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诺瓦克病毒P蛋白细菌细胞表面展示体系的构建及其功能评价
被引量：
1
1
作者
徐梦
吴文瑾
+1 位作者
徐婷
王大鹏
《国际病毒学杂志》
2020年第2期92-96,共5页
目的建立诺如病毒原型株诺瓦克病毒(Norwalk virus,NV)P蛋白细菌细胞表面展示体系,并对其进行功能评价。方法构建pET28a-inaQn-TB-P(GI.1)重组质粒,并在大肠杆菌中进行诱导表达,建立升级版假NV。以猪胃粘膜提取物中已知NV受体组织血型抗...
目的建立诺如病毒原型株诺瓦克病毒(Norwalk virus,NV)P蛋白细菌细胞表面展示体系,并对其进行功能评价。方法构建pET28a-inaQn-TB-P(GI.1)重组质粒,并在大肠杆菌中进行诱导表达,建立升级版假NV。以猪胃粘膜提取物中已知NV受体组织血型抗原(human histo-blood group antigens,HBGAs)为对象,验证假病毒特异性识别、捕获HBGAs的能力;以生菜叶中类HBGAs为对象,验证升级版假NV捕获生菜叶中NV配体的特性,并对所捕获的配体进行初步分析。结果获得可高效捕获NV受体/配体的假病毒体系,该体系可特异性识别并捕获猪胃粘膜提取物中A型HBGA和生菜中类HBGAs。另外,所捕获生菜中类HBGAs可以分别被A、H和Lewis a型HBGA单克隆抗体识别,且以H型HBGA抗原位点暴露最多。结论本研究成功建立了NV的P蛋白细菌细胞表面展示体系,可以识别并捕获HBGAs及其类似物,为解析NV与配体互作机制提供技术平台。
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关键词
诺瓦克病毒
细胞
表面
展示
体系
P蛋白
生菜
配体
原文传递
细菌细胞表面展示体系提呈人源诺如病毒(GⅡ.4)抗原效果的评价
被引量：
1
2
作者
竺晖
王楠
+4 位作者
鲁飞凤
张子蕾
唐峰
徐婷
王大鹏
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期439-445,共7页
人源诺如病毒(Human noroviruses,HuNoVs)是重要的肠胃炎病毒之一,造成了全球巨额经济负担,故其防控成为研究热点。探究不同形式的免疫原对机体体液和粘膜免疫的激发效果,成为HuNoVs疫苗研发的一个突破口。本研究利用前期以细菌细胞表...
人源诺如病毒(Human noroviruses,HuNoVs)是重要的肠胃炎病毒之一,造成了全球巨额经济负担,故其防控成为研究热点。探究不同形式的免疫原对机体体液和粘膜免疫的激发效果,成为HuNoVs疫苗研发的一个突破口。本研究利用前期以细菌细胞表面展示体系构建的假HuNoVs(GⅡ.4)和纯化的P(GⅡ.4)蛋白为对象,乳化后每隔两周分别进行Balb/C小鼠皮下多点和口服免疫,并以间接酶联免疫吸附试验测定血清中抗体的消长规律。同时,以磷酸盐缓冲液作为对照。抗体效价测定结果显示:皮下免疫组的假HuNoVs(GⅡ.4)可以有效激发小鼠体液免疫,其效价稍低于以P(GⅡ.4)蛋白作为抗原免疫获得的抗体。经过5次免疫后,血清中IgG抗体效价基本趋于稳定。但是,假HuNoVs(GⅡ.4)和P(GⅡ.4)蛋白的口服免疫组血清中均未测到IgA和IgG抗体。因此,细菌细胞表面展示体系假HuNoVs(GⅡ.4)可以作为HuNoVs疫苗候选抗原的提呈体系,为该病毒的疫苗研发提供借鉴。
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关键词
人源诺如病毒(HuNoVs)
细菌
细胞
表面
展示
体系
P蛋白
免疫
抗原提呈
原文传递
题名
诺瓦克病毒P蛋白细菌细胞表面展示体系的构建及其功能评价
被引量：
1
1
作者
徐梦
吴文瑾
徐婷
王大鹏
机构
上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系
出处
《国际病毒学杂志》
2020年第2期92-96,共5页
基金
