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急性淋巴细胞白血病患儿亚甲基四氢叶酸还原酶多态性与氨甲蝶呤毒副反应的研究 被引量:26
1
作者 余慧 金润铭 +1 位作者 白燕 林雯 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期302-303,共2页
关键词 氨甲蝶呤 白血病患儿 急性淋巴细胞白血病(ALL) 毒副反应 酶多态性 亚甲基四氢叶酸还原酶 髓外白血病 细胞活性 MTX 敏感性 维持治疗 常用药物 代谢药物 叶酸代谢 耐受性 抗叶酸 关键酶 机体
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抗微生物药物的细胞内活性
2
作者 徐伟 贾志敏 吴曙光 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2000年第2期71-74,共4页
阐述了影响病原体、抗微生物药物进入细胞的因素,具有细胞内活性的抗微生物药物分布与临床疗效以及抗微生物药物的临床应用,从而为临床医生用药提供指导。
关键词 细胞活性 抗生素
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丹参对血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞表达TGF-β_1,ROS和PAI-1的影响 被引量:38
3
作者 袁军 鲁艳芳 +1 位作者 陈陶后 曾祥法 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第22期2400-2404,共5页
目的:探讨丹参对血管紧张素Ⅱ致肾小球硬化的干预作用。方法:采用血管紧张素Ⅱ刺激系膜细胞增殖,同时加入不同剂量的丹参注射液分别对系膜细胞作用24 h。观察系膜细胞纤溶酶原激活剂抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)m... 目的:探讨丹参对血管紧张素Ⅱ致肾小球硬化的干预作用。方法:采用血管紧张素Ⅱ刺激系膜细胞增殖,同时加入不同剂量的丹参注射液分别对系膜细胞作用24 h。观察系膜细胞纤溶酶原激活剂抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)mRNA、培养上清液中的PAI-1蛋白和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的含量,以及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的变化。结果:丹参明显抑制住了由血管紧张素Ⅱ刺激大鼠肾脏系膜细胞而产生的PAI-1 mRNA以及蛋白表达的升高,且其抑制作用的强弱与丹参注射液的剂量密切相关。丹参还明显下调了因血管紧张素Ⅱ刺激后TGF-β1的表达增加以及细胞内ROS水平的升高。结论:丹参下调血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞PAI-1表达的增加,以及抑制TGF-β1的分泌增加与细胞内ROS水平的增高,从而发挥抗肾小球硬化的作用。 展开更多
关键词 丹参 纤溶酶原激活剂抑制物 转化生长因子Β1 细胞活性
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花青素抗氧化损伤及细胞凋亡的作用研究 被引量:21
4
作者 余晶 鲍中英 +2 位作者 徐玉敏 Vladimir Khaoustov Boris Yoffe 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2009年第1期24-26,31,共4页
目的:探索花青素对H2O2引起的Huh7细胞氧化应激、细胞凋亡的作用及其机制。方法:对H2O2和花青素干预培养的Huh7细胞,应用MTT法检测细胞活力,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量,免疫印迹测定Akt、磷酸化激活的c-Jun蛋白水平。... 目的:探索花青素对H2O2引起的Huh7细胞氧化应激、细胞凋亡的作用及其机制。方法:对H2O2和花青素干预培养的Huh7细胞,应用MTT法检测细胞活力,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量,免疫印迹测定Akt、磷酸化激活的c-Jun蛋白水平。结果:H2O20.8mmol/L孵育1小时可显著诱导Huh7细胞损伤,细胞活力下降到(49.27±3.2)%,ROS生成量是未处理细胞的3.56倍。细胞经花青素50μmol/L与H2O2共孵育后,细胞存活率提高到(81.2±2.34)%;花青素能显著抑制H2O2引起的Huh7细胞ROS生成,ROS生成下降74%(P<0.01)。花青素抑制H2O2引起Huh7细胞死亡和ROS生成的效应随剂量增加而加强。花青素抑制H2O2激发Huh7细胞磷酸化c-Jun表达,提高细胞Akt水平。结论:花青素抑制H2O2引起的Huh7细胞氧化应激损伤所导致的细胞死亡,其作用机制在于减少细胞内活性氧生成,抑制H2O2激活磷酸化c-Jun,提高细胞Akt水平。 展开更多
