衰老对大鼠结肠干细胞增殖分化功能及微环境的影响 被引量：1

1

作者 程志豪 顿耀艳 +5 位作者 刘洁 李玉婷 郭煜晖 何毓敏 袁丁 张长城 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第24期6030-6033,共4页

目的探讨衰老对大鼠结肠干细胞增殖分化功能及微环境的影响。方法雄性SD大鼠按不同月龄分成:成年组(6月龄)、老年组(24月龄),每组10只。采用高碘酸-雪夫试剂(PAS)染色和阿利新蓝染色检测大鼠结肠杯状细胞数量的变化,免疫组化检测各组大... 目的探讨衰老对大鼠结肠干细胞增殖分化功能及微环境的影响。方法雄性SD大鼠按不同月龄分成:成年组(6月龄)、老年组(24月龄),每组10只。采用高碘酸-雪夫试剂(PAS)染色和阿利新蓝染色检测大鼠结肠杯状细胞数量的变化,免疫组化检测各组大鼠结肠干细胞增殖细胞核抗原(PCNA)、β-catenin、糖原合成酶激酶(GSK)-3β蛋白的表达,RT-PCR检测各组大鼠结肠干细胞MUC1、MUC2、Lgr5、Bmi-1的变化。结果与成年组比较,老年组大鼠结肠组织干细胞标记物Lgr5、Bmi-1 mRNA表达量显著降低(P<0. 01),细胞增殖相关蛋白PCNA表达显著增加(P<0. 01),杯状细胞数量和MUC1、MUC2 mRNA表达显著降低(P<0. 01),其微环境Wnt/β-catenin信号通路中的β-catenin蛋白显著增加(P<0. 05)、GSK-3β表达显著降低(P<0. 01)。结论衰老过程中,大鼠结肠干细胞增殖功能增加,向杯状细胞分化的功能减弱,干细胞微环境Wnt/β-catenin信号通路上调。 展开更多

关键词 衰老 结肠干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路

下载PDF 职称材料

结直肠癌局部免疫动物模型研究进展 被引量：1

2

作者 秦凯迪 童仕伦 +3 位作者 郑勇斌 孙伟 肖旷 宋丹 《中国医药导报》 CAS 2017年第5期28-30,共3页

构建结直肠癌的动物模型在研究人类结直肠癌的预防与治疗中具有重大意义,而研究肿瘤的发生、发展及转移中扮演重要角色的癌组织局部免疫状态的动物模型尚处于探索阶段。其中局部免疫基因工程模型的研究发展迅速,并在突变结肠干细胞成瘤... 构建结直肠癌的动物模型在研究人类结直肠癌的预防与治疗中具有重大意义,而研究肿瘤的发生、发展及转移中扮演重要角色的癌组织局部免疫状态的动物模型尚处于探索阶段。其中局部免疫基因工程模型的研究发展迅速,并在突变结肠干细胞成瘤以及解决因原发肿瘤生长而导致的肠梗阻上取得了突破性进展。由此,一种未来理想局部免疫基因工程模型已展露雏形。 展开更多

关键词 结直肠癌 局部免疫状态 基因工程小鼠模型 结肠干细胞

下载PDF 职称材料

结肠癌干细胞的研究进展与在临床治疗中的意义 被引量：17

3

作者 赵景锋 龚代平 +2 位作者 卿松 杨川 杨秀江 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期3096-3098,共3页

结肠癌作为最常见的恶性肿瘤之一，在全世界男性的发病率排名第3位，病死率第4位，女性的发病率排名第2位，病死率第3位。在过去的30多年里，包括中国在内的许多国家或地区结肠癌发病率呈上升的趋势。而针对结肠癌的治疗，仍然是以手术... 结肠癌作为最常见的恶性肿瘤之一，在全世界男性的发病率排名第3位，病死率第4位，女性的发病率排名第2位，病死率第3位。在过去的30多年里，包括中国在内的许多国家或地区结肠癌发病率呈上升的趋势。而针对结肠癌的治疗，仍然是以手术为主、放化疗等为辅的综合治疗方法， 展开更多

关键词 结肠癌 肿瘤干细胞 结肠癌干细胞 表面标志物

下载PDF 职称材料

马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖作用的机理研究 被引量：17

4

作者 熊祎虹 邓超 +3 位作者 白文 刘宇 姚小芹 金黑鹰 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期39-44,共6页

