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氯法拉滨诱导U937细胞自噬性死亡的机制 被引量：4
1
作者 李程亮 刘海波 +1 位作者 张梅 贺鹏程 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期347-350,共4页
本研究旨在探讨氯法拉滨诱导急性髓系白血病(AML)细胞U937自噬性死亡的机制。不同浓度氯法拉滨作用U937细胞24、48 h后,用MTT法计算细胞生长抑制率及氯法拉滨半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测细胞自噬率的变化;Western blot方法检测... 本研究旨在探讨氯法拉滨诱导急性髓系白血病(AML)细胞U937自噬性死亡的机制。不同浓度氯法拉滨作用U937细胞24、48 h后,用MTT法计算细胞生长抑制率及氯法拉滨半数抑制浓度(IC50),流式细胞术检测细胞自噬率的变化;Western blot方法检测细胞自噬相关蛋白Beclin 1的表达变化。结果表明,0.01和0.15μmol/L氯法拉滨作用U937细胞48 h,增殖抑制率分别为(46.92±4.24)%和(86.10±1.16)%,IC50为0.022μmol/L,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。0.01和0.1μmol/L氯法拉滨作用U937细胞48 h,自噬率分别为(11.0033±1.4387)%和(59.4133±3.5409)%,且呈剂量依赖性增强(r=0.99);随药物浓度的增加,Beclin 1表达逐渐上调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:氯法拉滨对U937细胞有明显的增殖抑制作用,且存在剂量依赖性,其作用机制可能是通过上调Beclin 1的蛋白表达诱导U937细胞自噬性死亡。 展开更多
关键词 氯法拉滨 急性髓细胞白血病 自噬性死亡 细胞u937
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异烟肼耐药结核分枝杆菌感染人源巨噬细胞的蛋白质组学研究 被引量：5
2
作者 刘丽蓉 乐军 王洪海 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期361-367,共7页
利用双向电泳技术 ,对人源巨噬细胞U937感染异烟肼耐药结核分枝杆菌前后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析 ,发现其中产生差异的有 32个蛋白质斑点 ,利用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱技术 ,对其中 5个表达明显上调的蛋白... 利用双向电泳技术 ,对人源巨噬细胞U937感染异烟肼耐药结核分枝杆菌前后的全细胞蛋白表达图谱进行差异比较和分析 ,发现其中产生差异的有 32个蛋白质斑点 ,利用基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱技术 ,对其中 5个表达明显上调的蛋白质斑点进行分析鉴定 ,获得 5个明确的肽质量指纹图谱 ,通过在数据库中进行检索分析 ,确定这 5个蛋白质分别为热休克蛋白 10 5 β、凋亡抑制蛋白 1、磷酸甘油酸变位酶 1、组织蛋白酶B、桥粒胶蛋白 3.上述发现有助于了解耐药结核分枝杆菌入侵早期导致的巨噬细胞蛋白质组表达变化 ,为深入研究耐药结核分枝杆菌 宿主相互作用提供了探索方向 . 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 异烟肼 蛋白质组 巨噬细胞u937 人
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不同表型的结核分枝杆菌诱导U937细胞凋亡率差异分析 被引量：1
3
作者 胡族琼 谭耀驹 +4 位作者 关平 陈虹 孟繁荣 黄艳君 刘燕文 《微生物学免疫学进展》 2014年第1期9-12,共4页
目的利用流式细胞技术检测耐多药结核分枝杆菌(Multidrug resistant mycobacterium tuberculosis,MDRTB)临床分离株和结核分枝杆菌一、二线药物敏感株分别感染U937细胞后的凋亡率及其时相性变化。方法用两组细菌分别感染U937细胞,在感染... 目的利用流式细胞技术检测耐多药结核分枝杆菌(Multidrug resistant mycobacterium tuberculosis,MDRTB)临床分离株和结核分枝杆菌一、二线药物敏感株分别感染U937细胞后的凋亡率及其时相性变化。方法用两组细菌分别感染U937细胞,在感染后2、4、8及12 h用流式细胞技术检测各组感染U937细胞的凋亡率,并分析其时相性变化。结果结核分枝杆菌MDR株和敏感株均能诱导U937细胞凋亡,两组细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.01),MDR株诱导U937细胞凋亡率显著低于敏感株诱导的凋亡率,且在诱导后2、4、8及12 h各时间点的凋亡率都显著低于敏感株组,诱导早期凋亡率升高显著,特别是诱导后2 h凋亡率升高最显著,4 h以后凋亡率升高逐渐变慢。结论结核分枝杆菌临床分离株感染U937细胞后能快速诱导其凋亡,凋亡率与诱导菌株的耐药表型相关,敏感株诱导的凋亡率显著高于MDR株,诱导早期凋亡率升高最显著,4 h以后凋亡率升高减慢。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 临床分离株 耐多药结核分枝杆菌 巨噬细胞u937 凋亡