关键词 花青素 HUH7细胞 细胞活性 磷酸化c-Jun
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氧化应激与糖尿病血管并发症 被引量:16
5
作者 俞璐 罗敏 《国外医学(内分泌学分册)》 2005年第6期396-398,共3页
糖尿病血管并发症是糖尿病患者致残、致死的首要原因。高血糖引起细胞内活性氧簇生成过多是糖尿病血管损伤机制中的关键步骤。同时由于诱导型一氧化氮合酶表达增加,一氧化氮合成增多,两者产生的强氧化剂过氧亚硝酸阴离子引起一系列氧化... 糖尿病血管并发症是糖尿病患者致残、致死的首要原因。高血糖引起细胞内活性氧簇生成过多是糖尿病血管损伤机制中的关键步骤。同时由于诱导型一氧化氮合酶表达增加,一氧化氮合成增多,两者产生的强氧化剂过氧亚硝酸阴离子引起一系列氧化应激反应,导致血管损伤。基于这一理论,有望开发针对氧化应激的新药,从根本上防治糖尿病血管并发症。 展开更多
关键词 糖尿病 氧化应激 糖尿病血管病变 PARP 糖尿病血管并发症 氧化应激反应 过氧亚硝酸阴离子 诱导型一氧化氮 细胞活性 一氧化氮合成 糖尿病患者 损伤机制 强氧化剂
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细胞内活性氧及其DNA损伤产物在启动细胞癌变中的作用 被引量:12
6
作者 朱茂祥 杨陟华 +2 位作者 龚诒芬 陆颖 曹珍山 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1024-1028,共5页
目的:研究辐射(60Coγ射线照射)和化学致癌物4-甲基亚硝胺-1-(3-吡啶基)-1-丁酮4methylnitrosamino13pyridyl1butanone,NNK诱发细胞(BEP2D)产生的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)对DNA氧化损伤及其在启动细胞癌变中的作用。方法:细胞... 目的:研究辐射(60Coγ射线照射)和化学致癌物4-甲基亚硝胺-1-(3-吡啶基)-1-丁酮4methylnitrosamino13pyridyl1butanone,NNK诱发细胞(BEP2D)产生的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)对DNA氧化损伤及其在启动细胞癌变中的作用。方法:细胞内H2O2和O2分别用2′7′-二氯荧光黄双乙酸盐DCFHDA和氢化乙锭HE标记,用流式细胞法测定荧光产物2′7′-二氯荧光黄DCF和溴乙锭EB荧光强度;8-羟基脱氧鸟嘌呤(8hydroxydeoxygunosine,OH8dG)含量用高压液相色谱结合电化学方法HPLCECD测定;用脂质体包埋法将目标DNA(来自NNK处理和60Coγ射线照射的BEP2D细胞)转染到受体细胞(C3H10T1/2)中,并用G418筛选阳性克隆细胞;用半固体琼脂试验检测细胞转化能力;用裸鼠成瘤试验鉴定细胞恶性转化。结果:NNK和60Coγ射线可诱发BEP2D细胞内ROS水平及OH8dG含量显著增高,并显示出良好的剂量效应关系;NNK处理和60Coγ射线照射的BEP2D细胞DNA分别转染到C3H10T1/2受体细胞后,细胞出现转化特性,裸鼠成瘤试验为阳性。结论:辐射和化学致癌物诱发细胞产生的ROS增高及其对DNA的氧化损伤可能启动了细胞癌变。 展开更多
关键词 化学致癌物 辐射致癌 DNA损伤 启动细胞 细胞活性
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黑果腺肋花楸花色苷对人皮肤成纤维细胞紫外辐射损伤的保护作用 被引量:16
7
作者 张永祥 国石磊 +2 位作者 彭利沙 朱凤妹 李军 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1088-1092,共5页
为了探讨黑果腺肋花楸花色苷对紫外辐射所致人皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用,将体外培养的人皮肤成纤维细胞分为对照组、辐射组和辐射给药组。采用MTT法检测不同浓度花色苷添加量对细胞增殖的保护作用,以选择最优添加浓度。采用化... 为了探讨黑果腺肋花楸花色苷对紫外辐射所致人皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用,将体外培养的人皮肤成纤维细胞分为对照组、辐射组和辐射给药组。采用MTT法检测不同浓度花色苷添加量对细胞增殖的保护作用,以选择最优添加浓度。采用化学荧光法检测细胞活性氧(ROS)含量,ELISA法检测细胞MMP-1分泌水平。结果表明:UVA辐照剂量为10 J/cm2条件下,与辐射组相比,MTT法显示花色苷添加组浓度为125μg/m L对损伤细胞增殖保护作用有极显著的提高(P<0.01),同时,125μg/m L花色苷添加组能够显著降低辐射损伤后细胞ROS含量以及MMP-1分泌水平(P<0.01)。由此可见,适宜浓度的黑果腺肋花楸花色苷能够降低细胞ROS含量及MMP-1分泌水平,从而对辐射损的细胞起到一定的保护作用。 展开更多
