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脑出血后脑组织内凝血酶受体1(PAR1)的表达及其病理意义 被引量:31
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作者 姜亚军 常诚 +3 位作者 张琳 吴明华 符为民 吴灏昕 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期100-103,共4页
目的 探讨脑出血后脑组织内凝血酶受体 1(PAR1)的表达规律及其意义。方法 成年大鼠分为 3组 ,分别向大脑基底节区注入全血、全血加水蛭素、或生理盐水。于注射后 6 h、2 4 h、72 h和 7d,取脑组织 ,检测脑内PAR1表达 (免疫组织化学法 ... 目的 探讨脑出血后脑组织内凝血酶受体 1(PAR1)的表达规律及其意义。方法 成年大鼠分为 3组 ,分别向大脑基底节区注入全血、全血加水蛭素、或生理盐水。于注射后 6 h、2 4 h、72 h和 7d,取脑组织 ,检测脑内PAR1表达 (免疫组织化学法 )。同时 ,观察神经细胞的凋亡情况 (Tunel法 )和脑组织水含量 (干燥法 )。结果 与生理盐水对照组比较 ,脑出血后血肿周围脑组织内 PAR1免疫阳性细胞数明显升高 (P<0 .0 5 )。同时 ,脑组织内凋亡细胞数和脑组织水含量也明显增加。时效学研究显示 ,PAR1表达上调开始于脑出血后 6 h,72 h达高峰 ,7d后下降。加用凝血酶抑制剂 -水蛭素者 ,出血周围组织内 PAR1表达明显抑制 ,同时脑组织水肿和神经凋亡显著减轻。结论 脑出血后脑组织 PAR1表达增加。 PAR1高表达可能介导了脑出血后神经损伤的过程。 展开更多
关键词 脑出血 后脑组织 凝血酶受体 PAR1 组织表达 病理分析
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鸡PPARγ基因的表达特性及其对脂肪细胞增殖分化的影响 被引量:37
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作者 王丽 那威 +5 位作者 王宇祥 王彦博 王宁 王启贵 李玉茂 李辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期454-464,共11页
为分析鸡PPARγ基因的组织表达特性及其在脂肪细胞增殖和分化过程中的功能,文章以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,利用Western blotting方法,检测PPARγ基因的组织表达特性及其在高、低脂系肉鸡腹部脂肪组织间的表... 为分析鸡PPARγ基因的组织表达特性及其在脂肪细胞增殖和分化过程中的功能,文章以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,利用Western blotting方法,检测PPARγ基因的组织表达特性及其在高、低脂系肉鸡腹部脂肪组织间的表达差异;采用RNAi技术,在鸡原代脂肪细胞中抑制PPARγ基因的表达后,通过MTT和油红O提取比色的方法,研究鸡PPARγ基因对脂肪细胞增殖和分化的调控作用;利用Real-timePCR和Western blotting技术,分析PPARγ基因表达下调后,其他脂肪细胞分化转录因子以及与脂肪细胞分化相关的重要基因的表达变化情况。结果表明,PPARγ基因在7周龄高脂系肉鸡腹部脂肪组织、肌胃、脾脏、肾脏组织中表达量较高,在心脏中表达量较低,在肝脏、胸肌、腿肌、十二指肠中未检测到表达信号;与高脂系相比,PPARγ基因在5和7周龄低脂系肉鸡腹部脂肪组织中的表达量较低(P<0.05);PPARγ基因的表达量下降后,鸡脂肪细胞的增殖能力增强,分化能力减弱;同时,C/EBPα、SREBP1、A-FABP、Perilipin1、LPL、IGFBP-2基因的表达量均下降(P<0.05)。由此可见,PPARγ基因的表达可能与肉鸡腹部脂肪的沉积有一定的关系,该基因可能是调控鸡脂肪细胞增殖与分化的关键因子。 展开更多
关键词 PPARΓ基因 脂肪细胞增殖分化 组织表达 RNAI
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树木复幼的研究概述 被引量:31
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作者 裴东 谷瑞升 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2005年第6期753-760,共8页
幼龄树木通常具有良好的生根能力、旺盛和通直的生长习性与较强的抗性,然而随着树木的成熟这些特性会逐渐丧失。复幼是使成熟树木重现某些幼态性状的过程。成熟树木的复幼和幼态保持是林木生产、无性繁殖、遗传改良和生物技术在林木中... 幼龄树木通常具有良好的生根能力、旺盛和通直的生长习性与较强的抗性,然而随着树木的成熟这些特性会逐渐丧失。复幼是使成熟树木重现某些幼态性状的过程。成熟树木的复幼和幼态保持是林木生产、无性繁殖、遗传改良和生物技术在林木中应用中十分重要的科学问题。本文对树木的组织和器官保持幼态的特性、顶端分生组织表达幼态的潜能、与复幼相关的生理、生化和分子生物学以及复幼方法等方面的研究进行了概述,并对今后的研究和需要解决的关键问题提出了意见和建议。 展开更多
