1特异性荧光探针底物的设计研发 被引量：3

8

作者 丁乐乐 田镇豪 +4 位作者 侯洁 翁仔淼 崔京南 杨凌 葛广波 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期58-65,共8页

羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CE1)是哺乳动物体内分布的一种重要的丝氨酸水解酶,广泛参与多种内外源性酯类化合物(包括胆固醇酯等内源物,以及酯类药物及杀虫剂等外源物)的水解代谢。本研究基于人羧酸酯酶1(hCE1)偏好底物的结构特征,选... 羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CE1)是哺乳动物体内分布的一种重要的丝氨酸水解酶,广泛参与多种内外源性酯类化合物(包括胆固醇酯等内源物,以及酯类药物及杀虫剂等外源物)的水解代谢。本研究基于人羧酸酯酶1(hCE1)偏好底物的结构特征,选取8-羧酸-BODIPY为荧光母核,设计合成了4种BODIPY-8-羧酸酯衍生物,进而通过单酶筛选和酶抑制实验考察了hCE1催化4种酯类底物的特异性。研究发现,BODIPY-8-羧酸酯的醇基部分越小,hCE1对底物的选择性越高,BODIPY-8-羧酸甲酯(BCM)和BODIPY-8-羧酸乙酯(BCE)均可以作为hCE1的特异性荧光探针底物。在此基础上,选择了水解速率更快的BCM为hCE1探针底物,进一步考察了BCM在人肝微粒体(HLM)和hCE1单酶中的水解动力学,并借助该底物开展了hCE1抑制剂的高效表征研究。研究发现BCM在HLM和hCE1中的酶动力学行为及K_m值非常接近,表明hCE1是HLM中参与BCM水解的主要代谢酶。此外,抑制剂表征实验表明BCM可用于hCE1抑制剂的高效筛选与评价,且可用HLM代替hCE1单酶进行酶抑制剂的筛选与评价。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 BODIPY母核 荧光探针 特异性 抑制剂筛选

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氯吡格雷的体外相互作用研究 被引量：1

9

作者 刘帅兵 丁肖梁 +3 位作者 黄晨蓉 薛领 王子腾 缪丽燕 《中国血液流变学杂志》 CAS 2014年第1期12-15,173,共5页

目的：考察临床常与氯吡格雷合用的CYP2C19及羧酸酯酶1（CES1）的底物药物对氯吡格雷体外代谢的影响，以期为临床上氯吡格雷的合理使用提供科学依据。方法选择CYP2C19底物（奥美拉唑）和CES1底物（依那普利、奥司他韦、辛伐他汀、罗格... 目的：考察临床常与氯吡格雷合用的CYP2C19及羧酸酯酶1（CES1）的底物药物对氯吡格雷体外代谢的影响，以期为临床上氯吡格雷的合理使用提供科学依据。方法选择CYP2C19底物（奥美拉唑）和CES1底物（依那普利、奥司他韦、辛伐他汀、罗格列酮、氟西汀），通过体外人肝微粒体代谢试验研究其与氯吡格雷代谢相互作用，采用LC-MS/MS法测定微粒体酶孵育体系中氯吡格雷非活性和活性代谢产物的浓度。结果奥美拉唑显著抑制氯吡格雷活性代谢产物的生成（P＜0.05），辛伐他汀对活性及非活性代谢产物的生成均有不同程度的抑制作用，其他CES1底物对氯吡格雷活性和非活性代谢产物的产生无影响（P＞0.05）。结论奥美拉唑、辛伐他汀对氯吡格雷有不同程度的代谢抑制作用，临床上氯吡格雷与上述药物合用时可能需要考虑其相互作用。 展开更多

关键词 液相色谱-串联质谱 CYP2C19 羧酸酯酶1 氯吡格雷 人肝微粒体 相互作用

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羧酸酯酶1及其在肝脏代谢性疾病中的作用 被引量：1

10

作者 杨雪 刘亮明 《医学分子生物学杂志》 CAS 2020年第2期168-172,共5页

羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CES1)是丝氨酸水解酶多基因超家族的一员,在肝脏内高度表达。CES1参与了肝内许多物质代谢反应,如参与内源性物质包括胆固醇酯、甘油三酯等的水解反应,催化水解多种外源性物质诸如某些临床药物和环境毒素,... 羧酸酯酶1(carboxylesterase 1,CES1)是丝氨酸水解酶多基因超家族的一员,在肝脏内高度表达。CES1参与了肝内许多物质代谢反应,如参与内源性物质包括胆固醇酯、甘油三酯等的水解反应,催化水解多种外源性物质诸如某些临床药物和环境毒素,并在机体的防御体系中有重要作用。近年研究提示CES1还与许多肝脏疾病相关,包括酒精性肝损伤、非酒精性肝脂肪变性及肝癌等。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 酒精性肝损伤 非酒精性肝脂肪变性 肝癌 脂代谢 药物代谢