关键词 黑果腺肋花楸花色苷 皮肤成纤维细胞 辐射损伤 细胞活性
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木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用 被引量:11
8
作者 牟艳玲 胡志力 +3 位作者 周玲 张强 王晓静 解砚英 《山东中医药大学学报》 2009年第1期63-65,共3页
目的:观察木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的作用及其机制。方法:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷预作用12 h后,采用H2O2诱导培养乳鼠心肌细胞氧化损伤模型,测定细胞存活率、细胞内超氧化物歧化酶(SOD... 目的:观察木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对过氧化氢(H2O2)诱导乳鼠心肌细胞氧化损伤的作用及其机制。方法:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷预作用12 h后,采用H2O2诱导培养乳鼠心肌细胞氧化损伤模型,测定细胞存活率、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、细胞内活性氧(ROS)水平及细胞内钙(Ca2+)超载的变化。结果:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷能明显提高H2O2损伤细胞存活率,提高细胞内SOD活性,降低胞内MDA和ROS生成量,同时使细胞内钙含量降低。结论:木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷对H2O2氧化损伤心肌细胞具有明显的保护作用,机制可能与其抑制脂质过氧化、抑制细胞内钙超载有关。 展开更多
关键词 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 心肌细胞 H2O2 细胞 细胞活性 乳鼠
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6-姜酚诱导白血病细胞凋亡中细胞内活性氧及线粒体跨膜电位的改变 被引量:8
9
作者 曾慧兰 韩新爱 +7 位作者 古晨 朱海扬 黄雪松 古建泉 钟启 刘冠杰 明伟杰 蔡昕妮 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期584-587,共4页
目的:研究细胞内活性氧(ROS)及线粒体跨膜电位(ΔΨm)在6-姜酚诱导慢性粒细胞白血病K562细胞、人急性T淋巴细胞白血病MOLT4细胞凋亡中的变化,探讨线粒体途径在白血病信号转导中的作用。方法:用不同浓度6-姜酚作用K562细胞和MOLT4细胞,以... 目的:研究细胞内活性氧(ROS)及线粒体跨膜电位(ΔΨm)在6-姜酚诱导慢性粒细胞白血病K562细胞、人急性T淋巴细胞白血病MOLT4细胞凋亡中的变化,探讨线粒体途径在白血病信号转导中的作用。方法:用不同浓度6-姜酚作用K562细胞和MOLT4细胞,以2,7-二氯荧光素(2,7-d ichloro fluoresce inc iactate,DCFH-DA)为细胞内活性氧探针,罗丹明-123为反映线粒体膜电位荧光探针,流式细胞仪检测ROS水平和线粒体膜电位的变化。结果:不同浓度6-姜酚作用K562细胞后,ROS水平显著高于对照组(P<0.01),ΔΨm显著低于对照组(P<0.01)。姜酚作用MOLT4细胞后,ROS显著高于对照组(P<0.05)。结论:6-姜酚能诱导白血病细胞株K562及MOLT4细胞ROS水平升高,降低细胞ΔΨm,通过线粒体途径介导白血病细胞凋亡。 展开更多
关键词 6-姜酚 K562细胞 MOLT4细胞 细胞活性 线粒体跨膜电位 凋亡
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白藜芦醇对PM2.5诱导的内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用 被引量:9
10
作者 刘方芳 金瑶 +4 位作者 李明 吴彤 王芳 邝枣园 李岩 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期273-277,共5页
