FGFR4基因沉默对肝癌细胞生物学行为影响机制分析 被引量：4

1

作者 王朝辉 辛永宁 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2018年第3期156-158,共3页

目的:研究FGFR4基因沉默对肝癌细胞生物学行为影响。方法:采用FGFR4表达较高的肝癌细胞株smmc-7721,采用慢病毒转染降低smmc-7721中FGFR4的m RNA和蛋白表达水平。设A组为未进行转染操作的正常细胞组,B组为FGFR4基因序列被打乱后重组的... 目的:研究FGFR4基因沉默对肝癌细胞生物学行为影响。方法:采用FGFR4表达较高的肝癌细胞株smmc-7721,采用慢病毒转染降低smmc-7721中FGFR4的m RNA和蛋白表达水平。设A组为未进行转染操作的正常细胞组,B组为FGFR4基因序列被打乱后重组的阴性对照组,C组为经慢病毒转染后的FGFR4基因沉默(si RNA)组。对比三组细胞的增殖能力、凋亡情况、侵袭能力以及相关效应蛋白的表达情况。结果:C组细胞增殖明显低于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);细胞穿出计数对比,A组(59.8±3.17)和B组(61.5±4.26)均显著高于C组(36.8±5.13),差异有统计学意义(P<0.05);C组细胞凋亡显著高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05);C组FLIP、PCNA、Bcl-x L、p ERK、p STAT3、Vimentin和FGFR4的蛋白表达均显著低于A组和B组,而Caspase-3和E-cadeherin的表达则显著高于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:FGFR4沉默后,肝癌细胞smmc-7721的增殖能力受到了显著的抑制,癌细胞侵袭性明显下降,肝癌细胞的凋亡率显著上升。 展开更多

关键词 FGFR4 慢病毒转染 肝癌 细胞侵袭性

下载PDF 职称材料

孕激素和脂联素分子受体3过表达对子宫内膜异位症间质细胞中ERK1/2表达及细胞侵袭性影响 被引量：4

2

作者 郝婷 商丽红 哈春芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期1187-1192,共6页

目的探讨过表达孕激素和脂联素分子受体3(progestin and adipoQ receptor,PAQR3)对子宫内膜异位症在位内膜间质细胞中细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)表达及细胞侵袭性的影响。方法收集宁... 目的探讨过表达孕激素和脂联素分子受体3(progestin and adipoQ receptor,PAQR3)对子宫内膜异位症在位内膜间质细胞中细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases 1/2,ERK1/2)表达及细胞侵袭性的影响。方法收集宁夏医科大学总医院妇科符合标准的子宫内膜异位症患者在位内膜10例,分离培养、鉴定原代子宫内膜异位症在位内膜间质细胞。成功构建合成过表达PAQR3重组慢病毒。测定最佳MOI后转染10例子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞,设立实验组(加入重组过表达PAQR3慢病毒)、阴性对照组(仅加入慢病毒载体)、空白对照组(不添加任何试剂、同等条件处理细胞)。培养72 h后通过Western blot比较慢病毒转染前后各组ERK1/2蛋白表达情况;通过Transwell比较转染后各组细胞侵袭性的变化。结果实验组ERK1/2蛋白较阴性对照组均呈下降趋势,差异具有统计学意义(P <0.05)。阴性对照组与空白对照组间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。实验组细胞侵袭性较阴性对照组明显受抑制,差异具有统计学意义(P <0.01)。阴性对照组与空白对照组间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论过表达PAQR3下调在位内膜间质细胞中ERK1/2蛋白表达,抑制细胞增殖活性,促进内异症发生发展。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 PAQR3 ERK1/2 细胞侵袭性

