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仙茅不同炮制品对腺嘌呤致肾阳虚大鼠的作用机制分析 被引量：10
1
作者 鞠成国 李媛媛 +2 位作者 王巍 贾天柱 艾雪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期101-107,共7页
目的:研究仙茅不同炮制品水提液对腺嘌呤所致肾阳虚大鼠的补肾壮阳作用机制。方法:以桂附地黄丸为阳性组(给药剂量2. 466 g·kg^-1),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)比较仙茅不同炮制品水提液(给药剂量2. 742 g·kg^-1)灌胃4周... 目的:研究仙茅不同炮制品水提液对腺嘌呤所致肾阳虚大鼠的补肾壮阳作用机制。方法:以桂附地黄丸为阳性组(给药剂量2. 466 g·kg^-1),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)比较仙茅不同炮制品水提液(给药剂量2. 742 g·kg^-1)灌胃4周后对腺嘌呤所致肾阳虚大鼠血清中促甲状腺激素(TSH),雌二醇(E2),睾酮(T),17-羟皮质类固醇(17-OHCS),三碘甲状腺原氨酸(T3),甲状腺素(T4),皮质醇(COR)水平的影响;采用Nash比色法测定各组大鼠肝、肾微粒体细胞色素P450 3A(CYP3A)的活性。结果:仙茅各炮制品水提液对腺嘌呤所致肾阳虚大鼠的下丘脑-垂体-靶腺轴功能均有一定程度的改善作用,各炮制品总评分排序为萸仙茅(29分)>盐仙茅(25分)>酒仙茅(23分)>生仙茅(17分)>姜仙茅(11分);仙茅各炮制品组均能不同程度上调肾阳虚状态下大鼠肝、肾微粒体CYP3A活性,其中盐仙茅和萸仙茅效果较优。结论:仙茅各炮制品均能有效治疗大鼠肾阳虚证,其中萸仙茅、盐仙茅补肾壮阳效果较为显著。 展开更多
关键词 仙茅 炮制 腺嘌呤 补肾壮阳 细胞色素p4503A(cyp3A) 肾阳虚 下丘脑-垂体-靶腺轴
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药食两用物质效用成分对人孕烷X受体的激活效应及细胞增殖抑制筛选 被引量：2
2
作者 张祖奇 张光晨 +6 位作者 阮盼盼 林毅 谭洪玲 肖成荣 马增春 王宇光 高月 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第13期42-51,共10页
目的:探讨药食两用物质甘草(甘草苷、甘草酸)、鱼腥草(槲皮素、鱼腥草素)、夏枯草(迷迭香酸)、决明子(橙黄决明素)、茯苓(茯苓酸)、百合(百合皂苷、秋水仙碱)、枸杞子(枸杞多糖)7种药食两用物质中10种效用成分对人孕烷X受体(PXR)的激活... 目的:探讨药食两用物质甘草(甘草苷、甘草酸)、鱼腥草(槲皮素、鱼腥草素)、夏枯草(迷迭香酸)、决明子(橙黄决明素)、茯苓(茯苓酸)、百合(百合皂苷、秋水仙碱)、枸杞子(枸杞多糖)7种药食两用物质中10种效用成分对人孕烷X受体(PXR)的激活效应并筛选其潜在的毒性成分。方法:利用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法考察了甘草苷、甘草酸、槲皮素、鱼腥草素、迷迭香酸、橙黄决明素、茯苓酸、秋水仙碱(10、20、50μmol·L^(-1))、百合皂苷、枸杞多糖(10、20、50 mg·L^(-1))10种成分对正常的人肝细胞(L02)增殖抑制的影响;通过生化分析仪检测药物处理后对L02细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放的影响;Hoechst 33342染色考察了10种效用成分对L02细胞凋亡的影响;利用分泌型荧光素酶报告基因系统,将PXR表达载体和含细胞色素P4503A4(CYP3A4)转录调控区的报告基因载体共转染L02细胞,10μmol·L^(-1)利福平(RIF)为阳性对照,用甘草苷、甘草酸、槲皮素、鱼腥草素、迷迭香酸、橙黄决明素、茯苓酸、秋水仙碱(5、10、20μmol·L^(-1))和百合皂苷、枸杞多糖(5、10、20 mg·L^(-1))10种成分分别处理24 h,进行荧光素酶活性检测。结果:与空白组比较,秋水仙碱、百合皂苷、槲皮素会导致细胞活力呈浓度依赖性降低(P<0.05,P<0.01),槲皮素、迷迭香酸、甘草酸、秋水仙碱、橙黄决明素、茯苓酸可以增加L02细胞中LDH的释放率(P<0.05,P<0.01),迷迭香酸、甘草苷、枸杞多糖处理后部分细胞的高亮浓染细胞核的比例逐渐上升(P<0.05,P<0.01);pcDNA3.1-PXR与pGLuc-CYP3A4共转染L02细胞时,与空白组比较,橙黄决明素、茯苓酸对PXR有激活效应(P<0.05),甘草苷、甘草酸对PXR有抑制效应(P<0.05)。结论:在长期服用药食两用物质时,应注意其对药物代谢酶的影响及可能产生的相互作用,提高药食两用物质的安全性。 展开更多
关键词 药食两用物质 人孕烷X受体 细胞色素p4503A4(cyp3A4) 分泌型荧光素酶报告基因系统
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钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白BCRP和药物代谢酶CYP3A11的影响 被引量：1
3
作者 朱翠萍 高汉云 +3 位作者 赵茜茜 刘翔翔 黄美霞 王英豪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期58-64,共7页
