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cPKCγ参与低氧预适应对小鼠脑缺血皮质内CRMP2水解和磷酸化的调节 被引量:2
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作者 刘燕燕 杨璇 +3 位作者 韩松 苏吉儿 罗宏 李俊发 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第1期25-30,共6页
目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)调节小鼠脑缺血皮质内脑衰反应蛋白-2(CRMP2)水解和磷酸化中作用。方法利用雄性BALB/c小鼠(18~22 g)HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,借助蛋白印迹、免疫共沉淀和免疫组化等生物化... 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)在低氧预适应(HPC)调节小鼠脑缺血皮质内脑衰反应蛋白-2(CRMP2)水解和磷酸化中作用。方法利用雄性BALB/c小鼠(18~22 g)HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,借助蛋白印迹、免疫共沉淀和免疫组化等生物化学技术,观察cPKCγ激活对小鼠缺血脑皮质内CRMP2蛋白水解程度(BDP)和磷酸化水平(p-CRMP2)、cPKCγ-CRMP2相互作用和皮质缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数的影响。结果 HPC显著提高缺血脑皮质半影区内p-CRMP2水平,降低BDP产物形成(P<0.05),而侧脑室注射cPKCγ抑制剂Go6983(6nmol/L)可明显解除HPC对半影区内CRMP2蛋白水解和磷酸化的调节作用(P<0.05);免疫共沉淀结果提示,cPKCγ激活程度参与HPC对缺血脑皮质半影区内cPKCγ-CRMP2相互作用的调节;同时,cPKCγ激活与HPC提高脑缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数有关(P<0.05)。结论 cPKCγ参与HPC对小鼠缺血脑皮质内CRMP2水解与磷酸化的调节。 展开更多
关键词 缺血/低氧预适应 大脑中动脉阻塞 典型蛋白激酶c 脑衰反应蛋白-2
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缺血预处理对大鼠视网膜内cPKC亚型特异性膜转位和蛋白表达量的影响 被引量:1
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作者 丁宁 王宁利 +1 位作者 魏勇 李俊发 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第6期616-620,共5页
目的通过观察缺血预处理(IP)对大鼠视网膜内经典型蛋白激酶C(cPKC)α、βⅠ、βⅡ和γ等4种亚型特异性膜转位(激活)水平和蛋白表达量的影响,确定可能参与视网膜缺血预适应(IPC)形成的cPKC亚型。方法体重200~250g雄性Wistar大鼠随机分为... 目的通过观察缺血预处理(IP)对大鼠视网膜内经典型蛋白激酶C(cPKC)α、βⅠ、βⅡ和γ等4种亚型特异性膜转位(激活)水平和蛋白表达量的影响,确定可能参与视网膜缺血预适应(IPC)形成的cPKC亚型。方法体重200~250g雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(C,n=6),IP组(左眼内压17.29kPa并维持5min,n=48),假手术组(Sham,n=48);后两组分别在手术处理后10、20和40min及1、12、24、72和168h(每个时间点n=6)取视网膜组织。应用Western blot检测cPKC亚型特异性膜转位水平和蛋白表达量。结果大鼠视网膜组织内cPKCα、βⅠ、βⅡ和γ等亚型中,cPKCα膜转位水平在IP处理后10min^168h内与C和Sham组相比无显著改变,而蛋白表达量在IP处理后12~168h明显升高,在72h达高峰。cPKCγ膜转位水平在IP处理后20min^1h内显著增高,在40min达高峰;cPKCγ蛋白表达量在IP处理后12~72h明显增高,在24h达高峰。IP处理对视网膜组织内cPKCβⅠ、βⅡ膜转位水平和蛋白表达量均无显著影响。结论cPKCγ膜转位(激活)增强可能参与大鼠视网膜IPC早期形成,而cPKCα和γ蛋白表达量的增高可能与晚期IPC的维持有关。 展开更多
关键词 视网膜缺血预适应 典型蛋白激酶c 蛋白表达量 膜转位
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延迟性低氧预适应降低小鼠脑皮质cPKCγ蛋白表达 被引量:1