目的探讨马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖能力的影响及其作用机制。方法对结肠癌干细胞进行无血清培养,CCK-8法测定不同浓度马齿苋醇提取物对结肠癌HT-29细胞及HT-29干细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测其对HT-29细胞及... 目的探讨马齿苋醇提取物对结肠癌细胞及其干细胞体外增殖能力的影响及其作用机制。方法对结肠癌干细胞进行无血清培养,CCK-8法测定不同浓度马齿苋醇提取物对结肠癌HT-29细胞及HT-29干细胞的生长抑制情况,流式细胞仪检测其对HT-29细胞及其干细胞的凋亡情况及对细胞周期的影响。RT-PCR法以及Western blot分析马齿苋醇提取物对HT-29细胞及其干细胞Notch、Wnt双信号通路中Notch1、Notch2及β-catenin基因及蛋白表达的影响。结果马齿苋醇提取物对HT-29细胞及HT-29干细胞增殖有抑制作用,其作用时间、剂量与细胞增殖抑制率呈正相关,且对HT-29细胞增殖的抑制作用及凋亡率的影响较HT-29干细胞显著(P<0.05)。马齿苋醇提取物可下调HT-29细胞及其干细胞Notch1、β-catenin基因表达,并下调Notch1、Notch2及β-catenin蛋白表达(P<0.05)。结论马齿苋醇提取物可以通过下调Notch-1、Notch-2、β-catenin蛋白的表达发挥体外抑制结肠癌细胞及其干细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 马齿苋 结肠癌细胞 结肠癌干细胞 细胞凋亡 NOTCH信号通路 WNT信号通路

原文传递

白藜芦醇抑制结肠癌干细胞增殖并增强MICA/B的表达 被引量：13

5

作者 杨君 刘军权 +1 位作者 吕小婷 费素娟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期889-893,共5页

目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合... 目的研究白藜芦醇(Res)对结肠癌干细胞(CCSC)增殖、凋亡和免疫原性的影响。方法采用无血清培养法由HCT116结肠癌细胞诱导培养CCSC,通过检测CCSC标志物CD133、CD44进行鉴定。MTT法检测Res对CCSC增殖的影响;annexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测Res对CCSC凋亡的影响;流式细胞术检测Res对CCSC生长周期及主要组织相容性复合体Ⅰ类分子相关链A/B(MICA/B)表达的影响。结果 HCT116细胞在无血清培养下成球生长。球形细胞中CD133+细胞占91.07%±1.79%,CD44+细胞占90.33%±1.78%。与对照组相比,Res能明显抑制CCSC增殖,并且呈时间、剂量依赖性;Res作用48 h后,CCSC细胞周期G0/G1期比例显著升高,S期下降,呈剂量依赖性;随着药物浓度增加,CCSC的凋亡率增加,MICA/B的表达增强。结论从HCT116结肠癌细胞成功诱导培养出CCSC,Res能剂量依赖性地抑制CCSC的增殖,与阻滞细胞于G0/G1期,并诱导细胞凋亡有关;Res能增强CCSC中MICA/B的表达,增强其免疫原性。 展开更多

关键词 白藜芦醇 结肠癌干细胞 凋亡 细胞周期 主要组织相容性复合体I类分子相关链A/B(MICA/B)

下载PDF 职称材料

5氟尿嘧啶上调干细胞标记物CD133在结肠癌细胞中的表达 被引量：10

6

作者 邓艳红 黄美近 +4 位作者 汪建平 林桐榆 肖健 蔡永华 LIN,Edward-H 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期2187-2191,共5页

目的:研究通过5氟尿嘧啶(5-FU)对结肠癌干细胞标记物CD133表达的影响,探讨5-FU对结肠癌干细胞的影响。方法:用流式细胞仪检测CD133在结肠癌细胞株表面的表达,磁珠细胞分离的方法分离结肠癌细胞株DLD1中CD133阳性和阴性的细胞群,细胞克... 目的:研究通过5氟尿嘧啶(5-FU)对结肠癌干细胞标记物CD133表达的影响,探讨5-FU对结肠癌干细胞的影响。方法:用流式细胞仪检测CD133在结肠癌细胞株表面的表达,磁珠细胞分离的方法分离结肠癌细胞株DLD1中CD133阳性和阴性的细胞群,细胞克隆形成实验检测2群细胞的自我更新能力,新型四唑氮盐方法(MTS)检测2群细胞对5-FU敏感性的差异,qPCR方法检测5-FU处理结肠癌细胞后CD133 mRNA水平的变化。结果:结肠癌细胞株DLD1、HT29、SW480、HCT116、Lovo、RKO细胞表面CD133的表达率分别为30.20%、82.00%、0.34%、91.80%、85.30%、0.28%。DLD1细胞中以CD133为标记有2群明显的细胞,MACS方法分离后阳性细胞群中CD133为87.21%±5.33%,而阴性细胞群中阴性细胞的比例为84.30%±4.65%;CD133阳性的细胞与未分离及CD133阴性细胞相比,克隆形成能力强(46.33%±4.44%vs31.00%±2.00%,P<0.05),对5-FU的敏感性下降20%,P<0.01。在DLD1和HT29细胞中,5-FU1mg/L上调CD133 mRNA水平的表达,从1升为1.684±0.012(P<0.01)、HT29细胞从30.702±0.284升为49.379±0.460(P<0.01)。结论:与CD133阴性细胞相比CD133阳性细胞克隆形成能力强,对5-FU的敏感性下降;5-FU上调干细胞标记物CD133 mRNA水平的表达,CD133阳性的结肠癌干细胞在5-FU的治疗过程中被富集。 展开更多