目的:钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和细胞色素P450 3A11(CYP3A11)的影响,探讨其配伍减毒的机制;同时添加核受体激活剂干预探讨核受体是否在该过程中有调节作用。方法:将C57BL/6小鼠分为空白组,钩吻组(GE组,0.25 ... 目的:钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和细胞色素P450 3A11(CYP3A11)的影响,探讨其配伍减毒的机制;同时添加核受体激活剂干预探讨核受体是否在该过程中有调节作用。方法:将C57BL/6小鼠分为空白组,钩吻组(GE组,0.25 g·kg^(-1)),钩吻配伍玉叶金花组(GE+MP组,0.25 g·kg^(-1)+10 g·kg^(-1)),钩吻+孕烷X受体(PXR)激活剂(利福平)组(GE+Rif组,0.25 g·kg^(-1)+50 mg·kg^(-1)),配伍+利福平组(GE+MP+Rif组,0.25 g·kg^(-1)+10 g·kg^(-1)+50 mg·kg^(-1)),钩吻+组成型雄甾烷受体(CAR)激活剂{1,4-双[2-(3,5-二氯吡啶氧)]苯,TCPOBOP}组(GE+TCP组,0.25 g·kg^(-1)+0.5 mg·kg^(-1)),配伍+CAR激活剂组(GE+MP+TCP组,0.25 g·kg^(-1)+10 g·kg^(-1)+0.5 mg·kg^(-1))。连续给药14 d,末次给药1 h后脱颈处死小鼠,取肝组织。左肝组织采用苏木素-伊红(HE)染色观察其病理学变化;右肝组织采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)对其进行mRNA及蛋白水平的检测,检测其对BCRP,CYP3A11基因和蛋白的影响。结果:GE+Rif组小鼠存活率25%,存活率最低,GE组存活率40%,GE+MP组存活率为80%,其他组均存活未见死亡。GE组小鼠肝脏细胞出现明显病变,与GE组比较,GE+MP组肝细胞病理状态都有所缓解;GE+Rif组小鼠肝脏细胞病理状态严重,与GE+Rif组比较,GE+MP+Rif组小鼠肝脏细胞肝细胞病变有所缓解;GE+TCP组小鼠肝脏出现轻微病变,GE+MP+TCP组小鼠肝脏细胞病变不明显;与GE+MP组比较,GE+MP+TCP组病变程度有轻微缓解但差异不大。与空白组比较,GE组BCRP蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01);GE组CYP3A11蛋白表达显著下调(P<0.01),mRNA表达有下调趋势但差异无统计学意义。与GE组比较,GE+MP组BCRP蛋白及mRNA表达均明显上调(P<0.05,P<0.01);CYP3A11蛋白及mRNA表达有上调趋势,但差异无统计学意义。与GE组比较,GE+Rif组BCRP蛋白表达明显下调(P<0.05);与GE+MP组比较,GE+MP+Rif组BCRP蛋� 展开更多
关键词 钩吻 玉叶金花 乳腺癌耐药蛋白(BCRp) 细胞色素p4503A11(cyp3A11) 核受体
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孕烷受体X及其下游目的基因编码蛋白在小鼠慢性颞叶癫痫模型的表达 被引量：1
4
作者 孙琬冰 王剑虹 洪震 《癫痫与神经电生理学杂志》 2018年第6期321-326,共6页
目的:探究孕烷受体X(pregnane X receptor,PXR)及其下游目的基因编码蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)在小鼠慢性颞叶癫痫模型中的表达情况及对脑内卡马西平浓度的影响。方法:雄性C57... 目的:探究孕烷受体X(pregnane X receptor,PXR)及其下游目的基因编码蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)在小鼠慢性颞叶癫痫模型中的表达情况及对脑内卡马西平浓度的影响。方法:雄性C57/BL小鼠(n=30)随机分为模型组(n=20)和对照组(n=10)。模型组使用海人酸(kainic acid,KA)海马原位注射构建海人酸点燃模型,对照组同一位置注射等体积生理盐水。通过行为学及脑电图监测筛选慢性颞叶癫痫模型。Western blot检测PXR、P-gp及CYP3A4在海马内的表达水平。使用免疫荧光技术对P-gp和CYP3A4进行双标,检测其共表达;卡马西平连续给药7d后,通过高效液相色谱法(HPLC)检测脑组织内卡马西平浓度。结果:模型组小鼠中55%出现反复自发性发作行为及脑电图上典型的痫样放电,确认为慢性颞叶癫痫模型。模型组小鼠海马PXR表达水平较对照组显著增高(P<0.0001)。P-gp(P<0.001)和CYP3A4(P<0.001)的表达水平也较对照组显著增高,而且在模型组小鼠脑组织内存在显著共表达。模型组小鼠脑内卡马西平浓度显著低于对照组(P<0.05)。结论:PXR表达上调后可能通过同时激活下游目的基因编码蛋白P-gp和CYP3A4使二者发挥协同作用从而介导癫痫耐药。 展开更多
关键词 耐药性癫痫 颞叶癫痫 孕烷受体X(pXR) p-糖蛋白(p-gp) 细胞色素p4503A4(cyp3A4)
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