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黑色素瘤相关抗原-A3蛋白激活树突状细胞诱导CD8＋细胞毒性T淋巴细胞免疫治疗肝细胞癌 被引量：5
1
作者 王谦 黄长山 +3 位作者 余伟 丁月超 马超 黄涛 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期587-590,共4页
目的探讨黑色素瘤相关抗原-A3（MAGE-A3）蛋白激活树突状细胞（DC），然后诱导产生CD8＋细胞毒T淋巴细胞（CTL）进行免疫治疗肝细胞癌（简称肝癌）的效果。 方法利用MAGE-A3蛋白诱导DC成熟并检测DC表面标志物及白细胞介素（IL）-10、IL... 目的探讨黑色素瘤相关抗原-A3（MAGE-A3）蛋白激活树突状细胞（DC），然后诱导产生CD8＋细胞毒T淋巴细胞（CTL）进行免疫治疗肝细胞癌（简称肝癌）的效果。 方法利用MAGE-A3蛋白诱导DC成熟并检测DC表面标志物及白细胞介素（IL）-10、IL-12表达，然后利用成熟的MAGE-A3-DC诱导MAGE-A3特异性CD8＋CTL，并检测MAGE-A3-DC-CD8＋CTL对正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2的杀伤作用。建立BALB/c-nu/nu肝癌模型，检测MAGE-A3-DC-CD8＋CTL对小鼠肿瘤的抑制作用，并通过病理学切片观察肿瘤组织变化。 结果MAGE-A3蛋白刺激能够显著上调DC表面标志物DC80、DC83、DC86和人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR）水平（97.45±2.58比48.33±1.68，92.81±2.36比52.92±1.90，94.00±3.01比53.97±2.05，92.16±1.87比34.13±1.32；t＝35.680，P＝0.013；t＝29.440，P＝0.021；t＝24.580，P＝0.012；t＝56.690，P＝0.009）；与磷酸盐缓冲液（PBS）刺激的DC比较，MAGE-A3蛋白能够显著促进DC释放IL-12[（338.44±18.15） pg/ml比（243.23±16.56） pg/ml；t＝8.670，P＝0.005]和显著抑制IL-10的释放[（207.21±10.89） pg/ml比（327.58±14.36） pg/ml；t＝14.930，P＝0.009]。MAGE-A3-DC-CD8＋CTL和DC-CD8＋CTL展示了相近的L02细胞杀伤效果[（9.10±1.40）%比（9.71±1.58）%；t＝0.650，P＝0.120]，与DC-CD8＋CTL比较，MAGE-A3-DC-CD8＋CTL展示了显著的HepG2细胞杀伤效果[（58.84±5.27）%比（9.63±1.61）%；t＝19.970，P＝0.008]。BALB/c-nu/nu肝癌小鼠经过MAGE-A3-DC-CD8＋CTL治疗后，肿瘤体积比显著低于PBS组和DC-CD8＋CTL组（5.43±1.22比21.81±2.01比22.85±2.40；t＝22.030，P＝0.010；t＝20.460，P＝0.012）。苏木素-伊红（HE）染色结果显示，经过MAGE-A3-DC-CD8＋CTL处理的肿瘤组织细胞核固缩，细胞间隙增大，出现空泡和水肿现象，而PBS组和DC-CD8＋CTL组肿瘤组织无病理学改变。结论MAGE-A3蛋白能够刺激DC细胞成熟并诱导产生MAGE-A3蛋白特� 展开更多
关键词 癌 肝细胞 免疫治疗 黑色素瘤相关抗原-A3 树突状细胞 细胞毒T淋巴 细胞
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当归芍药散对慢性盆腔炎大鼠外周血Th、Tc细胞和NO、IL-4、IL-10的影响 被引量：34
2
作者 高升 高飞 +1 位作者 闫亚楠 任存霞 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期528-533,共6页
目的从T细胞亚群及细胞因子的角度探究当归芍药散对慢性盆腔炎大鼠模型的作用机制。方法采用混合菌感染合并机械损伤法制备慢性盆腔炎大鼠模型。60只雌性大鼠随机分为正常组,模型组,金刚藤胶囊组,当归芍药散高、中、低剂量组。用药14 d... 目的从T细胞亚群及细胞因子的角度探究当归芍药散对慢性盆腔炎大鼠模型的作用机制。方法采用混合菌感染合并机械损伤法制备慢性盆腔炎大鼠模型。60只雌性大鼠随机分为正常组,模型组,金刚藤胶囊组,当归芍药散高、中、低剂量组。用药14 d后,观察子宫病理组织改变;流式细胞术测定外周血CD3、CD4、CD8细胞,辅助性淋巴细胞(Th细胞),细胞毒性淋巴细胞(Tc细胞)数量百分比;测定血清中一氧化氮(NO)、白细胞介素(IL)-4、IL-10的含量。结果光学显微镜观察显示,当归芍药散高、中剂量组可以降低大鼠子宫内膜的炎症细胞浸润,促进病变上皮细胞增生修复;当归芍药散高、中剂量组可以显著升高Th细胞、CD3细胞、CD4细胞以及Th/Tc、CD4/CD8比值(P<0.01,P<0.05),降低Tc细胞、CD8细胞(P<0.01,P<0.05);当归芍药散高、中剂量组可以显著升高IL-4、IL-10含量,降低NO含量(P<0.05);与金刚藤胶囊组比较,高剂量组显著升高IL-4含量(P<0.01),降低NO含量(P<0.05)。结论当归芍药散可能通过改善免疫状态,降低炎症反应以发挥治疗慢性盆腔炎的作用。 展开更多
关键词 当归芍药散 慢性盆腔炎 辅助性淋巴细胞 细胞毒性淋巴细胞 一氧化氮 白细胞介素-4 白细胞介素-10