目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)对细颗粒物PM2.5诱导人血管内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用。方法体外培养血管内皮细胞株EA.hy926,分为对照组、PM2.5组(采用100μg·mL^(-1)PM2.5处理)和不同浓度RES组(采用终浓度为5,10,20μ... 目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)对细颗粒物PM2.5诱导人血管内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用。方法体外培养血管内皮细胞株EA.hy926,分为对照组、PM2.5组(采用100μg·mL^(-1)PM2.5处理)和不同浓度RES组(采用终浓度为5,10,20μmol·L^(-1)的RES预处理2h后再给予100μg·mL^(-1)的PM2.5)。分别采用CCK-8法检测各组细胞活性;荧光染色法检测细胞内活性氧(Reactive oxidative species,ROS)水平;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western Blot法检测凋亡相关蛋白Cytochrome C和Caspase3的表达。结果与对照组比较,PM2.5对EA.hy926细胞的活性具有明显的抑制作用(P<0.01),可诱导细胞内ROS生成增多、细胞凋亡(P<0.01)并促使凋亡相关蛋白Cytochrome C表达增高(P<0.01)和Caspase3活化(P<0.05);与PM2.5组比较,不同浓度RES预处理能显著抑制PM2.5诱导的ROS生成及细胞凋亡(P<0.01),同时可见Cytochrome C表达下调(P<0.05,P<0.01)和Caspase3活化减少(P<0.05,P<0.01)。结论白藜芦醇可以降低PM2.5诱导的血管内皮细胞氧化应激和凋亡,减轻PM2.5对血管内皮细胞的毒性,对其具有保护作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 PM2.5 血管细胞 氧化应激 凋亡 细胞活性
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硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 被引量:8
11
作者 任重 赵战芝 +4 位作者 彭湘萍 谢巍 刘艳文 索荣 姜志胜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期891-896,共6页
目的探讨硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及有关机制。方法人脐静脉内皮细胞分别经不同浓度(25、50、100、200μmol/L)和不同时间(6、12、24 h)硫氢化钠预孵育24 h后加入100 mg/L氧化型低密度脂蛋白处理24 ... 目的探讨硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及有关机制。方法人脐静脉内皮细胞分别经不同浓度(25、50、100、200μmol/L)和不同时间(6、12、24 h)硫氢化钠预孵育24 h后加入100 mg/L氧化型低密度脂蛋白处理24 h,Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡,罗丹明123染色检测细胞线粒体膜电位变化,双氢罗丹明123染色检测细胞内活性氧的含量变化。结果硫氢化钠预处理能以时间和浓度依赖性的方式抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡(均P<0.01),硫氢化钠或N-乙酰半胱氨酸预先处理能显著阻断氧化型低密度脂蛋白引起的人脐静脉内皮细胞线粒体膜电位降低、活性氧生成增多(均P<0.05)。结论硫化氢能显著抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,其机制与减少细胞线粒体膜电位及降低活性氧生成有关。 展开更多
关键词 硫化氢 氧化型低密度脂蛋白 N-乙酰半胱氨酸 人脐静脉细胞 凋亡 细胞线粒体膜电位 细胞活性
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人参三七川芎提取物延缓血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞衰老机制的研究 被引量:8
12
作者 杨静 雷燕 +2 位作者 方素萍 崔巍 陈可冀 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期524-528,共5页
