结肠癌干细胞的研究进展与在临床治疗中的意义 被引量：17

1

作者 赵景锋 龚代平 +2 位作者 卿松 杨川 杨秀江 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期3096-3098,共3页

结肠癌作为最常见的恶性肿瘤之一，在全世界男性的发病率排名第3位，病死率第4位，女性的发病率排名第2位，病死率第3位。在过去的30多年里，包括中国在内的许多国家或地区结肠癌发病率呈上升的趋势。而针对结肠癌的治疗，仍然是以手术... 结肠癌作为最常见的恶性肿瘤之一，在全世界男性的发病率排名第3位，病死率第4位，女性的发病率排名第2位，病死率第3位。在过去的30多年里，包括中国在内的许多国家或地区结肠癌发病率呈上升的趋势。而针对结肠癌的治疗，仍然是以手术为主、放化疗等为辅的综合治疗方法， 展开更多

关键词 结肠癌 肿瘤干细胞 结肠癌干细胞 表面标志物

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马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖作用的机理研究 被引量：16

2

作者 熊祎虹 邓超 +3 位作者 白文 刘宇 姚小芹 金黑鹰 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期39-44,共6页

目的探讨马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖能力的影响及其作用机制。方法对结肠癌干细胞进行无血清培养,CCK-8法测定不同浓度马齿苋醇提取物对结肠癌HT-29细胞及HT-29干细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测其对HT-29细胞及... 目的探讨马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖能力的影响及其作用机制。方法对结肠癌干细胞进行无血清培养,CCK-8法测定不同浓度马齿苋醇提取物对结肠癌HT-29细胞及HT-29干细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测其对HT-29细胞及其干细胞的凋亡情况及对细胞周期的影响。RT-PCR法以及Western blot分析马齿苋醇提取物对HT-29细胞及其干细胞Notch、Wnt双信号通路中Notch1、Notch2及β-catenin基因及蛋白表达的影响。结果马齿苋醇提取物对HT-29细胞及HT-29干细胞增殖有抑制作用,其作用时间、剂量与细胞增殖抑制率呈正相关,且对HT-29细胞增殖的抑制作用及凋亡率的影响较HT-29干细胞显著(P<0.05)。马齿苋醇提取物可下调HT-29细胞及其干细胞Notch1、β-catenin基因表达,并下调Notch1、Notch2及β-catenin蛋白表达(P<0.05)。结论马齿苋醇提取物可以通过下调Notch-1、Notch-2、β-catenin蛋白的表达发挥体外抑制结肠癌细胞及其干细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 马齿苋 结肠癌细胞 结肠癌干细胞 细胞凋亡 NOTCH信号通路 WNT信号通路

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白藜芦醇抑制结肠癌干细胞增殖并增强MICA/B的表达 被引量：12

3

作者 杨君 刘军权 +1 位作者 吕小婷 费素娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期889-893,共5页

目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合... 目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测Res对CCSC凋亡的影响;流式细胞术检测Res对CCSC生长周期及主要组织相容性复合体Ⅰ类分子相关链A/B(MICA/B)表达的影响。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长。球形细胞中CD133+细胞占91.07%±1.79%,CD44+细胞占90.33%±1.78%。与对照组相比,Res能明显抑制CCSC增殖,并且呈时间、剂量依赖性;Res作用48 h后,CCSC细胞周期G0/G1期比例显著升高,S期下降,呈剂量依赖性;随着药物浓度增加,CCSC的凋亡率增加,MICA/B的表达增强。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导培养出CCSC,Res能剂量依赖性地抑制CCSC的增殖,与阻滞细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡有关;Res能增强CCSC中MICA/B的表达,增强其免疫原性。 展开更多

关键词 白藜芦醇 结肠癌干细胞 凋亡 细胞周期 主要组织相容性复合体I类分子相关链A/B(MICA/B)

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TNF-α激活Wnt信号通路促进人结肠癌干细胞侵袭 被引量：10

4

作者 魏笑 李昕 +4 位作者 孔飞飞 马璐 隋御 陈冬梅 徐方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期982-988,共7页