国家自然科学基金(No.31772078)
上海交通大学交叉基金(Agri-X 2017005)。
文摘
目的建立诺如病毒原型株诺瓦克病毒(Norwalk virus,NV)P蛋白细菌细胞表面展示体系,并对其进行功能评价。方法构建pET28a-inaQn-TB-P(GI.1)重组质粒,并在大肠杆菌中进行诱导表达,建立升级版假NV。以猪胃粘膜提取物中已知NV受体组织血型抗原(human histo-blood group antigens,HBGAs)为对象,验证假病毒特异性识别、捕获HBGAs的能力;以生菜叶中类HBGAs为对象,验证升级版假NV捕获生菜叶中NV配体的特性,并对所捕获的配体进行初步分析。结果获得可高效捕获NV受体/配体的假病毒体系,该体系可特异性识别并捕获猪胃粘膜提取物中A型HBGA和生菜中类HBGAs。另外,所捕获生菜中类HBGAs可以分别被A、H和Lewis a型HBGA单克隆抗体识别,且以H型HBGA抗原位点暴露最多。结论本研究成功建立了NV的P蛋白细菌细胞表面展示体系,可以识别并捕获HBGAs及其类似物,为解析NV与配体互作机制提供技术平台。
关键词
诺瓦克病毒
细胞
表面
展示
体系
P蛋白
生菜
配体
Keywords
Norwalk virus
Bacterial surface display system
P protein
Romaine lettuce
Ligand
分类号
R3 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
细菌细胞表面展示体系提呈人源诺如病毒(GⅡ.4)抗原效果的评价
被引量：
1
2
作者
竺晖
王楠
鲁飞凤
张子蕾
唐峰
徐婷
王大鹏
机构
上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期439-445,共7页
基金
“十三五”国家重点研发计划(项目号:2017YFC1601200),题目:基于组学的食源性致病微生物快速高通量检测技术与装备研发。
文摘
人源诺如病毒(Human noroviruses,HuNoVs)是重要的肠胃炎病毒之一,造成了全球巨额经济负担,故其防控成为研究热点。探究不同形式的免疫原对机体体液和粘膜免疫的激发效果,成为HuNoVs疫苗研发的一个突破口。本研究利用前期以细菌细胞表面展示体系构建的假HuNoVs(GⅡ.4)和纯化的P(GⅡ.4)蛋白为对象,乳化后每隔两周分别进行Balb/C小鼠皮下多点和口服免疫,并以间接酶联免疫吸附试验测定血清中抗体的消长规律。同时,以磷酸盐缓冲液作为对照。抗体效价测定结果显示:皮下免疫组的假HuNoVs(GⅡ.4)可以有效激发小鼠体液免疫,其效价稍低于以P(GⅡ.4)蛋白作为抗原免疫获得的抗体。经过5次免疫后,血清中IgG抗体效价基本趋于稳定。但是,假HuNoVs(GⅡ.4)和P(GⅡ.4)蛋白的口服免疫组血清中均未测到IgA和IgG抗体。因此,细菌细胞表面展示体系假HuNoVs(GⅡ.4)可以作为HuNoVs疫苗候选抗原的提呈体系,为该病毒的疫苗研发提供借鉴。
关键词
人源诺如病毒(HuNoVs)
细菌
细胞
表面
展示
体系
P蛋白
免疫
抗原提呈
Keywords
Human norovirus(HuNoVs)
Bacterial cell surface display system
P protein
Immune
Antigen presentation
分类号
Q939.99 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
诺瓦克病毒P蛋白细菌细胞表面展示体系的构建及其功能评价
徐梦
吴文瑾
徐婷
王大鹏
《国际病毒学杂志》
2020
1
原文传递
2
细菌细胞表面展示体系提呈人源诺如病毒(GⅡ.4)抗原效果的评价
竺晖
王楠
鲁飞凤
张子蕾
唐峰
徐婷
王大鹏
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
原文传递
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