关键词 结肠肿瘤干细胞 CD133 氟尿嘧啶

下载PDF 职称材料

TNF-α激活Wnt信号通路促进人结肠癌干细胞侵袭 被引量：10

7

作者 魏笑 李昕 +4 位作者 孔飞飞 马璐 隋御 陈冬梅 徐方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期982-988,共7页

目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死... 目的探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响。方法以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理CD44+CD133+HT29细胞建立炎症细胞模型,噻唑蓝(MTT)实验筛选TNF-α作用的最适剂量及最佳作用时间; Wnt信号通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)作用于CD44+CD133+HT29炎症细胞,实验分为空白组、TNF-α处理组、加DKK1的TNF-α处理组。MTT实验检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测Wnt信号通路中相关蛋白β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、c-Myc及上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达情况,TranswellTM侵袭实验检测各组细胞侵袭情况。结果流式细胞分选术成功分选出结肠癌CD44+CD133+HT29干细胞。MTT实验筛选出TNF-α作用的最适剂量为10 ng/m L,最佳作用时间为48 h。与空白组相比,TNF-α处理组中CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率增加,TranswellTM穿膜的细胞数增加,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达升高,E-cadherin表达降低、vimentin表达升高;与TNF-α处理组相比,加DKK1的TNF-α处理组CD44+CD133+HT29细胞的相对存活率降低,TranswellTM穿膜细胞数减少,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达降低,E-cadherin表达升高、vimentin表达降低。结论TNF-α通过激活Wnt信号通路促进结肠癌干细胞的侵袭能力。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 肿瘤坏死因子α(TNF-α) WNT信号通路 HT29细胞 上皮间质转化(EMT)

下载PDF 职称材料

片仔癀对人结肠癌细胞株干细胞的影响 被引量：9

8

作者 魏丽慧 林久茂 +5 位作者 彭军 蔡巧燕 王丽丽 张铃 詹友知 沈阿灵 《福建中医药》 2012年第1期45-47,共3页

目的观察片仔癀(PZH)对结肠癌细胞株HT-29、SW620干细胞的抑制作用。方法采用人结肠癌细胞株HT-29、SW620常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度片仔癀组(0.25、0.5、1 mg/mL),干预24 h后,MTT法测定细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态变... 目的观察片仔癀(PZH)对结肠癌细胞株HT-29、SW620干细胞的抑制作用。方法采用人结肠癌细胞株HT-29、SW620常规体外培养,随机设定对照组和不同浓度片仔癀组(0.25、0.5、1 mg/mL),干预24 h后,MTT法测定细胞活力;倒置显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪分析片仔癀对HT-29、SW620细胞株干细胞数量的影响。结果 MTT显示,不同浓度片仔癀干预HT-29、SW620细胞后,细胞活力均下降且具有剂量依赖性;倒置显微镜观察,PZH 1 mg/mL干预24 h后,HT-29及SW620细胞数量减少,细胞变小,折光性差,细胞悬浮、脱落而死亡;流式分析HT-29、SW620细胞株SP细胞的比例分别为10.87%、8.46%,片仔癀1 mg/mL干预24 h后,SP细胞比例分别下降为1.69%、1.18%。结论片仔癀具有抑制HT-29、SW620结肠癌细胞增殖的作用,并且能够减少这2种细胞株干细胞的数量。 展开更多

关键词 结肠癌:片仔癀:HT-29 SW620 结肠癌干细胞

下载PDF 职称材料

半枝莲通过Hedgehog非经典信号通路抑制结肠肿瘤干细胞自我更新和分化 被引量：8

9

作者 谭溧 万莎 +4 位作者 雷楠 张梦 曾沙 周丽娟 徐海波 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第3期687-693,共7页

