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鉴别牛结节性皮肤病病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量：1
1
作者 赵钟毅 闭璟珊 +11 位作者 尹德玮 吕荞 吴健皓 韦正吉 邹联斌 苏姣秀 汪伟 辛佳亮 彭久青 李文静 郑敏 胡传活 《中国动物检疫》 CAS 2023年第2期117-124,共8页
为实现牛结节性皮肤病病毒(LSDV)和羊痘病毒属(CaPV)其他成员的鉴别诊断,针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合,通过优化反应体系和条件,建立了一种可同时鉴别检测LSDV和C... 为实现牛结节性皮肤病病毒(LSDV)和羊痘病毒属(CaPV)其他成员的鉴别诊断,针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合,通过优化反应体系和条件,建立了一种可同时鉴别检测LSDV和CaPV其他成员的双重荧光定量PCR检测方法。结果显示:本方法可以特异性扩增LSDV和CaPV其他成员,并且与其他牛、羊病毒无交叉反应,特异性好;对pLSDV-010和pCaPV-068质粒标准品的最低检测限均为15 copies/μL,具有较高的灵敏性;组内和组间变异系数均小于1.75%,重复性良好。应用本试验建立的方法与荧光定量PCR方法同时检测542份临床样品,发现CaPV的样品符合率为98.52%,LSDV为99.63%。本试验建立的方法为CaPV鉴别筛查、LSDV精准防控及流行病学调查提供了快捷有效的技术手段。 展开更多
关键词 牛结节性皮肤病病毒 羊痘病毒属 双重荧光定量PCR TAQMAN探针 鉴别检测
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山羊痘病毒属病毒荧光LAMP检测方法的建立与应用 被引量：3
2
作者 程汝佳 吴迪 +7 位作者 张启龙 栗云鹏 刘海莹 刘晓冬 赵浩军 周德刚 韦海涛 王林 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2022年第11期92-99,共8页
旨在建立一种荧光LAMP快速检测方法用于检测羊痘病毒属病毒(CaPV)。根据羊痘病毒属病毒ORF068基因高度保守区域,设计特异性引物,优化反应温度、反应时间,进行特异性及灵敏度验证,建立了一种基于SYTO9荧光染料的CaPV荧光LAMP快速检测方... 旨在建立一种荧光LAMP快速检测方法用于检测羊痘病毒属病毒(CaPV)。根据羊痘病毒属病毒ORF068基因高度保守区域,设计特异性引物,优化反应温度、反应时间,进行特异性及灵敏度验证,建立了一种基于SYTO9荧光染料的CaPV荧光LAMP快速检测方法。结果表明,在60℃下扩增40 min为最适反应条件,最低检测限为3 copies/μL,与小反刍兽疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、口蹄疫病毒均无交叉反应,变异系数低于5%。选取36份模拟样品,采用该方法和实时荧光PCR方法一起对其进行检测,均检出阳性26份,其结果符合率为100%。本研究所建立的CaPV荧光LAMP检测方法灵敏度高、特异性好、操作简便,40 min内即判定结果,可用于临床CaPV感染的快速诊断,为开展相关疾病流行病学研究提供了技术支持,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 羊痘病毒属 荧光 环介导等温扩增技术
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羊痘病毒属病毒通用Cycleave PCR检测方法的建立
3
作者 南文龙 巩明霞 +8 位作者 陆游 李金明 王永杰 哈达 吴发兴 李林 王英丽 陈义平 吴晓东 《中国动物检疫》 CAS 2022年第8期107-111,共5页
为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在4... 为快速特异检测羊痘病毒属病毒(CaPVs),比较了牛结节性皮肤病病毒(LSDV)、山羊痘病毒(GTPV)和绵羊痘病毒(SSPV)的全基因组序列,选择保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种CaPVs通用的Cycleave PCR检测方法。特异性结果显示,该方法在40 min内即可检出CaPVs,与口蹄疫病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒均无交叉反应;灵敏性结果显示,最低检出限为4.98 copies/μL;重复性结果显示,批内和批间重复变异系数均小于2%。对131份临床样本进行检测发现,该方法与世界动物卫生组织(WOAH)推荐的常规PCR方法相比,敏感性为100%,特异性为91.55%,总符合率为95.42%。以上结果表明,本研究建立的Cycleave PCR检测方法特异、敏感、重复性好,且操作简便,适用于CaPVs的高通量、快速检测。 展开更多
关键词 羊痘病毒属病毒 Cycleave PCR 检测
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羊痘疫病的发生与防治 被引量：2
4
作者 白仲乾 刘花祖 《中兽医学杂志》 2018年第4期66-66,共1页
羊痘分为绵羊痘和山羊痘,是由羊痘病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病,该病的传染性极强,被世界动物卫生组织《OIE疫病感染及侵染名录》列入其中~[1],在我国《一、二、三类动物疫病病种名录》（农业部第1125号公告）也将其列为Ⅰ... 羊痘分为绵羊痘和山羊痘,是由羊痘病毒引起的一种急性、热性、接触性传染病,该病的传染性极强,被世界动物卫生组织《OIE疫病感染及侵染名录》列入其中~[1],在我国《一、二、三类动物疫病病种名录》（农业部第1125号公告）也将其列为Ⅰ类动物疫病。羊感染痘病毒后,会在皮肤和黏膜上发生特异性痘疹,可见到典型的红斑、丘疹、水泡、脓疱和结痂、脱落等现象,常因继发感染使死亡率增加。 展开更多
关键词 羊痘病毒属
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