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前脑啡肽原和热休克蛋白参与宿主对结核分枝杆菌感染的应答
4
作者 徐霖 乐军 +3 位作者 刘丽蓉 梁莉 王洪海 谢建平 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期126-130,共5页
利用双向电泳比较了由临床分离的结核分枝杆菌感染离体巨噬细胞 U937 前后的全细胞蛋白组表达差异,肽指纹鉴定和生物信息学分析2个表达明显上调的斑点, 确定它们分别为热休克蛋白 HSP105β和前脑啡肽原. 比较蛋白质组学和转录组学研究发... 利用双向电泳比较了由临床分离的结核分枝杆菌感染离体巨噬细胞 U937 前后的全细胞蛋白组表达差异,肽指纹鉴定和生物信息学分析2个表达明显上调的斑点, 确定它们分别为热休克蛋白 HSP105β和前脑啡肽原. 比较蛋白质组学和转录组学研究发现, 热休克蛋白表达提高可能源于转录增加. 提出了从神经免疫学角度研究结核分枝杆菌致病和宿主免疫机理的新思路, 为解释吸毒人群中结核病高发病率提供了基础. 展开更多
关键词 前脑啡肽原 热休克蛋白 巨噬细胞u937 结核分枝杆菌 蛋白质组
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油茶的粕、果皮和叶的抗肿瘤活性研究 被引量：15
5
作者 马丽媛 李林 +4 位作者 唐玲 陈跃龙 冯宝民 史丽颖 王永奇 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期8-12,共5页
目的比较油茶粕、果皮和叶提取物对多种肿瘤细胞增殖抑制的作用。方法常规传代培养5种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞活性。结果 30～90μg.mL-1油茶粕总皂苷、31.25～500μg.mL-1油茶果皮乙酸乙酯提取物30%乙... 目的比较油茶粕、果皮和叶提取物对多种肿瘤细胞增殖抑制的作用。方法常规传代培养5种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞活性。结果 30～90μg.mL-1油茶粕总皂苷、31.25～500μg.mL-1油茶果皮乙酸乙酯提取物30%乙醇洗脱物、62.5～500μg.mL-1油茶叶95%乙醇提取物乙酸乙酯萃取物呈剂量依赖性地抑制多种肿瘤细胞增殖。体外增殖抑制作用强弱为油茶粕总皂苷>油茶果皮乙酸乙酯捏取物30%乙醇洗脱物>油茶叶95%乙醇提取物乙酸乙酯萃取物。进一步确定了油茶粕总皂苷对人乳腺癌细胞(MCF-7)产生的明显抑制作用是通过破坏细胞膜而发挥作用的。结论分析比较后,分别确定了油茶粕、果皮和叶抗肿瘤的有效部位,填补了油茶粕总皂苷在肿瘤治疗领域的空白。 展开更多
关键词 油茶 抗肿瘤 人肺癌细胞株(A549) 人乳腺癌细胞株(MCF-7) 人肝癌细胞株(HepG2) 结肠癌细胞株(HCT116) 白血病细胞株(u937)
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金花茶花、种子和叶提取物对U937和HCT116细胞增殖抑制的实验观察 被引量：13
6
作者 于大永 时贞颂 +2 位作者 史丽颖 冯宝民 王永奇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期2005-2007,共3页
目的比较金花茶花、种子和叶提取物对人白血病细胞(U937)和结肠癌细胞(HCT116)增殖抑制的作用。方法常规传代培养2种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性。结果金花茶花和种子的95%乙醇提取物对U937和HCT116细胞增殖均有抑制作用,... 目的比较金花茶花、种子和叶提取物对人白血病细胞(U937)和结肠癌细胞(HCT116)增殖抑制的作用。方法常规传代培养2种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性。结果金花茶花和种子的95%乙醇提取物对U937和HCT116细胞增殖均有抑制作用,且细胞存活率随样品质量浓度的加大而降低。金花茶叶乙醇提取物和水提取都显示了较强的抑制U937细胞增殖的作用,呈现出剂量效应关系。而金花茶叶子的不同提取物对HCT116细胞增殖没有作用。结论金花茶花、种子和叶子均有抗肿瘤的作用。 展开更多
关键词 金花茶 提取物 人白血病细胞株u937 人结肠癌细胞株HCT116
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三种草胡椒属植物对人白血病U937细胞增殖和凋亡的影响 被引量：2
7
作者 于大永 杨秀秀 +2 位作者 卢轩 史丽颖 冯宝民 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2108-2113,共6页