目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死... 目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理CD44+CD133+HT29细胞建立炎症细胞模型,噻唑蓝(MTT)实验筛选TNF-α作用的最适剂量及最佳作用时间; Wnt信号通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)作用于CD44+CD133+HT29炎症细胞,实验分为空白组、TNF-α处理组、加DKK1的TNF-α处理组。MTT实验检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测Wnt信号通路中相关蛋白β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、c-Myc及上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达情况,TranswellTM侵袭实验检测各组细胞侵袭情况。结果流式细胞分选术成功分选出结肠癌CD44+CD133+HT29干细胞。MTT实验筛选出TNF-α作用的最适剂量为10 ng/m L,最佳作用时间为48 h。与空白组相比,TNF-α处理组中CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率增加,TranswellTM穿膜的细胞数增加,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达升高,E-cadherin表达降低、vimentin表达升高;与TNF-α处理组相比,加DKK1的TNF-α处理组CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率降低,TranswellTM穿膜细胞数减少,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达降低,E-cadherin表达升高、vimentin表达降低。结论TNF-α通过激活Wnt信号通路促进结肠癌干细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 肿瘤坏死因子α(TNF-α) WNT信号通路 HT29细胞 上皮间质转化(EMT)

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片仔癀对人结肠癌细胞株干细胞的影响 被引量：9

5

作者 魏丽慧 林久茂 +5 位作者 彭军 蔡巧燕 王丽丽 张铃 詹友知 沈阿灵 《福建中医药》 2012年第1期45-47,共3页

目的观察片仔癀(PZH)对结肠癌细胞株HT-29、SW620干细胞的抑制作用。方法采用人结肠癌细胞株HT-29、SW620常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度片仔癀组(0.25、0.5、1 mg/mL),干预24 h后,MTT法测定细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态变... 目的观察片仔癀(PZH)对结肠癌细胞株HT-29、SW620干细胞的抑制作用。方法采用人结肠癌细胞株HT-29、SW620常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度片仔癀组(0.25、0.5、1 mg/mL),干预24 h后,MTT法测定细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪分析片仔癀对HT-29、SW620细胞株干细胞数量的影响。结果 MTT显示,不同浓度片仔癀干预HT-29、SW620细胞后,细胞活力均下降且具有剂量依赖性;倒置显微镜观察,PZH 1 mg/mL干预24 h后,HT-29及SW620细胞数量减少,细胞变小,折光性差,细胞悬浮、脱落而死亡;流式分析HT-29、SW620细胞株SP细胞的比例分别为10.87%、8.46%,片仔癀1 mg/mL干预24 h后,SP细胞比例分别下降为1.69%、1.18%。结论片仔癀具有抑制HT-29、SW620结肠癌细胞增殖的作用,并且能够减少这2种细胞株干细胞的数量。 展开更多

关键词 结肠癌:片仔癀:HT-29 SW620 结肠癌干细胞

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枸杞多糖联合奥沙利铂可逆转结肠癌干细胞的耐药 被引量：2

6

作者 艾芳芳 肖红燕 +2 位作者 汪芳 朱永朝 马丽君 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第1期74-79,共6页

背景:结肠癌临床主要采用以氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂为基础的治疗方法,研究发现这些药物的转运与ABC转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette transport protein of G2,ABCG2)等膜转运蛋白相关,然而当患者对这些化疗药物产生耐药... 背景:结肠癌临床主要采用以氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂为基础的治疗方法,研究发现这些药物的转运与ABC转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette transport protein of G2,ABCG2)等膜转运蛋白相关,然而当患者对这些化疗药物产生耐药后,ABCG2的高表达致使治疗效果明显下降,引起了结肠癌的耐药问题。临床急切需要新的药物及治疗方法来提高疗效,枸杞多糖具有广泛的生物学活性,将多糖作为抗肿瘤药物,可以克服化疗和放疗过程中杀死肿瘤细胞的同时对机体正常细胞的损伤。目的:通过体外实验探索枸杞多糖联合奥沙利铂对结肠癌干细胞耐药的逆转作用,进而探讨枸杞多糖逆转结肠癌耐药的可能分子机制。方法:选用结肠癌细胞株HCT116以及奥沙利铂耐药细胞株HCT116-OXR进行体外实验,采用CCK8检测细胞增殖情况确定枸杞多糖和奥沙利铂的最适干预浓度和干预时间,进一步分为HCT116对照组,HCT116-OXR空白处理组,枸杞多糖组(2.5 mg/mL枸杞多糖),奥沙利铂组(10μmol/L奥沙利铂),枸杞多糖+奥沙利铂组(2.5 mg/mL枸杞多糖+10μmol/L奥沙利铂),流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫荧光和Western blot检测磷酸甘露糖异构酶(phosphomannose isomerase,PMI)和ABCG2的表达,Western blot检测PI3K,AKT,Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果与结论:①HCT116-OXR相较HCT116对枸杞多糖更敏感(P<0.05);②与HCT116-OXR空白处理组比较,奥沙利铂联合枸杞多糖促进了HCT116-OXR细胞凋亡(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05),Bax蛋白表达明显上调(P<0.05),ABCG2、PMI、PI3K、AKT的蛋白表达明显下调(P<0.05);③结果表明枸杞多糖通过抑制PMI/PI3K/AKT通路逆转结肠癌耐药,为研究枸杞多糖增敏化疗作用的分子机制奠定了基础。 展开更多