关键词 树木 复幼 成熟态 生根 林木生产 组织表达 分子生物学 生根能力 生长习性 无性繁殖
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绵羊FGF 7基因组织表达及其多态性与产羔数之间的关系 被引量:28
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作者 周梅 曹晓涵 +8 位作者 贺小云 孙庆 狄冉 胡文萍 王翔宇 张效生 张金龙 刘秋月 储明星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期525-533,共9页
旨在探究绵羊FGF7基因组织表达水平及其多态性与产羔数之间的关系。本研究利用半定量反转录-聚合酶链式反应(sqRT-PCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术对绵羊FGF7基因在多羔小尾寒羊和单羔苏尼特羊以及小尾寒羊FecB不同基因型(BB、B+、++)... 旨在探究绵羊FGF7基因组织表达水平及其多态性与产羔数之间的关系。本研究利用半定量反转录-聚合酶链式反应(sqRT-PCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术对绵羊FGF7基因在多羔小尾寒羊和单羔苏尼特羊以及小尾寒羊FecB不同基因型(BB、B+、++)各组织中的表达水平进行研究,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术,对多羔绵羊品种(小尾寒羊380只)和单羔绵羊品种(滩羊、苏尼特羊、萨福克羊、杜泊羊和草原型藏羊共380只)FGF7基因g.57842893C>T位点多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果表明,FGF7基因在单、多羔绵羊的心和肺中高表达,在其它各组织呈中等或低丰度表达;FGF7基因在多羔小尾寒羊绝大部分组织中的表达量均高于单羔苏尼特羊,但差异均不显著(P>0.05),FGF7在小尾寒羊FecB不同基因型中的表达并无明显差异。g.57842893C>T位点共存在CC、CT和TT 3种基因型,且基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均达到显著水平(P≤0.05);g.57842893C>T位点在苏尼特羊、萨福克羊和杜泊羊中表现为中度多态(0.25<PIC<0.50),在其它品种中表现为低度多态(PIC<0.25);g.57842893C>T位点仅在苏尼特羊、萨福克羊以及杜泊羊3个品种中均处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05);g.57842893C>T位点与小尾寒羊第1、2以及第3胎产羔数均无显著关联(P>0.05),但CC型各胎产羔数均高于TT型。综上表明,FGF7基因的表达水平与绵羊产羔数可能存在一定程度的正相关,虽然可能不是影响绵羊产羔数的关键基因,但g.57842893C>T位点对绵羊产羔数性状的选育具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 绵羊 FGF7基因 组织表达 SNP分型 产羔数
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鲤鱼肌肉生长抑制素基因(MSTN)的克隆及其组织表达特征 被引量:22
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作者 李兴美 范巍 +4 位作者 张彬 彭扣 王玉凤 胡炜 赵浩斌 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期643-648,共6页
肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子,对MSTN的研究将有助于促进动物生产。鲤鱼是我国的主要淡水养殖对象之一。因此,我们采用RT-PCR方法克隆了鲤鱼MSTN cDNA(No.EF551058)的部分序列,长度为921bp,编... 肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子,对MSTN的研究将有助于促进动物生产。鲤鱼是我国的主要淡水养殖对象之一。因此,我们采用RT-PCR方法克隆了鲤鱼MSTN cDNA(No.EF551058)的部分序列,长度为921bp,编码306个氨基酸残基。鲤鱼MSTN具有MSTN的共同特征,有蛋白酶水解位点RIRR和9个保守的半胱氨酸残基。多重序列比较发现其与斑马鱼GDF8有极近的亲缘关系,96.7%的氨基酸序列同源。不同组织的RT-PCR分析发现鲤鱼MSTN主要在肌肉和脑部表达,而其他所检测组织未见表达。鲤鱼MSTN不仅在肌肉生长发育中发挥作用,可能在神经系统发育中也有其作用。 展开更多
关键词 鲤鱼 肌肉生长抑制素 克隆 同源性 组织表达
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海水鱼真鲷脂蛋白脂肪酶基因cDNA序列与组织表达 被引量:15