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自体宫颈癌-树突细胞疫苗激活的CTL杀伤效应 被引量：27
3
作者 周昌菊 马薇 +2 位作者 周建大 赵永祥 谢慧清 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期143-147,共5页
背景与目的:树突细胞(dendriticcells,DC)是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞(antigen-presentingcell,APC),它可以在体内、外向T淋巴细胞递呈抗原,并诱发细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)反应。本研究旨在探讨负载自体宫颈... 背景与目的:树突细胞(dendriticcells,DC)是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞(antigen-presentingcell,APC),它可以在体内、外向T淋巴细胞递呈抗原,并诱发细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)反应。本研究旨在探讨负载自体宫颈癌抗原的DC体外激发的CTL对自体宫颈癌细胞的杀伤效应。方法:先冻融宫颈癌细胞制备抗原,然后以GM-CSF、IL-4诱导自体外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)获得DC并负载抗原,刺激自体T淋巴细胞制备宫颈癌抗原特异性CTL,观察CTL对宫颈癌细胞的杀伤活性。结果:负载自体宫颈癌抗原DC诱导的特异性CTL对自体宫颈癌细胞的体外杀伤率高达79.32%～89.27%,显著高于淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokine-activatedkillingcells,LAK)的杀伤率(t≥2.89,P<0.05);且对宫颈癌HeLa细胞株具有一定杀伤效应(40.35%～58.09%),但低于自体癌细胞组(t≥2.97,P<0.05);特异性CTL对HepG2、MCF7、A549、MGC803细胞无明显杀伤效应。结论:自体宫颈癌-树突细胞疫苗体外诱导的CTL具有高效而特异的抗自体宫颈癌细胞免疫活性,可望成为宫颈癌生物治疗的一个有力手段。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 树突细胞 细胞毒性淋巴细胞 杀伤活性
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热休克蛋白70诱导抗肿瘤免疫的机制研究 被引量：16
4
作者 傅庆国 孟凡东 郭仁宣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期393-395,共3页
目的　研究肿瘤热休克蛋白 70 (HSP70 )诱导的抗肿瘤免疫产生的机制。方法　用液相色谱法提纯小鼠肿瘤细胞株中的HSP70。通过动物实验观察HSP70的抗肿瘤作用 ,并用流式细胞技术测定HSP70免疫后小鼠外周血中T细胞亚群的变化。用ELISA法测... 目的　研究肿瘤热休克蛋白 70 (HSP70 )诱导的抗肿瘤免疫产生的机制。方法　用液相色谱法提纯小鼠肿瘤细胞株中的HSP70。通过动物实验观察HSP70的抗肿瘤作用 ,并用流式细胞技术测定HSP70免疫后小鼠外周血中T细胞亚群的变化。用ELISA法测定HSP70免疫后小鼠体内细胞因子的水平。结果　用HSP70免疫后 ,小鼠外周血中CD8+T细胞及几种主要Th1型细胞因子 (IL 2、TNF α、TNF β和IFN γ)均升高 ,与对照组相比较 ,差异显著 (P <0 .0 1)。结论　HSP70免疫后 ,小鼠外周血中CD8+ T细胞及Th1型细胞因子均有明显升高。 展开更多
关键词 肿瘤 热休克蛋白 细胞毒T淋巴细胞 细胞因子
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六君子汤对食管癌EC-9706细胞株树突状细胞成熟的影响 被引量：20
5
作者 吴耀松 尹素改 +3 位作者 任闪闪 王朋辉 尚艺婉 陈玉龙 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期508-512,共5页
目的观察六君子汤对食管癌微环境中树突状细胞的影响及可能作用机制。方法用Fieoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,体外诱导培养树突状细胞,分为正常培养基组(正常培养)、肿瘤培养基组(30%食管癌EC-9706细胞株培养上清)、六君子汤... 目的观察六君子汤对食管癌微环境中树突状细胞的影响及可能作用机制。方法用Fieoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,体外诱导培养树突状细胞,分为正常培养基组(正常培养)、肿瘤培养基组(30%食管癌EC-9706细胞株培养上清)、六君子汤组(30%六君汤干预食管癌EC-9706细胞株培养上清)。7天后采用流式细胞术检测3组树突状细胞表面标志物CD80、CD86、CD1a;MTT法检测淋巴细胞增殖情况,计算刺激指数;LDH释放法检测细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤力,计算特异杀伤率;ELISA法检测白细胞介素12(IL-12)含量,Wester blot法检测STAT3及p-STAT3蛋白表达。