SOCS(suppressor of cytokine signalling)是细胞因子信号传导通路JAK/STAT(janus kinase/signal transduction and activators of transcription)的一个负性调控分子家族。近年来很多研究表明,SOCS在癌症、糖尿病、自身免疫性疾病和炎...SOCS(suppressor of cytokine signalling)是细胞因子信号传导通路JAK/STAT(janus kinase/signal transduction and activators of transcription)的一个负性调控分子家族。近年来很多研究表明,SOCS在癌症、糖尿病、自身免疫性疾病和炎症等多种疾病的发生发展过程中及在机体免疫调节中发挥着重要的作用,该蛋折分子家族的成员可能会成为重大疾病治疗的一种新候选基因。展开更多
目的探讨细胞因子信号传导抑制因子-1(Suppressors of cytokine signaling-1,SOCS1)基因腺病毒转染未成熟的树突细胞(Dendritic cells,DC),并免疫受体小鼠,通过小鼠肝移植模型,观察免疫耐受的效果并探讨可能的机制。方法构建SOCS1腺病毒...目的探讨细胞因子信号传导抑制因子-1(Suppressors of cytokine signaling-1,SOCS1)基因腺病毒转染未成熟的树突细胞(Dendritic cells,DC),并免疫受体小鼠,通过小鼠肝移植模型,观察免疫耐受的效果并探讨可能的机制。方法构建SOCS1腺病毒并PCR鉴定,感染体外分离、培养的小鼠骨髓树突细胞,Westernblot法检测SOCS1表达。以未转染组及空白转染组为对照,免疫肝移植小鼠模型,检测受体小鼠脾脏淋巴细胞混合淋巴细胞反应(MLR),检测血清IL-2和IFN-γ水平及肝脏组织IL-2和IFN-γmRNA表达。结果成功构建并鉴定转染腺病毒,感染DC后,SOCS1蛋白表达水平较未转染组及空白转染组显著增高(P<0.05)。SOCS1基因修饰的DC免疫肝移植模型小鼠后,受体小鼠脾脏淋巴细胞MLR较未转染组及空白对照免疫受体组小鼠显著下降(P<0.05);SOCS1-DC免疫受体小鼠血清IL-2和IFN-γ水平及肝脏mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。结论通过腺病毒转染使SOCS1在DC中过度表达,用以体内免疫同种异体肝移植受体小鼠,能有效减轻同种移植排斥反应,并在一定程度上诱导形成免疫耐受。展开更多
目的:揭示miR-455-5p对呼吸道合胞病毒(RSV)感染致气道上皮细胞炎症反应的作用机制。方法:qRT-PCR检测30例健康体检儿童(健康组)、RSV感染轻症组(n=41)和重症组(n=31)患儿血清miR-455-5p水平。将16HBE细胞分为Control组、NC-agomir组、m...目的:揭示miR-455-5p对呼吸道合胞病毒(RSV)感染致气道上皮细胞炎症反应的作用机制。方法:qRT-PCR检测30例健康体检儿童(健康组)、RSV感染轻症组(n=41)和重症组(n=31)患儿血清miR-455-5p水平。将16HBE细胞分为Control组、NC-agomir组、miR-455-5p-agomir组、NC-antagomir组、miR-455-5p-antagomir组。使用Lipofectamine 3000转染16HBE细胞后培养48 h后,分为Blank组、NC组(转染了NC-agomir的细胞)、RSV+NC-agomir组、RSV+miR-455-5p-agomir组,用RSV病毒液感染RSV+NC-agomir组和RSV+miR-455-5p-agomir组16HBE细胞,Blank组和NC组16HBE细胞正常培养。用CCK-8法和EdU法检测细胞增殖、TUNEL法检测细胞凋亡、ELISA法检测上清液中TNF-α、IL-6、IL-8水平,qRT-PCR检测miR-455-5p和SOCS3的m RNA水平,Western blot检测SOCS3、IFN-α、STAT1、STAT2、p-STAT1和p-STAT2的蛋白水平。结果:与健康组相比,轻症组和重症组患儿的血清miR-455-5p水平降低(P<0.05)。与轻症组相比,重症组的血清miR-455-5p水平降低(P<0.05)。与Control组和NC-agomir组相比,miR-455-5p-agomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率升高(P<0.05),TUNEL阳性率降低(P<0.05),上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平降低(P<0.05),SOCS3 m RNA和蛋白水平降低(P<0.05),IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平升高(P<0.05)。与Control组和NC-antagomir组相比,miR-455-5p-antagomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率降低(P<0.05),TUNEL阳性率升高(P<0.05),上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平升高(P<0.05),SOCS3 m RNA和蛋白水平升高(P<0.05),IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平降低(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,RSV+NC-agomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率降低(P<0.05),TUNEL阳性率升高(P<0.05),上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平升高(P<0.05),SOCS3 m RNA和蛋白水平升高(P<0.05),IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平降低(P<0.05)。与RSV+NC-agomir组相比,RSV+miR-455-5p-展开更多
