目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希...目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法，评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原，其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42％。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性，可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。展开更多
文摘目的：构建人羧基肽酶 H 不同区段抗原的原核表达载体，诱导表达获得重组蛋白，初步验证人羧基肽酶 H 不同抗原区段在羧基肽酶 H 自身抗体检测中的应用价值。方法应用 RT-PCR 方法调取目的基因，构建相应的原核表达质粒，转化大肠埃希氏菌诱导表达重组蛋白，用重组蛋白作为包被抗原建立人羧基肽酶 H 自身抗体的间接 ELISA 方法，评价羧基肽酶 H 抗原在检测新诊断2型糖尿病患者抗羧基肽酶 H 自身抗体中的应用价值。结果获得了羧基肽酶 H 三种不同区段抗原，其中42～476氨基酸区段为较理想的抗原。以该全长抗原作为包被抗原检测95例新诊断2型糖尿病患者，羧基肽酶 H 自身抗体阳性率为8.42％。结论原核克隆表达的人羧基肽酶 H 42～476氨基酸区段抗原具有良好的抗原性，可作为成人隐匿性自身免疫性糖尿病鉴别诊断的候选抗原。
