反义AKT2 RNA逆转C6胶质瘤的细胞恶性表型 被引量：10

1

作者 康春生 浦佩玉 +3 位作者 王广秀 王虎 董伦 李捷 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期852-854,共3页

目的研究反义AKT2RNA逆转C6鼠脑胶质瘤细胞恶性表型。方法将逆转录病毒LXSN为载体的反义AKT2构建体脂质体复合物直接转染人脑胶质瘤细胞系TJ905和鼠脑胶质瘤细胞系C6,LXSN载体转染组为空载对照。随机筛选阳性克隆并应用蛋白印记和原位... 目的研究反义AKT2RNA逆转C6鼠脑胶质瘤细胞恶性表型。方法将逆转录病毒LXSN为载体的反义AKT2构建体脂质体复合物直接转染人脑胶质瘤细胞系TJ905和鼠脑胶质瘤细胞系C6,LXSN载体转染组为空载对照。随机筛选阳性克隆并应用蛋白印记和原位杂交鉴定转染。MTT法和TUNEL法评价细胞的增殖活性和凋亡,Transwell法分析侵袭能力,划痕实验研究细胞迁移能力,流式细胞法分析细胞周期,并进行GFAP的表达分析。结果转染ASAKT2cDNA后C6细胞AKT2表达显著抑制。与C6对照组和LXSN空载组比较,转染反义AKT2后C6细胞存活率均明显下降(P<0.01),凋亡指数增加(0.33vs13.67,P<0.01),侵袭能力和细胞迁移能力抑制,诱导细胞出现G0/G1细胞周期阻滞,上调GFAP的表达。结论反义AKT2RNA基因治疗通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡、抑制肿瘤细胞侵袭与迁移并使G0/G1细胞周期阻滞逆转其恶性表型,AKT2可作为基因治疗胶质瘤的重要优选靶的。 展开更多

关键词 细胞恶性表型 RNA C6胶质瘤 胶质瘤细胞系 细胞迁移能力 细胞周期阻滞 脂质体复合物 TUNEL法 肿瘤细胞增殖 肿瘤细胞侵袭 侵袭能力 GFAP 基因治疗 逆转录病毒 流式细胞法 细胞存活率 脑胶质瘤 直接转染 原位杂交 蛋白印记

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松乳菇多糖对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖、凋亡和迁移的影响 被引量：7

2

作者 江波 张雅稚 《中医学报》 CAS 2019年第8期1680-1685,共6页

目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC... 目的:研究松乳菇多糖体外对人骨肉瘤Saos-2细胞生长、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:体外培养Saos-2细胞,将不同浓度的松乳菇多糖作用于细胞,MTT法检测不同时间点和不同浓度的松乳菇多糖对细胞生长的抑制作用;AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响;Transwell小室法检测细胞的侵袭和迁移能力;Western blot法检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白和核转录因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)通路蛋白的表达。结果:松乳菇多糖以时间和浓度依赖性抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,促进人骨肉瘤Saos-2细胞凋亡,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞侵袭和迁移,抑制人骨肉瘤Saos-2细胞COX-2、NF-κB和NF-κB p65蛋白的表达。结论:松乳菇多糖可抑制人骨肉瘤Saos-2细胞的生长,降低其侵袭和迁移能力,其作用机制可能与阻滞NF-κB信号通路和下调COX-2蛋白表达有关。 展开更多

关键词 松乳菇多糖 人骨肉瘤Saos-2细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞迁移能力 NF-ΚB COX-2

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人胎儿真皮间充质干细胞对人恶性黑色素瘤细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用观察

3

作者 焦亚 张艳美 +2 位作者 王晓 王兴蕾 姜笃银 《山东医药》 CAS 2024年第24期43-46,共4页

目的 观察人胎儿真皮间充质干细胞(FDMSCs)对人恶性黑色素瘤细胞(A375细胞)增殖、迁移、侵袭的抑制作用。方法 通过酶消化法从16~20孕周的人意外流产健康胎儿的背部皮肤中提取FDMSCs,并进行鉴定。选取A375细胞并分为3组,F-CM组加入FDMSC... 目的 观察人胎儿真皮间充质干细胞(FDMSCs)对人恶性黑色素瘤细胞(A375细胞)增殖、迁移、侵袭的抑制作用。方法 通过酶消化法从16~20孕周的人意外流产健康胎儿的背部皮肤中提取FDMSCs,并进行鉴定。选取A375细胞并分为3组,F-CM组加入FDMSCs条件培养基,A-CM组加入成人真皮成纤维细胞条件培养基,Control组加入DMEM低糖空白培养基,利用CCK-8细胞增殖实验、划痕细胞迁移实验、细胞侵袭实验测算各组细胞相对活力、细胞迁移率、侵袭细胞数。结果 FDMSCs可以从人胎儿皮肤中成功提取并体外培养,阳性表达间充质干细胞(MSCs)特异性标记CD44、CD90、CD105及胚胎组织特异性标记SSEA-4、OCT-4,且具备成脂、成骨、成软骨的多向分化能力。与Control组比较,F-CM组细胞相对活力下降,细胞迁移率低,侵袭细胞数少(P均<0.05)。结论 FDMSCs可抑制A375细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 人胎儿真皮间充质干细胞 人恶性黑色素瘤细胞 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力