文摘SOCS(suppressor of cytokine signalling)是细胞因子信号传导通路JAK/STAT(janus kinase/signal transduction and activators of transcription)的一个负性调控分子家族。近年来很多研究表明,SOCS在癌症、糖尿病、自身免疫性疾病和炎症等多种疾病的发生发展过程中及在机体免疫调节中发挥着重要的作用,该蛋折分子家族的成员可能会成为重大疾病治疗的一种新候选基因。
文摘目的探讨细胞因子信号传导抑制因子-1(Suppressors of cytokine signaling-1,SOCS1)基因腺病毒转染未成熟的树突细胞(Dendritic cells,DC),并免疫受体小鼠,通过小鼠肝移植模型,观察免疫耐受的效果并探讨可能的机制。方法构建SOCS1腺病毒并PCR鉴定,感染体外分离、培养的小鼠骨髓树突细胞,Westernblot法检测SOCS1表达。以未转染组及空白转染组为对照,免疫肝移植小鼠模型,检测受体小鼠脾脏淋巴细胞混合淋巴细胞反应(MLR),检测血清IL-2和IFN-γ水平及肝脏组织IL-2和IFN-γmRNA表达。结果成功构建并鉴定转染腺病毒,感染DC后,SOCS1蛋白表达水平较未转染组及空白转染组显著增高(P<0.05)。SOCS1基因修饰的DC免疫肝移植模型小鼠后,受体小鼠脾脏淋巴细胞MLR较未转染组及空白对照免疫受体组小鼠显著下降(P<0.05);SOCS1-DC免疫受体小鼠血清IL-2和IFN-γ水平及肝脏mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。结论通过腺病毒转染使SOCS1在DC中过度表达,用以体内免疫同种异体肝移植受体小鼠,能有效减轻同种移植排斥反应,并在一定程度上诱导形成免疫耐受。
文摘目的:揭示miR-455-5p对呼吸道合胞病毒(RSV)感染致气道上皮细胞炎症反应的作用机制。方法:qRT-PCR检测30例健康体检儿童(健康组)、RSV感染轻症组(n=41)和重症组(n=31)患儿血清miR-455-5p水平。将16HBE细胞分为Control组、NC-agomir组、miR-455-5p-agomir组、NC-antagomir组、miR-455-5p-antagomir组。使用Lipofectamine 3000转染16HBE细胞后培养48 h后,分为Blank组、NC组(转染了NC-agomir的细胞)、RSV+NC-agomir组、RSV+miR-455-5p-agomir组,用RSV病毒液感染RSV+NC-agomir组和RSV+miR-455-5p-agomir组16HBE细胞,Blank组和NC组16HBE细胞正常培养。用CCK-8法和EdU法检测细胞增殖、TUNEL法检测细胞凋亡、ELISA法检测上清液中TNF-α、IL-6、IL-8水平,qRT-PCR检测miR-455-5p和SOCS3的m RNA水平,Western blot检测SOCS3、IFN-α、STAT1、STAT2、p-STAT1和p-STAT2的蛋白水平。结果:与健康组相比,轻症组和重症组患儿的血清miR-455-5p水平降低(P<0.05)。与轻症组相比,重症组的血清miR-455-5p水平降低(P<0.05)。与Control组和NC-agomir组相比,miR-455-5p-agomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率升高(P<0.05),TUNEL阳性率降低(P<0.05),上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平降低(P<0.05),SOCS3 m RNA和蛋白水平降低(P<0.05),IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平升高(P<0.05)。与Control组和NC-antagomir组相比,miR-455-5p-antagomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率降低(P<0.05),TUNEL阳性率升高(P<0.05),上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平升高(P<0.05),SOCS3 m RNA和蛋白水平升高(P<0.05),IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平降低(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,RSV+NC-agomir组16HBE细胞的miR-455-5p水平、相对细胞活力和EdU阳性率降低(P<0.05),TUNEL阳性率升高(P<0.05),上清液中的TNF-α、IL-6和IL-8水平升高(P<0.05),SOCS3 m RNA和蛋白水平升高(P<0.05),IFN-α蛋白、STAT1和STAT2磷酸化水平降低(P<0.05)。与RSV+NC-agomir组相比,RSV+miR-455-5p-