关键词 PMI ABCG2 PI3K AKT 枸杞多糖 结肠癌干细胞 耐药 凋亡

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黄芪多糖通过诱导自噬作用促进结肠癌干细胞凋亡的机制 被引量：6

7

作者 李成军 沈光辉 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期2274-2279,共6页

目的:基于自噬作用探索黄芪多糖促进结肠癌干细胞凋亡及其相关分子机制。方法:免疫磁珠分选仪分选CD133、CD44共阳性结肠癌干细胞;悬浮培养验证CD133^(+)/CD44^(+)细胞干性;MTT检测黄芪多糖对CD133^(+)/CD44^(+)细胞增殖活性的影响;流... 目的:基于自噬作用探索黄芪多糖促进结肠癌干细胞凋亡及其相关分子机制。方法:免疫磁珠分选仪分选CD133、CD44共阳性结肠癌干细胞;悬浮培养验证CD133^(+)/CD44^(+)细胞干性;MTT检测黄芪多糖对CD133^(+)/CD44^(+)细胞增殖活性的影响;流式检测黄芪多糖对凋亡的影响;qPCR检测黄芪多糖对凋亡相关基因和自噬相关基因的影响;Western Blot检测黄芪多糖对凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的影响;免疫荧光检测各组细胞mTORC1蛋白的变化。结果:通过磁珠法成功富集CD133^(+)/CD44^(+)细胞,该细胞具有很强的成球能力。黄芪多糖可时间-浓度依赖地抑制CD133^(+)/CD44^(+)细胞增殖,并浓度依赖地诱导CD133^(+)/CD44^(+)细胞凋亡,促进Caspase 3、Caspase 9、Fas、Bax、ClassⅢPI3K、Beclin 1 mRNA和蛋白含量增加,降低Bcl-2、XIAP mRNA和蛋白表达。但是抑制自噬后,黄芪多糖对CD133^(+)/CD44^(+)细胞凋亡和自噬的诱导作用被逆转。结论:黄芪多糖可诱导结肠癌干细胞自噬,抑制其增殖,促进其凋亡。 展开更多

关键词 黄芪多糖 自噬 结肠癌干细胞 凋亡

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藤黄醇提取物对结肠癌干细胞裸鼠原位移植瘤的作用及机制

8

作者 李悠然 谷云飞 +3 位作者 王微 吴旻娜 贡钰霞 王浩 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期907-912,共6页

目的:观察藤黄醇提取物对结肠癌HCT116干细胞裸鼠原位移植瘤的作用及相关作用机制。方法:采用流式细胞术分选和鉴定结肠癌干细胞后,随后建立裸鼠结肠癌干细胞原位移植瘤模型,随机分为5组:G1(空白对照)、G2(5-氟尿嘧啶)、G3(低剂量藤黄... 目的:观察藤黄醇提取物对结肠癌HCT116干细胞裸鼠原位移植瘤的作用及相关作用机制。方法:采用流式细胞术分选和鉴定结肠癌干细胞后,随后建立裸鼠结肠癌干细胞原位移植瘤模型,随机分为5组:G1(空白对照)、G2(5-氟尿嘧啶)、G3(低剂量藤黄醇提取物)、G4(高剂量藤黄醇提取物)、G5(5-氟尿嘧啶和高剂量藤黄醇提取物)。通过荧光成像系统观察整体肿瘤发光强度和原位肿瘤发光强度,计算相对肿瘤抑制率和肿瘤延迟时间对药物抗肿瘤疗效进行评估。给药第28天处死裸鼠,记录肿瘤转移的数量和位置。取原发肿瘤病灶称重,并采用Western Blot检测相关蛋白表达。结果:与G1比较,各给药组瘤重和肿瘤荧光强度均有所降低,其中G5相对肿瘤抑制率及肿瘤转移抑制作用最佳。与G1比较,各给药组均显著下调分化抗原簇蛋白44(CD44)、分化抗原簇蛋白133(CD133)、性别决定区Y-box蛋白2(SOX2)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达(P<0.05,P<0.01),显著上调上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达(P<0.01)。结论:藤黄醇提取物可能通过抑制结肠癌干细胞调控上皮间质转化过程,发挥抑制结肠肿瘤的增殖、侵袭和转移的作用;且联合5-氟尿嘧啶效果更好。 展开更多

