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内源性大麻素对体外培养的牛眼小梁细胞PGE2表达及细胞骨架的影响 被引量：3
1
作者 陈丽 张德秀 +3 位作者 刘明 杨晓岗 孙松林 张俊霞 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第1期60-63,共4页
目的:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10μmol/... 目的:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10μmol/L的无血清培养液,作用24h后提取细胞上清液,并将细胞置于倒置显微镜下摄像,计算机图像分析系统计算细胞面积。用ELISA法检测PGE2浓度的变化。结果:AEA可以产生明显的细胞舒张效应,呈浓度依赖性。而且在一定范围内可以成剂量依赖性的促进PGE2的表达。与对照组均有显著性差异(P<0.05)。结论:AEA可引起小梁细胞的舒张和促进PGE2的释放。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 N-花生四氢酸氨基乙醇 细胞骨 架 前列腺素 青光眼
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破骨细胞形成过程中唑来膦酸的作用途径及机制 被引量：22
2
作者 黄晓林 廖健 +4 位作者 洪伟 李芳 程余婷 周倩 董强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2716-2721,共6页
背景:唑来膦酸可用来治疗骨吸收疾病,但其确切机制不明确。目的:探讨唑来膦酸对RANKL诱导的破骨细胞形成的影响和机制。方法:通过CCK8实验检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的活力,分析最大半数抑制浓度(IC_(50))。体外用RANKL将RAW26... 背景:唑来膦酸可用来治疗骨吸收疾病,但其确切机制不明确。目的:探讨唑来膦酸对RANKL诱导的破骨细胞形成的影响和机制。方法:通过CCK8实验检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的活力,分析最大半数抑制浓度(IC_(50))。体外用RANKL将RAW264.7细胞诱导为破骨细胞,鬼笔环肽和DAPI染色进行鉴定,并经抗酒石酸酸性磷酸酶染色来评估唑来膦酸在破骨细胞分化不同阶段对破骨细胞形成的影响,骨吸收实验检测破骨细胞骨吸收活性,最后Western blot检测IκBα、P38、JNK及ERK蛋白的表达。结果与结论:①唑来膦酸作用48 h,对RAW264.7细胞的最大半数抑制浓度(IC_(50))为33.9μmol/L,相比对照组,低于该浓度的唑来膦酸抑制破骨细胞分化;②唑来膦酸处理后骨吸收陷窝数目和面积明显减少(P <0.05);③蛋白表达水平上,唑来膦酸抑制RANKL诱导的IκBα磷酸化,其他蛋白磷酸化未见明显改变;④结果表明,唑来膦酸在体外可能通过调节NF-κB信号通路来抑制破骨细胞形成。 展开更多
关键词 破骨细胞 唑来膦酸 破骨细胞骨吸收 破骨细胞分化 核因子ΚB信号通路 核因子ΚB受体活化因子配体 国家自然科学基金
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骨脱细胞后的有机成分分析 被引量：17
3
作者 王昊 柏树令 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第5期422-424,共3页
目的　探讨脱细胞骨细胞外基质 (AECM)的制备 ,并对其进行有机成分分析。　方法　采用低渗和除垢剂脱细胞方法制备 AECM。使用 HE、Mallory- Heidenhain氏快速一步法染色和阿利新蓝染色观察形态学改变 ;免疫组织化学检测纤维连接蛋白 (... 目的　探讨脱细胞骨细胞外基质 (AECM)的制备 ,并对其进行有机成分分析。　方法　采用低渗和除垢剂脱细胞方法制备 AECM。使用 HE、Mallory- Heidenhain氏快速一步法染色和阿利新蓝染色观察形态学改变 ;免疫组织化学检测纤维连接蛋白 (FN)和层连接蛋白 (L N)。　结果　HE、Mallory- Heidenhain氏快速一步法染色后镜下可见AECM胶原纤维排列规则 ,骨陷窝空虚 ;阿利新蓝染色可见 AECM骨陷窝周边染色呈不同程度蓝绿色 ;免疫组织化学染色可见 FN和 L N的抗体染色阳性部位在细胞外基质 (ECM)。　结论　低渗和除垢剂二步法脱细胞是 AECM制备的有效方法。脱细胞过程中去除了细胞成分 ,保留了天然的胶原纤维分布及 ECM主要支架成分蛋白多糖、FN和 L N。 展开更多