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作者 韩松 牛晨晨 李俊发 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第4期372-375,共4页
目的探讨cPKCα和γ膜转位水平及蛋白表达量在延迟性脑低氧预适应形成过程中的变化。方法应用SDS-PAGE和Western bolt等技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测延迟性脑低氧预适应小鼠(H5和H6组)脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平及... 目的探讨cPKCα和γ膜转位水平及蛋白表达量在延迟性脑低氧预适应形成过程中的变化。方法应用SDS-PAGE和Western bolt等技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测延迟性脑低氧预适应小鼠(H5和H6组)脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平及蛋白表达量。结果延迟性低氧预适应(H5和H6组)明显降低小鼠脑皮质组织内cPKCγ蛋白表达量(P<0.05),而膜转位(活性)水平变化不显著。对海马cPKCγ、大脑皮质和海马cPKCα蛋白表达量及膜转位水平的影响均不显著。结论大脑皮质cPKCγ蛋白表达量的改变可能参与延迟性脑低氧预适应形成,且可能与皮质和海马低氧选择易损性的差异有关。 展开更多
关键词 脑低氧预适应 典型蛋白激酶c 膜转位 蛋白表达量 脑组织
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低氧预适应增高小鼠脑组织内cPKCγ的膜转位水平 被引量:14
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作者 崔秀玉 李俊发 +1 位作者 韩松 祖鹏宇 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期461-465,共5页
本实验拟通过观察重复性低氧对经典型蛋白激酶C(cPKC)膜转位水平(激活程度)的影响,初步探讨cPKC特定亚型在脑低氧预适应发生过程中的作用。按我室已建立的小鼠低氧预适应模型方法,制备重复性低氧1-4次的小鼠(H1-H4)。应用SDS-聚丙烯酰... 本实验拟通过观察重复性低氧对经典型蛋白激酶C(cPKC)膜转位水平(激活程度)的影响,初步探讨cPKC特定亚型在脑低氧预适应发生过程中的作用。按我室已建立的小鼠低氧预适应模型方法,制备重复性低氧1-4次的小鼠(H1-H4)。应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western bolt)等生化技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测小鼠海马和大脑皮层组织内cPKCα和γ的膜转位水平。实验结果表明,随低氧次数(H1-H4)的增加,小鼠海马组织内cPKCγ的膜转位水平明显增高,且在H2、H3和H4组的变化具有统计学显著意义(P<0.05,n=6);同样,大脑皮层内cPKCγ膜转位水平也随低氧次数的增加(H1-H4)而明显增高,且在H2、H3和H4组的变化具有统计学显著意义(P<0.05,n=6):而cPKCα亚型无论在大脑皮层还是在海马组织内的膜转位变化均无统计学意义。上述观察结果提示,cPKCγ膜转位可能在脑低氧预适应的发生发展过程中发挥着重要作用;但cPKCβ Ⅰ、β Ⅱ以及其它新奇型和非典型PKC特定亚型的变化还有待于进一步的研究和探讨。 展开更多
关键词 氧预适应 典型蛋白激酶c(cPKc) cPKcγ膜转位 蛋白激酶c 海马 大脑皮层
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PI3K/Akt-aPKC_(ι/ζ)-Nrf2调控大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达 被引量:7
5
作者 江刚 戴爱国 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期115-119,共5页
