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小鼠2-细胞胚电融合技术影响因素的研究 被引量:3
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作者 周琪 谭景和 +2 位作者 徐立滨 张秋明 秦鹏春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期214-218,共5页
以小鼠2-细胞胚为材料,研究电融合请参数。以M2液为融合液时,除在0.31kV/cm,1280s,1次脉冲条件下获100%融合率外,其他条件均造成较多的胚胎溶解。而持续时间在10~1280s范围内,以0.3mol/L... 以小鼠2-细胞胚为材料,研究电融合请参数。以M2液为融合液时,除在0.31kV/cm,1280s,1次脉冲条件下获100%融合率外,其他条件均造成较多的胚胎溶解。而持续时间在10~1280s范围内,以0.3mol/L甘露醇液为融合液,电场强度为0.31~2.04kV/cm条件下;及以0.26mol/L蔗糖液为融合液,电场强度为0.31~1.41kV/cm范围内时可获较高的融合率。实验表明:在0.47kV/cm电场条件下,蔗糖液与甘露醇液的渗透压对融合率无显著的影响;电场强度为2.04kV/cm,以高渗甘露醇液(0.30mol/L)为融合液时,胚的融合率比等渗甘露醇液(0.25mol/L)和低渗甘露醇液(0.20mol/L)做融合液时的融合结果高,而胚的死亡率低。融合后的胚与对照2-细胞胚都可继续发育.48h后发生致密化,此时融合胚发育到4-细胞,对照组为8-细胞。根据0.26mol/L蔗糖液做融合液时的结果,绘制一条获高融合率时电场强度与脉冲持续时间的关系曲线。 展开更多
关键词 电融合 渗透压 细胞 细胞融合
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小鼠2细胞胚卵裂球电融合的研究 被引量:1
2
作者 刘素娟 张涌 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期64-67,共4页
分别用800v/cm、40~80μs的单个电脉冲;800v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1000v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1200v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1000v/cm、... 分别用800v/cm、40~80μs的单个电脉冲;800v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1000v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1200v/cm、160~320μs的单个电脉冲;1000v/cm、160~320μs的2个电脉冲所获得的胚胎融合率分别为84.6%(33/39),100.0%(59/59),97.4%(74/76),95.1%(39/41),64.7%(11/17)。融合胚作培养后,2细胞胚的发育率分别为15.2%(5/33),39.0%(23/59),47.3%(35/74),43.6%(17/39),18.2%(2/11)。以1000v/cm,160~320μs的单个脉冲诱导注射LH39~43h,44~48h回收的2细胞胚,胚胎融合率分别为100.0%(27/27),96.4%(27/28);发育率分别为44.4%(12/27),33.3%(9/27)。2细胞胚卵裂球融合的适宜条件为1000v/cm和160~320μs的单个脉冲。 展开更多
关键词 电融合 卵裂球 细胞 小鼠
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影响羊胚胎移植受胎率的主要因素 被引量:2
3
作者 袁东波 尹念春 陈家树 《养殖与饲料》 2014年第9期23-24,共2页
近年来,为大力发展养羊产业,丰富我国优质羊品种资源,减少从国外直接引种的风险,羊胚胎移植技术广泛应用于养羊生产实践,在羊纯种快速扩繁中取得了良好的效果,然而羊胚胎移植受胎率一直是制约羊纯种快速扩繁的重要因素,受到大家的关注... 近年来,为大力发展养羊产业,丰富我国优质羊品种资源,减少从国外直接引种的风险,羊胚胎移植技术广泛应用于养羊生产实践,在羊纯种快速扩繁中取得了良好的效果,然而羊胚胎移植受胎率一直是制约羊纯种快速扩繁的重要因素,受到大家的关注。本文针对影响羊胚胎移植受胎率的主要因素进行了分析。 展开更多
关键词 胎移植 供卵 养羊生产 移植妊娠率 细胞 移植 子宫角 孕酮水平 体外培养条件 促性腺激素