目的:探究半枝莲醇提物对结直肠干细胞自我更新和分化的影响并阐明其分子作用机制。方法:慢病毒转染结肠肿瘤HT-29细胞,磁珠抗体标记法分选结肠干细胞;用CCK-8法检测半枝莲对肿瘤干细胞的活性;3D培养法、干细胞成球实验、琼脂糖集落实... 目的:探究半枝莲醇提物对结直肠干细胞自我更新和分化的影响并阐明其分子作用机制。方法:慢病毒转染结肠肿瘤HT-29细胞,磁珠抗体标记法分选结肠干细胞;用CCK-8法检测半枝莲对肿瘤干细胞的活性;3D培养法、干细胞成球实验、琼脂糖集落实验探究半枝莲对HT-29Smo-CSC的生长更新及其转化的影响。实时荧光定量PCR和Western blot技术检测半枝莲对非经典Hedgehog信号通路基因和蛋白Shh、Ptch1、Gli1、Sufu及其标记基因CD133、靶基因c-Myc、分化基因CK20、增殖基因Ki67、更新基因Nanog的影响。结果:半枝莲能抑制HT-29Smo-CSC活性、生长转化及成球能力,显著下调Gli1、c-Myc、Shh mRNA及蛋白的表达,上调Sufu,下调Ptch1、CD133、CK20、Ki67、Nanog mRNA表达。结论:半枝莲醇提物能抑制HT-29Smo-CSC的增殖和分化,对非经典Hedgehog信号通路关键靶基因和蛋白有显著抑制作用,提示半枝莲能通过非经典Hedgehog信号通路抑制结直肠肿瘤干细胞自我更新和分化。 展开更多

关键词 半枝莲 非经典Hedgehog信号通路 结肠肿瘤干细胞

下载PDF 职称材料

结肠癌干细胞标志物和信号通路的研究进展 被引量：7

10

作者 张子怡 林泉任 +1 位作者 叶春雨 金燕 《生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第8期802-811,共10页

结肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤,世界范围内其发病率位列第三。大部分的结肠癌患者死亡由肿瘤的复发转移和耐药性所致,而这些过程都有肿瘤干细胞的参与。因此,靶向肿瘤干细胞将成为未来根治结肠癌的重要研究方向,而结肠癌干细胞标... 结肠癌是一种最常见的消化道恶性肿瘤,世界范围内其发病率位列第三。大部分的结肠癌患者死亡由肿瘤的复发转移和耐药性所致,而这些过程都有肿瘤干细胞的参与。因此,靶向肿瘤干细胞将成为未来根治结肠癌的重要研究方向,而结肠癌干细胞标志物的发现则为其提供了新思路。同时,因结肠癌干细胞的生长依赖多种信号通路的作用,故其相关信号通路靶向药物的研究也将是一大发展方向。该文就目前关于结肠癌干细胞标志物及其相关信号通路抑制剂的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 生物学标志物 信号通路 肿瘤转移 抑制剂

原文传递

黄芪多糖通过诱导自噬作用促进结肠癌干细胞凋亡的机制 被引量：7

11

作者 李成军 沈光辉 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期2274-2279,共6页

目的:基于自噬作用探索黄芪多糖促进结肠癌干细胞凋亡及其相关分子机制。方法:免疫磁珠分选仪分选CD133、CD44共阳性结肠癌干细胞;悬浮培养验证CD133^(+)/CD44^(+)细胞干性;MTT检测黄芪多糖对CD133^(+)/CD44^(+)细胞增殖活性的影响;流... 目的:基于自噬作用探索黄芪多糖促进结肠癌干细胞凋亡及其相关分子机制。方法:免疫磁珠分选仪分选CD133、CD44共阳性结肠癌干细胞;悬浮培养验证CD133^(+)/CD44^(+)细胞干性;MTT检测黄芪多糖对CD133^(+)/CD44^(+)细胞增殖活性的影响;流式检测黄芪多糖对凋亡的影响;qPCR检测黄芪多糖对凋亡相关基因和自噬相关基因的影响;Western Blot检测黄芪多糖对凋亡相关蛋白和自噬相关蛋白的影响;免疫荧光检测各组细胞mTORC1蛋白的变化。结果:通过磁珠法成功富集CD133^(+)/CD44^(+)细胞,该细胞具有很强的成球能力。黄芪多糖可时间-浓度依赖地抑制CD133^(+)/CD44^(+)细胞增殖,并浓度依赖地诱导CD133^(+)/CD44^(+)细胞凋亡,促进Caspase 3、Caspase 9、Fas、Bax、ClassⅢPI3K、Beclin 1 mRNA和蛋白含量增加,降低Bcl-2、XIAP mRNA和蛋白表达。但是抑制自噬后,黄芪多糖对CD133^(+)/CD44^(+)细胞凋亡和自噬的诱导作用被逆转。结论:黄芪多糖可诱导结肠癌干细胞自噬,抑制其增殖,促进其凋亡。 展开更多

