目的:探讨CYP2R1(cytochrome P450family 2subfamily R member 1)基因多态性位点rs12794714多态性对海南人群慢性变应性鼻炎的影响,为其遗传诊断及预防提供参考。方法:选择本院就诊的海南本地慢性变应性鼻炎患者94例及同期在该院体检科...目的:探讨CYP2R1(cytochrome P450family 2subfamily R member 1)基因多态性位点rs12794714多态性对海南人群慢性变应性鼻炎的影响,为其遗传诊断及预防提供参考。方法:选择本院就诊的海南本地慢性变应性鼻炎患者94例及同期在该院体检科体检的健康人群113例,所有患者提取基因组DNA利用Snapshot技术进行序列测定及分型。对基因型及等位基因进行组间差异化分析。结果:rs12794714多态性位点在海南人群中均可检测出AA、AG、GG三种基因型它们在慢性变应性鼻炎组中的分布频率为20.2%、46.8%、33%,在对照组中的分布频率为18.6%、38%、43.4%。共显性模型、显性模型、隐性模型及超显性模型验证亦无统计学意义(P>0.05)。等位基因A和G在实验组中的分布频率为54%和46%,在对照组中的分布频率为63%和37%,组间不存在统计学差异(P>0.05)。结论:rs12794714单核苷酸多态性对海南慢性变应性鼻炎的发病机制无显著影响。展开更多
目的系统评价携带细胞色素P450家族3亚家族A成员5(CYP3A5)*1对移植患儿他克莫司给药剂量、血药浓度和血药浓度/给药剂量(C/D)值的影响。方法计算机检索PubMed、Scopus、ISI Web of Science、ProQuest、中国知网、维普资讯中文期刊服务...目的系统评价携带细胞色素P450家族3亚家族A成员5(CYP3A5)*1对移植患儿他克莫司给药剂量、血药浓度和血药浓度/给药剂量(C/D)值的影响。方法计算机检索PubMed、Scopus、ISI Web of Science、ProQuest、中国知网、维普资讯中文期刊服务平台、万方数据知识服务平台,纳入携带CYP3A5*1(CYP3A5*1/*1或CYP3A5*1/*3)对移植患儿他克莫司给药剂量、血药浓度、C/D值影响的文献。评价文献质量及提取资料后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入13篇文献进行Meta分析。Meta分析结果显示,在移植后第1、2、3、6、12个月时,CYP3A5*1携带者和非携带者的他克莫司给药剂量差异有统计学意义(P<0.05),其中携带者的他克莫司给药剂量更大;在移植后第1、2周和第1、2、6个月,CYP3A5*1携带者的他克莫司血药浓度低于CYP3A5*1非携带者(P<0.05);在移植后第1、2周和第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个月,CYP3A5*1携带者的他克莫司C/D值低于CYP3A5*1非携带者(P<0.05)。结论在移植患儿中,CYP3A5*1携带者和非携带者移植后的他克莫司给药剂量、血药浓度和C/D值存在明显差异,其中CYP3A5*1携带者所需的他克莫司剂量更大。在给药前进行CYP3A基因多态性检测有助于预测个体所需剂量。展开更多
目的分别构建稳定表达细胞色素P450家族2亚家族A成员13(cytochrome P450 family 2 subfamily A member 13,CYP2A13)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-CHO)和稳定表达CYP2A13和细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-POR-CH...目的分别构建稳定表达细胞色素P450家族2亚家族A成员13(cytochrome P450 family 2 subfamily A member 13,CYP2A13)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-CHO)和稳定表达CYP2A13和细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In CHO细胞系(CYP2A13-POR-CHO),并从中筛选代谢活性较好的细胞系。方法课题组前期通过慢病毒转染构建了稳定表达POR的Flp-In CHO细胞系(POR-Flp-In CHO)。该文构建了pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒,利用Lipofectamine^(TM) 2000转染试剂将pcDNA5/FRT-CYP2A13重组质粒分别转染到Flp-In CHO细胞和POR-Flp-In CHO细胞中。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot和黄曲霉素B1(AFB1)/4-甲基亚硝胺-1-3-吡啶基-1-丁酮(NNK)细胞毒实验来检测CYP2A13的表达及其活性,并比较了CYP2A13-CHO和CYP2A13-POR-CHO两种重组细胞系的代谢活性。结果与未转染的细胞相比,CYP2A13-CHO和CYP2A13-POR-CHO的CYP2A13 mRNA和蛋白的表达量均明显增加。且与CYP2A13-POR-CHO相比,CYP2A13-CHO细胞对AFB1、NNK的敏感度更高。结论建立了稳定表达CYP2A13且代谢活性较好的CYP2A13-CHO细胞系,为后续筛选能被CYP2A13代谢活化的前致癌物提供了工具。展开更多