目的探讨人参三七川芎提取物对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响。方法体外培养的HUVECs加入终浓度为10-6mol/LAngⅡ诱导细胞衰老,造成内皮细胞衰老模型。... 目的探讨人参三七川芎提取物对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响。方法体外培养的HUVECs加入终浓度为10-6mol/LAngⅡ诱导细胞衰老,造成内皮细胞衰老模型。细胞分为AngⅡ衰老模型组、空白对照组、人参三七川芎高剂量组、人参三七川芎低剂量组和缬沙坦组,采用SA-β-半乳糖染色法观察细胞衰老改变,流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量,硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot检测各组细胞AngⅡ1型和2型受体(AT1R和AT2R)、NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达。结果AngⅡ衰老模型组与空白对照组比较,β-gal染色阳性细胞数明显增多,细胞停滞在G0-G1期,激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强,培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少,p47phox蛋白表达明显上调,AT1R表达较空白对照组上调。给予高、低剂量中药处理后改善了细胞的衰老状态,β-gal染色阳性细胞数减少,G0-G1期细胞减少,G2-M期细胞增加,ROS荧光强度减弱,抗超氧阴离子、NO含量较AngⅡ衰老模型组增加,p47phox蛋白表达下调,AT1R表达较AngⅡ衰老模型组下调。结论人参三七川芎提取物能够延缓AngⅡ诱导的HUVECs衰老,可通过AT1R下调NAD(P)H氧化酶p47phox表达,进而使ROS产生减少,可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一。 展开更多
关键词 人参三七川芎提取物 血管紧张素Ⅱ NAD(P)H氧化酶 细胞 衰老 细胞活性
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细胞内活性氧在甲基乙二醛促人腹膜间皮细胞分泌血管内皮生长因子中的作用 被引量:6
13
作者 洪富源 孙芳 +3 位作者 刘军 姚建 黄一新 唐知还 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2005年第4期329-332,376,共5页
目的:观察葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MGO)对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法:分别用不同浓度的MGO及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC)作用于细胞,用RT-PCR和ELISA方法测定HPMC... 目的:观察葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MGO)对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法:分别用不同浓度的MGO及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC)作用于细胞,用RT-PCR和ELISA方法测定HPMC中VEGF的表达;再以氧化敏感的荧光染料2、7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内ROS强度。结果:MGO能使细胞内ROS水平明显升高,呈浓度依赖效应;MGO同时以时效和量效方式促进HPMC中VEGF的表达;而NAC能够明显抑制MGO导致的细胞内ROS升高,同时抑制HPMC中VEGF的分泌。结论:MGO可能部分通过诱导细胞内ROS,促进HPMC表达VEGF,从而引起腹膜新生血管的增加,最终导致腹膜失超滤现象。 展开更多
关键词 人腹膜间皮细胞 活性 血管皮生长因子 腹膜透析 分泌血管皮生长因子 细胞活性 甲基乙二醛 血管皮生长因子(VEGF) 细胞ROS ELISA方法
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活性氧在4-HPR诱导膀胱癌细胞T24凋亡中的作用 被引量:4
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作者 刘佳 李爱萍 +2 位作者 李春平 张正东 周建伟 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期191-194,i002,共5页