结果与正常培养基组比较,肿瘤培养基组树突状细胞表型CD80、CD86、CD1a降低,刺激指数及CTL的特异杀伤率降低,IL-12含量减少,STAT3和p-STAT3蛋白表达升高(P<0.05)。而六君子汤组较肿瘤培养基组树突状细胞CD80、CD86、CD1a增加,刺激指数及CTL特异杀伤率升高,IL-12分泌增加,STAT3和p-STAT3蛋白减少(P<0.05)。结论六君子汤可通过影响食管癌细胞的微环境而使树突状细胞的成熟和免疫活性发生改变,其机制可能与调节STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 食管癌 树突状细胞 六君子汤 细胞增殖 细胞毒T淋巴细胞
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益气养阴解毒方及黄芪甲苷体外对CTLA⁃4介导的肺癌免疫逃逸的影响 被引量：20
6
作者 姜怡 蔡雨晴 +3 位作者 张朋 沈丽萍 刘苓霜 刘嘉湘 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2173-2177,共5页
目的探讨益气养阴解毒方及黄芪甲苷在体外肿瘤细胞和淋巴细胞共培养体系中下调膜型细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(mCTLA⁃4)和可溶性CTLA⁃4(sCTLA⁃4)、提高CD8^(+)T淋巴细胞水平、抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长的作用,及其与抗CTLA⁃4单抗联用的... 目的探讨益气养阴解毒方及黄芪甲苷在体外肿瘤细胞和淋巴细胞共培养体系中下调膜型细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(mCTLA⁃4)和可溶性CTLA⁃4(sCTLA⁃4)、提高CD8^(+)T淋巴细胞水平、抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长的作用,及其与抗CTLA⁃4单抗联用的协同增效作用。方法小鼠脾脏淋巴细胞与Lewis肺癌细胞体外接触式共培养24 h,益气养阴解毒方、黄芪甲苷及抗CTLA⁃4单抗的给药浓度分别为500、50、5μg/mL,分为空白对照组、黄芪甲苷组(单体组)、益气养阴解毒方组(复方组)、抗CTLA⁃4单抗组(单抗组)、黄芪甲苷+抗CTLA⁃4单抗组(单体+单抗组)、益气养阴解毒方+抗CTLA⁃4单抗组(复方+单抗组)。流式细胞术检测淋巴细胞表面mCTLA⁃4及CD8^(+)T细胞的表达,ELISA法检测sCTLA⁃4的水平,CCK⁃8法检测Lewis肺癌细胞的增殖情况。结果与空白对照组比较,单体组、复方组、单抗组、单体+单抗组和复方+单抗组均可下调mCTLA⁃4及sCTLA⁃4的表达(P<0.01),提高CD8^(+)T细胞水平(P<0.05),降低Lewis肺癌细胞的存活率(P<0.01),与抗CTLA⁃4单抗联合给药作用更优(P<0.05)。结论益气养阴解毒方及黄芪甲苷通过下调mCTLA⁃4及sCTLA⁃4表达提高抗肺癌免疫应答、逆转CTLA⁃4介导的肺癌免疫逃逸,与抗CTLA⁃4单抗联合给药具有协同增效的作用。 展开更多
关键词 益气养阴解毒方 黄芪甲苷 共培养体系 肺癌 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 免疫逃逸
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负载胃癌酸洗抗原树突状细胞诱导高效特异的抗胃癌细胞效应 被引量：9
7
作者 吴淼 余佩武 +3 位作者 蔡志民 吴军 王自强 周立新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1236-1238,共3页
目的　研究负载胃癌酸洗抗原树突状细胞 (DC)诱导的特异性CTL对胃癌细胞的杀伤效应。方法　酸洗涤法获得SGC790 1细胞膜抗原多肽 ,GM CSF、IL 4和TNF a体外诱导扩增DC并负载酸洗抗原 ,制备胃癌抗原特异性CTL ;用CytoTox 96TM检测其对SGC... 目的　研究负载胃癌酸洗抗原树突状细胞 (DC)诱导的特异性CTL对胃癌细胞的杀伤效应。方法　酸洗涤法获得SGC790 1细胞膜抗原多肽 ,GM CSF、IL 4和TNF a体外诱导扩增DC并负载酸洗抗原 ,制备胃癌抗原特异性CTL ;用CytoTox 96TM检测其对SGC790 1体外杀伤效应。结果　负载胃癌抗原肽的DC诱导的特异性CTL对SGC790 1的杀伤率达 88 95 % ,显著高于LAK细胞的杀伤率 (P <0 0 5 )。且其对同种不同分化类型的胃癌细胞株MGC80 3、MNK2 8也有较高的杀伤效应 ,而对LOVO及HepG2肿瘤细胞株无显著杀伤作用 (P >0 0 5 )。结论　负载胃癌抗原的DC体外可诱导出高效而特异的抗胃癌效应 ,提示以DC为中心的肿瘤生物治疗可望提高胃癌综合治疗水平。 展开更多
关键词 胃癌酸洗抗原 树突状细胞 细胞毒性淋巴细胞 胃癌 生物治疗
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柴胡皂苷d对自身免疫性肝炎小鼠差异表达基因CTLA-4、IL-10和IL-17的影响 被引量：19
8