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Yes相关蛋白1短发卡RNA质粒构建及其对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 被引量：6

4

作者 董锐 王行环 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期2042-2045,共4页

目的用RNA干扰技术阻断人膀胱癌T24细胞中Yes相关蛋白1（YAP1）基因的表达，观察细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。方法检测人膀胱癌T24细胞中YAP1表达水平；采用真核转录质粒pGreenPuro构建针对YAP1基因的重组转染质粒。将4种不同序列... 目的用RNA干扰技术阻断人膀胱癌T24细胞中Yes相关蛋白1（YAP1）基因的表达，观察细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。方法检测人膀胱癌T24细胞中YAP1表达水平；采用真核转录质粒pGreenPuro构建针对YAP1基因的重组转染质粒。将4种不同序列的YAP1短发卡RNA（shRNA）质粒以及含与YAP1无关序列的对照质粒（YAP1 shRNA NC）分别转染T24细胞，48 h后行实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测其YAP1表达水平，筛选YAP1基因沉默效果最好的shRNA质粒干扰T24细胞；使用噻唑蓝（MTT）检测shRNA质粒对T24细胞增殖能力的影响、划痕实验检测其对迁移能力的影响、Transwell小室体外侵袭实验检测侵袭能力的影响。结果RT-qPCR检测T24细胞阳性表达YAP1基因，用Lipofectamine 2000成功将不同YAP1 shRNA质粒转染入T24细胞；RT-qPCR检测发现YAP1 shRNA3质粒沉默T24细胞YAP1表达效果最显著（抑制率为75.5%），随后用YAP1 shRNA3质粒干扰T24细胞，MTT检测结果显示转染YAP1 shRNA3质粒组T24细胞增殖能力小于空白对照组（干扰组增殖率为空白对照组的85.9%，P＝0.000）；转染YAP1 shRNA3的T24细胞迁移能力较空白对照组低[24 h平均划痕宽度分别为（218.50±3.50） μm和（86.5±4.50） μm，P＝0.003]；转染YAP1 shRNA3的T24细胞侵袭能力较空白对照组弱（穿透Transwell小室的平均细胞数62∶345，P＝0.000）。结论用RNA靶向干扰能明显降低人膀胱癌T24细胞内的YAP1基因表达，并抑制肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 膀胱癌T24细胞 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力 短发卡RNA 质粒构建 s相关蛋白 LIPOFECTAMINE

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PCa组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡观察 被引量：1

5

作者 张丽君 李嘉豪 +3 位作者 谢先娇 彭进城 魏灿 方玲 《山东医药》 CAS 2023年第12期6-11,共6页

目的观察前列腺癌(PCa)组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。方法体外培养人PCa细胞株(PC3细胞和DU145细胞),分别转染Mfn2过表达质粒、空白载体质粒及不转染质粒,PC3细胞分别记为A、B、C组,... 目的观察前列腺癌(PCa)组织Mfn2 mRNA表达及转染Mfn2过表达质粒的人PCa细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。方法体外培养人PCa细胞株(PC3细胞和DU145细胞),分别转染Mfn2过表达质粒、空白载体质粒及不转染质粒,PC3细胞分别记为A、B、C组,DU145细胞分别记为D、E、F组。CCK-8实验检测各组细胞OD值,细胞集落形成实验测算各组细胞集落数目,以OD值和细胞集落数目表示细胞增殖能力。细胞划痕实验测算各组细胞迁移率,以细胞迁移率表示细胞迁移能力。Transwell实验测算各组细胞侵袭数目,以细胞侵袭数目数表示细胞侵袭能力。流式细胞术测算各组细胞凋亡率,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3、caspase-3及PI3K/AKT通路相关蛋白(p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT)。结果PCa、癌旁组织Mfn2 mRNA相对表达量分别为0.36±0.32、0.72±0.35,两者比较,P<0.05。与同组24 h比较,A、B、C组48和72 h的OD值增加(P均<0.05);与同组48 h比较,A、B、C组72 h的OD值增加(P均<0.05);与B、C组比较,A组24、48、72 h的OD值和细胞集落数目减少(P均<0.05)。与同组24 h比较,D、E、F组48和72 h的OD值增加(P均<0.05);与同组48 h比较,D、E、F组72 h的OD值增加(P均<0.05);与E、F组比较,D组24、48、72 h的OD值和细胞集落数目减少(P均<0.05)。与B、C组比较,A组细胞迁移率及细胞侵袭数目减少(P均<0.05);与E、F组比较,D组细胞迁移率及细胞侵袭数目减少(P均<0.05)。与B、C组比较,A组细胞凋亡率及Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/caspase-3表达增加(P均<0.05);与E、F组比较,D组细胞凋亡率及Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/caspase-3表达增加(P均<0.05);与B、C组比较,A组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达降低(P均<0.05);与E、F组比较,D组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达降低(P均<0.05)。结论PCa组织Mfn2 mRNA的表达低于癌旁组织,转染Mfn2过表达质粒可抑制PCa细胞株增殖、迁移和侵袭,并诱导凋亡,其作用机� 展开更多

关键词 线粒体融合蛋白2 前列腺癌 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力 细胞凋亡能力 PI3K/AKT信号通路

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金丝桃苷对棕榈酸诱导内皮细胞凋亡的保护作用及相关机制的实验研究