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耐盐芦苇茎节组织体细胞胚发生及植株再生的研究 被引量:2
4
作者 郭睿 高颖 杨映根 《中国科技教育》 2004年第4期32-34,共3页
目的:耐盐芦苇的抗盐抗逆性比普通品种更加突出,对改造滩涂、盐碱地等有较强的改善作用,具有较大的经济价值。本实验旨在通过组织培养的方法,以耐盐芦苇变异植株的茎段为外植体诱导产生胚性愈伤组织,进而建立提取细胞胚发生和植株... 目的:耐盐芦苇的抗盐抗逆性比普通品种更加突出,对改造滩涂、盐碱地等有较强的改善作用,具有较大的经济价值。本实验旨在通过组织培养的方法,以耐盐芦苇变异植株的茎段为外植体诱导产生胚性愈伤组织,进而建立提取细胞胚发生和植株再生的体系,快速繁殖耐盐芦苇。 展开更多
关键词 植株再生 耐盐芦苇 茎节组织体 细胞 繁殖技术
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组织与原生质体培养
5
《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第9期60-68,共9页
关键词 原生质体培养 愈伤组织 外植体培养 植板率 细胞 培养物 诱导愈伤 芽尖 鸭茅状磨擦禾 田桂英
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C蛋白的前景
6
作者 王璋瑜 《生物技术通报》 CAS CSCD 1992年第10期17-18,共2页
尽管人C蛋白作为抗凝聚剂的效价尚未确定,弗吉尼亚多技术学院暨州立大学(Blacksburg,VA)及美国红十字(ARC,Rockville,MA)的科学家已研制了这一罕有蛋白的大宗来源,那就是转基因猪的奶液。弗吉尼亚的William Velander将C蛋白的基因与一... 尽管人C蛋白作为抗凝聚剂的效价尚未确定,弗吉尼亚多技术学院暨州立大学(Blacksburg,VA)及美国红十字(ARC,Rockville,MA)的科学家已研制了这一罕有蛋白的大宗来源,那就是转基因猪的奶液。弗吉尼亚的William Velander将C蛋白的基因与一个潜在的调节子(鼠奶蛋白基因)融合起来。通过微注射法将其带入猪的单细胞胚中。约15个月后,在完全长成的猪的奶液中发现了C蛋白。如果这一试剂被证明是一种可行的人类医药,那么遗留的简单问题就是扩大养殖规模以满足临床需要。目前。 展开更多
关键词 转基因猪 奶液 微注射 尼亚 凝聚剂 细胞 调节子 抗凝血剂 重组技术 凝聚功能
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枸杞组织培养中抗氧化酶活性与体细胞胚发生相关性的研究 被引量:59
7
作者 崔凯荣 任红旭 +1 位作者 邢更妹 王亚馥 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期93-99,共7页
以药用植物枸杞愈伤组织为材料诱导体细胞胚胎发生,在体细胞胚胎发生过程中的不同发育时期取样,分别测定了SOD,POD和CAT3种抗氧化酶的活性变化,以探讨细胞分化及体细胞胚发生过程中氧自由基代谢水平的变化.另外,在分化... 以药用植物枸杞愈伤组织为材料诱导体细胞胚胎发生,在体细胞胚胎发生过程中的不同发育时期取样,分别测定了SOD,POD和CAT3种抗氧化酶的活性变化,以探讨细胞分化及体细胞胚发生过程中氧自由基代谢水平的变化.另外,在分化培养基中加入不同浓度的H2O2,以探讨氧化胁迫对细胞分化及体细胞胚发生的影响.经测定发现,在体细胞胚发生过程中,SOD活性变化趋势与POD和CAT活性的变化趋势正好相反,推测可能是H2O2通过细胞的信号传递系统影响基因的表达,从而诱导胚的发生.通过在分化培养基中加入H2O2发现,一定浓度的H2O2(200μmol/L)可大大提高愈伤组织中体细胞胚的发生频率,比较发现,在加入200μmol/LH2O2的分化培养基中体细胞胚的发生频率是对照(不加H2O2)组的2倍左右.以上结果表明,H2O2对细胞分化及体细胞胚发生有促进作用. 展开更多
关键词 枸杞 细胞发生 组织培养 抗氧化酶 活性
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核桃体细胞胚发生与转基因研究进展 被引量:47
8
作者 汤浩茹 王永清 任正隆 《林业科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期102-110,共9页
总结了核桃体细胞胚发生的研究进展 ,列表统计已报道的核桃 5个种和 3个杂种体细胞胚发生的外植体与诱导条件 ,重点论述了影响核桃体细胞胚发生与次生胚发生的因素 ,介绍了核桃体细胞胚萌发与转化的方法。还总结核桃转基因研究的进展 。
关键词 核桃 细胞发生 转基因 离体培养