细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一类血红素氧化酶。细胞色素P450家族2亚家族R成员1(cytochrome P450 family 2 subfamily R member 1,CYP2R1)是一种主要在肝组织中表达的维生素D羟化酶。目前,对于小鼠CYP2R1蛋白质的结构、物...细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一类血红素氧化酶。细胞色素P450家族2亚家族R成员1(cytochrome P450 family 2 subfamily R member 1,CYP2R1)是一种主要在肝组织中表达的维生素D羟化酶。目前,对于小鼠CYP2R1蛋白质的结构、物化特性和病理机制的理了解仍十分有限。本研究结合基因克隆和生物信息学分析,获得小鼠CYP2R1基因CDS序列及其生物学特征。随后,利用pcDNA3.1-CYP2R1真核表达载体,通过细胞划痕、MTT分析、real-time qPCR方法检测异源表达CYP2R1对肺癌细胞A549、胃癌细胞7901、肝癌细胞HepG2以及正常细胞HEK293T细胞的迁移、增殖和细胞周期基因表达的影响,探明其对癌细胞增殖的作用。结果显示,由C57BL/6小鼠肝组织的CYP2R1基因,序列长度1506 bp,其中,CDS 468 bp。其编码的155个氨基酸,与其他11个物种间的同源性均较高,其三级结构与人CYP2R1略有不同。构建的pcDNA3.1-CYP2R1真核表达载体,可在体外培养细胞中提高CYP2R1基因mRNA表达105倍以上,蛋白质水平提高约30倍。值得注意的是,异源表达CYP2R1在癌细胞增殖中的作用具有差异性,其中,CYP2R1通过显著降低细胞周期蛋白基因CyclinD1(P<0.05)和Caspase3(P<0.01),而抑制7901细胞的增殖。该研究结果为进一步探索CYP2R1的生物学作用,特别是在分析其对癌细胞增殖方面提供了基础研究数据,并为进一步明确CYP2R1在癌症相关治疗中的重要意义奠定了理论基础。展开更多
文摘目的:探讨CYP2R1(cytochrome P450family 2subfamily R member 1)基因多态性位点rs12794714多态性对海南人群慢性变应性鼻炎的影响,为其遗传诊断及预防提供参考。方法:选择本院就诊的海南本地慢性变应性鼻炎患者94例及同期在该院体检科体检的健康人群113例,所有患者提取基因组DNA利用Snapshot技术进行序列测定及分型。对基因型及等位基因进行组间差异化分析。结果:rs12794714多态性位点在海南人群中均可检测出AA、AG、GG三种基因型它们在慢性变应性鼻炎组中的分布频率为20.2%、46.8%、33%,在对照组中的分布频率为18.6%、38%、43.4%。共显性模型、显性模型、隐性模型及超显性模型验证亦无统计学意义(P>0.05)。等位基因A和G在实验组中的分布频率为54%和46%,在对照组中的分布频率为63%和37%,组间不存在统计学差异(P>0.05)。结论:rs12794714单核苷酸多态性对海南慢性变应性鼻炎的发病机制无显著影响。
文摘目的系统评价携带细胞色素P450家族3亚家族A成员5(CYP3A5)*1对移植患儿他克莫司给药剂量、血药浓度和血药浓度/给药剂量(C/D)值的影响。方法计算机检索PubMed、Scopus、ISI Web of Science、ProQuest、中国知网、维普资讯中文期刊服务平台、万方数据知识服务平台,纳入携带CYP3A5*1(CYP3A5*1/*1或CYP3A5*1/*3)对移植患儿他克莫司给药剂量、血药浓度、C/D值影响的文献。评价文献质量及提取资料后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入13篇文献进行Meta分析。Meta分析结果显示,在移植后第1、2、3、6、12个月时,CYP3A5*1携带者和非携带者的他克莫司给药剂量差异有统计学意义(P<0.05),其中携带者的他克莫司给药剂量更大;在移植后第1、2周和第1、2、6个月,CYP3A5*1携带者的他克莫司血药浓度低于CYP3A5*1非携带者(P<0.05);在移植后第1、2周和第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个月,CYP3A5*1携带者的他克莫司C/D值低于CYP3A5*1非携带者(P<0.05)。结论在移植患儿中,CYP3A5*1携带者和非携带者移植后的他克莫司给药剂量、血药浓度和C/D值存在明显差异,其中CYP3A5*1携带者所需的他克莫司剂量更大。在给药前进行CYP3A基因多态性检测有助于预测个体所需剂量。
文摘细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)是一类血红素氧化酶。细胞色素P450家族2亚家族R成员1(cytochrome P450 family 2 subfamily R member 1,CYP2R1)是一种主要在肝组织中表达的维生素D羟化酶。目前,对于小鼠CYP2R1蛋白质的结构、物化特性和病理机制的理了解仍十分有限。本研究结合基因克隆和生物信息学分析,获得小鼠CYP2R1基因CDS序列及其生物学特征。随后,利用pcDNA3.1-CYP2R1真核表达载体,通过细胞划痕、MTT分析、real-time qPCR方法检测异源表达CYP2R1对肺癌细胞A549、胃癌细胞7901、肝癌细胞HepG2以及正常细胞HEK293T细胞的迁移、增殖和细胞周期基因表达的影响,探明其对癌细胞增殖的作用。结果显示,由C57BL/6小鼠肝组织的CYP2R1基因,序列长度1506 bp,其中,CDS 468 bp。其编码的155个氨基酸,与其他11个物种间的同源性均较高,其三级结构与人CYP2R1略有不同。构建的pcDNA3.1-CYP2R1真核表达载体,可在体外培养细胞中提高CYP2R1基因mRNA表达105倍以上,蛋白质水平提高约30倍。值得注意的是,异源表达CYP2R1在癌细胞增殖中的作用具有差异性,其中,CYP2R1通过显著降低细胞周期蛋白基因CyclinD1(P<0.05)和Caspase3(P<0.01),而抑制7901细胞的增殖。该研究结果为进一步探索CYP2R1的生物学作用,特别是在分析其对癌细胞增殖方面提供了基础研究数据,并为进一步明确CYP2R1在癌症相关治疗中的重要意义奠定了理论基础。