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基于核心家系的CES1基因多态性与非综合征型唇腭裂易感性的关联分析 被引量：1

11

作者 蒙宁 牟云 +3 位作者 于大海 陈凤强 陆树健 章鉴玮 《广西医科大学学报》 CAS 2014年第5期759-761,共3页

目的:利用以核心家系为基础的关联分析,探讨唇腭裂候选基因羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与非综合征型唇腭裂(NSCL/P)易感性的关系。方法:收集12例完整的患儿-健康父母3人核心家系(包含12例患儿组,24例父母组)作为研究对象,运用家系分析(FB... 目的:利用以核心家系为基础的关联分析,探讨唇腭裂候选基因羧酸酯酶1(CES1)基因多态性与非综合征型唇腭裂(NSCL/P)易感性的关系。方法:收集12例完整的患儿-健康父母3人核心家系(包含12例患儿组,24例父母组)作为研究对象,运用家系分析(FBAT)软件分析CES1基因多态性与NSCL/P易感性之间的关联性。结果:在FBAT检验的累加模式、显性模式以及隐性模式下均未显示CES1单核苷酸多态性位点(SNP)等位基因的分布与NSCL/P存在遗传学关联,FBAT累加模式下(A:Z=-0.229,P=0.819;G:Z=0.229,P=0.819)显性模式下(G:Z=-0.333,P=0.739)隐性模式下(A:Z=0.333,P=0.739)。结论:虽然全基因关联性分析发现参与肝脏解毒功能主要基因CES1与唇腭裂的发生有关,但是通过FBAT分析CES1等位基因与唇腭裂无遗传学关联。该基因突变可能是随机产生的,具有这些基因突变的个体,可能对环境因素中化学毒物的敏感性增加,导致唇腭裂的产生。 展开更多

关键词 非综合征型唇腭裂 羧酸酯酶1 单核苷酸多态性 家系分析

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普鲁卡因胺经羧酸酯酶1对咪达普利代谢的影响 被引量：1

12

作者 刘东 徐艳娇 +2 位作者 任秀华 向道春 张程亮 《中国药师》 CAS 2011年第1期6-8,共3页

目的:研究普鲁卡因胺经羧酸酯酶1(CES1)影响咪达普利代谢的作用。方法:进行体外大鼠肝微粒体酶孵育实验,通过测定CES1特异性底物咪达普利的代谢产物咪达普利拉的含量,来研究普鲁卡因胺对CES1活性的影响;将12只SD大鼠随机分为两组,分别... 目的:研究普鲁卡因胺经羧酸酯酶1(CES1)影响咪达普利代谢的作用。方法:进行体外大鼠肝微粒体酶孵育实验,通过测定CES1特异性底物咪达普利的代谢产物咪达普利拉的含量,来研究普鲁卡因胺对CES1活性的影响;将12只SD大鼠随机分为两组,分别给予生理盐水和普鲁卡因胺(50mg·kg^(-1)),连续4 d,随后灌胃给予咪达普利(10mg·kg^(-1)),于给药后不同时间点采集血样,采用LC-MS/MS法测定血浆中咪达普利拉的含量,计算药动学参数,来研究普鲁卡因胺对咪达普利在大鼠体内代谢的影响。结果:在体外研究中,普鲁卡因胺对CES1的调节呈现剂量依赖型抑制特征。体内研究发现,普鲁卡因胺显著降低咪达普利拉AUC_(0-24h),AUC_(0-∞)和C_(max)。结论:普鲁卡因胺显著抑制CES1的活性,从而抑制咪达普利拉的形成,对酯类前药代谢的研究有一定的意义。 展开更多

关键词 羧酸酯酶1 普鲁卡因胺 咪达普利 代谢

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达比加群酯抗凝治疗与基因多态性研究进展 被引量：7

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作者 王玮 周明礼 楚天舒 《心血管病学进展》 CAS 2018年第3期494-497,共4页