关键词 黄芪多糖 自噬 结肠癌干细胞 凋亡

原文传递

枸杞多糖联合奥沙利铂可逆转结肠癌干细胞的耐药 被引量：2

12

作者 艾芳芳 肖红燕 +2 位作者 汪芳 朱永朝 马丽君 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第1期74-79,共6页

背景:结肠癌临床主要采用以氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂为基础的治疗方法,研究发现这些药物的转运与ABC转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette transport protein of G2,ABCG2)等膜转运蛋白相关,然而当患者对这些化疗药物产生耐药... 背景:结肠癌临床主要采用以氟尿嘧啶、伊立替康及奥沙利铂为基础的治疗方法,研究发现这些药物的转运与ABC转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette transport protein of G2,ABCG2)等膜转运蛋白相关,然而当患者对这些化疗药物产生耐药后,ABCG2的高表达致使治疗效果明显下降,引起了结肠癌的耐药问题。临床急切需要新的药物及治疗方法来提高疗效,枸杞多糖具有广泛的生物学活性,将多糖作为抗肿瘤药物,可以克服化疗和放疗过程中杀死肿瘤细胞的同时对机体正常细胞的损伤。目的:通过体外实验探索枸杞多糖联合奥沙利铂对结肠癌干细胞耐药的逆转作用,进而探讨枸杞多糖逆转结肠癌耐药的可能分子机制。方法:选用结肠癌细胞株HCT116以及奥沙利铂耐药细胞株HCT116-OXR进行体外实验,采用CCK8检测细胞增殖情况确定枸杞多糖和奥沙利铂的最适干预浓度和干预时间,进一步分为HCT116对照组,HCT116-OXR空白处理组,枸杞多糖组(2.5 mg/mL枸杞多糖),奥沙利铂组(10μmol/L奥沙利铂),枸杞多糖+奥沙利铂组(2.5 mg/mL枸杞多糖+10μmol/L奥沙利铂),流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫荧光和Western blot检测磷酸甘露糖异构酶(phosphomannose isomerase,PMI)和ABCG2的表达,Western blot检测PI3K,AKT,Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果与结论:①HCT116-OXR相较HCT116对枸杞多糖更敏感(P<0.05);②与HCT116-OXR空白处理组比较,奥沙利铂联合枸杞多糖促进了HCT116-OXR细胞凋亡(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显下调(P<0.05),Bax蛋白表达明显上调(P<0.05),ABCG2、PMI、PI3K、AKT的蛋白表达明显下调(P<0.05);③结果表明枸杞多糖通过抑制PMI/PI3K/AKT通路逆转结肠癌耐药,为研究枸杞多糖增敏化疗作用的分子机制奠定了基础。 展开更多

关键词 PMI ABCG2 PI3K AKT 枸杞多糖 结肠癌干细胞 耐药 凋亡

下载PDF 职称材料

miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响 被引量：4

13

作者 阎立昆 李伟 +1 位作者 姚建锋 毛智军 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第45期6746-6752,共7页

背景:前期研究发现miR-1231在结肠癌干细胞中表达明显下调,但是其具体的作用机制尚不明确。目的:探讨miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:采用免疫磁珠分选技术从结肠癌细胞株SW1116中分选出结肠癌干细胞(CD133^+CD44... 背景:前期研究发现miR-1231在结肠癌干细胞中表达明显下调,但是其具体的作用机制尚不明确。目的:探讨miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:采用免疫磁珠分选技术从结肠癌细胞株SW1116中分选出结肠癌干细胞(CD133^+CD44^+)和双阴性细胞(CD133-CD44-)。q RT-PCR检测miR-1231在这2种细胞中的表达水平。将CD133^+CD44^+细胞通过脂质体转染miR-1231模拟物(miR-1231 mimics)或miR NA模拟物对照(mi R-control)。采用MTT、流式细胞仪、Transwell小室实验检测miR-1231对CD133^+CD44^+细胞增殖、凋亡、侵袭的影响;免疫印迹法检测miR-1231对CD133^+CD44^+细胞中Ki67、Bax、Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。结果与结论:(1)采用免疫磁珠分选技术得到CD133^+CD44^+和CD133-CD44-细胞;(2)miR-1231在CD133^+CD44^+细胞中的表达水平显著低于CD133-CD44-细胞;(3)miR-1231抑制CD133^+CD44^+细胞增殖和侵袭,促进其凋亡;(4)相对于转染miR NA模拟物对照组,miR-1231高表达的CD133^+CD44^+细胞具有较低的Ki67、Bcl-2,MMP-2和MMP-9蛋白表达和较高的Bax蛋白表达,进一步证实miR-1231抑制CD133^+CD44^+细胞增殖和侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 干细胞 肿瘤干细胞 结肠癌干细胞 miR-1231 增殖 凋亡 侵袭