作者 郝健亨 陈浩 +5 位作者 高艳 徐慧超 高玉亭 苗宇船 郝慧琴 刘杨 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期303-309,共7页
目的·选用Agilent-085631芯片筛选自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠差异表达基因,并观察柴胡皂苷d(Saikosaponin d,SS-d)对部分差异表达基因的影响,探讨SS-d治疗AIH的作用机制。方法·健康雄性SPF级C57BL/6小鼠40... 目的·选用Agilent-085631芯片筛选自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠差异表达基因,并观察柴胡皂苷d(Saikosaponin d,SS-d)对部分差异表达基因的影响,探讨SS-d治疗AIH的作用机制。方法·健康雄性SPF级C57BL/6小鼠40只,分为芯片组(n=8)和SS-d治疗机制组(n=32)。芯片组分为正常组和模型组[按15 mg/kg剂量给予尾静脉注射刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)](每组n=4),12 h后处死,进行肝脏差异表达基因的筛选,并采用q RT-PCR技术对部分基因进行验证。SS-d治疗机制组分为正常组、模型组(处理同芯片组)、SS-d低剂量组和SS-d高剂量组(参照文献及预实验结果,分别按2.5和5.0 mg/kg剂量腹腔注射SS-d,8 h后按15 mg/kg剂量给予尾静脉注射Con A)(每组n=8)。12 h后收集小鼠静脉血及肝脏总蛋白、总RNA,采用ELISA法检测血清谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)及白介素(interleukin,IL)-10、IL-17的含量,Western blotting检测细胞毒T淋巴细胞相关抗原(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen,CTLA)-4蛋白的表达量,q RT-PCR技术检测IL-10、IL-17和CTLA-4 m RNA表达量。结果·共筛查差异表达基因11 512个(上调5 189个,下调6 323个),与138条信号通路相关;差异表达基因IL-10、IL-17及CTLA-4的q RT-PCR检测结果与芯片筛查结果一致。与正常组比较:模型组小鼠血清GPT、GOT含量升高;IL-17 m RNA表达量升高,IL-10 mRNA和CTLA-4 mRNA表达量降低;血清IL-17含量升高,血清IL-10含量降低,肝组织CTLA-4蛋白表达量降低。与模型组比较:SS-d低剂量组和SS-d高剂量组小鼠血清GPT、GOT含量降低;IL-17 mRNA表达量降低,IL-10 mRNA和CTLA-4 mRNA表达量升高;血清IL-17含量降低,血清IL-10含量升高,肝组织CTLA-4蛋白表达量升高。结论·多条信号通路参与AIH的发病,而SS-d可通过调节IL-10、CTLA-4、IL-17的表达,改善AIH小鼠肝脏炎症反应。 展开更多
关键词 自身免疫性肝炎 柴胡皂苷-D 细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4 白介素-10 白介素-17
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应用MAGE-1抗原肽体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞形成 被引量：16
9
作者 吕建锋 冷希圣 +3 位作者 彭吉润 牟东成 庞学雯 尚小英 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期217-219,共3页
目的探讨应用MAGE 1抗原肽治疗肝细胞肝癌 (HCC)的可行性。方法接受MAGE 1抗原九肽NYKCRFPEI孵育的外周血单个核细胞 (PBMC)经 30 0 0rad的射线照射后用作抗原呈递细胞 (APC) ,每隔 7d刺激HCC病人自体的PBMC 1次 ,进行混合淋巴细胞培养 ... 目的探讨应用MAGE 1抗原肽治疗肝细胞肝癌 (HCC)的可行性。方法接受MAGE 1抗原九肽NYKCRFPEI孵育的外周血单个核细胞 (PBMC)经 30 0 0rad的射线照射后用作抗原呈递细胞 (APC) ,每隔 7d刺激HCC病人自体的PBMC 1次 ,进行混合淋巴细胞培养 (MLCs) ,共 4次后作为细胞毒T淋巴细胞 (CTL) ,应用乳酸脱氢酶 (LDH)释放分析法检测CTL对靶细胞的杀伤效应。结果从培养的第 1周至第 4周 ,淋巴细胞共增加至原细胞数的 32倍 ;在效应细胞∶靶细胞 (E∶T)为10∶1时 ,CTL对MAGE 1抗原九肽NYKCRFPEI孵育的自体淋巴母细胞的杀伤效应为 6 2 5 % ,对MAGE 1阳性、HLA A2 4阳性的HCC细胞株BEL740 5的杀伤效应为 40 2 % ,两者均明显高于对自体淋巴母细胞的杀伤效应 (17 9% )、和对MAGE 1阳性 ,HLA A2 4阴性的HCC细胞株HLE的杀伤效应(19 6 % ) ,及对MAGE 1阴性、HLA A2 4阴性的HCC细胞株QGY 770 1的杀伤效应 (1 6 % ) ;在E∶T为3 3∶1时 ,CTL对肽孵育的自体淋巴母细胞的杀伤效应为 5 3 6 % ,明显高于对自体淋巴母细胞的杀伤效应 (15 6 % )、对HLE的杀伤效应 (13% )和对QGY770 1的杀伤效应 (1% )。结论本实验结果表明 ,应用MAGE 1抗原肽NYKCRFPEI,能在体外从HCC病人的PBMC中有效地诱导出具有特异性杀伤能力的CTL。 展开更多