目的:观察香烟烟雾提取物(CSE)是否通过磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt-不典型蛋白激酶Cι/ζ(aP-KCι/ζ)-核因子相关因子2(Nrf2)信号通路调控大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(-γGCS)表达。方法:用Western blot法检测-γGCS、N... 目的:观察香烟烟雾提取物(CSE)是否通过磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt-不典型蛋白激酶Cι/ζ(aP-KCι/ζ)-核因子相关因子2(Nrf2)信号通路调控大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(-γGCS)表达。方法:用Western blot法检测-γGCS、Nrf2、p-Akt和p-aPKCι/ζ蛋白质,细胞免疫化学法观察-γGCS蛋白质表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测-γGCSmRNA,免疫荧光法检测Nrf2蛋白质,流式分析法检测p-Akt阳性细胞率,双酶法测定-γGCS活性,酶循环分析法测定总还原型谷胱甘肽(GSH)含量。结果:暴露CSE 3 h,GSH含量显著升高,Nrf2胞核蛋白质、p-aPKCι/ζ蛋白质、p-Akt蛋白质及其阳性细胞率、-γGCS蛋白质及其mRNA和活性均显著增强。aPKCι/ζ抑制剂RO813220明显减弱p-aPKCι/ζ蛋白质、-γGCS蛋白质及其mRNA和活性表达,但增强Nrf2胞浆蛋白质表达,对p-Akt无影响。p-Akt抑制剂LY294002及RO813220+LY294002均降低p-aPKCι/ζ蛋白质、p-Akt蛋白质及阳性细胞率、-γGCS蛋白质及其mRNA和活性表达,增强Nrf2胞浆蛋白质表达。直线相关性分析显示Nrf2与-γGCS、p-Akt及p-aPKCι/ζ呈正相关,p-Akt与Nrf2、p-aPKCι/ζ及-γGCS呈正相关,p-aPKCι/ζ与Nrf2、p-Akt及-γGCS呈正相关(P<0.05)。结论:CSE可能通过PI3K/Akt-aPKCι/-ζNrf2调节-γGCS表达。 展开更多
关键词 香烟烟雾提取物 磷酯酰肌醇-3-激酶 典型蛋白激酶cι/ζ 核因子相关因子2 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶
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复方血栓通胶囊对动脉阻塞致缺血性脑卒中小鼠cPKCγ表达水平及神经功能损伤程度的影响 被引量:7
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作者 鲁东 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2015年第2期109-112,共4页
目的探讨复方血栓通胶囊对动脉阻塞致缺血性脑卒中小鼠脑内源性经典型蛋白激酶Cγ亚型(c PKCγ)表达水平及神经功能损伤程度的影响。方法选取60只健康成年昆明小鼠,根据随机数字表将小鼠分为假性手术组、模型对照组、尼莫地平组及复方... 目的探讨复方血栓通胶囊对动脉阻塞致缺血性脑卒中小鼠脑内源性经典型蛋白激酶Cγ亚型(c PKCγ)表达水平及神经功能损伤程度的影响。方法选取60只健康成年昆明小鼠,根据随机数字表将小鼠分为假性手术组、模型对照组、尼莫地平组及复方血栓通胶囊低剂量组(0.75 g/kg)、中剂量组(1.50 g/kg)和高剂量组(2.25 g/kg),每组10只。记录建模后6 h、12 h和48 h时间点小鼠神经功能评分,并测定小鼠脑含水量及c PKCγ蛋白水平。结果复方血栓通低、中、高剂量组在缺血后6 h、12 h和48 h神经功能损伤评分显著低于假性手术组(P<0.05)。而实验结束后复方血栓通各组脑c PKCγ蛋白水平均高于模型对照组(P<0.05)。实验结束时复方血栓通低、中、高剂量组脑含水量均低于模型对照组(P<0.05)。结论复方血栓通胶囊能有效改善缺血性脑卒中小鼠脑水肿程度,减轻神经功能损伤,其作用机制可能与其促进c PKCγ蛋白水平表达有关。 展开更多
关键词 复方血栓通胶囊 缺血性脑卒中 脑内源性典型蛋白激酶cγ亚型 小鼠
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aPKC-ι和E-cadherin在胆管癌组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 李强 王剑明 +3 位作者 刘聪 肖宝来 苏瑛 邹声泉 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期715-718,共4页