目的研究4HPR诱导的膀胱癌细胞凋亡,探讨DNA氧化损伤与修复在其中的作用。方法以4HPR处理T24细胞后,检测其生长抑制情况,用荧光分光光度计检测细胞内活性氧(ROS)含量,用流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况,用Westernblot法检测... 目的研究4HPR诱导的膀胱癌细胞凋亡,探讨DNA氧化损伤与修复在其中的作用。方法以4HPR处理T24细胞后,检测其生长抑制情况,用荧光分光光度计检测细胞内活性氧(ROS)含量,用流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况,用Westernblot法检测DNA修复蛋白XRCC1的表达。结果4HPR能诱导细胞发生凋亡,2.5、5.0、10.0μmolL4HPR引起的凋亡率分别达到1.8%、4.0%和10.5%,在此过程中伴随着细胞内ROS水平升高(最高达到3倍),并使DNA修复蛋白XRCC1的表达下降,使caspase3激活。抗氧化物质维生素C能有效地抑制4HPR引起的ROS升高,并能部分抑制其引起的细胞生长抑制、凋亡及XRCC1蛋白表达的下降。结论ROS的生成并造成DNA损伤可能是4HPR诱导膀胱癌细胞凋亡的主要机制。 展开更多
关键词 4-HPR 膀胱癌细胞 CASPASE-3激活 DNA修复蛋白 XRCC1 氧化损伤与修复 荧光分光光度计 Western 细胞凋亡 细胞活性 凝胶电泳检测 细胞ROS 细胞生长抑制 T24细胞 流式细胞 BLOT法 抗氧化物质 DNA损伤 细胞发生
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汉防己甲素抑制肝癌细胞增生的作用 被引量:6
15
作者 荆绪斌 李涛 +3 位作者 杨绮华 郭光华 胡辉 陈素钻 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第8期1223-1226,共4页
目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TTD)对肝癌细胞的作用及其机制。方法:采用MTT比色法观察了TTD对肝癌细胞增生的影响;采用流式细胞仪法观察了TTD对肝癌细胞内活性氧的影响;采用琼脂凝胶电泳法观察了DNA片断化的梯形条带。结果:10 and... 目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TTD)对肝癌细胞的作用及其机制。方法:采用MTT比色法观察了TTD对肝癌细胞增生的影响;采用流式细胞仪法观察了TTD对肝癌细胞内活性氧的影响;采用琼脂凝胶电泳法观察了DNA片断化的梯形条带。结果:10 and 20μmol/L TTD作用于肝癌细胞系24,48,72h后其增生率分别为90.1±1.0% and 77.5±2.0%,70.2±2.9% and 56.6±1.6%,61.6±2.0% and 47.2±1.9%(F=40.025,P<0.001);0、10和20μmol/L TTD作用于肝癌细胞系2h后O_2^-为35%、36.6%、63.2%;H_2O_2为24.5%、40.5%、84.6%。48h后20μmol/L TTD组肝癌细胞出现典型的凋亡表现。结论:TTD能够通过诱导肝癌细胞内活性氧的产生,而引起细胞凋亡,呈明显的剂量依赖性。 展开更多
关键词 汉防己甲素 细胞增生 细胞活性 原发性肝痛 中医药治疗
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金雀异黄素诱导结肠癌HCT-116细胞凋亡及其机制研究 被引量:7
16
作者 吴晶 徐加英 +1 位作者 韩淑芬 秦立强 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期1-5,共5页
目的探讨金雀异黄素对结肠癌细胞HCT-116的细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法不同浓度金雀异黄素处理HCT-116细胞,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡、细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位的变化,并用透... 目的探讨金雀异黄素对结肠癌细胞HCT-116的细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法不同浓度金雀异黄素处理HCT-116细胞,MTT法测定细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡、细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位的变化,并用透射电镜观察细胞的超微结构。结果金雀异黄素呈剂量和时间依赖性地抑制细胞增殖。0~100μmol/L的金雀异黄素处理细胞24 h后引起G2/M期阻滞,凋亡峰Sub-G1所占细胞比例从(1.63±0.44)%增至(8.33±1.51)%(P<0.01),早期凋亡细胞从(1.93±0.32)%增至(7.25±0.86)%(P<0.01)。透射电镜下细胞出现凋亡特征性改变。100μmol/L金雀异黄素处理后细胞内ROS水平在2 h时增至处理前的1.81倍,(15.53±1.55)%vs(8.57±0.35)%,P<0.01,细胞线粒体膜电位在1 h时迅速下降了87.8%,(0.82±0.02)%vs(6.70±0.21)%,P<0.01。结论金雀异黄素抑制结肠癌细胞株HCT-116的细胞增殖,引起G2/M期细胞阻滞并促进细胞凋亡,可能与升高细胞内ROS水平,降低线粒体膜电位有关。 展开更多