关键词 骨脱细胞 脱细胞骨细胞外基质 制备 有机成分分析 纤维连接蛋白 层连接蛋白 免疫组织化学
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人血源性间充质干细胞培养与体外成骨研究 被引量：15
4
作者 曹聪 董英海 +4 位作者 董宇启 路丽明 崔磊 刘伟 曹谊林 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期642-647,共6页
目的建立分离、培养成人外周血来源的间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的方法,观察成人血源性MSCs体外成骨潜能。方法抽取成年志愿者外周静脉血30份,每份15ml。用淋巴细胞分离液(密度为1.077g/ml)梯度离心,取单个核细胞在含有20... 目的建立分离、培养成人外周血来源的间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的方法,观察成人血源性MSCs体外成骨潜能。方法抽取成年志愿者外周静脉血30份,每份15ml。用淋巴细胞分离液(密度为1.077g/ml)梯度离心,取单个核细胞在含有20%胎牛血清的α-MEM培养液中培养扩增MSCs,流式细胞仪分析MSCs表型。第2次传代培养时在培养液中添加成骨诱导因子(地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和1,25二羟维生素D3)。第5代传代细胞检测碱性磷酸酶、型胶原(collagentype,Col)、骨钙素(osteocalcin,OC)和骨粘连蛋白(osteonectin,ON)表达,连续培养1个月后检测钙结节形成情况。结果成人外周血中存在MSCs,集落形成率为0.27±0.22/106单个核细胞,表达CD44、CD54、CD105和CD166,而不表达与造血系相关的CD14、CD34、CD45及内皮细胞特异的CD31。地塞米松、β-磷酸甘油、维生素C和1,25二羟维生素D3可作用于传代培养的血源性MSCs,表现为碱性磷酸酶染色阳性细胞增多,逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)产物电泳条带显示ColI、OC和ON表达,盐酸四环素荧光标记证实有钙结节形成。结论建立的成人MSCs分离、培养条件可分选出外周血贴壁生长的细胞中一组独特的细胞群。成人血源性MSCs具有较强的体外成骨潜能,可望成为一种新的骨组织工程种子细胞。 展开更多
关键词 血细胞间允质干细胞骨生成
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同种异体脱细胞骨的生物力学性质及其临床应用 被引量：10
5
作者 张旗涛 姚猛 +3 位作者 于友 杨林 张鹏 韩福友 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期172-175,共4页
目的　探讨人同种异体脱细胞骨的制备 ,生物力学特性及其临床应用效果。方法　取新鲜人尸体髂骨 ,用 2 0 %过氧化氢和 90 %的乙醚脱去其细胞成分 ,制成需要的骨块。以同等大小新鲜解冻骨块作对照 ,在通用力学实验机上行抗压性、应变程... 目的　探讨人同种异体脱细胞骨的制备 ,生物力学特性及其临床应用效果。方法　取新鲜人尸体髂骨 ,用 2 0 %过氧化氢和 90 %的乙醚脱去其细胞成分 ,制成需要的骨块。以同等大小新鲜解冻骨块作对照 ,在通用力学实验机上行抗压性、应变程度、移位程度及弹性模量等测量。选择 37例先天性髋脱位 ,骨囊肿和内生软骨瘤的患儿行此脱细胞骨移植 ,随诊 3～ 12个月 ,观察骨诱导和骨缺损修复的效果。结果　组织学切片染色镜下观察见脱细胞骨保留较完整的骨小梁结构 ,无细胞残留。脱细胞骨的力学强度 ,抗压性与正常骨差别无显著性意义 ,但是弹性模量有所降低 (P <0 .0 1)。脱细胞骨在所有骨移植病例中显示良好的支撑效果和骨诱导成骨作用。结论　脱细胞骨是一种制备简单、效果可靠的骨移植材料 ,具有良好的硬度 ,相容性和诱导成骨功能 。 展开更多
关键词 同种异体脱细胞骨 生物力学 骨移植 骨组织工程 骨缺损 生物相容性 生物力学