达比加群酯作为非瓣膜心房颤动抗凝治疗新型口服抗凝药,其抗凝作用与华法林相当,出血风险较华法林减少约20%,较华法林具有诸多优势;但达比加群酯抗凝治疗普遍存在个体差异,基因多态性对于达比加群酯的影响可能在于药物代谢及药物动力学... 达比加群酯作为非瓣膜心房颤动抗凝治疗新型口服抗凝药,其抗凝作用与华法林相当,出血风险较华法林减少约20%,较华法林具有诸多优势;但达比加群酯抗凝治疗普遍存在个体差异,基因多态性对于达比加群酯的影响可能在于药物代谢及药物动力学方面。CES1和ABCB1等位基因多态性与达比加群酯血药浓度相关,CES1 SNP rs2244613与谷浓度及出血事件相关,携带该等位基因的人群有较低的出血风险,因此CES1 SNP rs2244613是达比加群酯临床出血风险的决定因素。而CES1 SNP G143E对于达比加群酯活化是一种功能缺失型突变,这种突变会影响达比加群酯的激活从而影响达比加群酯的活性及相关不良事件的发生。因此在个体化治疗方案中,可基于基因多态性更好地提高达比加群酯疗效及安全性。 展开更多

关键词 达比加群酯 羧酸酯酶1、2 基因多态性 谷浓度 峰浓度

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人羧酸酯酶1结构和功能的研究进展 被引量：5

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作者 童金英 易银沙 +3 位作者 曹蓬荣 刘彩云 王雷 吕媛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1414-1422,共9页

人羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,HCE1)是丝氨酸水解酶多基因家族的重要成员之一,它是一种参与肝脏外源物质解毒及代谢的肝羧酸酯酶。HCE1还能参与人体内胆固醇酯和游离脂肪酸的运输和代谢过程,与肝细胞肝癌的发生发展密切相关。... 人羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,HCE1)是丝氨酸水解酶多基因家族的重要成员之一,它是一种参与肝脏外源物质解毒及代谢的肝羧酸酯酶。HCE1还能参与人体内胆固醇酯和游离脂肪酸的运输和代谢过程,与肝细胞肝癌的发生发展密切相关。文中就近十年来人羧酸酯酶1的分子结构、药物代谢、毒物代谢、脂质代谢及早期诊断肝细胞肝癌等功能方面的相关研究进展进行综述。 展开更多

关键词 人羧酸酯酶1 药物代谢 毒物代谢 脂质代谢 诊断标志物

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活体靶向羧酸酯酶1f基因敲减对急性肝衰竭小鼠枯否细胞极化活性的影响

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作者 赵赛 杨雪 +1 位作者 于倩 刘亮明 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期582-588,共7页

目的探讨靶向羧酸酯酶1f(Ces1f)基因敲减对脂多糖/D-半乳糖胺(LPS/D-GalN)诱导的急性肝衰竭小鼠枯否细胞(KC)极化活性的影响。方法将携带靶向Ces1f干扰序列的小RNA(siRNA)与多肽转运载体(Endoporter)结合形成的复合物siRNA-EndoPorter... 目的探讨靶向羧酸酯酶1f(Ces1f)基因敲减对脂多糖/D-半乳糖胺(LPS/D-GalN)诱导的急性肝衰竭小鼠枯否细胞(KC)极化活性的影响。方法将携带靶向Ces1f干扰序列的小RNA(siRNA)与多肽转运载体(Endoporter)结合形成的复合物siRNA-EndoPorter包裹在β-1,3-D葡聚糖壳中形成复合体颗粒(GeRPs)。将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组(LPS/D-GalN)、预处理组(GeRPs)、预处理模型组(GeRPs+LPS/D-GalN)、空载体组(EndoPorter)。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹(western blot)技术检测各组小鼠肝组织Ces1f mRNA及蛋白表达水平;采用实时荧光定量PCR技术检测各组小鼠KC M1极化表型分化簇86(CD86)mRNA以及KC M2极化表型分化簇163(CD163)mRNA表达水平;采用免疫荧光双染技术检测KC中Ces1f蛋白以及M1/M2极化表型CD86/CD163蛋白表达情况;采用苏木精-伊红染色观察肝组织病理损伤情况。多组间均数比较采用单因素方差分析,或方差不齐时采用独立样本非参数秩和检验。结果正常对照组与模型组、预处理组和预处理模型组肝组织Ces1f mRNA/蛋白相对表达水平分别为:1.00±0.00、0.80±0.03/0.80±0.14、0.56±0.08/0.52±0.13、0.26±0.05/0.29±0.13,各组间差异均有统计学意义(F值分别为9.171/3.957、20.740/9.315、34.530/13.830,P值均<0.01)。正常对照组与模型组、预处理组和预处理模型组KC Ces1f阳性细胞百分比分别为91.42%±3.79%、73.85%±7.03%、48.70%±5.30%、25.68%±4.55%,各组间差异均有统计学意义(F值分别为6.333、15.400、23.700,P值均<0.01)。正常对照组与模型组、预处理模型组CD86 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、2.01±0.04、4.17±0.14,各组间差异均有统计学意义(F值分别为33.800、106.500,P值均<0.01)。正常对照组与模型组、预处理模型组CD163 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、0.85±0.01、0.65±0.01,各组间差异均有统计学意义(F值分别为23.360、55.350,P值均<0.01)。正� 展开更多