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紫花苜蓿不同栽培品种植株再生的研究 被引量:54
9
作者 马晖玲 卢欣石 +1 位作者 曹致中 葛军 《草业学报》 CSCD 2004年第6期99-105,F003,共8页
离体培养条件下对紫花苜蓿地方栽培品种———陇东苜蓿、和田苜蓿、准格尔苜蓿以及引进品种Rambler苜蓿植株不同部位的再生进行了研究,结果表明,不同的苜蓿品种、外植体、外源激素种类及其浓度等因素均影响着植株的再生。陇东苜蓿下胚... 离体培养条件下对紫花苜蓿地方栽培品种———陇东苜蓿、和田苜蓿、准格尔苜蓿以及引进品种Rambler苜蓿植株不同部位的再生进行了研究,结果表明,不同的苜蓿品种、外植体、外源激素种类及其浓度等因素均影响着植株的再生。陇东苜蓿下胚轴愈伤组织出愈率和体细胞胚形成率最高可达91.04%和63.75%;和田苜蓿下胚轴愈伤组织出愈率最高可达92.05%,体细胞胚形成率最高为56.82%。这2个品种在紫花苜蓿的组织培养植株再生中是较理想的试验材料;紫花苜蓿下胚轴是理想的受体材料。苜蓿愈伤组织的诱导、体细胞胚的形成以2.0mg/L2,4 D处理2周为最佳;在2.0mg/L2,4 D+0.5~2.0mg/L6 BA的作用下,外植体产生愈伤组织以及进一步发育的趋势较强。对体细胞胚的发育和幼苗的形成则以2.0mg/L6 BA+0.5mg/LNAA的激素组合进行处理。适宜的生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+1%蔗糖+0.7%琼脂。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 栽培品种 愈伤组织 细胞 植株再生
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植物体细胞胚状体的诱导研究及应用 被引量:32
10
作者 王傲雪 李景富 《黑龙江农业科学》 1999年第2期39-41,共3页
植物体外再生有两个类型,一是器官再生,一个是胚状体再生。对于胚状体再生,它主要有两个特点:一是两极性,即在其发生的最早阶段就具有根端和芽端;其二是它与外植体的维管束系统无直接联系,具有完整植株特性,在适宜条件下可长成... 植物体外再生有两个类型,一是器官再生,一个是胚状体再生。对于胚状体再生,它主要有两个特点:一是两极性,即在其发生的最早阶段就具有根端和芽端;其二是它与外植体的维管束系统无直接联系,具有完整植株特性,在适宜条件下可长成一个独立的有苗端和根端的植株。相比... 展开更多
关键词 植物体细胞 诱导 基因型 应用
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体细胞胚发生的生化基础 被引量:26
11
作者 崔凯荣 邢更生 +2 位作者 周功克 刘新民 王亚馥 《生命科学》 CSCD 2001年第1期28-33,共6页
在胚性细胞分化和分裂过程中ATP酶活性和分布的动态变化表明,这些胚性细胞进行着旺盛的主动物质吸收和活跃的新陈代谢过程。在多种植物的体细胞胚发生中过氧化物酶的活性与同工酶的种类都高于对照,而且在大麦中发现过氧化物酶、酯... 在胚性细胞分化和分裂过程中ATP酶活性和分布的动态变化表明,这些胚性细胞进行着旺盛的主动物质吸收和活跃的新陈代谢过程。在多种植物的体细胞胚发生中过氧化物酶的活性与同工酶的种类都高于对照,而且在大麦中发现过氧化物酶、酯酶和酸性磷酸酶同工酶的结合应用可以作为体细胞胚发生的标志酶。胚性愈伤组织中可溶性蛋白质含量与组分远高于或多于非胚性愈伤组织。大多数材料中都存在45kD~55kD的胚胎发生特异性蛋白质组分。而且在体细胞胚发生中蛋白质和核酸代谢动态呈规律性变化,首先是RNA合成速率增加,继而是蛋白质的迅速合成,并在胚性细胞分化和发育过程中一直保持相对较高水平;其中mRNA种类丰富,不同发育时期mRNA种类不同,因此转译形成多种蛋白质。DNA的代谢相对较稳定;但在胚性细胞系中DNA合成量仍高于非胚性细胞系。加入蛋白质或核酸合成抑制剂,不仅抑制了蛋白质和核酸的合成,同时也抑制了体细胞胚的发生与发育,而且抑制剂加入时间愈早,影响愈严重。由此表明,蛋白质与核酸的合成为体细胞胚的分化和发育奠定了分子基础。 展开更多
关键词 细胞发生 ATP酶 蛋白质 RNA DNA 植物 组织培养
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西洋梨叶片直接再生体细胞胚 被引量:32
12
作者 孙清荣 刘庆忠 赵瑞华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期85-86,共2页