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自体骨髓间充质干细胞骨泥治疗早期股骨头缺血性坏死近期疗效分析 被引量：9
6
作者 王伟 刘丹平 +1 位作者 张德志 张正 《医学与哲学（B）》 2016年第4期47-50,共4页
为了研究与探讨自体骨髓间充质干细胞骨泥结合髓心减压植骨治疗早期股骨头缺血性坏死的临床疗效。收集2014年2月～2015年2月于笔者所在医院由同一组关节科医生治疗且符合标准纳入研究的患者11例12髋。比较术前术后骨盆DR片、CT及Harris... 为了研究与探讨自体骨髓间充质干细胞骨泥结合髓心减压植骨治疗早期股骨头缺血性坏死的临床疗效。收集2014年2月～2015年2月于笔者所在医院由同一组关节科医生治疗且符合标准纳入研究的患者11例12髋。比较术前术后骨盆DR片、CT及Harris评分，评估该方法治疗早期股骨头缺血性坏死的临床疗效。术后平均随访9个月，所有患者髋关节疼痛症状基本消失，活动范围改善或接近恢复正常。自体骨髓间充质干细胞骨泥结合髓心减压植骨治疗早期股骨头缺血性坏死，可显著地改善髋关节活动功能，促进骨再生，具有明显的短期临床效果。 展开更多
关键词 髓心减压 股骨头缺血性坏死 骨髓间充质干细胞骨泥 植骨
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人脱细胞骨复合骨髓基质细胞成骨活性的实验研究 被引量：7
7
作者 张旗涛 于有 +2 位作者 杨林 姚猛 陶天遵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第1期35-38,共4页
目的 研究人脱细胞骨(HAB)复合经诱导的骨髓基质细胞的实验效果,观察细胞的黏附和生长情况,并对其成骨活性进行检测。方法 用15％的过氧化氢和乙醚去除人髂骨块内的结缔组织和细胞成分,消毒后制备人脱细胞骨。取材活体或新鲜尸体的骨髓... 目的 研究人脱细胞骨(HAB)复合经诱导的骨髓基质细胞的实验效果,观察细胞的黏附和生长情况,并对其成骨活性进行检测。方法 用15％的过氧化氢和乙醚去除人髂骨块内的结缔组织和细胞成分,消毒后制备人脱细胞骨。取材活体或新鲜尸体的骨髓行骨髓基质细胞培养,细胞纯化后加入β-甘油酸钠,地塞米松和抗坏血酸等向成骨方向诱导,并进行对照培养。通过碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)检测来确定骨髓基质细胞的增殖和分化情况,将诱导的骨髓基质细胞浓缩后复合到制备好的脱细胞骨块内进行复合培养。8d后通过光镜和电镜等形态学观察以及生化指标检测来确定细胞的成骨活性。结果 人髂骨块内细胞清除干净,骨基质保存良好;诱导后的骨髓基质细胞ALP和OCN水平明显高于对照组(P<0.05);复合后的人脱细胞骨培养液中ALP和OCN检测呈阳性;骨髓基质细胞在HAB支架内附着紧密,生长良好。结论 人脱细胞骨复合经诱导的骨髓基质细胞在体外具有有效的成骨功能,是一种较为理想的骨组织工程材料。 展开更多
关键词 人脱细胞骨 骨髓基质细胞 成骨活性 实验 检测 骨组织工程
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不对称正畸力对成年大鼠双侧髁状突软骨下骨RANKL/OPG的影响 被引量：8
8
作者 许跃 吴拓江 陈扬熙 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2008年第21期1941-1943,共3页
目的:通过建立下颌骨单侧前上牵引的大鼠动物模型模拟正畸颌间不对称牵引对成年颞下颌关节的影响,研究牵引力对双侧髁状突软骨下骨RANK配体(RANKL)和骨保护素(OPG)表达和比例关系的影响,并观察去除牵引力后的组织反应。方法:利用外科手... 目的:通过建立下颌骨单侧前上牵引的大鼠动物模型模拟正畸颌间不对称牵引对成年颞下颌关节的影响,研究牵引力对双侧髁状突软骨下骨RANK配体(RANKL)和骨保护素(OPG)表达和比例关系的影响,并观察去除牵引力后的组织反应。方法:利用外科手术方法在80只SD大鼠左侧下颌角与同侧颧弓前区置入镍钛拉簧,使左侧下颌骨受到前上方向的40g持续牵引力,4wk后拆除弹簧。实验动物分别在手术后和拆除弹簧的3,7,14,28d处死,用免疫组化法检测双侧髁状突软骨下骨中RANKL/OPG蛋白表达的变化.结果:髁状突软骨下骨中RANKL和OPG共同表达在成骨细胞、破骨细胞和早期骨细胞中,对照组大鼠RANKL/OPG蛋白表达量(积分光密度)的比值为0.246±0.013.在外力加载或撤除的1wk内,RANKL/OPG比值显著增加(P<0.01).实验大鼠加力侧和非加力侧RANKL/OPG比值无显著相关性(r=0.45,P>0.01).结论:在40g颌间不对称力作用下,双侧髁状突软骨下骨的改建活动均有增强.加力侧RANKL/OPG比值变化幅度大于非加力侧,而且对牵引力的反应更为迅速,撤除牵引力会导致口颌系统新的不平衡和骨吸收活跃. 展开更多