关键词 肝衰竭 羧酸酯酶1f 枯否细胞极化 活体基因敲减

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荧光检测人羧酸酯酶的研究进展 被引量：2

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作者 张同艳 王文爽 +2 位作者 钱恒玉 尹志刚 葛广波 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期627-631,共5页

羧酸酯酶是丝氨酸酯酶大家族的一员,它们主要是对脂类物质起水解作用,其活性直接与许多的疾病相关,人体中主要存在人羧酸酯酶1和人羧酸酯酶2。因此,在检测酶活性方面受到了广大研究者的青睐。传统的检测方法过程繁琐,费时费力,设备昂贵... 羧酸酯酶是丝氨酸酯酶大家族的一员,它们主要是对脂类物质起水解作用,其活性直接与许多的疾病相关,人体中主要存在人羧酸酯酶1和人羧酸酯酶2。因此,在检测酶活性方面受到了广大研究者的青睐。传统的检测方法过程繁琐,费时费力,设备昂贵,检测不出酶的活性。近年来荧光探针技术成为测量生物样本中人羧酸酯酶1、人羧酸酯酶2真实活性的实用、敏感、高选择性、高精确度的检测方法。本文主要针对近年来用于检测酶活性的荧光探针进行总结。 展开更多

关键词 人羧酸酯酶1 人羧酸酯酶2 荧光探针 研究进展

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肝细胞癌中差异表达N-连接糖蛋白的分析鉴定 被引量：3

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作者 马瑾 齐义军 +4 位作者 刘瑞敏 王明 张天 朱晗 马远方 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期493-499,共7页

目的分析鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达的N-连接糖蛋白。方法应用刀豆蛋白凝集素(ConA)、晶状体凝集素(LCH)和雪花凝集素(GNA)组成的亲合层析柱富集10对HCC和癌旁非癌组织中N-连接糖蛋白、二维电泳(2DE)比较分析差异表达... 目的分析鉴定与肝细胞癌(HCC)发生发展相关的差异表达的N-连接糖蛋白。方法应用刀豆蛋白凝集素(ConA)、晶状体凝集素(LCH)和雪花凝集素(GNA)组成的亲合层析柱富集10对HCC和癌旁非癌组织中N-连接糖蛋白、二维电泳(2DE)比较分析差异表达的蛋白质点、串联质谱鉴定差异表达蛋白,Western blotting验证人羧酸酯酶1(hCE1)、触珠蛋白(HP)及组织蛋白酶D(CD)的差异表达;体外侵袭实验检测CD表达沉默后对HCC的侵袭力影响。结果质谱、生物信息学等技术鉴定了28个与HCC相关的差异表达蛋白(HCC中高表达和低表达的蛋白均为14个),Western blotting验证hCE1、HP在HCC中明显低表达,组织蛋白酶D前体(pCD)在HCC中高表达;而ConA亲和层析柱富集的ConA-CD在HCC中显著高表达。CD-siRNA介导的CD表达沉默能够显著降低肝癌细胞系SNU449、SNU473的体外侵袭能力。结论 HP、hCE1蛋白表达变化和CD N-糖链变异可能参与了HCC发生发展过程。 展开更多

关键词 原发性肝癌 糖蛋白 组织蛋白酶D 触珠蛋白 人羧酸酯酶1 二维电泳 质谱 人

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脂多糖促进H_2O_2降低羧酸酯酶1/2活性抑制肝癌HepG2细胞存活

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作者 方坤 呼晓 齐玉山 《牡丹江医学院学报》 2017年第6期4-8,共5页