背景与目的:研究表明,极化调节蛋白非典型蛋白激酶C(atypical protein kinase C,aPKC)亚型aPKC-ι和E-cadherin在一些恶性肿瘤中异常表达对肿瘤的发生、发展起着重要作用。本研究分析aPKC-ι和E-cadherin在胆管癌组织中的表达与临床病... 背景与目的:研究表明,极化调节蛋白非典型蛋白激酶C(atypical protein kinase C,aPKC)亚型aPKC-ι和E-cadherin在一些恶性肿瘤中异常表达对肿瘤的发生、发展起着重要作用。本研究分析aPKC-ι和E-cadherin在胆管癌组织中的表达与临床病理的关系,探讨胆管癌侵袭转移的分子机制。方法:采用免疫组化EnVision法检测9例非癌胆管疾病组织及35例胆管癌组织中aPKC-ι和E-cadherin表达,分析两者与胆管癌临床病理特征、侵袭性的关系。结果:aPKC-ι在胆管癌组织中的阳性高表达率为68.6%明显高于非癌胆管疾病组织的11.1%(P=0.006),E-cadherin在胆管癌中的高表达率为37.1%明显低于非癌胆管疾病组织的88.9%(P=0.016),且两者间呈负相关(r=-0.287,P<0.05);胆管癌组织分化程度、侵袭性与aPKC-ι表达呈正相关(P<0.05),与E-cadherin表达呈负相关(P<0.05)。结论:aPKC-ι和E-cadherin的表达与胆管癌分化程度和侵袭性相关,aPKC-ι可能作为一种极化调节相关蛋白在胆管癌侵袭、转移中发挥作用。 展开更多
关键词 胆管肿瘤 典型蛋白激酶c 上皮钙粘蛋白 免疫组化
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非经典型蛋白激酶C的研究进展 被引量:3
8
作者 李亚宁 刘华锋 《临床医学工程》 2012年第9期1614-1616,1619,共4页
非经典型蛋白激酶C是G蛋白偶联受体系统中的效应物,其在细胞内信号传递过程中起重要作用,可介导细胞增殖和分化、影响细胞周期和细胞凋亡、参与代谢调节、促进肿瘤形成和转移等。因此,靶向非经典型蛋白激酶C的药物在疾病治疗中有广泛的... 非经典型蛋白激酶C是G蛋白偶联受体系统中的效应物,其在细胞内信号传递过程中起重要作用,可介导细胞增殖和分化、影响细胞周期和细胞凋亡、参与代谢调节、促进肿瘤形成和转移等。因此,靶向非经典型蛋白激酶C的药物在疾病治疗中有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 典型蛋白激酶c 活化 易位 抑制剂
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胰岛素敏感性磷脂信号系统与葡萄糖转运的关系 被引量:1
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作者 侯志敏 茹柄根 《生命的化学》 CAS CSCD 2004年第2期125-127,共3页
胰岛素能够迅速改变靶细胞磷脂代谢 ,生成一系列活性脂类信号分子 ,激活PIP3依赖性非典型蛋白激酶C、PIP3依赖性蛋白激酶B以及DAG敏感性PKCs等下游效应因子 ,从而对葡萄糖转运进行调控。阐明胰岛素敏感性磷脂信号系统与葡萄糖转运的关... 胰岛素能够迅速改变靶细胞磷脂代谢 ,生成一系列活性脂类信号分子 ,激活PIP3依赖性非典型蛋白激酶C、PIP3依赖性蛋白激酶B以及DAG敏感性PKCs等下游效应因子 ,从而对葡萄糖转运进行调控。阐明胰岛素敏感性磷脂信号系统与葡萄糖转运的关系对于深入了解胰岛素抵抗的发病机制具有重要意义。 展开更多
关键词 胰岛素 典型蛋白激酶c 蛋白激酶c 蛋白激酶c 蛋白激酶B
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核因子相关因子2调节大鼠气道上皮细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达 被引量:3
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作者 江刚 戴爱国 胡瑞成 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期150-156,共7页
红系衍生的核因子相关因子2(Nrf2)是调节抗氧化基因表达的关键转录因子.γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)是肺内主要的抗氧化基因,但Nrf2如何调节γ-GCS表达目前仍不清楚.该文采用香烟烟雾提取物(CSE)诱导大鼠气道上皮细胞为研究对象,探... 红系衍生的核因子相关因子2(Nrf2)是调节抗氧化基因表达的关键转录因子.γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)是肺内主要的抗氧化基因,但Nrf2如何调节γ-GCS表达目前仍不清楚.该文采用香烟烟雾提取物(CSE)诱导大鼠气道上皮细胞为研究对象,探索Nrf2调节γ-GCS基因表达机制.细胞免疫荧光显示,Nrf2蛋白质在CSE处理1、3和6h组,主要在胞核中表达.细胞免疫化学与Western印迹显示,γ-GCS蛋白质在CSE1、3、6h组表达明显增强,其中Western印迹结果高于对照组(P<0.05);Nrf2胞核蛋白质表达增强.p-aPKCι/ζ蛋白质在CSE1、3h组表达增强,与对照组相比差异显著(P<0.05).RT-PCR结果表明,γ-GCSmRNA在CSE1、3、6h组表达明显高于对照组(P<0.05).γ-GCS活性在CSE1、3、6h组增高并高于对照组(P<0.05).GSH含量在CSE3、6h组明显高于对照组(P<0.05).预先加入aPKCι/ζ抑制剂RO813220,Nrf2胞浆蛋白质表达增强,GSH含量、p-aPKCι/ζ蛋白质、γ-GCS蛋白质与其mRNA和活性均明显低于CSE3h组(P<0.05).相关性分析显示Nrf2与γ-GCS、γ-GCS活性、p-aPKCι/ζ呈正相关,p-aPKCι/ζ与Nrf2、γ-GCS、γ-GCS活性呈正相关(P<0.05).以上结果表明,CSE可能通过aPKCι/ζ-Nrf2信号通路调节γ-GCS的表达水平和活性. 展开更多