关键词 金雀异黄素 结肠癌 细胞凋亡 细胞活性 线粒体膜电位
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鱼藤酮诱发PC12细胞内质网应激的钙机制和超微结构的变化 被引量:3
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作者 赵黔鲁 柴锡庆 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期363-366,共4页
目的探讨鱼藤酮诱发内质网(endoplasmicreticulum,ER)应激的钙离子机制及其超微结构的变化。方法应用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测鱼藤酮对体外培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞株活性氧的影响,应用激光扫描共聚焦显微镜观察... 目的探讨鱼藤酮诱发内质网(endoplasmicreticulum,ER)应激的钙离子机制及其超微结构的变化。方法应用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测鱼藤酮对体外培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞株活性氧的影响,应用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子变化及透射电镜观察超微结构。结果0·1、1·0、2·0和3·0μmol/L浓度鱼藤酮诱导细胞内活性氧的生成,荧光指数(FI)值分别为1·55±0·17、2·16±0·10、1·77±0·20和1·41±0·12,相同浓度鱼藤酮所致细胞内钙离子荧光强度变换值分别为0·6029±0·0685、1·0902±0·1127、0·7479±0·0820和0·5614±0·0870,分别与对照组比较差异有统计学意义(P<0·01)。当鱼藤酮浓度大于1·0μmol/L时,其作用呈剂量依赖性递减。预先用超氧化物歧化酶(SOD)1200U/ml干预24h,可有效减弱1·0μmol/L鱼藤酮引发的细胞内钙离子升高(P<0·01)。电镜观察到滑面内质网大量增生,粗面内质网轻、中度扩张及脱颗粒。结论鱼藤酮可通过活性氧途径耗竭ER腔钙离子,诱发ER应激,并引起其超微结构的相应变化。 展开更多
关键词 超微结构 鱼藤酮 PC12细胞 质网应激 诱发 CYTOMETRY 肾上腺嗜铬细胞 细胞钙离子变化 mol/L 钙离子荧光强度 超氧化物歧化酶 透射电镜观察 细胞活性 钙离子机制 流式细胞 剂量依赖性 钙离子升高 滑面质网
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尼克酰胺转甲基酶通过介导细胞内活性氧影响肝癌细胞铁死亡的作用研究
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作者 王锦春 戴永青 +3 位作者 王亚清 陈珏 刘祖平 李烨佳 《中国现代医生》 2024年第23期30-34,共5页
目的探究尼克酰胺转甲基酶介导细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)在肝癌细胞铁死亡中的影响及其机制。方法选取2019年3月至2020年2月于笔者医院接受治疗的40例原发性肝细胞癌患者作研究对象,分别取患者的癌旁组织标本及肝癌组... 目的探究尼克酰胺转甲基酶介导细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)在肝癌细胞铁死亡中的影响及其机制。方法选取2019年3月至2020年2月于笔者医院接受治疗的40例原发性肝细胞癌患者作研究对象,分别取患者的癌旁组织标本及肝癌组织标本。使用串联液相质谱仪检测细胞中甲基尼克酰胺(methyl nicotinamid,MNA)表达,使用流式细胞仪检测ROS及过氧化脂质的平均荧光强度,采用蛋白质印迹法(Western blot)法检测人肝癌细胞(SK-Hep-1、Hep3B)细胞表达的情况变化。采用免疫组化法检测癌旁组织、肝癌组织中尼克酰胺转甲基酶(nicotinamide N-methyltransferase,NNMT)及ROS水平,采用CCK-8法检测不同铁浓度细胞的生存活性。