下载PDF 职称材料

莱菔子抑制结肠癌干细胞恶性行为的研究 被引量：5

14

作者 郝钦 谭晓慧 +3 位作者 王飞 杨昊 张慕垚 王振飞 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2020年第10期154-156,共3页

目的研究中药莱菔子对结肠癌干细胞恶性行为的影响,并探讨其作用机理。方法采用无血清悬浮培养法从HT29结肠癌细胞系中诱导培养结肠癌干细胞。制备莱菔子乙醇提取物,以不同浓度(30~120μg/mL)作用于结肠癌干细胞。采用悬浮成球法检测结... 目的研究中药莱菔子对结肠癌干细胞恶性行为的影响,并探讨其作用机理。方法采用无血清悬浮培养法从HT29结肠癌细胞系中诱导培养结肠癌干细胞。制备莱菔子乙醇提取物,以不同浓度(30~120μg/mL)作用于结肠癌干细胞。采用悬浮成球法检测结肠癌干细胞的自我更新能力,采用CCK-8法检测增殖能力,采用Matrigel穿膜法检测侵袭能力,采用实时荧光定量PCR法检测结肠癌干细胞内长链非编码RNA HOTAIR的表达水平。结果莱菔子乙醇提取物有力抑制了结肠癌干细胞的自我更新能力、增殖能力和侵袭能力,显著下调了结肠癌干细胞内HOTAIR的表达水平。结论中药莱菔子能够抑制结肠癌干细胞的恶性行为,其作用机制与下调促癌的长链非编码RNA表达有关,在结肠癌的治疗中具有良好应用价值。 展开更多

关键词 莱菔子 结肠癌干细胞 长链非编码RNA 恶性行为

下载PDF 职称材料

EMT在结肠癌干细胞“干性”获得与维持中的作用及机制研究进展 被引量：4

15

作者 康毅 周晏因(综述) 朱蓉(审校) 《海南医学》 CAS 2022年第6期782-786,共5页

结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,在全球其发病率高居第三。大部分结肠癌患者的死亡由肿瘤的复发、转移和耐药性所导致,而这些过程都有结肠癌干细胞(CCSCs)的介入。上皮间充质转化(EMT)在胚胎发育、肿瘤发生及其浸润转移等过程中都起着重... 结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤,在全球其发病率高居第三。大部分结肠癌患者的死亡由肿瘤的复发、转移和耐药性所导致,而这些过程都有结肠癌干细胞(CCSCs)的介入。上皮间充质转化(EMT)在胚胎发育、肿瘤发生及其浸润转移等过程中都起着重要的调节作用。近来研究发现,EMT与CCSCs之间存在重要的相互联系,CCSCs的“干性”获得与维持与EMT密切相关,同时CCSCs在不同的微环境又具有EMT特性,从而在肿瘤的产生、进展和转移过程中发挥着十分重要的作用。本文总结国内外关于CCSCs和肿瘤细胞EMT关系的研究进展,阐明CCSCs与EMT的相互关系及其调控机制,以期为其靶向治疗找到新途径。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 上皮间充质转化 结肠癌 机制 靶向治疗 研究进展

下载PDF 职称材料

藤黄醇提取物对结肠癌干细胞裸鼠原位移植瘤的作用及机制

16

作者 李悠然 谷云飞 +3 位作者 王微 吴旻娜 贡钰霞 王浩 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期907-912,共6页