6

作者 毛佳乐 张晓芹 +2 位作者 刘爽 陈礼平 王娜妮 《中国中医药科技》 CAS 2024年第4期611-617,共7页

目的:研究金丝桃苷对棕榈酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响和相关机制。方法:建立棕榈酸诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型,实验分为正常组、棕榈酸组(50μmol/L棕榈酸)、金丝桃苷组(50μmol/L棕榈酸+0.1μmol/L金丝桃苷),采用流式细胞术... 目的:研究金丝桃苷对棕榈酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡的影响和相关机制。方法:建立棕榈酸诱导人脐静脉内皮细胞损伤模型,实验分为正常组、棕榈酸组(50μmol/L棕榈酸)、金丝桃苷组(50μmol/L棕榈酸+0.1μmol/L金丝桃苷),采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax(Bcl-2相关X蛋白)、Bcl-2(B淋巴细胞瘤-2蛋白)和内质网应激相关蛋白CHOP(C/EBP同源蛋白)、GRP78(葡萄糖调节蛋白78)的表达水平,PCR检测凋亡相关基因Bax、CHOP mRNA水平,划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:与正常组比较,棕榈酸组细胞凋亡率显著增加(P<0.01),Bax/Bc-l2蛋白表达比值显著升高(P<0.01),Bax mRNA表达水平显著升高(P<0.01),迁移能力显著降低。与棕榈酸组比较,金丝桃苷组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),Bax/Bcl-2蛋白表达比值显著降低(P<0.01),Bax mRNA表达水平显著降低(P<0.01),迁移能力显著升高(P<0.01)。研究还发现,棕榈酸可提高CHOP(P<0.01)表达(P<0.01),降低GRP78表达(P<0.01);与棕榈酸组相比,金丝桃苷组CHOP和GRP78蛋白和mRNA表达水平均逆转(P<0.01)。结论:金丝桃苷能够缓解棕榈酸诱导的人脐静脉内皮细胞内质网应激,减少细胞凋亡,提高细胞迁移能力。 展开更多

关键词 金丝桃苷 内皮细胞 凋亡 内质网应激 凋亡相关蛋白 内质网应激相关蛋白 细胞迁移能力 体外实验

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马蔺子甲素对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、迁移、侵袭的影响及其机制 被引量：1

7

作者 张思宇 王超 +5 位作者 陈炼 王嘉铭 董适毓 程玉鑫 彭利 张萌 《山东医药》 CAS 2023年第12期12-15,共4页

目的观察马蔺子甲素(IQ)对人胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株PANC-1增殖、侵袭、迁移的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期的PANC-1细胞置于基础培养基中,将细胞分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组,高剂量组、中剂量组、低剂量... 目的观察马蔺子甲素(IQ)对人胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株PANC-1增殖、侵袭、迁移的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期的PANC-1细胞置于基础培养基中,将细胞分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、对照组,高剂量组、中剂量组、低剂量组分别加入25、20、15μmol/L的IQ,对照组加入等量0.9%NaCl溶液。采用MTT比色法检测细胞增殖能力(细胞OD值),划痕愈合实验检测细胞迁移能力(细胞迁移距离),Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞个数),qPCR法检测细胞Rho信号通路关键分子RhoA、Rac1、ROCK1、CDC42、ROCK2。结果与对照组比较,中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值减小(P均<0.05);与同组0 h比较,低剂量组及中剂量组和高剂量组培养24、48、72 h的OD值增加(P均<0.05)。与对照组比较,低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05);与中剂量组比较,高剂量组细胞迁移距离短,穿膜细胞个数少(P均<0.05)。与对照组比较,低剂量组及中剂量组和高剂量组RhoA、Rac1、ROCK1相对表达量减小(P均<0.05);与低剂量组比较,中剂量组、高剂量组ROCK1相对表达量减小(P均<0.05)。结论IQ可抑制PANC-1细胞增殖、侵袭及转移,其作用机制可能为抑制Rho信号通路介导的上皮间质转化进程,当药物浓度为25μmol/L时可达到最大抑瘤效应。 展开更多

关键词 胰腺癌 胰腺导管腺癌 马蔺子甲素 细胞增殖能力 细胞侵袭能力 细胞迁移能力 Rho信号通路

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miRNA-299-3p对肺癌细胞系A549迁移、增殖、凋亡、多柔比星敏感性的影响 被引量：5

8

作者 汪洋 汪群 张峰 《山东医药》 CAS 2019年第3期9-13,共5页

目的观察微小RNA-299-3p(miRNA-299-3p)对人肺癌细胞A549迁移、增殖、凋亡、多柔比星敏感性的影响。方法以A549细胞为研究对象,首先评价miRNA-299-3p对靶基因三磷酸腺苷结合盒E1(ABCE1)的调控效应;通过CCK-8染色、划痕实验、活力分析、T... 目的观察微小RNA-299-3p(miRNA-299-3p)对人肺癌细胞A549迁移、增殖、凋亡、多柔比星敏感性的影响。方法以A549细胞为研究对象,首先评价miRNA-299-3p对靶基因三磷酸腺苷结合盒E1(ABCE1)的调控效应;通过CCK-8染色、划痕实验、活力分析、TUNEL染色以及蛋白印迹方法系统分析miRNA-299-3p转染的A549细胞迁移、增殖、凋亡以及对多柔比星敏感性的影响。结果 miRNA-299-3p对肺癌细胞ABCE1具有显著抑制效应。经miRNA-299-3p转染的A549细胞增殖活性、迁移等生物学特征并未受到明显影响。然而,miRNA-299-3p显著增加了A549细胞对多柔比星的敏感性,与对照组相比,同样剂量的多柔比星药物导致A549细胞活性显著下降,凋亡水平显著升高。结论 miR-299-3p靶向抑制ABCE1表达,其过表达并不能显著抑制A549细胞的增殖,但miR-299-3p联合多柔比星促进了A549细胞对多柔比星的敏感性,显著促进了A549细胞的凋亡。 展开更多