关键词 香烟烟雾提取物 典型蛋白激酶cι/ζ 红系衍生的核因子相关因子2 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶
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2,3,7,8-四氯二苯二噁英诱导C57BL小鼠腭裂发病机制的研究 被引量:1
11
作者 罗枭 蔡生青 +1 位作者 石冰 李承浩 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2022年第3期317-323,共7页
目的探究2,3,7,8-四氯二苯二噁英(TCDD)诱导的腭裂模型中对中嵴上皮细胞影响的机制。方法E12.5孕鼠随机分为对照组和实验组,实验组孕鼠胃饲质量浓度为4μg·mL-1的TCDD;对照组孕鼠胃饲蓖麻油。于E18.5在体视显微镜下检测各组腭发育... 目的探究2,3,7,8-四氯二苯二噁英(TCDD)诱导的腭裂模型中对中嵴上皮细胞影响的机制。方法E12.5孕鼠随机分为对照组和实验组,实验组孕鼠胃饲质量浓度为4μg·mL-1的TCDD;对照组孕鼠胃饲蓖麻油。于E18.5在体视显微镜下检测各组腭发育情况;分别在E13.5、E14.5、E15.5取胎鼠腭部组织行苏木精-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色,观察小鼠腭部形态和蛋白酶活化受体/非典型蛋白激酶C(PAR/aPKC)复合物、β-连环蛋白的表达情况;用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定量检测mRNA表达;Western blot定量检测PAR/aPKC复合物。结果TCDD组胎鼠在E18.5全部发生腭裂,对照组未见腭裂产生。RT-PCR定量检测,PAR/aPKC复合体mRNA在E13.5表达最强,E14.5、E15.5的表达减弱。β-连环蛋白在E14.5表达最强,E13.5次之,E15.5表达最弱;E13.5、E14.5 TCDD组β-连环蛋白的表达明显低于对照组,E15.5高于对照组(P<0.01)。Western blot检测,PAR/aPKC复合体的表达随着腭发育而降低。免疫组织化学染色显示β-连环蛋白在对照组E13.5、E14.5腭中嵴上皮细胞内呈强阳性表达。结论TCDD有可能通过干扰PAR/aPKC复合体协同β-连环蛋白参与诱导小鼠腭上皮融合异常,而导致腭裂。 展开更多
关键词 蛋白酶活化受体/非典型蛋白激酶c复合体 细胞极性 四氯二苯二噁英 腭裂 Β-连环蛋白
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非典型蛋白激酶C复合物在细胞极性建立中的作用 被引量:1
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作者 陈励 辛天池 李明发 《细胞生物学杂志》 CSCD 2007年第4期468-472,共5页
极性是多数细胞的共同特征,是细胞分化和细胞行使正常功能的基础,细胞极性的建立对于生物体的生长发育至关重要。过去十年的研究显示,进化上保守的非典型蛋白激酶C(aPKC)复合物在许多生物的多种细胞中都参与了细胞极性的建立,并且在其... 极性是多数细胞的共同特征,是细胞分化和细胞行使正常功能的基础,细胞极性的建立对于生物体的生长发育至关重要。过去十年的研究显示,进化上保守的非典型蛋白激酶C(aPKC)复合物在许多生物的多种细胞中都参与了细胞极性的建立,并且在其中扮演着相当重要的角色,这为揭示极性建立的机制提供了重要的线索。以线虫合子前-后极(anterior-posterior)的形成、哺乳动物和果蝇上皮细胞顶-底极(apical-basal)的建立以及果蝇神经母细胞不对称分裂中细胞命运决定子的分配这3个典型的极性过程为主线,综述了aPKC复合物在细胞极性建立中的作用,并探讨其中的分子机制。 展开更多
关键词 PAR 典型蛋白激酶c 细胞极性
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经典型蛋白激酶Cγ对突触蛋白-Ⅰ磷酸化调节及其在脑缺血损伤中的作用 被引量:1
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作者 朱弘倚 张楠 +3 位作者 于津泠 魏海萍 韩松 李俊发 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期145-151,共7页