关键词 藤黄 醇提取物 结肠癌干细胞 上皮间质转化 干性 机制 结直肠癌 5-氟尿嘧啶

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结肠癌干细胞标志物和信号通路的研究进展 被引量：6

9

作者 张子怡 林泉任 +1 位作者 叶春雨 金燕 《生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第8期802-811,共10页

结肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤,世界范围内其发病率位列第三。大部分的结肠癌患者死亡由肿瘤的复发转移和耐药性所致,而这些过程都有肿瘤干细胞的参与。因此,靶向肿瘤干细胞将成为未来根治结肠癌的重要研究方向,而结肠癌干细胞标... 结肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤,世界范围内其发病率位列第三。大部分的结肠癌患者死亡由肿瘤的复发转移和耐药性所致,而这些过程都有肿瘤干细胞的参与。因此,靶向肿瘤干细胞将成为未来根治结肠癌的重要研究方向,而结肠癌干细胞标志物的发现则为其提供了新思路。同时,因结肠癌干细胞的生长依赖多种信号通路的作用,故其相关信号通路靶向药物的研究也将是一大发展方向。该文就目前关于结肠癌干细胞标志物及其相关信号通路抑制剂的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 生物学标志物 信号通路 肿瘤转移 抑制剂

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复方苦参注射液联合奥沙利铂对结肠癌干细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响 被引量：1

10

作者 武曼 王大望 +4 位作者 杨蕊菲 王战争 莫皎 冯飞雪 马艳侠 《中药材》 CAS 北大核心 2023年第1期212-216,共5页

目的:探究复方苦参注射液联合奥沙利铂对结肠癌干细胞(cCSCs)增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:采用无血清培养从结肠癌SW480细胞系中获得cCSCs,并将其分为对照组、复方苦参注射液组、奥沙利铂组、联合组,CCK-8法检测药物对cCSCs存活... 目的:探究复方苦参注射液联合奥沙利铂对结肠癌干细胞(cCSCs)增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:采用无血清培养从结肠癌SW480细胞系中获得cCSCs,并将其分为对照组、复方苦参注射液组、奥沙利铂组、联合组,CCK-8法检测药物对cCSCs存活率的影响;流式细胞仪分析用药后cCSCs细胞凋亡情况;qPCR和Western Blot检测用药后cCSCs细胞周期和凋亡相关基因及蛋白的表达。结果:复方苦参注射液组、奥沙利铂组cCSCs存活率均显著低于对照组,联合组效果较单药组显著(P<0.05),两药具有协同作用。两药单用与联用均能显著诱导cCSCs细胞凋亡,降低Cyclin D、Bcl-2 mRNA及蛋白表达,升高P21、P27、Bax、Caspase-3 mRNA及蛋白表达(P<0.05)。联合用药的作用显著优于单独用药(P<0.05)。结论:复方苦参注射液与奥沙利铂具有协同作用,可抑制cCSCs增殖,通过影响细胞周期和细胞凋亡相关基因及蛋白表达调控细胞周期,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 复方苦参注射液 奥沙利铂 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期

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miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响 被引量：4

11

作者 阎立昆 李伟 +1 位作者 姚建锋 毛智军 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第45期6746-6752,共7页