关键词 动物模型 牵引 颞下颌关节 破骨细胞分化因子 牙周膜细胞骨保护素
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槲皮苷抑制RANKL诱导的破骨细胞形成及骨吸收 被引量：7
9
作者 张健 庄玉明 +2 位作者 尚宝华 孙宏伟 王玉 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期2180-2185,共6页
[目的]探讨槲皮苷对核因子κB受体激动剂配体（receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL）诱导的破骨细胞形成及骨吸收功能的影响。[方法]通过CCK-8法观察不同浓度槲皮苷（0~800μmol/L）干预不同时间（48 h、96 h）... [目的]探讨槲皮苷对核因子κB受体激动剂配体（receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL）诱导的破骨细胞形成及骨吸收功能的影响。[方法]通过CCK-8法观察不同浓度槲皮苷（0~800μmol/L）干预不同时间（48 h、96 h）对RAW 264.7细胞的生存影响,确定合适的体外用药浓度;利用体外RANKL诱导RAW 264.7细胞形成破骨细胞体系,通过抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase,TRAP）染色计数评价槲皮苷（200、400μmol/L）对破骨细胞形成和生存的影响;通过骨片吸收实验对骨凹陷和骨吸收面积统计分析评价槲皮苷（200、400μmol/L）3 d内对成熟破骨细胞骨吸收功能的影响;釆用实时定量（Real-Time）PCR技术,检测槲皮苷（200、400μmol/L）对RANKL诱导的破骨细胞特异性基因NFATc1、TRAP和c-fos表达水平的影响。[结果]细胞生存实验发现槲皮苷干预96 h后,槲皮苷（0~800μmol/L）对RAW 264.7细胞4 d内生存未发现显著影响;通过TRAP染色发现200、400μmol/L槲皮苷能显著抑制体外RANKL诱导的破骨细胞形成;通过骨片吸收实验发现200、400μmol/L槲皮苷3d内能显著降低骨吸收面积,提示其抑制成熟破骨细胞骨吸收功能;同时,槲皮苷能呈剂量依赖性抑制RANKL诱导活化T细胞核因子（nuclear factor of activated T cells,NFAT）c1、TRAP和c-fos基因表达。[结论]槲皮苷通过抑制NFATc1,TRAP和c-fos的表达,来抑制体外RANKL诱导的破骨细胞形成和骨吸收功能,是一种潜在治疗骨质疏松药物。 展开更多
关键词 槲皮苷 RAW 264.7细胞 破骨细胞形成 破骨细胞骨吸收 骨质疏松
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骨康胶囊对SaOS-2人成骨样细胞增殖、分化及矿化的影响 被引量：6
10
作者 杨健 陆定艳 +5 位作者 彭潇 董莉 沈艳珍 李勇军 席晓岚 刘亭 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第5期517-521,共5页
目的:研究骨康胶囊对体外培养的SaOS-2成骨肉瘤细胞增殖、分化及矿化的影响。方法:培养成骨肉瘤细胞SaOS-2,设立对照组、不同浓度的骨康胶囊组(生药浓度为1、10、100、200、400、800 mg/L)及维生素D3组,采用MTT法检测SaOS-2细胞增殖能力... 目的:研究骨康胶囊对体外培养的SaOS-2成骨肉瘤细胞增殖、分化及矿化的影响。方法:培养成骨肉瘤细胞SaOS-2,设立对照组、不同浓度的骨康胶囊组(生药浓度为1、10、100、200、400、800 mg/L)及维生素D3组,采用MTT法检测SaOS-2细胞增殖能力;选择10、100及200 mg/L骨康胶囊浓度处理SaOS-2细胞,对-硝基苯磷酸盐法(PNPP法)检测SaOS-2细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,ELISA法检测SaOS-2细胞骨钙素(OTC)和钙离子(Ca^(2+))分泌能力,采用细胞钙茜素红染色法对成骨细胞进行染色、观察SaOS-2细胞矿化能力。结果:与对照组相比,骨康胶囊在体外可以显著促进成骨肉瘤细胞的增殖(P<0.01),当骨康胶囊浓度为200 mg/L时作用最大,此后随着骨康胶囊浓度增大对SaOS-2细胞增殖的促进作用有明显减弱的趋势;在10、100、200 mg/L浓度范围内,骨康胶囊剂量依赖性地增加SaOS-2细胞ALP活性、促进OTC和Ca^(2+)的分泌及细胞矿化结节形成(P<0.05或P<0.01)。结论:骨康胶囊对体外培养的SaOS-2细胞的增殖、分化和矿化有明显的促进作用。 展开更多
