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羊布鲁菌16M Omp25真核表达载体的构建
被引量：
2
1
作者
屈海龙
王海浪
+4 位作者
陈思
张瑞
王秀然
钱晶
王兴龙
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期1848-1850,1854,共4页
利用聚合酶链式反应(PCR),以羊布鲁菌16M基因组为模板克隆Omp25基因,设计含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物序列,定向克隆到真核表达载体pCMV-HA上,构建真核表达重组质粒pCMV-HA-Omp25。经测序及双酶切验证正确,证明成功构建了pCMV-HA-Om...
利用聚合酶链式反应(PCR),以羊布鲁菌16M基因组为模板克隆Omp25基因,设计含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物序列,定向克隆到真核表达载体pCMV-HA上,构建真核表达重组质粒pCMV-HA-Omp25。经测序及双酶切验证正确,证明成功构建了pCMV-HA-Omp25真核表达质粒,为表达纯化外膜蛋白Omp25,研究其功能奠定基础。
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关键词
羊
布鲁
菌
16
M
Omp25
真核表达
原文传递
羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测
2
作者
屈海龙
王景龙
+5 位作者
李晓燕
张瑞
王秀然
陈思
钱晶
王兴龙
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1378-1382,共5页
利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有...
利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无自激活作用。结果表明,经序列测定证实重组诱饵质粒pSos-VjbR构建成功。重组质粒转化入酵母细胞后,经检测其表达产物对cdc25H(α)酵母细胞无毒性作用,对报告基因亦无自激活作用。可以利用SRS研究与羊布鲁菌16M VjbR蛋白相互作用的蛋白,为进一步研究羊布鲁菌致病机制奠定了基础。
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关键词
VjbR蛋白
羊
布鲁
菌
16
M
自激活作用
酵母双杂交
原文传递
题名
羊布鲁菌16M Omp25真核表达载体的构建
被引量：
2
1
作者
屈海龙
王海浪
陈思
张瑞
王秀然
钱晶
王兴龙
机构
军事医学科学院军事兽医研究所
吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室
北京奶牛中心
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第12期1848-1850,1854,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30972198/C180503)
国家科技支撑计划(2010BAD04B03)
文摘
利用聚合酶链式反应(PCR),以羊布鲁菌16M基因组为模板克隆Omp25基因,设计含有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物序列,定向克隆到真核表达载体pCMV-HA上,构建真核表达重组质粒pCMV-HA-Omp25。经测序及双酶切验证正确,证明成功构建了pCMV-HA-Omp25真核表达质粒,为表达纯化外膜蛋白Omp25,研究其功能奠定基础。
关键词
羊
布鲁
菌
16
M
Omp25
真核表达
Keywords
Brucella rn elitensis
16
M
Omp2 5
eukaryotic expression
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测
2
作者
屈海龙
王景龙
李晓燕
张瑞
王秀然
陈思
钱晶
王兴龙
机构
军事医学科学院军事兽医研究所
吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1378-1382,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(30972198/C180503)
国家科技支撑计划资助项目(2010BAD04B03)
文摘
利用Sos招募系统(SRS),通过PCR扩增羊布鲁菌16M VjbR基因的编码序列,定向克隆到酵母表达载体pSos中,构建诱饵重组质粒pSos-VjbR,经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H(α)感受态细胞,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无自激活作用。结果表明,经序列测定证实重组诱饵质粒pSos-VjbR构建成功。重组质粒转化入酵母细胞后,经检测其表达产物对cdc25H(α)酵母细胞无毒性作用,对报告基因亦无自激活作用。可以利用SRS研究与羊布鲁菌16M VjbR蛋白相互作用的蛋白,为进一步研究羊布鲁菌致病机制奠定了基础。
关键词
VjbR蛋白
羊
布鲁
菌
16
M
自激活作用
酵母双杂交
Keywords
VjbR protein
Brucella melitensis
16
M
self-activation
yeast two-hybrid
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
羊布鲁菌16M Omp25真核表达载体的构建
屈海龙
王海浪
陈思
张瑞
王秀然
钱晶
王兴龙
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
原文传递
2
羊布鲁菌16M VjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测
屈海龙
王景龙
李晓燕
张瑞
王秀然
陈思
钱晶
王兴龙
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
原文传递
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