目的:考察三种草胡椒属植物豆瓣绿、石蝉草和草胡椒的乙醇提取物及其极性萃取部位对人单核细胞白血病细胞(U937)增殖和凋亡的影响。方法:分别用95%乙醇加热回流提取三种植物,回收溶剂后用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取物和水层。采用噻... 目的:考察三种草胡椒属植物豆瓣绿、石蝉草和草胡椒的乙醇提取物及其极性萃取部位对人单核细胞白血病细胞(U937)增殖和凋亡的影响。方法:分别用95%乙醇加热回流提取三种植物,回收溶剂后用乙酸乙酯萃取得到乙酸乙酯萃取物和水层。采用噻唑兰(MTT)法测定三种植物对U937细胞增殖的抑制作用,Hoechst 33342染色分析U937细胞形态学改变,流式细胞仪结合Annexin V-FITC染色检测细胞凋亡,PI染色检测细胞周期变化。结果:MTT法分析表明豆瓣绿、石蝉草和草胡椒的乙醇提取物及其乙酸乙酯部位均能显著抑制U937细胞增殖,乙酸乙酯部位抑制作用更强,水层在高浓度下有一定的抑制作用。其中以豆瓣绿抑制U937细胞增殖的活性最强。流式细胞仪分析结果表明豆瓣绿醇提物乙酸乙酯部位呈浓度和时间依赖性诱导U937细胞凋亡,荧光染色发现其诱导细胞凋亡的特征明显,通过流式细胞仪检测还表明细胞周期发生阻滞:G2/M期细胞所占比例降低、S期升高、G1期降低。结论:石蝉草、豆瓣绿和草胡椒的乙醇提取物及其乙酸乙酯部位均有抑制U937肿瘤细胞增殖的作用,豆瓣绿的乙醇提取物及其乙酸乙酯部位能诱导U937细胞凋亡和S期周期阻滞。 展开更多
关键词 草胡椒属 豆瓣绿 石蝉草 草胡椒 人白血病细胞株u937细胞
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诱导型环氧合酶-2在CD40配体诱导基质金属蛋白酶表达中的作用 被引量：1
8
作者 李岚 樊民 +1 位作者 杨靖 汪沁沁 《心脏杂志》 CAS 2011年第1期56-58,64,共4页
目的:探讨重组人CD40配体(rhCD40L)诱导U937细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)表达的作用及其与诱导型环氧合酶-2(COX-2)途径的关系。方法:体外培养U937细胞,以不同浓度(0.1、0.2、0.4 mg/L)的rhCD40L和不同浓度(10-5 mol/L、10-4 mol/L、10-3... 目的:探讨重组人CD40配体(rhCD40L)诱导U937细胞中基质金属蛋白酶(MMPs)表达的作用及其与诱导型环氧合酶-2(COX-2)途径的关系。方法:体外培养U937细胞,以不同浓度(0.1、0.2、0.4 mg/L)的rhCD40L和不同浓度(10-5 mol/L、10-4 mol/L、10-3 mol/L)的COX-2特异性抑制剂(NS-398)分别刺激24 h。在加入终浓度为0.4 mg/L rhCD40L的基础上,加入终浓度为10-4 mol/L的NS-398,共同刺激U937细胞24 h后,收集培养上清液,用酶谱法测定MMPs的活性。结果:rhCD40L可使MMP-2和MMP-9的活性明显增加(P<0.01),且呈剂量依赖性;NS-398可抑制MMP-2和MMP-9的活性,且抑制作用随剂量的增加而增强(P<0.05)。结论:rhCD40L以浓度依赖的方式诱导MMPs表达,rhCD40L对MMPs的诱导作用可能与COX-2途径有关。 展开更多
关键词 CD40配体 诱导型环氧合酶-2 基质金属蛋白酶 单核细胞系u937
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RNA干扰技术对人U937巨噬细胞株糖皮质激素受体表达及功能的抑制效应
9
作者 张芳 钱桂生 +1 位作者 陈维中 苏踊跃 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期951-953,共3页
目的　利用载体介导的RNA干扰技术,建立糖皮质激素受体(GR)基因阻断的人U93 7巨噬细胞株模型。方法　构建两个针对GR的RNAi重组表达载体,分别命名为pSilencer 3 1 GR1和pSilencer 3 1 GR2 ,经测序确认后,转染人U93 7巨噬细胞株。RT PC... 目的　利用载体介导的RNA干扰技术,建立糖皮质激素受体(GR)基因阻断的人U93 7巨噬细胞株模型。方法　构建两个针对GR的RNAi重组表达载体,分别命名为pSilencer 3 1 GR1和pSilencer 3 1 GR2 ,经测序确认后,转染人U93 7巨噬细胞株。RT PCR、Westernblot分别检测糖皮质激素受体mRNA水平和蛋白水平表达变化;相对荧光素酶活性法检测地塞米松作用后GR转录激活功能的变化。结果　经测序证实:成功构建两个针对GR的RNAi表达载体(pSilencer3 1 GR1和pSilencer 3 .1 GR2 ) ;转染pSilencer 3 .1 GR2 可明显降低细胞内GRmRNA的丰度及GR蛋白表达,细胞内GR转录激活功能明显降低;转染pSilencer 3 .1 GR1与对照组相比无显著变化。结论　成功地构建并筛选出一个高效且特异阻断GR表达及功能的RNAi质粒表达载体,为进一步研究糖皮质激素受体的功能提供新方法。 展开更多
关键词 糖皮质激素受体 人巨噬细胞株u937 RNA干扰
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