下载PDF 职称材料

骨桥蛋白基因沉默对子宫内膜异位症患者在位内膜细胞侵袭性的影响 被引量：2

3

作者 白治苗 刘玉锋 +1 位作者 郭玉琳 赵乐 《陕西医学杂志》 CAS 2022年第6期668-671,共4页

目的:探讨骨桥蛋白(OPN)基因沉默对子宫内膜异位症(EMS)患者在位内膜细胞侵袭性的影响。方法:采用原代细胞培养方法培养EMS患者在位内膜腺上皮细胞,分为干预组和未干预组。干预组采用OPN特异小RNA(siRNA)进行基因沉默。采用Western blot... 目的:探讨骨桥蛋白(OPN)基因沉默对子宫内膜异位症(EMS)患者在位内膜细胞侵袭性的影响。方法:采用原代细胞培养方法培养EMS患者在位内膜腺上皮细胞,分为干预组和未干预组。干预组采用OPN特异小RNA(siRNA)进行基因沉默。采用Western blot、RT-PCR检测细胞中OPN蛋白、mRNA表达情况。采用穿膜实验观察细胞的侵袭性变化。结果:与未干预组比较,干预组细胞OPN蛋白及mRNA表达明显下降(均P<0.05)。与未干预组比较,干预组细胞穿膜数减少(P<0.05)。结论:对EMS患者在位内膜腺上皮细胞进行OPN基因沉默后,细胞OPN蛋白、mRNA表达降低,侵袭性明显减弱,说明OPN与细胞侵袭性明显相关。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 骨桥蛋白 腺上皮细胞 细胞侵袭性 基因沉默

下载PDF 职称材料

p73对结肠癌细胞侵袭性的影响及其机制研究 被引量：2

4

作者 彭海霞 关明 +4 位作者 周林法 孙晨光 陈宇明 钱爱华 王赛玉 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期439-441,共3页

关键词 P73 结肠癌 细胞侵袭性 血管因子 调节作用

原文传递

组织激肽释放酶7高表达前列腺癌PC-3单克隆细胞株的构建及其侵袭性研究 被引量：2

5

作者 吕文鑫 莫曾南 杨小丽 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第5期527-530,共4页

目的:构建重组人组织激肽释放酶7(KLK7)表达载体,建立稳定过表达KLK7的前列腺癌细胞株PC-3,并研究其细胞侵袭性。方法:将扩增后的KLK7cDNA克隆到表达载体pcDNA3.1上;使用限制性内切酶酶切后,DNA测序验证。然后,通过脂质体法转染人前列... 目的:构建重组人组织激肽释放酶7(KLK7)表达载体,建立稳定过表达KLK7的前列腺癌细胞株PC-3,并研究其细胞侵袭性。方法:将扩增后的KLK7cDNA克隆到表达载体pcDNA3.1上;使用限制性内切酶酶切后,DNA测序验证。然后,通过脂质体法转染人前列腺癌细胞株PC-3;选用G418进行筛选,并扩大培养每个单克隆细胞,进而建立稳定转染后的KLK7单克隆细胞株PC-3;Western blot检测目的蛋白的表达。通过细胞侵袭性试验了解其细胞侵袭性。结果:①通过酶切鉴定、DNA测序分析并证明,成功构建pcDNA3.1-KLK7表达载体;②成功获得稳定过表达KLK7的前列腺癌单克隆细胞株PC-3;③Western blot结果显示:经过pcDNA3.1-KLK7转染后的细胞与未转染的细胞表达量比较有统计学差异(P<0.01);④细胞侵袭性试验结果显示:转染后的细胞侵袭性高于未转染的细胞。结论:成功的建立pcDNA3.1-KLK7表达载体及稳定过表达KLK7的前列腺癌PC-3单克隆细胞株,同时证明其细胞侵袭性,为研究KLK7在前列腺癌发生、发展中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 组织激肽释放酶7 前列腺癌 稳定细胞株 表达载体 细胞侵袭性