目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(c PKCγ)对突触蛋白-Ⅰ磷酸化水平的影响及其在小鼠原代脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中作用。方法借助c PKCγ基因敲除(c PKCγ^(-/-))小鼠,利用小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)在体缺血模型和原代脑皮层神... 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(c PKCγ)对突触蛋白-Ⅰ磷酸化水平的影响及其在小鼠原代脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中作用。方法借助c PKCγ基因敲除(c PKCγ^(-/-))小鼠,利用小鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)在体缺血模型和原代脑皮层神经元OGD离体细胞缺血模型,采用免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹和免疫荧光等生物化学技术,验证c PKCγ与突触蛋白-Ⅰ的相互作用,探讨c PKCγ对突触蛋白-Ⅰ磷酸化水平的调节及小鼠原代脑皮层神经元OGD损伤后对神经元形态的影响。结果免疫共沉淀结果证明,正常及缺血小鼠脑皮层组织中c PKCγ与突触蛋白-Ⅰ均存在相互作用;对突触蛋白-Ⅰ5个可能的丝氨酸磷酸化位点进行筛选发现,只有Ser549和Ser553位点的磷酸化水平在OGD和c PKCγ敲除前后有明显变化;进一步统计分析得出,野生型(c PKCγ^(+/+))小鼠原代脑皮层神经元中,OGD处理使突触蛋白-ⅠSer549和Ser553位点的磷酸化水平显著降低(每组n=5,与野生型常氧组相比P<0.05),c PKCγ基因敲除可显著降低上述两个位点的磷酸化水平(每组n=5,与野生型常氧组相比P<0.05),而OGD处理后降低趋势更明显(每组n=5,与野生型OGD组相比P<0.05);除此之外,OGD处理可使c PKCγ^(+/+)和c PKCγ^(-/-)脑皮层神经元突起的长度和数目均显著降低(每组n=8,与野生型常氧组相比,P<0.05),c PKCγ^(-/-)组降低现象更加显著(每组n=8,与野生型OGD组相比,P<0.05)。结论缺血/低氧损伤情况下,c PKCγ可能通过调节突触蛋白-ⅠSer549和Ser553磷酸化水平影响神经元突起的形态,从而保护神经元免受缺血/低氧损伤。 展开更多
关键词 氧糖剥夺 典型蛋白激酶cγ 突触蛋白-Ⅰ 基因敲除 免疫荧光 小鼠
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经典型蛋白激酶Cγ及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺缺血损伤中的作用 被引量:1
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作者 章欣欣 杨璇 +3 位作者 马维 陈璐勔 韩松 李俊发 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期145-150,共6页
目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中的作用。方法利用cPKCγ基因敲除(cPKCγ-/-)小鼠和原代培养脑皮层神经元1hOGD/24h复糖复氧(R)模拟离体细胞缺血模型,给... 目的探讨经典型蛋白激酶Cγ(cPKCγ)及其相互作用蛋白14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元氧-糖剥夺(OGD)缺血损伤中的作用。方法利用cPKCγ基因敲除(cPKCγ-/-)小鼠和原代培养脑皮层神经元1hOGD/24h复糖复氧(R)模拟离体细胞缺血模型,给予14-3-3γ抑制剂R18干扰,采用免疫共沉淀(Co-IP)、蛋白免疫印迹(Westernblotting)和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,验证cPKCγ与14-3-3γ的相互作用及其对原代培养小鼠脑皮层神经元1hOGD/24hR缺血损伤的影响。结果Co-IP结果证明,14-3-3γ与cPKCγ在小鼠脑皮层中确实存在相互作用;1hOGD/24hR处理使原代培养野生型(cPKCγ+/+)小鼠脑皮层神经元内cPKCγ蛋白水平明显降低,而14-3-3γ蛋白水平显著增加(P<0.05,每组n=6);对于原代培养cPKCγ-/-小鼠脑皮层神经元,尽管14-3-3γ表达水平明显高于cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元,但1hOGD/24hR处理却使14-3-3γ表达水平显著降低(P<0.05,每组n=6),提示cPKCγ可影响神经元内14-3-3γ的表达水平。此外,MTT结果表明,14-3-3γ抑制剂R18(100μmol/L)可显著加重1hOGD/24hR处理原代培养cPKCγ-/-和cPKCγ+/+小鼠脑皮层神经元的缺血损伤(P<0.05,每组n=6)。结论cPKCγ与14-3-3γ在小鼠脑皮层神经元内存在相互作用并影响14-3-3γ的蛋白表达水平,cPKCγ和14-3-3γ在原代培养小鼠脑皮层神经元缺血/低氧损伤中起保护作用。 展开更多