以西洋梨‘红安久’和‘绿安久’两个品种的无菌苗幼叶为试材 ,研究了不同培养基对叶片分化不定梢及体细胞胚的影响。结果表明 :基本培养基的组成是影响叶片分化为不定梢还是体细胞胚的关键因素 ,植物生长物质的种类和水平是影响体细胞... 以西洋梨‘红安久’和‘绿安久’两个品种的无菌苗幼叶为试材 ,研究了不同培养基对叶片分化不定梢及体细胞胚的影响。结果表明 :基本培养基的组成是影响叶片分化为不定梢还是体细胞胚的关键因素 ,植物生长物质的种类和水平是影响体细胞胚再生率高低的重要因素。诱导培养基NN6 9附加TDZ 2mg/L及NAA 0 .1mg/L ,体细胞胚再生率最高 ,绿安久达 5 5 .5 % ,红安久为 4 7.3%。NN6 9附加BA5mg/L及NAA 0 .1mg/L ,不定梢再生率最高 ,绿安久达 10 0 % ,红安久为 85 .7%。 展开更多
关键词 西洋梨 叶片 细胞 再生 培育基
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诱导植物体细胞胚发生的几个生理因素 被引量:47
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作者 袁澍 贾勇炯 林宏辉 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期508-512,共5页
介绍了影响植物体细胞胚发生的几个主要生理因素 。
关键词 细胞 发生 诱导
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植物体细胞胚发生的分子基础 被引量:28
14
作者 邢更生 崔凯荣 +1 位作者 山仑 王亚馥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期30-34,共5页
MolecularFoundationinPlantSomaticEmbryogenesisXINGGeng-ShengCUIKai-RongSHANLunWANGYa-Fu(TheStateKeyLaborator... MolecularFoundationinPlantSomaticEmbryogenesisXINGGeng-ShengCUIKai-RongSHANLunWANGYa-Fu(TheStateKeyLaboratoryofAridAgroecolog... 展开更多
关键词 植物 细胞 发生 调控作用
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小麦组织培养中体细胞胚胎发生的细胞胚胎学及淀粉消长动态的研究 被引量:31
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作者 王亚馥 崔凯荣 +3 位作者 陈克明 高清祥 张德华 焦成瑾 《实验生物学报》 CSCD 1993年第3期259-267,共9页
小麦幼胚在附加2,4-D 2 mg/L+KT0.5 mg/L+LH 300 mg/L+3%蔗糖的MS 培养基上诱导出愈伤组织,继代2—3次后,降低2,4-D 的浓度,该愈伤组织约以60%的频率转变为胚性愈伤组织,继而形成不同发育期的体细胞胚。这些体细胞胚是起源于愈伤组织表... 小麦幼胚在附加2,4-D 2 mg/L+KT0.5 mg/L+LH 300 mg/L+3%蔗糖的MS 培养基上诱导出愈伤组织,继代2—3次后,降低2,4-D 的浓度,该愈伤组织约以60%的频率转变为胚性愈伤组织,继而形成不同发育期的体细胞胚。这些体细胞胚是起源于愈伤组织表层或近表层的单个胚性细胞,体细胞胚经球形胚、梨形胚、盾片胚、成熟胚而成再生植株。在胚性细胞内淀粉粒大最积累,淀粉颗粒大而密集。随着胚性细胞的分裂,淀粉逐渐被消耗,到多细胞原胚期,胚体细胞内淀粉粒趋于消失。球形胚期淀粉粒又开始积累,但到成熟胚期,淀粉积累只限于生长点区域,尔后随着胚体萌发,淀粉含量又趋于减少。这一消长动态过程与小麦合子胚发生中淀粉代谢动态基本一致。 展开更多
关键词 小麦 组织培养 细胞发生 淀粉
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通过农杆菌介导法将哈兹木霉几丁质酶ThEn-42基因导入核桃 被引量:36
16
作者 汤浩茹 Wallbraun M +2 位作者 任正隆 Reustle G.M Krczal G 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期12-18,共7页
通过根癌农杆菌C58C1ATHVRifR 介导法 ,利用烟草花叶病毒 35S双启动子和苜蓿花叶病毒引导序列控制下的含抗新霉素磷酸转移酶基因 (nptⅡ )和哈兹木霉几丁质酶基因(ThEn 4 2 )的质粒pBin19ESR为载体 ,对 3个核桃体细胞胚系进行遗传转化 ... 通过根癌农杆菌C58C1ATHVRifR 介导法 ,利用烟草花叶病毒 35S双启动子和苜蓿花叶病毒引导序列控制下的含抗新霉素磷酸转移酶基因 (nptⅡ )和哈兹木霉几丁质酶基因(ThEn 4 2 )的质粒pBin19ESR为载体 ,对 3个核桃体细胞胚系进行遗传转化 ,结果获得 4 1个抗卡那霉素的体细胞胚系。经PCR和复式PCR检测 ,4 1个转化系均含有nptⅡ基因 ,其中 38个转化系含有ThEn 4 2基因。Southern杂交分析表明 ,ThEn 4 2基因已被整合到核桃体的基因组中。几丁质酶活性检测结果表明 ,转化的体细胞胚系的几丁质酶活性比对照高几十至几千倍。 展开更多