关键词 肿瘤抗原 细胞毒T淋巴细胞 肝细胞癌 免疫疗法 特异性 MAGE-1抗原肽 体外诱导
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免疫接种乙型肝炎病毒外膜小S蛋白产生的细胞免疫反应 被引量：15
10
作者 施理 刘树人 +2 位作者 孔祥平 易学端 张宜俊 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2003年第8期710-713,共4页
目的　研究BALB/c(H 2 d)小鼠免疫接种乙型肝炎病毒 (HBV)外膜小S蛋白 (HBVsmallSenvelopeprotein,S HBsAg)产生的细胞免疫反应。方法　BALB/c(H 2 d)小鼠腹腔接种 0～ 5 μg的S HBsAg ;4周后分离脾淋巴细胞 ,体外分别用特异性多肽、S H... 目的　研究BALB/c(H 2 d)小鼠免疫接种乙型肝炎病毒 (HBV)外膜小S蛋白 (HBVsmallSenvelopeprotein,S HBsAg)产生的细胞免疫反应。方法　BALB/c(H 2 d)小鼠腹腔接种 0～ 5 μg的S HBsAg ;4周后分离脾淋巴细胞 ,体外分别用特异性多肽、S HBsAg刺激 ,分别用51Cr释放实验3 H掺入实验检测细胞毒T淋巴细胞 (cy totoxicTlymphocyte,CTL)及辅助T淋巴细胞 (helperTlymphocyte,HTL)增殖实验。结果　CTL反应的靶细胞自然释放率 ,自然释放 /最大释放 ,平均数±标准差为 (2 8 76± 13 4 5 ) % ;分别接种 0 ,0 6 5 ,1 2 5 ,2 5 ,5 μgS HB sAg的BALB/c(H 2 d)小鼠脾淋巴细胞CTL特异性释放率 (平均数±标准差 )分别为 (31 2 1± 9 2 3) % ,(4 2 36±19 32 ) % ,(91 2 1± 2 2 97) % ,(6 9 2 5± 2 4 l3) % ,(5 1 4 9± 2 1 6 6 ) % ,均高于作为对照的 0组小鼠脾淋巴细胞CTL释放率 ,差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;HTL增殖实验 ,用S HBsAg刺激的 0 6 5～ 5 μg实验组BALB/c(H 2 d)小鼠脾淋巴细胞cpm值 (平均数±标准差 )分别为 3830 2 4± 14 96 12 ,2 736 19±12 38 0 6 ,4 10 0 37±172 3 74 ,12 4 6 18± 10 88 88,均高于未用S HBsAg刺激的对照组BALB/c(H 2 d)小鼠脾淋巴细胞cpm值 ,差异有统计学意义 展开更多
关键词 细胞毒T淋巴细胞 辅助T淋巴细胞 小鼠 接种 HBV外膜小S蛋白
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细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与炎症性肠病的相关性 被引量：16
11
作者 蒋益 夏冰 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期191-194,共4页
目的　炎症性肠病 (IBD)的发病机制与T细胞免疫应答过度有关。细胞毒T淋巴细胞相关抗原 4(CTLA 4)主要在已激活的T细胞上表达 ,通过与CD2 8竞争与B7结合 ,抑制T细胞激活 ,维持免疫系统内环境稳定。CTLA 4基因多态性与一些自身免疫性疾... 目的　炎症性肠病 (IBD)的发病机制与T细胞免疫应答过度有关。细胞毒T淋巴细胞相关抗原 4(CTLA 4)主要在已激活的T细胞上表达 ,通过与CD2 8竞争与B7结合 ,抑制T细胞激活 ,维持免疫系统内环境稳定。CTLA 4基因多态性与一些自身免疫性疾病相关 ,但未见其与IBD的研究。本研究旨在了解IBD的遗传易感性。方法　对 68例无血缘关系的湖北汉族IBD患者 (54例溃疡性结肠炎 ,14例克罗恩病 )以及 14 0例正常对照者 ,采用序列特异性引物PCR方法检测CTLA 4外显子 4的 3′非转录区包含AT重复序列的特异性等位基因。扩增产物用 12 %非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,硝酸银染色 ,部分样品经测序以确定片段长度。结果　共发现CTLA 4基因有 18种等位基因 ,与正常对照组比较 ,12 2bp等位基因在溃疡性结肠炎患者中显著增高 (7 4%vs 0 3 % ,P =0 0 0 0 2 /Pc =Sig ,OR =2 2 3 2 ,95%CI :2 76～ 180 80 )。结论　CTLA 展开更多
关键词 基因多态性 炎症性肠病 细胞毒T淋巴细胞相关抗原4 发病机制 免疫应答
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肝细胞肝癌对机体细胞免疫的影响 被引量：12
12
作者 刘尚梅 赵建军 +1 位作者 杨晓洁 胡敬群 《实用癌症杂志》 2005年第1期68-70,74,共4页