关键词 骨质疏松症 骨康胶囊 成骨肉瘤细胞 增殖 分化 矿化 碱性磷酸酶 细胞骨钙素
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自体骨移植修复下颌骨缺损的研究新进展 被引量：6
11
作者 张森林 孟昭业 《国外医学（口腔医学分册）》 1998年第4期212-215,共4页
自体骨移植是下颌骨缺损最常用的修复方法。为了寻找理想的自体骨源,近年来人们进行了积极探索。自体血管化腓骨、自体松质细胞骨、自体颅骨、自体冷冻病变下颌骨和自体脱钙骨等修复下颌骨缺损的效果良好,但也存在各自的优缺点。
关键词 下颌骨缺损 自体骨移植 血管化腓骨 松质细胞骨
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脱细胞真皮基质复合小牛脱细胞骨修复口腔上颌窦瘘 被引量：5
12
作者 李晓宇 伍靖 +3 位作者 曹君 杨微 武斌 谢春 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期633-637,共5页
目的评价脱细胞真皮基质复合小牛脱细胞骨修复口腔上颌窦瘘的效果。方法选择上颌骨囊肿摘除术或上颌磨牙拔除术后口腔与上颌窦相通的9例口腔上颌窦瘘患者(缺损大于5 mm×5 mm),采用脱细胞真皮基质复合小牛脱细胞骨进行同期植入修复... 目的评价脱细胞真皮基质复合小牛脱细胞骨修复口腔上颌窦瘘的效果。方法选择上颌骨囊肿摘除术或上颌磨牙拔除术后口腔与上颌窦相通的9例口腔上颌窦瘘患者(缺损大于5 mm×5 mm),采用脱细胞真皮基质复合小牛脱细胞骨进行同期植入修复缺损。结果 9例患者术后切口均一期愈合,随访6个月,口腔上颌窦相通处黏膜均未见瘘道及分泌物,无鼻塞、流脓涕等上颌窦炎症相关症状,临床检查鼓气试验及CT检查均证实创口愈合。结论应用脱细胞真皮基质及小牛脱细胞骨修复口腔上颌窦瘘,是一种有效的治疗方法。 展开更多
关键词 脱细胞真皮基质 小牛脱细胞骨 口腔上颌窦瘘 上颌窦炎
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Bax抑制因子1通过促进视神经萎缩蛋白1表达抑制小鼠动脉血管钙化 被引量：4
13
作者 陈韦任 杜辉 +5 位作者 钱赓 周玉杰 陈韵岱 马茜 吴雪萍 沙媛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期330-337,共8页
目的探讨Bax抑制因子1(BI-1)和视神经萎缩蛋白1(OPA1)蛋白对血管钙化的影响。方法ApoE^(-/-)糖尿病小鼠高脂喂养12周后予以腹腔注射Nε-(1-羧甲基)-L-赖氨酸16周建立血管钙化模型,实验将小鼠分为4组,6只/组:对照组(ApoE^(-/-)小鼠普通... 目的探讨Bax抑制因子1(BI-1)和视神经萎缩蛋白1(OPA1)蛋白对血管钙化的影响。方法ApoE^(-/-)糖尿病小鼠高脂喂养12周后予以腹腔注射Nε-(1-羧甲基)-L-赖氨酸16周建立血管钙化模型,实验将小鼠分为4组,6只/组:对照组(ApoE^(-/-)小鼠普通饲料喂养)、钙化组(ApoE^(-/-)小鼠建立钙化模型)、钙化+BI-1^(TG)组(血管特异性过表达BI-1的ApoE^(-/-)小鼠建立钙化模型)和钙化+BI-1TG+OPA1-/-组(血管特异性过表达BI-1和基因敲除OPA1的ApoE^(-/-)小鼠建立钙化模型)。另β磷酸甘油诱导血管平滑肌细胞建立细胞钙化模型。使用von Kossa染色检测血管钙化程度,使用ELISA检测主动脉钙含量,使用免疫组织化学方法检测Runt相关转录因子2和骨形态发生蛋白2表达、使用TUNEL检测细胞凋亡率,使用Westernblot检测BI-1、OPA1、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3水平的表达。结果血管钙化后,BI-1和OPA1蛋白表达均下降(P=0.0044),钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达增加(P=0.0041)。过表达BI-1促进OPA1蛋白表达,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达均减少(P=0.0006)。基因敲除OPA1蛋白后,钙沉积、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3又明显增多(P=0.0007)。结论BI-1可能通过促进OPA1表达,减轻钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,继而抑制血管钙化。 展开更多