下载PDF 职称材料

RNAi抑制IKK/NF-κB信号通路对子宫内膜异位症腺上皮细胞中MMP-9的表达及细胞侵袭性的影响 被引量：2

6

作者 祁彩珍 李望舒 刘玉锋 《临床和实验医学杂志》 2018年第19期2046-2049,共4页

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默IκB激酶(IKK)/核因子κB(NF-κB)信号通路对子宫内膜异位症在位内膜腺上皮细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及细胞侵袭性的影响。方法根据基因数据库IKKα的c DNA序列,设计构建合成IKKαsiRNA转染10例... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默IκB激酶(IKK)/核因子κB(NF-κB)信号通路对子宫内膜异位症在位内膜腺上皮细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及细胞侵袭性的影响。方法根据基因数据库IKKα的c DNA序列,设计构建合成IKKαsiRNA转染10例EMs患者在位内膜原代腺上皮细胞,设立空白对照组(不加任何siRNA的等比例转染试剂)、阴性对照组(与IKKα同源性极低的无意义链siRNA)及实验组(IKKαsiRNA)。采用Realtime PCR、Western blot、Transwell等方法分别检测IKKαsiRNA转染前后NF-κB、MMP-9 mRNA和蛋白表达及腺上皮细胞侵袭性的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,实验组EMs腺上皮细胞中NF-кB、MMP-9蛋白及mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);IKKαsiRNA转染后EMs腺上皮细胞的细胞侵袭性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RNA干扰可抑制IKK/NF-κB信号通路进而显著降低细胞的侵袭,这种抑制作用可能是通过下调MMP-9的表达进而改变其侵袭作用诱导EMs的发生。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 IKK/NF - ΚB 通路 金属基质蛋白酶 9 细胞侵袭性

下载PDF 职称材料

慢病毒介导的FHIT基因过表达调控人肝癌细胞株生长实验研究 被引量：1

7

作者 戈佳云 杨筱燕 +6 位作者 李晓 吴雪松 施智甜 赵松凌 张文瀚 王琳 魏东 《昆明医科大学学报》 CAS 2016年第8期19-23,共5页

目的探讨过表达FHIT基因对FHIT基因含量不一致的人肝癌细胞株Hep G2、Hep3B和Huh7的增殖、凋亡和细胞侵袭以及细胞周期的影响,以期证实FHIT基因在肝癌细胞株的表达差异与肝癌细胞的分化有密切相关性.方法体外成功构建p LVX-IRES-FHIT慢... 目的探讨过表达FHIT基因对FHIT基因含量不一致的人肝癌细胞株Hep G2、Hep3B和Huh7的增殖、凋亡和细胞侵袭以及细胞周期的影响,以期证实FHIT基因在肝癌细胞株的表达差异与肝癌细胞的分化有密切相关性.方法体外成功构建p LVX-IRES-FHIT慢病毒重组载体转染FHIT基因含量不一致的肝癌细胞株Hep G2、Hep3B和Huh7,以MTT法、FCM法、Annexin V/PI双染色法、细胞周期检测技术和Transwell侵袭实验分析过表达的FHIT基因对三系肝癌细胞的增殖活性、凋亡、细胞侵袭性和细胞周期的影响机制及其生物学效应与时间梯度的关系.结果体外成功构建重组慢病毒载体p LVX-IRES-FHIT转染FHIT含量不一致的肝癌细胞株Hep G2、Hep3B和Huh7.(1)MTT法检测显示三系肝癌细胞株的p LVX-IRES-FHIT组细胞增殖活性明显降低,且随时间推移细胞增殖抑制效果更为显著,在48 h达到高峰,此后到72 h进入平台期,对照组细胞增殖抑制不明显(P<0.05).Annexin V/PI双染色法检测发现p LVX-IRES-FHIT组三系肝癌细胞48 h凋亡率较对照组差异无统计学意义(P>0.05).三系肝癌细胞中对p LVX-IRES-FHIT组转染致FHIT基因过表达抑制增殖活性大小的顺序依次是Hep G2>Hep3B>Huh7;(2)经过Transwell侵袭实验表明对FHIT基因过表达对三系肝癌细胞的p LVX-IRES-FHIT组侵袭性均有明显的抑制作用(P<0.05),而对照组未见明显差异(P>0.05).三系肝癌细胞的侵袭性顺序依次为Hep G2>Hep3B>Huh7;(3)细胞周期检测发现p LVX-IRES-FHIT组G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,增殖指数减低,在Hep G2细胞中与对照组间有统计学意义(P<0.05),在Hep B和Huh7细胞中与对照组间无统计学意义(P>0.05).FHIT基因的过表达对三系肝癌细胞的细胞周期影响为细胞周期停滞于S期,且G0/G1期细胞增多的顺序依次是Hep G2<Hep3B<Huh7.结论 FHIT基因在肝癌细胞株中的表达差异可能与肝癌细胞的恶性分化有密切正相关性,FHIT基因有可能成为原 展开更多