关键词 微小RNA-299-3p 肺肿瘤 肺癌 细胞增殖能力 细胞凋亡能力 细胞迁移能力 化疗敏感性

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绞股蓝总皂苷对胶质母细胞瘤细胞株U87细胞形态、迁移能力的影响 被引量：5

9

作者 魏依兰 曲杰 +1 位作者 窦志杰 申晓平 《山东医药》 CAS 2018年第11期5-8,共4页

目的观察不同剂量绞股蓝总皂苷(Gyp)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞株U87细胞形态、迁移能力的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期U87细胞,分别加入10、5 mg/mL的Gyp溶液100μL及等量PBS(分别计为A、B、C组),常规培养细胞。比较各组细胞形... 目的观察不同剂量绞股蓝总皂苷(Gyp)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞株U87细胞形态、迁移能力的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期U87细胞,分别加入10、5 mg/mL的Gyp溶液100μL及等量PBS(分别计为A、B、C组),常规培养细胞。比较各组细胞形态、迁移能力及IL-6蛋白。结果 A组细胞生长慢、体积小、固缩现象非常明显,细胞贴壁现象接近消失;B组细胞生长缓慢,体积缩小,胞质固缩,部分细胞甚至破裂死亡,细胞贴壁现象减弱;C组细胞生长规则,轮廓清晰,形态饱满,胞体透亮,贴壁生长良好。A、B、C组细胞迁移覆盖区域占原有划痕区的54.8%、82.4%、98.6%,两两比较,P均<0.05。A、B、C组穿膜细胞个数分别占19.8%、58.9%、100%,两两比较,P均<0.05。A、B、C组IL-6蛋白水平分别为小量、中等量、多量,两两比较,P均<0.05。结论Gyp可抑制U87细胞生长及减弱细胞迁移能力,尤以10 mg/mL的Gyp效果更佳,机制可能与其可抑制IL-6蛋白表达有关。 展开更多

关键词 绞股蓝总皂苷 胶质母细胞瘤 U87细胞 细胞形态 细胞迁移能力 IL-6蛋白

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FGF4在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用 被引量：4

10

作者 曲杰 魏依兰 +1 位作者 吕喜英 李青山 《山东医药》 CAS 2018年第27期30-34,共5页

目的观察成纤维生长因4(FGF4)在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用。方法取乳腺癌组织及癌旁正常组织各40例份,采用RT-PCR法检测FGF4 mRNA。培养正常乳腺细胞株MCF-10A、低转移乳腺癌细胞株T47D、高转移... 目的观察成纤维生长因4(FGF4)在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用。方法取乳腺癌组织及癌旁正常组织各40例份,采用RT-PCR法检测FGF4 mRNA。培养正常乳腺细胞株MCF-10A、低转移乳腺癌细胞株T47D、高转移乳腺癌细胞株MDA-MB-231,采用RT-PCR法检测FGF4 mRNA,Western blotting法检测FGF4蛋白。收集T47D,利用p CDNA3.1-FGF4构建过表达FGF4的T47D稳定细胞株T47DFGF4-oe,以只转染p CDNA3.1的细胞株T47D-NC作为作为阴性对照组;收集MDA-MB-231,利用RNA干扰技术敲除FGF4构建稳定表达FGF4-shRNA的细胞株MDA-MB-231-FGF4-si,以MDA-MB-231-NC作为阴性对照组;Western blotting法检测FGF4蛋白,MTT实验及划痕实验检测细胞增殖、迁移能力。结果乳腺癌组织中FGF4 mRNA表达高于癌旁组织(P<0.05)。CF-10A、T47D细胞FGF4 mRNA和蛋白灰度值均低于MDA-MB-231细胞,T47D细胞FGF4蛋白灰度值低于MDA-MB-231细胞(P均<0.05)。T47D-FGF4-oe细胞FGF4蛋白灰度值、增殖速度高于T47D-NC细胞,划痕距离小于T47D-NC细胞(P均<0.05)。MDA-MB-231-FGF4-si细胞FGF4蛋白灰度值、增殖速度低于MDA-MB-231-NC细胞,划痕距离大于MDA-MB-231-NC细胞(P均<0.05)。结论 FGF4在乳腺癌中显著高表达,并有促进乳腺癌细胞株增殖及转移的作用。 展开更多

关键词 成纤维生长因子4 乳腺癌 T47D细胞 MDA-MB-231细胞 细胞增殖能力 细胞迁移能力

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miR-623在膀胱癌中的表达及靶向Fascin1抑制膀胱癌细胞迁移和侵袭 被引量：4