关键词 Bax抑制因子1 视神经萎缩蛋白1 血管钙化 细胞骨型分化 细胞凋亡
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长链非编码RNA H19促进血管钙化:基于抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1通路 被引量：1
14
作者 陈韦任 杜辉 +6 位作者 沙媛 周玉杰 梁静 陈韵岱 马茜 吴雪萍 钱赓 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1469-1475,共7页
目的探讨长链非编码RNAH19(lncRNAH19)是否通过抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1(BI-1/OPA1)通路促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,进而诱导血管钙化。方法β磷酸甘油和氯化钙药物诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)建立细胞钙化模型,将... 目的探讨长链非编码RNAH19(lncRNAH19)是否通过抑制Bax抑制因子1/视神经萎缩蛋白1(BI-1/OPA1)通路促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡,进而诱导血管钙化。方法β磷酸甘油和氯化钙药物诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)建立细胞钙化模型,将细胞分为5组:对照组(普通培养基培养14 d)、钙化组(钙化培养基培养14 d)、钙化+siH19组(敲低lncRNAH19表达后钙化培养基培养14 d)、钙化+siH19+BI-1-/-组(敲低lncRNA H19和BI-1表达后钙化培养基培养14 d)和钙化+siH19+OPA1-/-组(敲低lncRNA H19和OPA1表达后钙化培养基培养14 d)。另ApoE-/-糖尿病小鼠使用高脂饲料喂养32周建立动物钙化模型。通过茜素红S染色和von Kossa染色检测钙沉积,通过Western blotting测定Runt相关转录因子2(Runx-2)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)观察细胞骨型分化,通过TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3检测观察细胞凋亡情况。结果血管钙化后,lncRNAH19表达明显上升,BI-1和OPA1表达明显下降,而siRNA敲低lncRNAH19表达后,BI-1和OPA1蛋白表达明显上升;抑制BI-1后,OPA1再次下降(P<0.001)。siRNA敲低lncRNA H19表达后,钙化结节消失,钙含量、Runx-2、BMP-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和细胞凋亡率均显著降低(P<0.001)。siRNA敲低lncRNAH19基础上再抑制BI-1或OPA1蛋白,钙化结节出现,钙含量、Runx-2、BMP-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达和细胞凋亡率均显著增加(P<0.001)。结论LncRNAH19通过抑制BI-1/OPA1蛋白通路诱导血管钙化,其可能机制和促进钙沉积、细胞骨型分化和细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNAH19 Bax抑制因子1 视神经萎缩蛋白1 血管钙化 细胞骨型分化
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转化生长因子-β1对MC3T3-E1小鼠成骨细胞骨形成的影响 被引量：4
