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角蛋白K18及其33、52位丝氨酸磷酸化在HBV感染肝脏疾病中的表达及意义
被引量：
2
1
作者
李娟
石英
+5 位作者
武聚山
绳波
于红卫
吴昊
陈新月
陈德喜
《临床肝胆病杂志》
CAS
2008年第4期243-245,共3页
目的探索K18磷酸化ser33和ser52水平与HBV感染肝脏疾病的关系。方法应用组织化学免疫荧光法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52的表达及其相对亚细胞定位;Western blot方法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其...
目的探索K18磷酸化ser33和ser52水平与HBV感染肝脏疾病的关系。方法应用组织化学免疫荧光法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52的表达及其相对亚细胞定位;Western blot方法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52水平。结果组织化学免疫荧光结果显示K18及其磷酸化Ser33和Ser52在所有肝组织都有表达,K18的表达没有明显差异,K18磷酸化Ser33和Ser52在正常细胞中表达较弱,位于细胞膜周围,在慢性HBV肝病时弥漫分散于细胞浆中且表达增强,重型肝炎表达最高;Western blot结果显示与对照相比,K18的Ser52水平被显著诱导但在不同程度肝脏疾病的表达无显著差异,重型肝炎时,K18的Ser33水平被显著诱导。结论K18高度磷酸化可能是HBV感染后肝脏疾病病情进展的标志。
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关键词
细胞
角蛋白
18
(
k
18
)
k
18
磷酸化Ser33和Ser52
HBV感染后肝脏疾病
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职称材料
化学发光法检测血清CK18水平在胃癌诊断中的应用
被引量：
4
2
作者
贾志凌
张宏艳
+1 位作者
刘畅
于忠和
《现代检验医学杂志》
CAS
2009年第3期34-36,共3页
目的寻找新型血清CK18的检测方法，并作为一种胃癌肿瘤标志物与CA72—4指标进行比较。方法分别以CK-3A9和CK-2A6作为固相抗体和标记抗体，制备化学发光试剂盒（CK18—3A9）对正常人及胃癌患者血清CK18进行检测；通过ROc曲线比较CK18—3A...
目的寻找新型血清CK18的检测方法，并作为一种胃癌肿瘤标志物与CA72—4指标进行比较。方法分别以CK-3A9和CK-2A6作为固相抗体和标记抗体，制备化学发光试剂盒（CK18—3A9）对正常人及胃癌患者血清CK18进行检测；通过ROc曲线比较CK18—3A9与CA72—4在胃癌诊断中的意义。结果CK18—3A9化学发光测定试刺盒诊断胃癌灵敏度为44．00％，特异度为98．50％；诊断胃腺癌灵敏度为42．65％，特异度为98．50％；诊断正常人血清假阳性率为0％；诊断炎症血清假阳性率为6．00％。结论在该研究考察的范围内，与CA72—4相比，CK18—3A9在诊断胃癌时有更好的灵敏度和特异度。
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关键词
细胞
角蛋白
18
(C
k
18
)
胃癌
C
k
18
—3A9
化学发光
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职称材料
CK18基因的原核表达及蛋白纯化?
3
作者
倪佳
王伟
+3 位作者
徐莹莹
陈相屹
张欣
孙达权
《贵州医科大学学报》
CAS
2022年第9期1025-1030,共6页
目的采用原核表达和亲和层析的方法获得人细胞角蛋白18(CK18)。方法利用高保真聚合酶链式反应(PCR)法克隆人CK18基因的蛋白编码区,TA克隆入pMD18-T载体中;经筛选和鉴定后,将CK18基因编码区插入原核表达载体pGEX-4t-1中,构建重组质粒pGEX...