目的　探讨原发性肝细胞肝癌(HCC )对机体细胞免疫机能的影响。方法　采用血常规检测,应用荧光标记抗体及三色激光流式细胞仪对5 1例肝细胞肝癌患者和17例对照样本术前、术后外周血的细胞免疫指标进行检测。检测项目包括:T辅助淋巴细胞(... 目的　探讨原发性肝细胞肝癌(HCC )对机体细胞免疫机能的影响。方法　采用血常规检测,应用荧光标记抗体及三色激光流式细胞仪对5 1例肝细胞肝癌患者和17例对照样本术前、术后外周血的细胞免疫指标进行检测。检测项目包括:T辅助淋巴细胞(THL) ,细胞毒T淋巴细胞(CTL) ,NK细胞,单核细胞,并进行手术前后的对比分析。结果　原发性肝细胞肝癌(HCC)术后THL、CTL、NK和单核细胞百分比、单核细胞绝对值的平均值较术前分别增高0 .91% ,8.5 8% ,8.85 % ,3 1.45 % ,66.5 5 % ,手术前后有显著性差异(P <0 .0 5或P <0 .0 1)。良性对照组的术前与术后上述各项指标比较,均无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论　肝细胞肝癌(HCC)对机体的细胞免疫产生明显抑制作用,在肿瘤切除之后,这种抑制能力随之减弱,细胞免疫得到恢复。而良性对照组对机体细胞免疫的抑制不显著。综合分析细胞免疫的变化情况,对判断HCC的预后及肿瘤复发有重要的意义。 展开更多
关键词 机体细胞免疫 原发性肝细胞肝癌 细胞毒T淋巴细胞 激光流式细胞仪 T辅助淋巴细胞 显著性差异 荧光标记抗体 细胞免疫指标 单核细胞 手术前后 血常规检测 免疫机能 肝癌患者 检测项目 NK细胞 对比分析 0.05 指标比较 抑制作用
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胃癌患者外周血淋巴细胞CD_8、CD_(28)表达的检测及临床意义 被引量：11
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作者 金秀国 刘晓光 +3 位作者 刘波 庄晓玲 方汉波 方国安 《江西医学检验》 2007年第1期17-18,54,共3页
目的探讨胃癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28的表达及其临床意义。方法用流式细胞术对48例胃癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD8及CD28进行了检测。结果(1)胃癌组CD8+CD28-细胞与对照组比较明显增高(P<0.05),CD8+CD28+细胞则明... 目的探讨胃癌患者外周血淋巴细胞CD8、CD28的表达及其临床意义。方法用流式细胞术对48例胃癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD8及CD28进行了检测。结果(1)胃癌组CD8+CD28-细胞与对照组比较明显增高(P<0.05),CD8+CD28+细胞则明显减低(P<0.01)。(2)胃癌患者手术后CD8+CD28-细胞明显低于手术前(P<0.01),CD8+CD28+细胞明显高于手术前(P<0.05)。(3)胃癌患者淋巴结转移组CD8+CD28-细胞明显低于未转移组(P<0.01)。(4)Ⅲ期胃癌患者CD8+CD28-细胞与Ⅰ期和Ⅱ期相比明显增高(分别P<0.01,P<0.05),随着临床分期的进程CD8+CD28+细胞、CD8-CD28+细胞逐渐减低(分别P<0.01,P<0.05)。结论检测胃癌患者的外周血中的CD8和CD28的表达,对了解患者的免疫状况,疾病进展和指导临床对患者进行免疫调节治疗方面有一定的价值。 展开更多
关键词 胃癌 抗原CD28 抗原CD8 细胞毒T淋巴细胞
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IL-2基因修饰的细胞毒T淋巴细胞抗肿瘤效应的研究 被引量：9
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作者 吕彦恩 曹雪涛 +2 位作者 于益芝 弥静 雷虹 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第8期844-847,共4页
目的:了解IL2基因修饰的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytesCTL)的增殖和杀伤活性,探索细胞因子基因疗法及被动免疫治疗脑胶质瘤的新途径。方法:用昆明种小鼠的脾细胞体外诱导CTL,用腺病毒载体转染IL2基因,观察其体外增殖活性和杀... 目的:了解IL2基因修饰的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocytesCTL)的增殖和杀伤活性,探索细胞因子基因疗法及被动免疫治疗脑胶质瘤的新途径。方法:用昆明种小鼠的脾细胞体外诱导CTL,用腺病毒载体转染IL2基因,观察其体外增殖活性和杀伤活性,再用G422小鼠胶质母细胞瘤细胞建立肺转移瘤模型,36h后经过继回输,2周后计数肺的肿瘤结节,观察IL2基因转染的CTL对实验性肺转移瘤的治疗作用。结果:重组腺病毒载体在MOImultiplicityofinfection为100时,转染率达96.8%,IL2基因修饰的CTL增殖活性、IL2的分泌(248u)和体外杀伤活性36.4%明显增强,对实验性肺转移瘤的治疗作用都显著增强,肺转移结节数28显著减少(P<0.01)。结论:IL-2基因转染的CTL过继回输,可直接杀伤和诱导激活机体特异性抗肿瘤免疫反应,使体内抗肿瘤效果显著增强,有效抑制实验性肺转移瘤的生长,为胶质瘤的过继免疫治疗提供了新的思路和实验依据。 展开更多
关键词 白细胞介素2 基因转染 细胞毒T淋巴细胞 胶质瘤