背景:前期研究发现miR-1231在结肠癌干细胞中表达明显下调,但是其具体的作用机制尚不明确。目的:探讨miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:采用免疫磁珠分选技术从结肠癌细胞株SW1116中分选出结肠癌干细胞(CD133^+CD44... 背景:前期研究发现miR-1231在结肠癌干细胞中表达明显下调,但是其具体的作用机制尚不明确。目的:探讨miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:采用免疫磁珠分选技术从结肠癌细胞株SW1116中分选出结肠癌干细胞(CD133^+CD44^+)和双阴性细胞(CD133-CD44-)。q RT-PCR检测miR-1231在这2种细胞中的表达水平。将CD133^+CD44^+细胞通过脂质体转染miR-1231模拟物(miR-1231 mimics)或miR NA模拟物对照(mi R-control)。采用MTT、流式细胞仪、Transwell小室实验检测miR-1231对CD133^+CD44^+细胞增殖、凋亡、侵袭的影响;免疫印迹法检测miR-1231对CD133^+CD44^+细胞中Ki67、Bax、Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。结果与结论:(1)采用免疫磁珠分选技术得到CD133^+CD44^+和CD133-CD44-细胞;(2)miR-1231在CD133^+CD44^+细胞中的表达水平显著低于CD133-CD44-细胞;(3)miR-1231抑制CD133^+CD44^+细胞增殖和侵袭,促进其凋亡;(4)相对于转染miR NA模拟物对照组,miR-1231高表达的CD133^+CD44^+细胞具有较低的Ki67、Bcl-2,MMP-2和MMP-9蛋白表达和较高的Bax蛋白表达,进一步证实miR-1231抑制CD133^+CD44^+细胞增殖和侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 干细胞 肿瘤干细胞 结肠癌干细胞 miR-1231 增殖 凋亡 侵袭

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EMT在结肠癌干细胞“干性”获得与维持中的作用及机制研究进展 被引量：4

12

作者 康毅 周晏因(综述) 朱蓉(审校) 《海南医学》 CAS 2022年第6期782-786,共5页

结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,在全球其发病率高居第三。大部分结肠癌患者的死亡由肿瘤的复发、转移和耐药性所导致,而这些过程都有结肠癌干细胞(CCSCs)的介入。上皮间充质转化(EMT)在胚胎发育、肿瘤发生及其浸润转移等过程中都起着重... 结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,在全球其发病率高居第三。大部分结肠癌患者的死亡由肿瘤的复发、转移和耐药性所导致,而这些过程都有结肠癌干细胞(CCSCs)的介入。上皮间充质转化(EMT)在胚胎发育、肿瘤发生及其浸润转移等过程中都起着重要的调节作用。近来研究发现,EMT与CCSCs之间存在重要的相互联系,CCSCs的“干性”获得与维持与EMT密切相关,同时CCSCs在不同的微环境又具有EMT特性,从而在肿瘤的产生、进展和转移过程中发挥着十分重要的作用。本文总结国内外关于CCSCs和肿瘤细胞EMT关系的研究进展,阐明CCSCs与EMT的相互关系及其调控机制,以期为其靶向治疗找到新途径。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 上皮间充质转化 结肠癌 机制 靶向治疗 研究进展

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白细胞介素-1β对结肠癌干细胞迁移及诱导上皮-间质转化的影响 被引量：4

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作者 莫波 雍鑫 +3 位作者 乔丽娟 杨明 刘阳 徐辉 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期2901-2904,共4页

目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)促进结肠癌干细胞转移及要到上皮间质转化的作用机制。方法以原代细胞无血清培养刺激原代细胞向干细胞转化的方法获取干细胞。根据处理方式将结肠癌细胞分为对照组(不处理)和IL-1β组(4 ng·mL^(-1)I... 目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)促进结肠癌干细胞转移及要到上皮间质转化的作用机制。方法以原代细胞无血清培养刺激原代细胞向干细胞转化的方法获取干细胞。根据处理方式将结肠癌细胞分为对照组(不处理)和IL-1β组(4 ng·mL^(-1)IL-1β处理)。观察IL-1β处理对结肠癌干细胞转移能力、上皮间质转化以及干细胞相关基因mRNA及蛋白水平的影响。同时根据不同的处理方式将结肠癌细胞分为IL-1β组(IL-1β处理)和shZeb1+IL-1β组(经shZeb1慢病毒感染后IL-1β再处理)。观察结肠癌干细胞相关基因以及EMT相关基因mRNA和蛋白水平变化。结果IL-1β处理后结肠癌干细胞转移数量增多,对照组和IL-1β组的迁移细胞数目分别为(796.33±42.72)和(458.67±20.64),差异有统计学意义(P<0.01)。IL-1β组结肠癌干细胞上皮间质转化细胞数量明显增多,细胞形态由上皮典型的上皮细胞形态向间质细胞形态转化;IL-1β组结肠癌干细胞相关基因mRNA及蛋白表达量改变,B细胞特异的莫洛尼白血病插入位点1基因(Bmi1)、Nestin、E盒结合锌指蛋白(Zeb1)、Zeb2基因及蛋白表达均显著高于对照组。对照组和IL-1β组E-cadherin蛋白表达量分别为0.66±0.09,0.32±0.04,Vimentin蛋白表达分别为0.38±0.04,0.77±0.07,IL-1β组和IL-1β+shZeb1组E-cadherin蛋白表达量分别为0.38±0.04,0.91±0.05,Vimentin蛋白表达量分别为0.76±0.05,0.40±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.01)。IL-1β组和shZeb1+IL-1β组Bmi1 mRNA表达分别为1.37±0.10,0.28±0.05,Nestin mRNA表达分别为1.25±0.14,0.21±0.10,Bmi1蛋白表达分别为0.66±0.07,0.31±0.12,Nestin蛋白表达分别为0.71±0.13,0.31±0.12,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论IL-1β可促进结肠癌干细胞转移及诱导上皮-间质转化,其机制与上调Zeb1有关。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 转移 上皮间质转化 白细胞介素-1Β E盒结合锌指蛋白1

