目的研究丁酸梭菌(Clostridium butyricum,C.butyricum)与细胞周期蛋白激酶2(Cdk2)对结直肠癌细胞迁移的作用,探讨其作用机制。方法以结直肠癌细胞DLD-1作为研究载体,运用蛋白印迹法(Western blot)、MTT、定量聚合酶链反应(qPCR)、Trans...目的研究丁酸梭菌(Clostridium butyricum,C.butyricum)与细胞周期蛋白激酶2(Cdk2)对结直肠癌细胞迁移的作用,探讨其作用机制。方法以结直肠癌细胞DLD-1作为研究载体,运用蛋白印迹法(Western blot)、MTT、定量聚合酶链反应(qPCR)、Transwell和划痕实验等研究C.butyricum和Cdk2对结直肠癌形成的影响。结果 Western blot和qPCR结果显示,癌组织Cdk2阳性表达率明显高于癌旁组织(t=8.271,P<0.01)。qPCR结果表明C.butyricum在结直肠癌患者粪便中的丰度明显低于正常人群(t=6.903,P<0.05)。MTT、Transwell和划痕实验表明,C.butyricum培养上清作用的结直肠癌细胞生长速度明显低于对照组(MTT:96 h t=4.356,P<0.05;120 h t=6.025,P<0.05。Transwell:C.butyricum t=3.794,P<0.05;Cdk2 knockdown t=5.086,P<0.01;丁酸梭菌+Cdk2 knockdown t=4.815,P<0.01。划痕:24 h t=4.356,P<0.01;48 h t=6.025,P<0.01),且C.butyricum通过Cdk2抑制了结直肠癌细胞增殖与迁移能力。Western blot结果显示C.butyricum抑制Cdk2的表达,且与Cdk2协同作用调控Wnt/β-catenin信号通路。结论 C.butyricum通过抑制Cdk2经Wnt/β-catenin信号通路调控结直肠癌细胞的增殖和迁移。展开更多
文摘目的研究丁酸梭菌(Clostridium butyricum,C.butyricum)与细胞周期蛋白激酶2(Cdk2)对结直肠癌细胞迁移的作用,探讨其作用机制。方法以结直肠癌细胞DLD-1作为研究载体,运用蛋白印迹法(Western blot)、MTT、定量聚合酶链反应(qPCR)、Transwell和划痕实验等研究C.butyricum和Cdk2对结直肠癌形成的影响。结果 Western blot和qPCR结果显示,癌组织Cdk2阳性表达率明显高于癌旁组织(t=8.271,P<0.01)。qPCR结果表明C.butyricum在结直肠癌患者粪便中的丰度明显低于正常人群(t=6.903,P<0.05)。MTT、Transwell和划痕实验表明,C.butyricum培养上清作用的结直肠癌细胞生长速度明显低于对照组(MTT:96 h t=4.356,P<0.05;120 h t=6.025,P<0.05。Transwell:C.butyricum t=3.794,P<0.05;Cdk2 knockdown t=5.086,P<0.01;丁酸梭菌+Cdk2 knockdown t=4.815,P<0.01。划痕:24 h t=4.356,P<0.01;48 h t=6.025,P<0.01),且C.butyricum通过Cdk2抑制了结直肠癌细胞增殖与迁移能力。Western blot结果显示C.butyricum抑制Cdk2的表达,且与Cdk2协同作用调控Wnt/β-catenin信号通路。结论 C.butyricum通过抑制Cdk2经Wnt/β-catenin信号通路调控结直肠癌细胞的增殖和迁移。