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作者 陈雪磊 刘光华 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第7期1129-1134,共6页

目的:探讨miR-623在膀胱癌中的表达及通过靶向Fascin1对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR检测正常膀胱上皮组织、膀胱癌组织、正常永生化膀胱上皮细胞系(SV-HUC-1)和膀胱癌细胞系(T24、UMUC3)中miR-623的表达... 目的:探讨miR-623在膀胱癌中的表达及通过靶向Fascin1对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR检测正常膀胱上皮组织、膀胱癌组织、正常永生化膀胱上皮细胞系(SV-HUC-1)和膀胱癌细胞系(T24、UMUC3)中miR-623的表达量;采用脂质体瞬时转染miR-623 mimics,划痕实验和Transwell侵袭实验检测miR-623过表达后膀胱癌细胞迁移、侵袭能力的改变;生物信息学预测miR-623的作用靶蛋白。miR-623过表达后Western blot及双荧光素酶报告基因检测其靶点的表达及结合情况;使用Fascin1特异性siRNA观察膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的变化,并同时转染miR-623 inhibitor进行恢复实验。结果:miR-623在膀胱癌中的表达水平显著低于在正常膀胱组织中的表达(P<0.05),在膀胱癌细胞系(T24、UMUC3)中的表达水平显著低于正常膀胱细胞系(SV-HUC-1)(P<0.05);miR-623过表达显著抑制T24和UMUC3细胞的迁移和侵袭能力。生物信息学预测Fascin1为miR-623的靶基因,在T24和UMUC3细胞中过表达miR-623,能够显著降低Fascin1的蛋白水平;荧光素酶报告基因分析结果证实miR-623作用于Fascin1的3'-UTR。下调Fascin1表达能够抑制膀胱癌T24和UMUC3细胞的迁移和侵袭能力,同时抑制miR-623的表达能够提高细胞的迁移和侵袭能力。结论:miR-623在膀胱癌中表达水平降低,是一个抑癌因子;并可能通过靶向Fascin1调节膀胱癌的侵袭和转移能力。 展开更多

关键词 膀胱癌 miR-623 Fascin1 细胞迁移能力 细胞侵袭能力

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NFAT5基因在食管癌组织中的表达情况及其对食管癌细胞迁移能力的影响

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作者 赵二波 杨盛诏 温麟琦 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2023年第6期681-685,共5页

目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在食管癌组织中表达的临床意义及敲低其在食管癌细胞的表达对其迁移能力的影响。方法用免疫组化法检测所收集的26例食管癌患者组织及其癌旁组织标本中NFAT5的表... 目的探索活化T细胞核因子5(nuclear factor of activated T cells 5,NFAT5)在食管癌组织中表达的临床意义及敲低其在食管癌细胞的表达对其迁移能力的影响。方法用免疫组化法检测所收集的26例食管癌患者组织及其癌旁组织标本中NFAT5的表达情况。将食管癌细胞ECA109分为实验组和对照组,实验组ECA109细胞转染NFAT5-siRNA质粒,对照组ECA109细胞转染MOCK-siRNA质粒,RT-PCR检测各组细胞NFAT5 mRNA的含量,蛋白免疫印迹法检测各组细胞的NFAT5、TLR4、MyD88表达情况,Transwell实验、细胞划痕实验检测实验组和对照组细胞的迁移(转移)能力。结果免疫组化实验结果显示食管癌患者组织NFAT5阳性率为80.77%(21/26),相应癌旁组织中表达率为15.38%(4/26),食管癌组织中NFAT5的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.001)。实验组和对照组ECA109细胞转染相应siRNA后NFAT5 mRNA含量下降;实验组ECA109细胞NFAT5、TLR4、MyD88蛋白表达量分别为0.28±0.08、0.31±0.13、0.41±0.14;对照组ECA109细胞NFAT5、TLR4、MyD88蛋白表达量分别为0.95±0.15、0.84±0.22、1.04±0.26;实验组ECA109细胞TLR4、MyD88的表达明显下降(均P<0.05)。划痕实验结果表明,实验组细胞划痕愈合率为(52.67±5.21)%,对照组细胞为(82.91±7.26)%;Transwell实验结果表明,实验组成功迁移细胞数为(35±5)个,对照组成功迁移细胞数为(92±13)个,结果表明ECA109细胞低表达NFAT5后,细胞迁移能力显著下降(P<0.01)。结论NFAT5在食管癌中表达明显升高,可能与食管癌的恶性程度相关;且NFAT5通过调控TLR4/MyD88信号通路影响食管癌细胞的迁移能力。 展开更多

关键词 活化T细胞核因子5 食管癌 细胞迁移能力

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miR-639在骨肉瘤组织中的表达及其模拟物转染对人骨肉瘤细胞U20S增殖、迁移、侵袭能力的影响 被引量：3

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作者 张琼 张琳 +1 位作者 杨臻 陈楠 《山东医药》 CAS 2019年第3期1-4,共4页