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骨髓间充质干细胞外泌体调节哮喘小鼠Foxp3^＋ Treg/Th17的平衡 被引量：12
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作者 林颖 胡锦章 +5 位作者 颛孙永勋 冉丕鑫 陈瑞 杜雨末 林琳 李建国 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第17期2637-2643,共7页
背景:Th1/Th2失衡是哮喘的基本的病理生理表现,但近来的研究表明哮喘还与调节T细胞(Foxp3^+Treg)/Th17的失衡有关。许多研究表明间充质干细胞的免疫调节作用与其分泌的外泌体相关。目的:观察骨髓间充质干细胞外泌体注射对哮喘小鼠气道... 背景:Th1/Th2失衡是哮喘的基本的病理生理表现,但近来的研究表明哮喘还与调节T细胞(Foxp3^+Treg)/Th17的失衡有关。许多研究表明间充质干细胞的免疫调节作用与其分泌的外泌体相关。目的:观察骨髓间充质干细胞外泌体注射对哮喘小鼠气道炎症及Foxp3^+Treg细胞、Th17细胞及支气管肺泡灌洗液中细胞因子的影响。方法:将27只SPF级BALB/c小鼠分为3组:正常对照组、哮喘模型组、外泌体处理组。除正常对照组外,其他两组以卵白蛋白致敏和激发的方法建立哮喘动物模型,外泌体处理组在第21天激发的同时尾静脉注射外泌体。最后1次激发后24 h,检测各组小鼠脾中Foxp3^+Treg及Th17占淋巴细胞的比例,检测Foxp3^+Treg中CTLA-4及PD-1表达,检测CD4^+T细胞中p27^(kip1)表达,支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数,肺泡灌洗液中白细胞介素4,5,13,10,17及干扰素γ表达,并进行肺组织病理观察。结果与结论:(1)小鼠脾组织中Foxp3^+Treg占淋巴细胞比例及Foxp3^+Treg上CTLA-4和PD-1表达:外泌体处理组高于哮喘模型组(P<0.01);(2)脾组织中Th17细胞占淋巴细胞的比例:哮喘模型组>外泌体处理组>正常对照组(P<0.01);(3)支气管肺泡灌洗液中炎症细胞总数及分类计数:外泌体处理组炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞计数,单核巨噬细胞计数显著低于哮喘模型组(P<0.01);(4)肺组织病理变化:正常对照组气道无明显炎症细胞浸润,哮喘模型组气道炎症显著,外泌体组气道炎症明显减轻;(5)支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平检测:与哮喘模型组相比,外泌体处理组白细胞介素13和Th17相关的白细胞介素17水平降低(P<0.05,P<0.01),Foxp3^+Treg相关的白细胞介素10水平升高(P<0.01);(6)CD4^+T细胞中p27^(kip1)的表达:外泌体处理组p27^(kip1)的表达高于哮喘模型组;(7)结果表明:骨髓间充质干细胞外泌体可以抑制哮喘小鼠气道炎症反应,逆转哮喘小鼠Foxp3^+Treg 展开更多
关键词 哮喘 间充质干细胞 外泌体 组织工程 调节性T细胞 免疫调节 炎症 细胞毒T淋巴细胞抗原4 程序性死亡受体1:细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制因子 免疫失衡
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细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性测定方法进展 被引量：7
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作者 姚朗 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 2002年第2期69-70,共2页
细胞毒T淋巴细胞 (CTL)活性测定是研究机体细胞免疫功能的重要方法之一。传统的51 Cr释放法虽然有效 ,但也存在某些不足。随着荧光标记、流式细胞分析和报告基因等技术的广泛应用 ,促进了寻找灵敏可靠、简单易行的非同位素法测定CTL活... 细胞毒T淋巴细胞 (CTL)活性测定是研究机体细胞免疫功能的重要方法之一。传统的51 Cr释放法虽然有效 ,但也存在某些不足。随着荧光标记、流式细胞分析和报告基因等技术的广泛应用 ,促进了寻找灵敏可靠、简单易行的非同位素法测定CTL活性的方法学研究。 展开更多
关键词 细胞毒T淋巴细胞 活性测定 荧光测定 比色测定
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非小细胞肺癌治疗新时代：免疫治疗 被引量：11
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作者 袁冬梅 宋勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期483-487,共5页
免疫检查点抑制剂目前已成为晚期非小细胞肺癌患者除外手术、化疗、放疗、靶向治疗之外的又一重要选择。无论是一线还是二线治疗、鳞癌还是非鳞癌,免疫治疗均有可能带来优于传统化疗的治疗效果,尤其是对于PD-L1阳性患者。本文对免疫检... 免疫检查点抑制剂目前已成为晚期非小细胞肺癌患者除外手术、化疗、放疗、靶向治疗之外的又一重要选择。无论是一线还是二线治疗、鳞癌还是非鳞癌,免疫治疗均有可能带来优于传统化疗的治疗效果,尤其是对于PD-L1阳性患者。本文对免疫检查点抑制剂的临床疗效、分子标志物选择、联合治疗、耐药机制应用等进行述评。 展开更多