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胃肠安及四藤方对人结肠癌细胞株干细胞CD133^+的影响 被引量：4

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作者 祝利民 沈克平 +2 位作者 周浩 潘传芳 姚琼 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期161-165,171,共6页

目的观察胃肠安和四藤方对结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29及其干细胞CD133^+的抑制作用。方法人结肠癌细胞株(HCT-116、SW480、HT-29)随机分为对照组和不同浓度胃肠安(500 mg/L和1 000mg/L)、四藤方(100 mg/L和200 mg/L)干预组,干预... 目的观察胃肠安和四藤方对结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29及其干细胞CD133^+的抑制作用。方法人结肠癌细胞株(HCT-116、SW480、HT-29)随机分为对照组和不同浓度胃肠安(500 mg/L和1 000mg/L)、四藤方(100 mg/L和200 mg/L)干预组,干预24 h后,CCK-8法测定细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪分析胃肠安和四藤方对HCT-116、SW480、HT-29中CD133^+表达的影响。结果 CCK-8法检测结果显示,胃肠安及四藤方干预HCT-116、SW480、HT-29细胞后,细胞活力均下降且呈剂量依赖性;倒置显微镜观察发现:胃肠安及四藤方干预24 h,HCT-116、SW480、HT-29的细胞数量减少,细胞体积缩小,遮光性差,细胞悬浮、脱落而死亡。流式细胞术分析结果显示:对照组HCT-116、SW480、HT-29中CD133^+细胞的比例分别为12.52%、10.98%、2.33%;胃肠安方1 000 mg/L干预24 h后,CD133^+细胞比例分别下降为7.49%、5.36%、0.11%;四藤方组200 mg/L干预24 h后,CD133^+细胞比例分别下降为7.83%、6.45%、0.18%。结论不同结肠癌细胞株中CD133^+细胞比例有差异。胃肠安及四藤方均具有抑制结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29增殖的作用;但在同样的干预时间内,较高浓度胃肠安(1 000 mg/L)及四藤方(200 mg/L)才具有抑制3种细胞株干细胞CD133^+表达的作用。 展开更多

关键词 胃肠安 四藤方 结肠癌干细胞 CD133^+

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人HCT116结肠癌细胞系中CD133^+结肠癌干细胞分离及鉴定 被引量：4

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作者 陈克力 梁后杰 +3 位作者 江恒 陈建芳 裴莉 郑晨宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期330-333,共4页

目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+... 目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+细胞鉴定其体外增殖特性;采用含血清培养基诱导干细胞克隆球分化并采用免疫组化检测CK20表达情况鉴定其分化特性。结果HCT116细胞系中存在CD133+细胞,免疫磁珠能有效的分选CD133+细胞,分选后的阳性含量为91.92%,分选后的阳性细胞具有典型干细胞的体外增殖、分化特性。结论CD133+结肠癌干细胞在体外具有和普通干细胞类似的无限增殖、自我更新和分化能力,同时它们也表达ABCG2等耐药相关蛋白。 展开更多

关键词 HCT116 结肠癌干细胞 CD133 分离及鉴定

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结肠癌干细胞表面标志物、特性及致病机制的研究概况 被引量：4

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作者 高莹 安啸海 +1 位作者 杨晓玲 杨柏霖 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第35期5662-5669,共8页