目的:观察藤黄醇提取物对结肠癌HCT116干细胞裸鼠原位移植瘤的作用及相关作用机制。方法:采用流式细胞术分选和鉴定结肠癌干细胞后,随后建立裸鼠结肠癌干细胞原位移植瘤模型,随机分为5组:G1(空白对照)、G2(5-氟尿嘧啶)、G3(低剂量藤黄... 目的:观察藤黄醇提取物对结肠癌HCT116干细胞裸鼠原位移植瘤的作用及相关作用机制。方法:采用流式细胞术分选和鉴定结肠癌干细胞后,随后建立裸鼠结肠癌干细胞原位移植瘤模型,随机分为5组:G1(空白对照)、G2(5-氟尿嘧啶)、G3(低剂量藤黄醇提取物)、G4(高剂量藤黄醇提取物)、G5(5-氟尿嘧啶和高剂量藤黄醇提取物)。通过荧光成像系统观察整体肿瘤发光强度和原位肿瘤发光强度,计算相对肿瘤抑制率和肿瘤延迟时间对药物抗肿瘤疗效进行评估。给药第28天处死裸鼠,记录肿瘤转移的数量和位置。取原发肿瘤病灶称重,并采用Western Blot检测相关蛋白表达。结果:与G1比较,各给药组瘤重和肿瘤荧光强度均有所降低,其中G5相对肿瘤抑制率及肿瘤转移抑制作用最佳。与G1比较,各给药组均显著下调分化抗原簇蛋白44(CD44)、分化抗原簇蛋白133(CD133)、性别决定区Y-box蛋白2(SOX2)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达(P<0.05,P<0.01),显著上调上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达(P<0.01)。结论:藤黄醇提取物可能通过抑制结肠癌干细胞调控上皮间质转化过程,发挥抑制结肠肿瘤的增殖、侵袭和转移的作用;且联合5-氟尿嘧啶效果更好。 展开更多

关键词 藤黄 醇提取物 结肠癌干细胞 上皮间质转化 干性 机制 结直肠癌 5-氟尿嘧啶

原文传递

白细胞介素-1β对结肠癌干细胞迁移及诱导上皮-间质转化的影响 被引量：4

17

作者 莫波 雍鑫 +3 位作者 乔丽娟 杨明 刘阳 徐辉 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期2901-2904,共4页

目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)促进结肠癌干细胞转移及要到上皮间质转化的作用机制。方法以原代细胞无血清培养刺激原代细胞向干细胞转化的方法获取干细胞。根据处理方式将结肠癌细胞分为对照组(不处理)和IL-1β组(4 ng·mL^(-1)I... 目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)促进结肠癌干细胞转移及要到上皮间质转化的作用机制。方法以原代细胞无血清培养刺激原代细胞向干细胞转化的方法获取干细胞。根据处理方式将结肠癌细胞分为对照组(不处理)和IL-1β组(4 ng·mL^(-1)IL-1β处理)。观察IL-1β处理对结肠癌干细胞转移能力、上皮间质转化以及干细胞相关基因mRNA及蛋白水平的影响。同时根据不同的处理方式将结肠癌细胞分为IL-1β组(IL-1β处理)和shZeb1+IL-1β组(经shZeb1慢病毒感染后IL-1β再处理)。观察结肠癌干细胞相关基因以及EMT相关基因mRNA和蛋白水平变化。结果IL-1β处理后结肠癌干细胞转移数量增多,对照组和IL-1β组的迁移细胞数目分别为(796.33±42.72)和(458.67±20.64),差异有统计学意义(P<0.01)。IL-1β组结肠癌干细胞上皮间质转化细胞数量明显增多,细胞形态由上皮典型的上皮细胞形态向间质细胞形态转化;IL-1β组结肠癌干细胞相关基因mRNA及蛋白表达量改变,B细胞特异的莫洛尼白血病插入位点1基因(Bmi1)、Nestin、E盒结合锌指蛋白(Zeb1)、Zeb2基因及蛋白表达均显著高于对照组。对照组和IL-1β组E-cadherin蛋白表达量分别为0.66±0.09,0.32±0.04,Vimentin蛋白表达分别为0.38±0.04,0.77±0.07,IL-1β组和IL-1β+shZeb1组E-cadherin蛋白表达量分别为0.38±0.04,0.91±0.05,Vimentin蛋白表达量分别为0.76±0.05,0.40±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.01)。IL-1β组和shZeb1+IL-1β组Bmi1 mRNA表达分别为1.37±0.10,0.28±0.05,Nestin mRNA表达分别为1.25±0.14,0.21±0.10,Bmi1蛋白表达分别为0.66±0.07,0.31±0.12,Nestin蛋白表达分别为0.71±0.13,0.31±0.12,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论IL-1β可促进结肠癌干细胞转移及诱导上皮-间质转化,其机制与上调Zeb1有关。 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 转移 上皮间质转化 白细胞介素-1Β E盒结合锌指蛋白1