关键词 肺癌 非小细胞 免疫治疗 免疫检查点 程序死亡分子1 细胞毒T淋巴细胞抗体4
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利用综合治疗措施进一步提高肝癌肝移植疗效 被引量：11
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作者 汪根树 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期249-256,共8页
超标准原发性肝癌(肝癌)病人的肝移植机会、符合标准的肝癌病人等待肝移植期间因肝癌进展脱失和肝癌肝移植术后复发是当前肝癌肝移植面临的重要问题。近年来仑伐替尼等系统治疗药物及其联合其它治疗的综合治疗在晚期肝癌治疗中获得了突... 超标准原发性肝癌(肝癌)病人的肝移植机会、符合标准的肝癌病人等待肝移植期间因肝癌进展脱失和肝癌肝移植术后复发是当前肝癌肝移植面临的重要问题。近年来仑伐替尼等系统治疗药物及其联合其它治疗的综合治疗在晚期肝癌治疗中获得了突破性疗效,也为肝癌肝移植的降期治疗、桥接治疗和肿瘤复发防治带来了新的希望。基于系统治疗药物的综合治疗可能是提高肝癌肝移植疗效的突破点,值得深入研究。本文介绍了肝癌肝移植的降期治疗、桥接治疗和肿瘤复发防治进展,旨在为临床治疗提供参考。 展开更多
关键词 肝细胞癌 肝移植 降期治疗 桥接治疗 综合治疗 经导管动脉化疗栓塞(TACE) 细胞毒T淋巴细胞相关抗原(CTLA) 程序性细胞死亡蛋白1(PD-1) 索拉非尼 仑伐替尼 立体定向体部放疗(SBRT) 酪氨酸激酶抑制剂(TKI)
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香菇多糖增强5-FU抑制结肠癌细胞增殖机制研究 被引量：10
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作者 袁昌劲 孔庆志 +1 位作者 卢宏达 孔双喜 《中国实验诊断学》 2012年第6期992-994,共3页
香菇多糖主要为甘露糖甘肽,其余为多种糖分和各种氨基酸等,对光和热稳定,不溶于甲醇、乙醇和丙酮等有机溶剂[1],联合抗肿瘤药物对胃癌[2]、结肠癌[3]、肺癌[4]等肿瘤具有良好的疗效,显著延长肿瘤患者存活时间。目前对香菇多糖的抗肿瘤... 香菇多糖主要为甘露糖甘肽,其余为多种糖分和各种氨基酸等,对光和热稳定,不溶于甲醇、乙醇和丙酮等有机溶剂[1],联合抗肿瘤药物对胃癌[2]、结肠癌[3]、肺癌[4]等肿瘤具有良好的疗效,显著延长肿瘤患者存活时间。目前对香菇多糖的抗肿瘤机制仍然不清楚,一般认为和免疫调节有关。香菇多糖是典型的T细胞激活剂,体内外均能促进细胞毒T淋巴细胞（CTL）的产生,提高CTL细胞杀伤力。 展开更多
关键词 香菇多糖 细胞增殖机制 结肠癌 5-FU 细胞毒T淋巴细胞 抗肿瘤药物 抗肿瘤机制 细胞激活剂
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加载HCMV抗原肽的HLA-A*0201单体及其四聚体制备和鉴定 被引量：9
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作者 何贤辉 徐丽慧 +2 位作者 刘毅 蔡小嫦 曾耀英 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期382-388,共7页
细胞毒T淋巴细胞 (CTL)在控制病原体感染以及抗肿瘤过程中发挥重要作用 ,因而特异性CTL的检测相当重要 ;而过去检测CTL的方法都是间接的 ,最近发展起来的四聚体技术则是直接检测抗原特异性CTL的有效而特异的方法 ,成为目前研究T细胞免... 细胞毒T淋巴细胞 (CTL)在控制病原体感染以及抗肿瘤过程中发挥重要作用 ,因而特异性CTL的检测相当重要 ;而过去检测CTL的方法都是间接的 ,最近发展起来的四聚体技术则是直接检测抗原特异性CTL的有效而特异的方法 ,成为目前研究T细胞免疫应答的关键技术。报道一种简化的四聚体制备程序 ,利用该程序成功制备加载人巨细胞病毒 (HCMV)抗原肽的HLA_A2四聚体 ,具有特异性结合CTL活性。HLA_A 0 2 0 1重链基因是通过RT_PCR方法从HLA_A2 + 供者白细胞中克隆 ,进而以PCR方法构建在羧基端融合生物素化酶BirA底物肽 (BSP)的HLA_A 0 2 0 1(A2 )重链胞外区原核表达载体 ,A2重组蛋白在大肠杆菌中得到高表达 ,主要以包涵体形式存在。加载抗原肽的可溶性A2单体是A2胞外区在轻链 β2 微球蛋白和HLA_A2限制性HCMVpp6 5 495_50 3抗原肽 (NLVPMVATV ,NLV)存在时通过稀释法复性获得 ,以BirA对其进行生物素化 ,然后以阴离子交换树脂纯化 ,得到的纯化A2_NLV单体与Streptavidin_PE按 4 :0 8比例混合形成四聚体 ,结合程度在 85 %以上 ,流式细胞仪分析显示该四聚体具有与HLA_A2 + 供者的特异性CTL结合活性。总之 ,这种简化的四聚体制备程序 ,不仅有利于该技术的推广 ,为特异性T细胞免疫研究建立必要的技术平台 。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 四聚体 细胞毒T淋巴细胞 包涵体 人巨细胞病毒
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