关键词 FHIT 慢病毒载体 增殖 凋亡 细胞侵袭性 细胞周期

下载PDF 职称材料

超短期低剂量伽玛刀照射对胶质瘤细胞侵袭性的影响 被引量：1

8

作者 林益光 刘晓民 +4 位作者 张志远 李彦和 刘东 王国开 徐德生 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期881-884,共4页

目的 从基因水平验证低剂量伽玛刀照射在超短期内对胶质瘤细胞侵袭性的影响.方法 以80％等剂量线包绕U87、U251细胞系,分别以4、6、8、10Gy边缘剂量行伽玛刀照射30min,以未照射的细胞作为对照组.应用RT-PCR检测细胞β-链蛋白（β-cateni... 目的 从基因水平验证低剂量伽玛刀照射在超短期内对胶质瘤细胞侵袭性的影响.方法 以80％等剂量线包绕U87、U251细胞系,分别以4、6、8、10Gy边缘剂量行伽玛刀照射30min,以未照射的细胞作为对照组.应用RT-PCR检测细胞β-链蛋白（β-catenin）、T细胞因子4（TCF-4）、蛋白激酶B（AKT）-1、AKT-2 mRNA的表达. 结果 与对照组比较,U87、U251细胞β-catenin、TCF-4、AKT-1和U87细胞AKT-2 mRNA的表达在4、6、8Gy伽玛刀照射后明显上调,10Gy照射后下调;U251细胞AKT-2 mRNA的表达在4、6Gy伽玛刀照射后明显上调,8、10 Gy照射后下调,差异均有统计学意义（P＜0.05）.其中U87细胞β-catenin、AKT-1 mRNA和U251细胞TCF-4、AKT-1、AKT-2 mRNA在6Gy照射时上调最明显,U87细胞TCF-4、AKT-2 mRNA和U251细胞β-catenin mRNA在8Gy照射时上调最明显. 结论 低剂量的伽玛刀照射对胶质瘤细胞的侵袭性在照射后30 min即有明显的促进作用. 展开更多

关键词 神经胶质瘤 放射治疗 伽玛刀 低剂量 超短期 细胞侵袭性

原文传递

反义局部粘着斑激酶脱氧寡核苷酸对肝癌细胞侵袭性生长的抑制作用 被引量：3

9

作者 顾岩 陈积圣 周晓东 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 2003年第10期612-615,共4页

目的 观察反义局部粘着斑激酶脱氧寡核苷酸(FAK ODN)转染对肝癌细胞侵袭性生长的影响,并探讨其作用机制。 方法 以LipofecTAMINE介导的反义FAK ODN转染Bel 7402肝癌细胞株,测定Bel 7402肝癌细胞株体外生长曲线、细胞活力,测定不同时间... 目的 观察反义局部粘着斑激酶脱氧寡核苷酸(FAK ODN)转染对肝癌细胞侵袭性生长的影响,并探讨其作用机制。 方法 以LipofecTAMINE介导的反义FAK ODN转染Bel 7402肝癌细胞株,测定Bel 7402肝癌细胞株体外生长曲线、细胞活力,测定不同时间点该细胞体外黏附能力变化,以Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力,同时行FAK表达与细胞DNA含量的双参数流式细胞仪检测及细胞凋亡的流式细胞仪检测。 结果 p125FAK表达在反义转染组(6.49％±0.10％)显著低于正义转染组(14.33％±1.88％)与对照组(16.68％±1.62％),F=7.66,P<0.01;反义FAK ODN转染显著抑制Bel 7402肝癌细胞株的生长,其细胞活力显著下降,肿瘤细胞抑制率在30％-60％之间;细胞体外黏附能力受到显著抑制,黏附抑制率在25％-55％间;细胞的体外侵袭能力显著下降,侵袭抑制率在15％-25％之间;细胞凋亡显著增加;细胞周期分析显示S期细胞比率显著降低,细胞生长主要阻滞在G2/M期。 结论 FAK在Bel 7402肝癌细胞的黏附与迁移运动中发挥重要作用,其表达阻断显著抑制肝癌细胞的体外黏附与侵袭活性。FAK表达阻断显著抑制肝癌细胞的体外增殖,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 反义局部粘着斑激酶脱氧寡核苷酸 肝癌 细胞侵袭性生长 抑制作用 测定