目的观察微小RNA-639(miR-639)在骨肉瘤组织中的表达及miR-639模拟物(miR-639 mimics)转染对人骨肉瘤细胞U20S增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法通过GEO数据库和TCGA数据库分析骨肉瘤组织及癌旁组织miR-639表达情况,另分析miR-639高表... 目的观察微小RNA-639(miR-639)在骨肉瘤组织中的表达及miR-639模拟物(miR-639 mimics)转染对人骨肉瘤细胞U20S增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法通过GEO数据库和TCGA数据库分析骨肉瘤组织及癌旁组织miR-639表达情况,另分析miR-639高表达与骨肉瘤临床病理参数的关系。取U20S细胞,将miR-639 mimics和模拟物阳性对照(miR-NC)转染入U20S细胞中(分别计为观察组和对照组),转染后继续培养24 h,后收集细胞进行后续实验。采用CCK-8实验检测两组细胞集落形成数,Ed U实验检测细胞Ed U染色数,克隆形成实验检测细胞迁移细胞数,Transwell实验检测细胞侵袭数,荧光定量PCR法和Western blotting法分别检测细胞TUSC5 mRNA、蛋白。结果 GEO数据库显示,骨肉瘤、癌旁组织中miR-639表达水平分别为11.2±0.4、7.1±0.6,两者比较,P <0.05;TCGA数据库显示,骨肉瘤、癌旁组织中miR-639表达水平分别为19.5±3.4、7.7±2.2,两者比较,P <0.05。miR-639高表达与骨肉瘤肿瘤直径、淋巴结转移、解剖部位有关(P均<0.05)。观察组、对照组集落形成数分别为(155±12)、(84±8)个,Ed U染色数分别为(14±3)、(6±2)个,迁移细胞数分别为(120±30)、(70±18)个,侵袭细胞数分别为(100±16)、(52±23)个,两组比较,P均<0.05。观察组和对照组TUSC5 mRNA分别为0.18±0.07、0.84±0.13,TUSC5蛋白分别为0.31±0.06、0.81±0.09,两组比较,P均<0.05。结论 miR-639在骨肉瘤组织中表达升高;miR-639 mimics转染促进了骨肉瘤细胞的增殖、迁移、侵袭能力,可能与其抑制TUSC5有关。 展开更多

关键词 骨肉瘤 微小RNA-639 微小RNA-639模拟物 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力

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EIF4A1在胃癌组织中表达及其抑制剂对人胃癌细胞株增殖、存活、侵袭、迁移能力影响观察 被引量：3

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作者 韦尉元 陈建思 +3 位作者 覃宇周 莫显伟 严林海 肖强 《山东医药》 CAS 2018年第39期9-12,共4页

目的观察真核翻译起始因子4A1(EIF4A1)在胃癌组织中的表达变化;另观察EIF4A1抑制剂(Silvestrol)对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、存活、侵袭、迁移能力影响,并分析其可能机制。方法淋巴结转移阳性、阴性胃癌组织及匹配癌旁正常组织各20例份... 目的观察真核翻译起始因子4A1(EIF4A1)在胃癌组织中的表达变化;另观察EIF4A1抑制剂(Silvestrol)对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、存活、侵袭、迁移能力影响,并分析其可能机制。方法淋巴结转移阳性、阴性胃癌组织及匹配癌旁正常组织各20例份,采用免疫组化法检测各组织EIF4A1。取对数生长期SGC-7901细胞并分为3组,药物组加含120μg/m L Silvestrol(在DMSO溶剂溶解)的细胞培养液100μL,模型组加含0. 5%DMSO的细胞培养液100μL,对照组加细胞培养液100μL; CCK-8法检测细胞增殖活性,CountessⅡFL细胞计数仪计数活细胞数,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,qRT-PCR法和Western blotting法分别检测EIF4A1和AKT mRNA、蛋白。结果与癌旁正常组织比较,淋巴结转移阳性胃癌组织中EIF4A1高表达例数多(P<0. 05)。各组OD值及活细胞数两两比较,P均> 0. 05;与模型组、对照组比较,药物组侵袭细胞数少,细胞迁移距离长,EIF4A1和AKT蛋白、mRNA表达降低(P均<0. 05)。结论淋巴结转移阳性胃癌组织中EIF4A1表达量高于癌旁正常组织; Silvestrol不影响SGC-7901细胞的增殖、存活能力,但可抑制细胞侵袭、迁移能力,其机制可能与Silvestrol调控AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 真核翻译起始因子4A1 真核翻译起始因子4A1抑制剂 胃癌 胃肿瘤 细胞增殖能力 细胞侵袭能力 细胞迁移能力 蛋白激酶B

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miRNA-138模拟物转染对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响及其机制 被引量：3

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作者 董超 黄远丽 徐正丰 《山东医药》 CAS 2019年第3期5-8,共4页