全球范围内结肠癌肿瘤发病位列第3位.随着分子生物学研究不断进步,人们发现肿瘤细胞中存在着一小部分特殊的细胞亚群,即肿瘤干细胞.肿瘤干细胞通过不断自我更新和分化使肿瘤具有持续生长、远处转移和复发的能力.研究表明,传统的放化疗... 全球范围内结肠癌肿瘤发病位列第3位.随着分子生物学研究不断进步,人们发现肿瘤细胞中存在着一小部分特殊的细胞亚群,即肿瘤干细胞.肿瘤干细胞通过不断自我更新和分化使肿瘤具有持续生长、远处转移和复发的能力.研究表明,传统的放化疗无法彻底消除肿瘤干细胞,通过特异性细胞表面标志精确地将肿瘤干细胞从大量肿瘤细胞和正常健康细胞中分离,为精确靶向治疗提供了基础.充分认识和利用结肠癌干细胞的自我更新和分化机制,应用分子生物技术阻断其稳态调控,将成为靶向治疗结肠癌的新契机. 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 稳态调控 表面标志 靶向治疗

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干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的生物学特性 被引量：3

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作者 杨东 张金龙 +7 位作者 黄轶轩 栾青春 刘健 孟希亭 王海娟 钱海利 李贵新 林晨 《山东医药》 CAS 2012年第25期12-15,共4页

目的探讨干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的相关蛋白表达及生物学特性。方法用干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞,Western blot检测干细胞相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期;同时检测干细胞增殖、黏附、耐药及侵袭能... 目的探讨干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞的相关蛋白表达及生物学特性。方法用干细胞培养基成球培养法筛选结肠癌干细胞,Western blot检测干细胞相关蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期;同时检测干细胞增殖、黏附、耐药及侵袭能力,并摸索结肠癌干细胞最佳冻存条件。结果用干细胞培养基成球培养法成功培养出了结肠癌细胞球,检测发现干细胞相关蛋白表达增强,静止期细胞比例明显升高,细胞增殖速度慢,黏附性、耐药性、侵袭性均强于亲本细胞。结论干细胞培养基成球培养法筛选的细胞球中富集了肿瘤干细胞,为结肠癌干细胞的研究提供了良好的细胞模型。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 黏附性 耐药性

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藤黄酸颗粒对结肠癌干细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3

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作者 欧志涛 魏芳 +2 位作者 陈志乾 郭家伟 罗铎 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2018年第2期111-115,共5页

目的探讨藤黄酸(GA)颗粒对结肠癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法通过体外培养结肠癌HCT116细胞,采用免疫磁珠标记分选技术从HCT116细胞中分选出ALDH1^+/CD133^+结肠癌干细胞;经不同浓度(0、0.5、1和2 mg/ml)GA颗粒处理结肠癌干细胞后,采... 目的探讨藤黄酸(GA)颗粒对结肠癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法通过体外培养结肠癌HCT116细胞,采用免疫磁珠标记分选技术从HCT116细胞中分选出ALDH1^+/CD133^+结肠癌干细胞;经不同浓度(0、0.5、1和2 mg/ml)GA颗粒处理结肠癌干细胞后,采用克隆形成实验观察细胞的克隆能力,CCK-8法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,Western blotting及实时定量PCR(QPCR)检测干细胞中Sox2和Oct4蛋白及m RNA的表达。结果免疫磁珠标记分选技术成功分选出符合要求的ALDH1^+/CD133^+结肠癌干细胞;克隆形成实验结果显示,不同浓度GA颗粒处理后细胞克隆形成率显著降低,且呈剂量依赖性;CCK-8检测发现,GA颗粒能够呈剂量-时间依赖性地抑制结肠癌干细胞的增殖;流式细胞仪检测结果表明,GA颗粒能够呈剂量依赖性地诱导结肠癌干细胞的凋亡;Western blotting及QPCR检测结果显示,GA颗粒能够呈剂量依赖性地降低Oct4和Sox2蛋白及m RNA水平。结论 GA颗粒能够明显抑制结肠癌干细胞的克隆、增殖及Oct4和Sox2的表达并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 藤黄酸颗粒 细胞增殖 细胞凋亡

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HT29和HCT116结肠癌细胞无血清培养形成肿瘤干细胞球特性的差异性研究 被引量：3

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作者 冯燕君 夏璐 +4 位作者 李晓露 王海伟 刘建胜 杜艳芝 张济 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2011年第10期892-896,共5页

