目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进...目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进一步将HepG2细胞分为对照(Control)组、阴性对照(NC)组和沉默CKAP2(siCKAP2)组。NC组和siCKAP2组细胞分别转染siControl和siCKAP2。采用CKK-8法检测细胞活性,BrdU掺入法检测细胞增殖,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法检测cleavedcaspase 3,Bax,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin以及磷酸化的Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和磷酸化的信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白质表达水平。结果:与正常肝细胞L02比较,CKAP2在肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721中的表达显著上调(均P<0.05)。与NC组比较,siCKAP2组细胞活性和增殖率显著下降(均P<0.05);细胞凋亡率升高,cleaved-caspase 3和Bax的蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);细胞迁移和侵袭显著减少(均P<0.05);E-cadherin蛋白质表达水平显著上调,Vimentin,Ncadherin,磷酸化的JAK2和磷酸化的STAT3的蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默CKAP2基因抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,JAK2/STAT3信号通路可能参与这些过程。展开更多
目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织...目的本研究主要分析细胞骨架相关蛋白2样蛋白(cytoskeleton associated protein 2 like protein,CKAP2L)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取2018年2月至2020年5月在太原市中心医院行卵巢癌根治术的卵巢癌患者87例,收集其卵巢癌组织及距癌灶边缘>2 cm的癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法测定卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的mRNA表达,免疫组化法分析卵巢癌组织及癌旁组织中CKAP2L的蛋白表达。Kaplan-Meier法分析卵巢癌组织中CKAP2L表达与患者预后的关系。结果CKAP2L在卵巢癌组织中mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L的蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。卵巢癌组织中CKAP2L mRNA表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移、FIGO分期、浸润深度有关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果表明,卵巢癌患者3年总生存率为80.46%;CKAP2L低表达患者3年总生存率为显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.316,P=0.004)。患者3年无复发生存率为77.01%;CKAP2L低表达患者3年无复发生存率显著高于CKAP2L高表达患者(Log-rankχ^(2)=8.921,P=0.003)。结论CKAP2L在卵巢癌组织中高表达,与FIGO分期、淋巴结转移等有关,是卵巢癌患者死亡的影响因素。展开更多
文摘目的:研究细胞骨架相关蛋白2(cytoskeleton-associated protein 2,CKAP2)对肝癌细胞的增殖、凋亡和迁移的作用及其机制。方法:培养正常肝细胞L02和肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721。采用实时PCR和蛋白质印迹法检测CKAP2的表达水平。进一步将HepG2细胞分为对照(Control)组、阴性对照(NC)组和沉默CKAP2(siCKAP2)组。NC组和siCKAP2组细胞分别转染siControl和siCKAP2。采用CKK-8法检测细胞活性,BrdU掺入法检测细胞增殖,凋亡试剂盒检测细胞凋亡,transwell实验检测细胞的迁移和侵袭。采用蛋白质印迹法检测cleavedcaspase 3,Bax,E-cadherin,N-cadherin,Vimentin以及磷酸化的Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)和磷酸化的信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白质表达水平。结果:与正常肝细胞L02比较,CKAP2在肝癌细胞系HepG2,Huh7和SMMC-7721中的表达显著上调(均P<0.05)。与NC组比较,siCKAP2组细胞活性和增殖率显著下降(均P<0.05);细胞凋亡率升高,cleaved-caspase 3和Bax的蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);细胞迁移和侵袭显著减少(均P<0.05);E-cadherin蛋白质表达水平显著上调,Vimentin,Ncadherin,磷酸化的JAK2和磷酸化的STAT3的蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默CKAP2基因抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡,JAK2/STAT3信号通路可能参与这些过程。