目的观察miRNA-138模拟物(miRNA-138 mimics)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法选取人高侵袭性乳腺细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468)及人低侵袭性乳腺癌细胞系(MCF-7)和人正常乳腺上皮细胞系(HBL-100),qRT-PCR... 目的观察miRNA-138模拟物(miRNA-138 mimics)对人乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响,并探讨其可能机制。方法选取人高侵袭性乳腺细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468)及人低侵袭性乳腺癌细胞系(MCF-7)和人正常乳腺上皮细胞系(HBL-100),qRT-PCR法检测微小RNA-138(miRNA-138);取MDA-MB-231并分为两组,miRNA-138 mimics组细胞系以miRNA-138 mimics转染,miR-NC组细胞系以miR阴性对照模拟物(miR-NC)转染,qRT-PCR法检测miRNA-138,Transwell迁移和侵袭实验测算迁移细胞数、侵袭细胞数,Western blotting法检测SOX4蛋白及上皮间质转化(EMT)相关标志物(E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白)。结果 MDA-MB-231、MDA-MB-468、MCF-7、HBL-100中miRNA-138相对表达量分别为0.23±0.08、0.42±0.05、0.56±0.11、1.03±0.04,MDAMB-231、MDA-MB-468、MCF-7与HBL-100比较,MDA-MB-231、MDA-MB-468与MCF-7比较,P均<0.05。miRNA-138 mimics组和miR-NC组miRNA-138相对表达量分别为13.35±0.35、0.98±0.05,两组比较,P <0.05。miRNA-138 mimics组和miR-NC组迁移细胞数分别为(210±30)、(340±18)个,侵袭细胞数分别为(100±16)、(190±26)个,两组比较,P均<0.05。miRNA-138 mimics组SOX、E-cadherin、Fibronectin、Vimentin蛋白灰度值分别为0.16±0.08、0.59±0.16、0.42±0.14、0.17±0.09,miR-NC组分别为0.77±0.19、0.12±0.06、1.19±0.21、0.44±0.12,两组比较,P均<0.05。结论 miRNA-138 mimics能够抑制乳腺癌细胞侵袭和迁移,机制可能与其调控SOX4基因抑制乳腺癌细胞EMT有关。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 乳腺癌 微小RNA-138 细胞侵袭能力 细胞迁移能力 SOX4蛋白 E-CADHERIN蛋白 Fibronectin蛋白 Vimentin蛋白

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口腔鳞状细胞癌中CD133阳性细胞体外迁移能力的研究 被引量：3

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作者 李麒麟 赵晖 +1 位作者 陈卫民 李秋慧 《临床口腔医学杂志》 2018年第8期455-458,共4页

目的:研究口腔鳞状细胞癌细胞中CD133高表达和CD133低表达细胞亚群的体外迁移能力。方法:流式细胞仪分选出CD133阳性(CD133^+)和CD133阴性(CD133^-)细胞亚群。利用Transwell和划痕实验法检测口腔癌细胞系Cal27中CD133^+和CD133^-的细胞... 目的:研究口腔鳞状细胞癌细胞中CD133高表达和CD133低表达细胞亚群的体外迁移能力。方法:流式细胞仪分选出CD133阳性(CD133^+)和CD133阴性(CD133^-)细胞亚群。利用Transwell和划痕实验法检测口腔癌细胞系Cal27中CD133^+和CD133^-的细胞亚群的迁移能力。逆转录及荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测CD133+和CD133^-细胞中Snail1、Slug、Twist等上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关因子的表达情况。结果:CD133^+细胞穿透膜的数目[(92.75±9.92)个]明显多于CD133-细胞[(20.12±4.55)个](P<0.05)。CD133^+细胞亚群划痕恢复能力[迁移细胞数(601.3±10.12)个]明显多于CD133^-细胞亚群[(200.12±5.14)个](P<0.05)。CD133+细胞中Snail1、Slug、Twist等mRNA表达水平显著高于CD133^-细胞(P<0.05)。结论:口腔鳞癌中CD133+细胞亚群具有更强的的体外迁移能力,其机制可能与EMT相关。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 细胞迁移能力 CD133 上皮间充质转化(EMT)

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miR-32-5p和FKBP14基因转染对SPC-A1细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其靶向关系验证 被引量：2

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作者 杨丹芬 谢圆媛 +2 位作者 姜棚菲 白娟 林芳 《山东医药》 CAS 2020年第24期17-21,共5页

目的观察miR-32-5p和FK506结合蛋白14(FKBP14)基因转染对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系SPC-A1增殖、迁移、侵袭能力的影响,并验证两者之间靶向关系。方法选取SPC-A1细胞,将细胞为A、B、C、D、E、F组,分别转染miR-32-5p+pcDNA-FKBP14、miR... 目的观察miR-32-5p和FK506结合蛋白14(FKBP14)基因转染对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系SPC-A1增殖、迁移、侵袭能力的影响,并验证两者之间靶向关系。方法选取SPC-A1细胞,将细胞为A、B、C、D、E、F组,分别转染miR-32-5p+pcDNA-FKBP14、miR-32-5p+pcDNA、miR-32-5p、miR-con、pcDNA-FKBP14、pcDNA-con,采用MTT法检测细胞吸光度值,并计算细胞存活率;Transwell实验检测细胞迁移数、侵袭数,Western blotting法检测细胞CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量。取SPC-A1细胞,将细胞分为G、H、I、J组,分别转染FKBP14-WT+miR-con、FKBP14-WT+miR-32-5p、FKBP14-MUT+miR-con、FKBP14-MUT+miR-32-5p,采用荧光素酶活性检测试剂盒检测细胞荧光素酶活性。取SPC-A1细胞,将细胞分为K、L、M、N组,分别转染miR-32-5p、miR-con、anti-miR-32-5p、anti-miR-con,Western blotting法检测细胞中KBP14蛋白相对表达量。结果与B组比较,A组细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量增加(P均<0.05);与D组比较,C组细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量减少(P均<0.05);与F组比较,E组SPC-A1细胞存活率、迁移细胞数、侵袭细胞数及CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量增加(P均<0.05)。与G组比较,H组细胞荧光素酶活性减弱(P<0.05);与I组比较,J组细胞荧光素酶活性无显著变化(P>0.05)。与L组比较,K组FKBP14蛋白相对表达量减少(P<0.05);与N组比较,M组FKBP14蛋白相对表达量增加(P<0.05)。结论过表达miR-32-5p或敲减FKBP14后SPC-A1细胞存活率降低,迁移细胞数、侵袭细胞数减少,miR-32-5p与FKBP14存在靶向调控关系。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 微小RNA-32-5p FK506结合蛋白14 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力