15
作者 晋瑞 李嫚 +1 位作者 雷喆 金迎迎 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2018年第3期378-381,共4页
目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在成骨细胞骨形成中的负向调节作用及其可能作用机制。方法:离体培养MC3T3-E1小鼠成骨细胞系,以10μg/L的甲状旁腺激素(PTH)或TGF-β1处理细胞6、12、24 h后,应用荧光定量PCR检测硬骨素(SOST)和TGF-... 目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在成骨细胞骨形成中的负向调节作用及其可能作用机制。方法:离体培养MC3T3-E1小鼠成骨细胞系,以10μg/L的甲状旁腺激素(PTH)或TGF-β1处理细胞6、12、24 h后,应用荧光定量PCR检测硬骨素(SOST)和TGF-β受体ALK5 mRNA表达变化;取对数生长期的MC3T3-E1细胞进行ALK5-siRNA转染,荧光定量PCR及Western blot法检测ALK5-siRNA转染对TGF-β1作用下MC3T3-E1细胞中SOST mRNA和Smad2/3蛋白表达的影响。结果:在10μg/L浓度的TGF-β1诱导下,MC3T3-E1细胞中SOST和ALK5 mRNA表达水平均较对照组升高(P<0.05),且表达水平均随着处理时间的延长而上调(P<0.05)。沉默ALK5可部分抑制TGF-β1诱导的SOST mRNA和Smad2/3蛋白表达上调(P<0.05)。结论:TGF-β1可通过激活Smad2/3信号通路上调SOST表达,从而抑制成骨细胞骨形成。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 SMAD2/3 硬骨素 成骨细胞骨形成
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骨形成蛋白-2、成纤维细胞生长因子-2对大鼠触须毛乳头细胞增殖和毛发诱导能力的影响 被引量：3
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作者 郝建春 刘玮 +2 位作者 袁小英 马慧敏 赵艳爽 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2015年第11期105-108,共4页
目的探讨骨形成蛋白-2(BMP-2),成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)单独及联合作用对毛乳头细胞增殖和毛发诱导能力的影响。方法采用显微机械法分离大鼠触须毛乳头并培养,行免疫荧光鉴定。CCK-8法检测毛乳头细胞的增殖活性。毛发诱导能力通过... 目的探讨骨形成蛋白-2(BMP-2),成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)单独及联合作用对毛乳头细胞增殖和毛发诱导能力的影响。方法采用显微机械法分离大鼠触须毛乳头并培养,行免疫荧光鉴定。CCK-8法检测毛乳头细胞的增殖活性。毛发诱导能力通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性确定。采用ELISA法检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的含量。结果毛乳头细胞的ALP免疫荧光染色阳性,确定培养的细胞是毛乳头细胞。BMP-2对毛乳头细胞增殖无影响,但可提高毛乳头细胞的ALP活性并呈剂量依赖性。FGF-2促进毛乳头细胞增殖,但会降低毛乳头细胞的ALP活性并呈剂量依赖性。联合BMP-2和FGF-2既可以促进毛乳头细胞的增殖,又可以增强ALP活性,并呈时间依赖性。BMP-2可上调毛乳头细胞培养上清液中IGF-1的含量,并呈剂量依赖性。结论 BMP-2可能通过促进毛乳头细胞分泌IGF-1以保持毛乳头细胞的毛发诱导能力,按适当浓度比例联合BMP-2和FGF-2可形成互补作用,既促进毛乳头细胞的增殖,又可以保持其毛发诱导能力。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子2 胰岛素样生长因子I 碱性磷酸酶 毛乳头细胞骨 形成蛋白-2
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脱细胞骨基质研究进展