原文传递

NF-κB p65对子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响 被引量：5

10

作者 李望舒 白治苗 +4 位作者 王瑞 卢玉凤 陈华 姚卫卫 哈春芳 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2016年第7期518-522,共5页

目的:探讨RNAi抑制核因子NF-κB p65对子宫内膜异位症(EMs)在位内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响。方法:采用NF-κB p65 siRNA基因沉默转染10例EMs患者在位内膜原代腺上皮细胞,由Western blot、Real-time PCR、Transw... 目的:探讨RNAi抑制核因子NF-κB p65对子宫内膜异位症(EMs)在位内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9表达及细胞侵袭性的影响。方法:采用NF-κB p65 siRNA基因沉默转染10例EMs患者在位内膜原代腺上皮细胞,由Western blot、Real-time PCR、Transwell等分别检测干扰前后OPN、NF-κB p65、MMP-9蛋白和mRNA表达及细胞侵袭性的变化。结果:与未干预组比较,NF-κB p65 siRNA干预后EMs腺上皮细胞中OPN蛋白及mRNA表达无明显变化,差异无统计学意义(P均>0.05);NF-κB p65、MMP-9蛋白及mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。NF-κB p65 siRNA干预后,EMs腺上皮细胞的细胞侵袭性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:揭示NF-κB可能通过下调MMP-9的表达进而改变细胞侵袭性诱导EMs的发生。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 核因子NF-ΚB P65 骨桥蛋白 金属基质蛋白酶-9 细胞侵袭性45

下载PDF 职称材料

大麻二酚抗肿瘤作用机制的研究进展

11

作者 赵朋涛 闫晓冬 +2 位作者 闫聚瀚 刘鑫 李向东 《现代药物与临床》 CAS 2022年第8期1903-1908,共6页

大麻二酚是非生理依赖性成分,不具有大麻的成瘾性,可被有选择地应用于晚期癌症。大麻二酚对癌细胞有抑制作用,是一种具有良好前景的新型抗肿瘤药物。综述了大麻二酚调控癌细胞凋亡、抑制癌细胞增殖、减轻癌细胞侵袭性的抗肿瘤作用机制,... 大麻二酚是非生理依赖性成分,不具有大麻的成瘾性,可被有选择地应用于晚期癌症。大麻二酚对癌细胞有抑制作用,是一种具有良好前景的新型抗肿瘤药物。综述了大麻二酚调控癌细胞凋亡、抑制癌细胞增殖、减轻癌细胞侵袭性的抗肿瘤作用机制,为大麻二酚的抗肿瘤研究提供参考。 展开更多

关键词 大麻二酚 抗肿瘤 癌细胞凋亡 癌细胞增殖 癌细胞侵袭性 作用机制

原文传递

高侵袭性胰腺癌Panc-1细胞系中干细胞筛选结果分析 被引量：1

12

作者 沈俊 王敏 +2 位作者 刘文松 江建新 秦仁义 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第26期24-25,共2页

目的探讨高侵袭性胰腺癌细胞中是否有比例较高的胰腺癌干细胞。方法采用Transwell小室肿瘤侵袭模型筛选、分离出胰腺癌细胞系Panc-1中的高侵袭性癌细胞(Panc-1-H)和低侵袭性癌细胞(Panc-1-L),FCM检测上述两种细胞的胰腺癌干细胞表面标记... 目的探讨高侵袭性胰腺癌细胞中是否有比例较高的胰腺癌干细胞。方法采用Transwell小室肿瘤侵袭模型筛选、分离出胰腺癌细胞系Panc-1中的高侵袭性癌细胞(Panc-1-H)和低侵袭性癌细胞(Panc-1-L),FCM检测上述两种细胞的胰腺癌干细胞表面标记物CD24、CD44、ESA。结果Panc-1-H、Panc-1-L中胰腺癌干细胞所占比例相近,随着侵袭时间延长,胰腺癌干细胞比例无改变,P均>0.05。结论高侵袭性胰腺癌细胞中不含有较高比例的胰腺癌干细胞。 展开更多

关键词 胰腺癌 肿瘤干细胞 肿瘤细胞侵袭性

下载PDF 职称材料