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乳腺癌组织中Kif2a过表达在肿瘤进展和转移中的作用 被引量：2

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作者 王建丽 马榕 +2 位作者 曲迅 张晓英 孙善珍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2003-2004,共2页

关键词 肿瘤进展 Kif2a 原发肿瘤 淋巴结转移 细胞迁移能力 纺锤体 驱动蛋白 空白对照组 体外实验结果 细胞有丝分裂

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大鼠血管平滑肌细胞迁移与西洛他唑的干预效应 被引量：1

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作者 王守力 韩雅玲 +7 位作者 于海波 邓捷 徐凯 梁明 李毅 苏庆丰 闫承慧 康建 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第15期69-71,i001,共4页

目的:探讨西洛他唑对原代培养大鼠血管平滑肌细胞迁移能力的影响及其可能的调控作用。方法:实验于2003-03/12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。使用胶原酶消化法处理健康雄性SD大鼠,获得原代培养的鼠血管平滑肌细胞,加入... 目的:探讨西洛他唑对原代培养大鼠血管平滑肌细胞迁移能力的影响及其可能的调控作用。方法:实验于2003-03/12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所完成。使用胶原酶消化法处理健康雄性SD大鼠,获得原代培养的鼠血管平滑肌细胞,加入终浓度为0.5μmol/L西洛他唑培养72h为西洛他唑组,对照组为加入等量的Dulbecco改良的Eagle培养液培养的血管平滑肌细胞。应用细胞刮伤实验和基质金属蛋白酶活性测定分析西洛他唑对原代培养血管平滑肌细胞迁移能力的影响。应用蛋白质印记杂交方法分析给药前后血管平滑肌细胞内基质金属蛋白酶2,9和细胞外信号调节激酶蛋白的表达情况。结果:①细胞刮伤实验显示,与对照组比较,西洛他唑组血管平滑肌细胞迁移能力明显受抑,迁移距离明显缩短。明胶酶活性分析发现,西洛他唑组细胞基质金属蛋白酶活性明显低于对照组。②蛋白质印迹杂交分析发现,西洛他唑可引起原代培养血管平滑肌细胞迁移能力下降。西洛他唑组细胞内基质金属蛋白酶2,9蛋白表达明显低于对照组(14.34±0.70,12.65±0.98;93.67±1.90,83.67±1.05,t=67.86,85.65,P<0.05)。③蛋白质印迹杂交分析检测显示,西洛他唑组与对照组血管平滑肌细胞内信号调节激酶1,2蛋白表达无明显差异(P>0.05);细胞内磷酸化信号调节激酶蛋白表? 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞迁移 西洛他唑 干预效应 基质金属蛋白酶活性 基质金属蛋白酶2 培养的血管平滑肌细胞 细胞迁移能力 平滑肌细胞内 信号调节激酶 沈阳军区总医院 蛋白质印记杂交 细胞外信号调节 细胞内信号调节 原代培养

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干扰FTO蛋白对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、迁移、侵袭的影响及其机制

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作者 黄锦源 杨静 代荫梅 《山东医药》 CAS 2022年第36期5-9,共5页

目的 观察干扰脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法 取对数生长期SKOV3细胞,分为siFTO-1组、siFTO-2组、si-NC组,siFTO-1组转染第一条靶向FTO的小干扰RNA(siFTO-1),siFTO-2... 目的 观察干扰脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)对人卵巢癌细胞系SKOV3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法 取对数生长期SKOV3细胞,分为siFTO-1组、siFTO-2组、si-NC组,siFTO-1组转染第一条靶向FTO的小干扰RNA(siFTO-1),siFTO-2组转染第二条靶向FTO的小干扰RNA(siFTO-2),si-NC组转染无靶向作用的小干扰RNA(si-NC),CCK-8法检测细胞增殖能力(增殖率),细胞划痕实验检测细胞迁移能力(相对迁移率),Transwell实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞数),Western blotting法检测细胞AKT、p-AKT/AKT、PI3K、p-PI3K/PI3K蛋白相对表达量。结果 与si-NC组比较,siFTO-1组和siFTO-2组细胞增殖率、相对迁移率、穿膜细胞数高(P均<0.05);与si-NC组比较,siFTO-1组和siFTO-2组p-AKT/AKT和P-PI3K/PI3K蛋白相对表达量升高(P均<0.05),PI3K、AKT蛋白相对表达量无显著变化(P均>0.05)。结论 干扰FTO可促进SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭,可能机制是其通过上调PI3K和AKT磷酸化水平,进而激活PI3K/AKT信号通路。 展开更多

关键词 卵巢癌 FTO蛋白 细胞增殖能力 细胞迁移能力 细胞侵袭能力 PI3K/AKT信号通路

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