目的阐明LPS对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及其潜在机理。研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝癌HepG2细胞中羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,CES1)、羧酸酯酶2(Human carboxylesterase 2,CES2)活性和表达的影响。方法 MT... 目的阐明LPS对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及其潜在机理。研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝癌HepG2细胞中羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,CES1)、羧酸酯酶2(Human carboxylesterase 2,CES2)活性和表达的影响。方法 MTT检测不同剂量LPS(0mg/L,1.0mg/L,3.0mg/L,5.0mg/L,10.0mg/L)与H_2O_2(0.5mm)分别处理或共孵育12h,24h,48h对细胞增殖的影响。采用Tunel技术检测LPS对细胞凋亡的影响。酶学测定LPS对HepG2细胞中HCEs酶活性的影响。采用Real-time PCR和Western blot检测HepG2细胞中CES1、CES2在mRNA水平和蛋白水平变化。结果 LPS和H_2O_2(0.5mm)单独处理对HepG2细胞增殖和凋亡无显著影响。LPS与H_2O_2(0.5mm)共孵育剂量依赖性的降低HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,降低HCEs酶活性。此外,LPS和H_2O_2(0.5mm)共孵育可明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的mRNA和蛋白水平的表达,降低趋势呈现剂量-效应关系。结论我们发现LPS和H_2O_2(0.5mm)共孵育能够显著降低细胞增殖,促进细胞凋亡。此机制可能与LPS明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的表达和活性有关。提示肝肿瘤细胞在炎症状态下,羧酸酯酶对药物代谢的能力下降。本研究为临床肝癌治疗提供新的理论依据和治疗靶点。 展开更多

关键词 脂多糖(LPS) 肝癌HepG2细胞(HepG2) 羧酸酯酶1(CES1) 羧酸酯酶2(CES2)

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猪肝羧酸酯酶1基因的克隆和在原核细胞中的功能性表达

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作者 肖启玲 李朋辉 +7 位作者 闫秉芳 杨路 王喜亮 肖运才 李自力 刘梅 毕丁仁 石德时 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期650-656,共7页

为获得有活性的猪肝羧酸酯酶1(PLE1)并研究其功能,利用RT-PCR与常规PCR方法,从大白猪肝组织中扩增PLE1基因的ORF。将PLE1的ORF序列连接到pET15b原核表达载体,在Origami TM2(DE3)中与pGro7质粒共诱导表达,纯化目的蛋白质并检测其酶活性... 为获得有活性的猪肝羧酸酯酶1(PLE1)并研究其功能,利用RT-PCR与常规PCR方法,从大白猪肝组织中扩增PLE1基因的ORF。将PLE1的ORF序列连接到pET15b原核表达载体,在Origami TM2(DE3)中与pGro7质粒共诱导表达,纯化目的蛋白质并检测其酶活性。测序结果表明克隆到PLE1基因编码区全长1 686bp的片段,该片段编码562个氨基酸。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,PLE1融合蛋白质成功表达,在30℃的培养温度下,IPTG诱导6h后,PLE1重组蛋白质表达量最高,且大部分以可溶性形式存在。酶活性试验结果表明,PLE1融合蛋白质水解底物p-NPA的酶活力为1.24U。研究结果不仅为研究PLE1水解兽药特性提供高纯度的具有原有酶活性的重组蛋白质,也为PLE同工酶家族其他重要成员的活性功能研究提供理论依据和技术手段。 展开更多

关键词 猪肝羧酸酯酶1 功能性表达 活性检测

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羧酸酯酶基因1多态性鉴定及其与抗结核药物肝毒性相关性研究 被引量：9

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作者 吴雪琼 朱冬林 +5 位作者 张俊仙 钟逾 席云 安慧茹 梁艳 阳幼荣 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期524-530,共7页

目的研究羧酸酯酶（CES）基因1多态性及其与抗结核药物肝毒性易感性之间的关系。方法应用PCR一时间飞行质谱技术（PCR．MassArray）分析473例抗结核治疗后发生肝损害（200例）和未发生肝损害（273例）结核病患者的CES1基因多态性，并通... 目的研究羧酸酯酶（CES）基因1多态性及其与抗结核药物肝毒性易感性之间的关系。方法应用PCR一时间飞行质谱技术（PCR．MassArray）分析473例抗结核治疗后发生肝损害（200例）和未发生肝损害（273例）结核病患者的CES1基因多态性，并通过统计学分析CESl各单核苷酸多态性（SNP）位点基因型与抗结核药物所致肝毒性之间的关系。结果在筛选出的4个CESl标签SNP位点中，rs1968753的等位基因频率在肝损害和无肝损害组间存在分布差异（P=0．0236）。SNP1rs8192950（P=0．044，OR=0．649，95％CI=0．426—0．989，AC／AA）和SNP2rs1968753（P=0．048，OR：0．556，95％CI=0．311～0．995，GG／AA）与抗肝毒特性有显著关联。由‘CGC’参与构成的双单体型，在1份拷贝时表现出显著的肝毒保护性（P=0．048，OR=0．654，95％CI=0．430—0．996）。结论CES1基因多态性可能与抗结核药物性肝损害密切相关，SNPrs8192950的AC基因型和rs1968753的GG基因型可能成为抗结核药物肝毒性风险预测的候选突变。 展开更多

关键词 结核 肝损害 羧酸酯酶基因1 基因多态性

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