目的比较HT29和HCT116两种结肠癌细胞系中肿瘤干细胞的差异,初步探讨结肠癌干细胞研究模型。方法以无血清培养法培养HT29和HCT116细胞,观察其在不同时间形成肿瘤干细胞球的差异,用限制性稀释法计算两者的成球率;流式细胞术分析HT29和HCT... 目的比较HT29和HCT116两种结肠癌细胞系中肿瘤干细胞的差异,初步探讨结肠癌干细胞研究模型。方法以无血清培养法培养HT29和HCT116细胞,观察其在不同时间形成肿瘤干细胞球的差异,用限制性稀释法计算两者的成球率;流式细胞术分析HT29和HCT116细胞系中CD44/CD24的表达情况;裸鼠体内成瘤实验鉴定HT29细胞球与HCT116细胞球成瘤能力。结果无血清培养法发现HCT116较HT29更易形成肿瘤干细胞球且所需时间更短,即HT29在无血清培养的第7天开始形成规则的球体,而HCT116则在第5天就已形成规则的球体,HCT116成球率(11.4±1.15)%高于HT29(3.31±0.27)%,且差异有统计学意义(P<0.05);HT29和HCT116中CD44±/CD24±各细胞含量有显著差异,结果显示具有干细胞特性的CD44+/CD24-结肠癌细胞在HCT116中所占比例(60.33±5.75)%明显高于HT29(9.23±2.15)%,差异有统计学意义(t=13.939,P<0.05);体内成瘤实验发现HCT116细胞球在裸鼠体内的成瘤能力明显强于HT29细胞球,HCT116细胞球的成瘤速度及瘤体生长速度都较HT29细胞球快。结论与HT29相比,HCT116结肠癌细胞系更适合作为肿瘤干细胞研究的模型。 展开更多

关键词 结肠癌 结肠癌干细胞球 CD44/CD24 致瘤性 裸鼠

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一种结肠癌干细胞上皮-间质转化分层模型的建立和验证 被引量：3

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作者 李鹏 马晓莹 +3 位作者 李小嘉 金文琪 丁旭枫 郭修田 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期100-110,共11页

背景与目的:肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,同时具有自我更新能力及多向分化潜能。CSC在肿瘤转移过程中起着重要作用。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与恶性肿瘤浸润、转... 背景与目的:肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,同时具有自我更新能力及多向分化潜能。CSC在肿瘤转移过程中起着重要作用。上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与恶性肿瘤浸润、转移及与肿瘤患者预后紧密联系。本研究以CSC是否经EMT为标准,建立一种新型结肠癌干细胞EMT分层模型,以评价不同活性物质对不同分型的结肠癌干细胞表型的影响。并用当下研究成熟的抑癌基因miR-139-5p及其靶向抑制的转录因子4(transcription factor 4,TCF4)蛋白验证上述模型的可行性,为临床研究提供理论依据。方法:以CD44和细胞上皮黏附分子/上皮特异性抗原(epithelial cell adhesion molecule/epithelial specific antigen,EpCAM/ESA)为结肠癌干细胞标志物,采用流式细胞术分选皮下移植瘤中CD44+ESA+、CD44+ESA-细胞亚群和转移瘤中CD44+ESA+、CD44+ESA-细胞亚群,分别命名为Epi-S、Epi-P、pEMT-S和pEMT-P,亲本细胞株HCT116作为后续实验的阴性对照;验证分选后不同细胞亚群的多药耐药性、克隆形成能力以及干性转录因子SOX2、OCT4和EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达情况;检测miR-139-5p过表达、TCF4敲低对Epi-P和pEMT-P以及TCF4过表达对Epi-S和pEMT-S CSC侵袭能力与EMT标志分子E-cadherin、N-cadherin和vimentin蛋白的影响。结果:相较于HCT116亲本细胞株,Epi-S、Epi-P、pEMT-S和pEMT-P共4种CSC分型均对奥沙利铂(oxaliplatin,LOHP)和氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)产生了不同程度的抗性;干性相关转录因子OCT4和SOX2在4种CSC分型中表达均升高,与亲本细胞株相比,差异有统计学意义(P<0.05);上皮相关标志物E-cadherin、N-cadherin和vimentin在4种CSC分型中表达均升高,与亲本细胞株相比,差异有统计学意义(P<0.05);过表达miR-139-5p或敲低TCF4均能抑制Epi-P和pEMT-P结肠癌干细胞亚型的侵袭能力(P<0.01);在表型稳定未经历EMT的上皮亚系Epi 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 CD44 上皮细胞黏附分子 上皮-间质转化

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