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作者 王德超 刘维钢 杜靖远 《组织工程与重建外科杂志》 2006年第4期235-237,共3页
因严重创伤及骨肿瘤所致的骨不连、骨缺损严重影响人体生活质量甚至威胁生命,一直是骨科医生的难题.中国每年有数百万人面临骨不连、骨缺损痛苦.目前常用的治疗方法主要是自体骨移植、异体骨移植和人工骨移植等.这些方法各有优缺点,难... 因严重创伤及骨肿瘤所致的骨不连、骨缺损严重影响人体生活质量甚至威胁生命,一直是骨科医生的难题.中国每年有数百万人面临骨不连、骨缺损痛苦.目前常用的治疗方法主要是自体骨移植、异体骨移植和人工骨移植等.这些方法各有优缺点,难以满足临床上修复各种骨缺损的需要.也就是说,目前还没有十分理想的骨移植材料. 展开更多
关键词 脱细胞骨 自体骨移植 骨缺损 骨不连 异体骨移植 骨移植材料 治疗方法 严重创伤 生活质量 骨科医生 骨肿瘤 中国 生命 人体 人工 临床 理想
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骨形态生成蛋白-4与17β-雌二醇诱导MBA-1细胞分化的研究 被引量：2
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作者 胡平安 廖二元 +2 位作者 肖新华 周后德 苏欣 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1580-1582,共3页
目的探讨BMP-4与17β-雌二醇诱导MBA-1细胞分化的作用。方法用骨形态生成蛋白-4(BMP-4)诱导MBA-1细胞15～22d后进行HE染色观察细胞形态,用1型胶原染色、矿化结节染色鉴定成骨细胞功能;用BMP-4及17β-雌二醇干预MBA-1细胞后,用RT-PCR检... 目的探讨BMP-4与17β-雌二醇诱导MBA-1细胞分化的作用。方法用骨形态生成蛋白-4(BMP-4)诱导MBA-1细胞15～22d后进行HE染色观察细胞形态,用1型胶原染色、矿化结节染色鉴定成骨细胞功能;用BMP-4及17β-雌二醇干预MBA-1细胞后,用RT-PCR检测骨钙素的变化。结果①MBA-1细胞可向成骨细胞或脂肪细胞分化;②在无BMP-4或17β-雌二醇干预的情况下,MBA-1细胞在自身分化成熟过程中伴有骨钙素的表达增加;③经BMP-4与17β-雌二醇干预后,MBA-1细胞骨钙素的表达明显增加。结论MBA-1细胞可能具有多系分化潜能,BMP-4与17β-雌二醇可上调其骨钙素表达,诱导MBA-1细胞向成骨细胞方向分化。 展开更多
关键词 MBA-1细胞骨形态生成蛋白-4 17β-雌二醇诱导分化
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重视老年骨质疏松症的骨形成促进治疗 被引量：2
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作者 王洪复 朱国英 《老年医学与保健》 CAS 2015年第1期11-14,共4页
骨质疏松症是一种骨重建异常的代谢性骨病。骨重建异常主要表现在骨转换中出现破骨细胞骨吸收功能异常活跃，或成骨细胞骨形成功能明显衰退，前者常见于绝经后骨质疏松和内分泌疾病诱发的继发性骨质疏松症，后者主要见于老年骨质疏松症... 骨质疏松症是一种骨重建异常的代谢性骨病。骨重建异常主要表现在骨转换中出现破骨细胞骨吸收功能异常活跃，或成骨细胞骨形成功能明显衰退，前者常见于绝经后骨质疏松和内分泌疾病诱发的继发性骨质疏松症，后者主要见于老年骨质疏松症。60岁以上老年人的骨质疏松症患病率明显增高，女性尤为显著，是我们临床诊治骨质疏松症的主要服务人群。 展开更多
关键词 老年骨质疏松症 骨形成 继发性骨质疏松症 破骨细胞骨吸收 绝经后骨质疏松 治疗 代谢性骨病 内分泌疾病
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肾主骨理论与骨髓间充质干细胞骨向分化关系之探讨 被引量：1
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作者 徐凌霄 张前德 《江西中医学院学报》 2010年第1期35-37,共3页
文章从中国传统医学"肾主骨"理论和"骨髓间充质干细胞骨向分化"两个方面在基本理论、实验研究以及临床实践等多角度去探讨相互间之关系,希冀为进一步的科研工作提供一些思路。
关键词 肾主骨 间充质干细胞骨向分化 关系探讨
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