原文传递

胃肠安及四藤方对人结肠癌细胞株干细胞CD133^+的影响 被引量：4

18

作者 祝利民 沈克平 +2 位作者 周浩 潘传芳 姚琼 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期161-165,171,共6页

目的观察胃肠安和四藤方对结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29及其干细胞CD133^+的抑制作用。方法人结肠癌细胞株(HCT-116、SW480、HT-29)随机分为对照组和不同浓度胃肠安(500 mg/L和1 000mg/L)、四藤方(100 mg/L和200 mg/L)干预组,干预... 目的观察胃肠安和四藤方对结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29及其干细胞CD133^+的抑制作用。方法人结肠癌细胞株(HCT-116、SW480、HT-29)随机分为对照组和不同浓度胃肠安(500 mg/L和1 000mg/L)、四藤方(100 mg/L和200 mg/L)干预组,干预24 h后,CCK-8法测定细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪分析胃肠安和四藤方对HCT-116、SW480、HT-29中CD133^+表达的影响。结果 CCK-8法检测结果显示,胃肠安及四藤方干预HCT-116、SW480、HT-29细胞后,细胞活力均下降且呈剂量依赖性;倒置显微镜观察发现:胃肠安及四藤方干预24 h,HCT-116、SW480、HT-29的细胞数量减少,细胞体积缩小,遮光性差,细胞悬浮、脱落而死亡。流式细胞术分析结果显示:对照组HCT-116、SW480、HT-29中CD133^+细胞的比例分别为12.52%、10.98%、2.33%;胃肠安方1 000 mg/L干预24 h后,CD133^+细胞比例分别下降为7.49%、5.36%、0.11%;四藤方组200 mg/L干预24 h后,CD133^+细胞比例分别下降为7.83%、6.45%、0.18%。结论不同结肠癌细胞株中CD133^+细胞比例有差异。胃肠安及四藤方均具有抑制结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29增殖的作用;但在同样的干预时间内,较高浓度胃肠安(1 000 mg/L)及四藤方(200 mg/L)才具有抑制3种细胞株干细胞CD133^+表达的作用。 展开更多

关键词 胃肠安 四藤方 结肠癌干细胞 CD133^+

下载PDF 职称材料

人HCT116结肠癌细胞系中CD133^+结肠癌干细胞分离及鉴定 被引量：4

19

作者 陈克力 梁后杰 +3 位作者 江恒 陈建芳 裴莉 郑晨宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期330-333,共4页

目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+... 目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+细胞鉴定其体外增殖特性;采用含血清培养基诱导干细胞克隆球分化并采用免疫组化检测CK20表达情况鉴定其分化特性。结果HCT116细胞系中存在CD133+细胞,免疫磁珠能有效的分选CD133+细胞,分选后的阳性含量为91.92%,分选后的阳性细胞具有典型干细胞的体外增殖、分化特性。结论CD133+结肠癌干细胞在体外具有和普通干细胞类似的无限增殖、自我更新和分化能力,同时它们也表达ABCG2等耐药相关蛋白。 展开更多

关键词 HCT116 结肠癌干细胞 CD133 分离及鉴定

下载PDF 职称材料

结肠癌干细胞表面标志物、特性及致病机制的研究概况 被引量：4

20

作者 高莹 安啸海 +1 位作者 杨晓玲 杨柏霖 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第35期5662-5669,共8页

全球范围内结肠癌肿瘤发病位列第3位.随着分子生物学研究不断进步,人们发现肿瘤细胞中存在着一小部分特殊的细胞亚群,即肿瘤干细胞.肿瘤干细胞通过不断自我更新和分化使肿瘤具有持续生长、远处转移和复发的能力.研究表明,传统的放化疗... 全球范围内结肠癌肿瘤发病位列第3位.随着分子生物学研究不断进步,人们发现肿瘤细胞中存在着一小部分特殊的细胞亚群,即肿瘤干细胞.肿瘤干细胞通过不断自我更新和分化使肿瘤具有持续生长、远处转移和复发的能力.研究表明,传统的放化疗无法彻底消除肿瘤干细胞,通过特异性细胞表面标志精确地将肿瘤干细胞从大量肿瘤细胞和正常健康细胞中分离,为精确靶向治疗提供了基础.充分认识和利用结肠癌干细胞的自我更新和分化机制,应用分子生物技术阻断其稳态调控,将成为靶向治疗结肠癌的新契机. 展开更多

关键词 结肠癌干细胞 稳态调控 表面标志 靶向治疗

下载PDF 职称材料