关键词 原代培养小鼠脑皮层神 氧-糖剥夺 缺血损伤 典型蛋白激酶cγ 14-3-3γ 免疫印迹法 小鼠
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小分子化合物C93355对小鼠海马神经元突起的抑制作用
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作者 邓桂芬 杨贤云 周立兵 《郧阳医学院学报》 2008年第5期408-410,F0002,共4页
目的:研究小分子C93355对神经元突起生长的影响及其可能的机制。方法:培养新生小鼠海马神经元,采用免疫细胞化学染色分析神经元突起的生长,Western blot检测C93355对非典型蛋白激酶C(aPKC)的磷酸化影响。结果:小分子C93355抑制海马神经... 目的:研究小分子C93355对神经元突起生长的影响及其可能的机制。方法:培养新生小鼠海马神经元,采用免疫细胞化学染色分析神经元突起的生长,Western blot检测C93355对非典型蛋白激酶C(aPKC)的磷酸化影响。结果:小分子C93355抑制海马神经元突起的生长,降低aPKC的磷酸化。结论:小分子C93355可能通过抑制aPKC的磷酸化而调节神经元突起的生长。 展开更多
关键词 小分子化合物 元突起 典型蛋白激酶c
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非典型蛋白激酶C的研究进展
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作者 周瑶 邹键 《生命的化学》 CAS CSCD 2018年第3期358-366,共9页
非典型蛋白激酶C(atypical PKC,aPKC)是蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)家族中的亚家族。aPKC具有不同于PKC家族中其他亚型的结构特征和功能特性,它在调控细胞极性建立、细胞骨架的动态组装、细胞的非对称性分裂、囊泡运输等多种生物... 非典型蛋白激酶C(atypical PKC,aPKC)是蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)家族中的亚家族。aPKC具有不同于PKC家族中其他亚型的结构特征和功能特性,它在调控细胞极性建立、细胞骨架的动态组装、细胞的非对称性分裂、囊泡运输等多种生物学事件中发挥重要调控作用,从而广泛影响多种组织器官的发育及多类疾病的发生发展。aPKC的蛋白质翻译后修饰对于aPKC的激活与抑制具有重要调控作用。本文就近年来aPKC的结构、功能及蛋白质翻译后修饰的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 典型蛋白激酶c 细胞极性 蛋白质翻译后修饰
原文传递
新辅助化疗对乳腺癌aPKC-ι和MUCl表达的影响
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作者 吕宝军 谢小铭 +1 位作者 王晓鸿 苟新敏 《医学信息(下旬刊)》 2011年第10期94-95,共2页
目的:分析乳腺癌新辅助化疗中aPKC—l和MUCl表达的变化,探讨其发生机制。方法:应用免疫组织化学法检测51例新辅助化疗组和106例对照组中乳腺癌组织标本aPKC-l和MUC!的表达。结果:新辅助化疗组和对照组乳腺癌组织中aPKC—l和MUCl的... 目的:分析乳腺癌新辅助化疗中aPKC—l和MUCl表达的变化,探讨其发生机制。方法:应用免疫组织化学法检测51例新辅助化疗组和106例对照组中乳腺癌组织标本aPKC-l和MUC!的表达。结果:新辅助化疗组和对照组乳腺癌组织中aPKC—l和MUCl的表达差异显著(P〈0.05),分别由对照组的40.57%和53.78%,下调到21.57%和40.57%。新辅助化疗组和对照组乳腺癌组织中aPKC—l和MUCl的表达呈正相关(P〈0.05)。结论:新辅助化疗通过抑制乳腺癌组织中aPKC-l和MUCl表达。抑制乳腺癌细胞的浸润和转移。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 新辅助化疗 极化调节蛋白典型蛋白激酶c-l 蛋白1
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