目的采用原核表达和亲和层析的方法获得人细胞角蛋白18(CK18)。方法利用高保真聚合酶链式反应(PCR)法克隆人CK18基因的蛋白编码区,TA克隆入pMD18-T载体中;经筛选和鉴定后,将CK18基因编码区插入原核表达载体pGEX-4t-1中,构建重组质粒pGEX-CK18 GST;将重组质粒导入感受态细菌Rosetta(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导CK18融合蛋白(GST-CK18)表达,并用GST亲和层析分离纯化CK18蛋白;用体外磷酸化、免疫组化等方法验证CK18磷酸化位点及其对细胞的影响。结果成功克隆人CK18基因蛋白编码区,构建了原核表达质粒pGEX-CK18 GST,表达了GST-CK18并获得纯化蛋白,体外磷酸化、免组织化学方法均证实CK18的52位丝氨酸磷酸化可以导致细胞骨架重排和细胞形态变化。结论成功获得纯化的人CK18蛋白,为体外研究CK18和蛋白激酶之间的关系奠定了前期基础。
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关键词
细胞
角蛋白
18
(C
k
18
)
聚合酶链式反应
基因克隆
原核表达
蛋白
纯化
肝癌
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职称材料
题名
角蛋白K18及其33、52位丝氨酸磷酸化在HBV感染肝脏疾病中的表达及意义
被引量：
2
1
作者
李娟
石英
武聚山
绳波
于红卫
吴昊
陈新月
陈德喜
机构
首都医科大学附属北京佑安医院
出处
《临床肝胆病杂志》
CAS
2008年第4期243-245,共3页
文摘
目的探索K18磷酸化ser33和ser52水平与HBV感染肝脏疾病的关系。方法应用组织化学免疫荧光法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52的表达及其相对亚细胞定位;Western blot方法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52水平。结果组织化学免疫荧光结果显示K18及其磷酸化Ser33和Ser52在所有肝组织都有表达,K18的表达没有明显差异,K18磷酸化Ser33和Ser52在正常细胞中表达较弱,位于细胞膜周围,在慢性HBV肝病时弥漫分散于细胞浆中且表达增强,重型肝炎表达最高;Western blot结果显示与对照相比,K18的Ser52水平被显著诱导但在不同程度肝脏疾病的表达无显著差异,重型肝炎时,K18的Ser33水平被显著诱导。结论K18高度磷酸化可能是HBV感染后肝脏疾病病情进展的标志。
关键词
细胞
角蛋白
18
(
k
18
)
k
18
磷酸化Ser33和Ser52
HBV感染后肝脏疾病
Keywords
k
18
k
18
Ser- 33 phosphorylated
k
18
Ser- 52 phosphorylated
HBV infected human liver disease
分类号
R512.62 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
化学发光法检测血清CK18水平在胃癌诊断中的应用
被引量：
4
2
作者
贾志凌
张宏艳
刘畅
于忠和
机构
北京军区总医院肿瘤科
出处
《现代检验医学杂志》
CAS
2009年第3期34-36,共3页
文摘
目的寻找新型血清CK18的检测方法，并作为一种胃癌肿瘤标志物与CA72—4指标进行比较。方法分别以CK-3A9和CK-2A6作为固相抗体和标记抗体，制备化学发光试剂盒（CK18—3A9）对正常人及胃癌患者血清CK18进行检测；通过ROc曲线比较CK18—3A9与CA72—4在胃癌诊断中的意义。结果CK18—3A9化学发光测定试刺盒诊断胃癌灵敏度为44．00％，特异度为98．50％；诊断胃腺癌灵敏度为42．65％，特异度为98．50％；诊断正常人血清假阳性率为0％；诊断炎症血清假阳性率为6．00％。结论在该研究考察的范围内，与CA72—4相比，CK18—3A9在诊断胃癌时有更好的灵敏度和特异度。
关键词
细胞
角蛋白
18
(C
k
18
)
胃癌
C
k
18
—3A9
化学发光
Keywords
cyto
k
eratin-
18
（C
k
18
）
gastric cancer
C
k
18
-3A9
chemiluminescence
分类号
R730.45 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
CK18基因的原核表达及蛋白纯化?
3
作者
倪佳
王伟
徐莹莹
陈相屹
张欣
孙达权
机构
贵阳市妇幼保健院&贵阳市儿童医院儿童重症监护病房
贵州医科大学基础医学院
宁波市第一医院疝肝胆肛肠外科
出处
《贵州医科大学学报》
CAS
2022年第9期1025-1030,共6页
基金
国家自然科学基金(81560390)
2020年贵州省大学生创新创业训练计划项目(S202010660004)。
文摘
目的采用原核表达和亲和层析的方法获得人细胞角蛋白18(CK18)。方法利用高保真聚合酶链式反应(PCR)法克隆人CK18基因的蛋白编码区,TA克隆入pMD18-T载体中;经筛选和鉴定后,将CK18基因编码区插入原核表达载体pGEX-4t-1中,构建重组质粒pGEX-CK18 GST;将重组质粒导入感受态细菌Rosetta(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导CK18融合蛋白(GST-CK18)表达,并用GST亲和层析分离纯化CK18蛋白;用体外磷酸化、免疫组化等方法验证CK18磷酸化位点及其对细胞的影响。结果成功克隆人CK18基因蛋白编码区,构建了原核表达质粒pGEX-CK18 GST,表达了GST-CK18并获得纯化蛋白,体外磷酸化、免组织化学方法均证实CK18的52位丝氨酸磷酸化可以导致细胞骨架重排和细胞形态变化。结论成功获得纯化的人CK18蛋白,为体外研究CK18和蛋白激酶之间的关系奠定了前期基础。
关键词
细胞
角蛋白
18
(C
k
18
)
聚合酶链式反应
基因克隆
原核表达
蛋白
纯化
肝癌
Keywords
cyto
k
eratin
18
(C
k
18
)
polymerase chain reaction(PCR)
gene cloning
pro
k
aryotic expression
protein purification
liver cancer
分类号
R34 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
角蛋白K18及其33、52位丝氨酸磷酸化在HBV感染肝脏疾病中的表达及意义
李娟
石英
武聚山
绳波
于红卫
吴昊
陈新月
陈德喜
《临床肝胆病杂志》
CAS
2008
2
下载PDF
职称材料
2
化学发光法检测血清CK18水平在胃癌诊断中的应用
贾志凌
张宏艳
刘畅
于忠和
《现代检验医学杂志》
CAS
2009
4
下载PDF
职称材料
3
CK18基因的原核表达及蛋白纯化?
倪佳
王伟
徐莹莹
陈相屹
张欣
孙达权
《贵州医科大学学报》
CAS
2022
0
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职称材料
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