结果肝癌组织组中的MNA水平较癌旁组织组有所提升差异有统计学意义(P<0.05)。与癌旁组织组比较,肝癌组织组的ROS平均荧光强度表达升高,过氧化脂质平均的荧光强度表达降低,SK-Hep-1、Hep3B细胞表达量上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,NNMT组2、10、20及25μmol/L的细胞生存活性水平升高(P<0.05)。与NNMT组比较,铁抑制组不同铁浓度(2μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、25μmol/L)的细胞生存活性表达下降差异有统计学意义(P<0.05)。结论经尼克酰胺转甲基酶介导可引导产生ROS及能量紊乱,提高了肿瘤细胞的死亡率。 展开更多
关键词 肝癌 尼克酰胺转甲基酶 细胞活性 铁死亡
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三七总皂苷对毒胡萝卜素引起的肝细胞内质网应激的作用 被引量:5
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作者 余晶 邱华 +3 位作者 龙富立 石清兰 陈月桥 毛德文 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第7期1572-1574,共3页
目的:探索三七总皂苷对毒胡萝卜素引起的huh 7细胞内质网应激的作用及其机制。方法:对毒胡萝卜素和三七总皂苷干预培养的肝细胞,应用MTT法检测细胞活力,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量。免疫印迹测定Akt,PCNA,磷酸化应激... 目的:探索三七总皂苷对毒胡萝卜素引起的huh 7细胞内质网应激的作用及其机制。方法:对毒胡萝卜素和三七总皂苷干预培养的肝细胞,应用MTT法检测细胞活力,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量。免疫印迹测定Akt,PCNA,磷酸化应激激活的c-Jun蛋白水平。结果:毒胡萝卜素0.8 mmol.L-1孵育1 h可诱导显著huh 7细胞损伤,细胞活力下降到(40±3.2)%,ROS生成量比未处理细胞多5.4倍。细胞经三七总皂苷150μmol.L-1与毒胡萝卜素共孵育后,细胞存活率提高到(94.5±9.84)%;三七总皂苷能显著抑制毒胡萝卜素引起的huh 7细胞ROS生成,ROS生成下降60%(P<0.01)。三七总皂苷抑制毒胡萝卜素引起huh 7细胞死亡和ROS生成随剂量增加抑制作用加强。三七总皂苷抑制毒胡萝卜素激发huh 7细胞磷酸化c-Jun表达,提高细胞Akt,PCNA水平。结论:三七总皂苷抑制毒胡萝卜素引起的肝细胞应激损伤而导致的细胞死亡,其作用机制是通过减少细胞内活性氧生成,抑制毒胡萝卜素激活磷酸化c-Jun,提高细胞Akt,PCNA水平,降低了内质网应激。 展开更多
关键词 三七总皂苷 huh 7细胞 细胞活性 磷酸化c-Jun
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2-芳基-4-取代喹啉类化合物的抗真菌活性和作用机制研究
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作者 过忠杰 张蓉 +5 位作者 赵玫 张邵华 刘伟 李穆琼 姜茹 王胜正 《空军军医大学学报》 CAS 2023年第12期1164-1169,1176,共7页
目的开发新型抗真菌药物以解决深部真菌感染发病率和死亡率高、抗真菌药物出现耐药性的临床问题。方法采用抗真菌药敏实验对内部化合物库进行活性筛选,进一步通过微量液基稀释法考察阳性化合物的抗真菌谱;通过生长实验、时间杀菌曲线实... 目的开发新型抗真菌药物以解决深部真菌感染发病率和死亡率高、抗真菌药物出现耐药性的临床问题。方法采用抗真菌药敏实验对内部化合物库进行活性筛选,进一步通过微量液基稀释法考察阳性化合物的抗真菌谱;通过生长实验、时间杀菌曲线实验评价阳性化合物对真菌存活的影响;通过倒置显微镜观察化合物对真菌菌丝形成的影响;采用流式细胞仪检测化合物对真菌细胞内活性氧(ROS)生成、生物膜通透性和凋亡的影响。结果2芳基4取代喹啉类化合物J6抗真菌活性最优,对白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、新生隐球菌的最小抑菌浓度分别为18.9、18.9、37.8、37.8 mg/L。J6能明显抑制这4种真菌的生长,甚至对新生隐球菌表现杀菌作用。此外,J6还能抑制真菌菌丝的形成。作用机制研究显示,J6可增加真菌细胞膜通透性和细胞内ROS水平,诱导真菌细胞发生凋亡。结论2芳基4取代喹啉类化合物J6表现出较好的抗真菌活性,对其进一步结构优化和机制研究,有望发现新型的抗真菌药物。 展开更多
关键词 抗真菌活性 细胞活性 杀真菌活性
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