关键词 核桃 几丁质酶 转基因 细胞 农杆菌介导
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苹果离体叶片培养直接体细胞胚胎发生研究 被引量:27
17
作者 达克东 张松 +1 位作者 李雅志 亓增军 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期241-245,共5页
在MS+BA10mg/L+NAA50mg/L+2,4_D0\^5mg/L+蔗糖20g/L的固体培养基上,苹果品种嗄拉试管苗叶片经7天暗培养产生胚性细胞。将具有胚性细胞的叶片转入MS+BA10mg/L+蔗糖20g... 在MS+BA10mg/L+NAA50mg/L+2,4_D0\^5mg/L+蔗糖20g/L的固体培养基上,苹果品种嗄拉试管苗叶片经7天暗培养产生胚性细胞。将具有胚性细胞的叶片转入MS+BA10mg/L+蔗糖20g/L的培养基上暗培养40天,65%的叶片直接发生体细胞胚,体细胞胚在同种培养基上萌发,长成小植株。 展开更多
关键词 苹果:离体叶片培养 细胞 小植株
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黑核桃体细胞胚状体发生及其基因转化系统的建立 被引量:31
18
作者 方宏筠 王关林 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期406-411,共6页
以我国种植的优良品种黑核桃 (JuglansnigiaL .)幼胚和幼叶为外植体诱导出体细胞胚状体 ,通过根癌农杆菌介导将nptⅡ和gus基因导入体细胞胚 ,同时研究了激素、体细胞胚的发育时期及预培养等对转化率的影响 ,建立了黑核桃体细胞胚基因转... 以我国种植的优良品种黑核桃 (JuglansnigiaL .)幼胚和幼叶为外植体诱导出体细胞胚状体 ,通过根癌农杆菌介导将nptⅡ和gus基因导入体细胞胚 ,同时研究了激素、体细胞胚的发育时期及预培养等对转化率的影响 ,建立了黑核桃体细胞胚基因转化系统 ,还分析了体细胞胚胎转化系统的特点和潜力。 展开更多
关键词 黑核桃 细胞 GUS基因 基因转化
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利用mRNA差别显示技术分析枸杞体细胞胚发生早期基因的差别表达 被引量:24
19
作者 崔凯荣 邢更生 +1 位作者 秦琳 王亚馥 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期16-19,共4页
本研究选用枸杞体细胞胚发生体系中的继代愈伤组织(对照)、胚性愈伤组织和早期胚体为实验材料,提取细胞总RNA,在12种锚定真核生物mRNA3′末端的OligodT12VN中,随机选用OligodT12GA为引物合成了以... 本研究选用枸杞体细胞胚发生体系中的继代愈伤组织(对照)、胚性愈伤组织和早期胚体为实验材料,提取细胞总RNA,在12种锚定真核生物mRNA3′末端的OligodT12VN中,随机选用OligodT12GA为引物合成了以上三种材料的cDNA第一链,以此cDNA为模板,用随机引物进行PCR扩增,选择差别表达的片段。我们选用了OPA、OPH、OPK和OPB四组的60个随机引物对所得的cDNA进行了PCR扩增,得到了三个在体细胞胚发生早期组织中基因特异表达的片段。结果表明,在体细胞胚发生早期有胚胎发生特异性基因的表达,而且这种特异表达的基因在继代愈伤组织中没有表达。 展开更多
关键词 MRNA 基因差别表达 PCR 细胞发生 枸杞
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植物体细胞胚发生与内源激素的关系研究进展 被引量:22
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作者 刘华英 萧浪涛 何长征 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期349-354,共6页
概述了不同外植体和体胚发生特定部位的内源激素水平、胚性和非胚性愈伤组织的内源激素差异、体胚发生过程中内源激素的变化、内源激素间的平衡等与体胚发生能力的关系以及多胺在植物体胚发生中的作用 。
关键词 植物 细胞发生 内源激素 多胺
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