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作者 梁旭方 Hiromi OKU +3 位作者 Hiroshi Y.OGATA 李月琴 白俊杰 罗建仁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期712-719,共8页
为研究脊椎动物真鲷脂蛋白脂肪酶 (LPL)结构与功能关系以及探讨动脉粥样硬化形成机理 ,通过构建cDNA文库 ,克隆对动脉粥样硬化表现抗性的海水鱼真鲷LPL基因cDNA全序列 .再通过PCR方法扩增基因组DNA ,获取内含子 9及其两侧序列以确定外显... 为研究脊椎动物真鲷脂蛋白脂肪酶 (LPL)结构与功能关系以及探讨动脉粥样硬化形成机理 ,通过构建cDNA文库 ,克隆对动脉粥样硬化表现抗性的海水鱼真鲷LPL基因cDNA全序列 .再通过PCR方法扩增基因组DNA ,获取内含子 9及其两侧序列以确定外显子 10的大小 ,最后通过RT PCR ,以 β肌动蛋白为外参照 ,比较真鲷在食用两种脂肪含量不同饲料和摄食状态不同的处理条件下 ,肝脏和腹腔肠系膜脂肪组织LPLmRNA的相对水平 .从腹腔肠系膜脂肪组织cDNA文库中克隆出LPLcDNA序列 ,其完整的开放阅读框架由 15 36bp组成 ,编码 5 11个氨基酸残基 .与哺乳类不同 ,真鲷LPL基因外显子 10的开始部分是翻译的 .LPL的催化位点、二硫键位点、N 糖基化位点、肝素结合区、脂质结合位点、介导脂蛋白与低密度脂蛋白受体结合位点、二聚体形成位点等主要功能域在真骨鱼类真鲷与其它脊椎动物间基本保守 ,但肝素结合区的碱性氨基酸残基含量较人类减少 ,并在结合脂质底物的疏水环套中出现插入片段 .与哺乳类不同 ,真鲷LPL基因在成体肝脏存在诱导性表达 ,而在其腹腔肠系膜脂肪组织则存在与哺乳类相似的组成性表达 .当真鲷喂食高脂饲料时 ,其饱食状态下肝脏LPLmRNA水平升高 ,但对其腹腔肠系膜脂肪组织LPL表达没有影响 .当真鲷喂食标准商业饲料时 ,? 展开更多
关键词 海水鱼 真鲷 脂蛋白脂肪酶基因 CDNA序列 组织表达
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鸭A-FABP基因的克隆及其组织表达 被引量:19
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作者 张军 董飚 +6 位作者 张红 储冬生 徐国庆 龚道清 段修军 赵旭庭 顾志良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期819-822,共4页
本文采用RT-PCR方法从35周龄母鸭脂肪组织中克隆了A-FABP基因的cDNA序列,其长度为422 bp,包含了1个399 bp的完整CDS,编码132个氨基酸。该序列与家禽(鹅、鸡)和哺乳动物(人、小鼠、猪、牛)的A-FABP基因序列约有94%和73.4%-75.7%的同... 本文采用RT-PCR方法从35周龄母鸭脂肪组织中克隆了A-FABP基因的cDNA序列,其长度为422 bp,包含了1个399 bp的完整CDS,编码132个氨基酸。该序列与家禽(鹅、鸡)和哺乳动物(人、小鼠、猪、牛)的A-FABP基因序列约有94%和73.4%-75.7%的同源性,而相应氨基酸序列的同源性为92.4%和72.0%-77.3%。半定量RT-PCR研究结果为A-FABP基因在间脑、肺和肾组织中不表达,在脂肪组织中的表达明显高于其他组织(P〈0.5)。表明A-FABP基因在动物进化中具有高度保守性,该基因的表达具有组织特异性。 展开更多
关键词 A-FABP基因 克隆 组织表达
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猪PID1基因CDS区的克隆及其mRNA表达与肌内脂肪沉积关系 被引量:20
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作者 钱源 曾勇庆 +5 位作者 杜金芳 崔景香 李华 陈其美 宋一萍 陈伟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1153-1158,共6页
为了探索PID1(Phosphotyrosine interaction domain containing1)基因的表达与脂肪沉积的关系,文章利用兼并引物进行RT-PCR从猪脂肪和肌肉组织中克隆PID1基因CDS(Coding region)区全序列,并采用荧光定量PCR方法对大白猪、鲁莱黑猪、莱芜... 为了探索PID1(Phosphotyrosine interaction domain containing1)基因的表达与脂肪沉积的关系,文章利用兼并引物进行RT-PCR从猪脂肪和肌肉组织中克隆PID1基因CDS(Coding region)区全序列,并采用荧光定量PCR方法对大白猪、鲁莱黑猪、莱芜猪3个猪品种的肝脏、脂肪和肌肉组织PID1基因mRNA表达进行了相对定量分析。结果表明:经克隆、测序,得到了猪PID1基因654bp全编码区序列,通过Blast比对,与人、大鼠、牛有93.88%、66.94%、88.07%的同源性。PID1基因在同一个品种猪中mRNA表达水平总体表现为:肝脏>脂肪>肌肉。在不同品种3种组织中PID1基因mRNA表达水平总体表现为:莱芜猪>鲁莱黑猪>大白猪,其中肝脏中差异显著(P<0.05),但是在脂肪和肌肉组织中莱芜猪与鲁莱黑猪差异不显著(P>0.05)。对于高肌内脂肪(LWH)、中等肌内脂肪(LWI)和低肌内脂肪(LWL)沉积的3组莱芜猪,PID1基因在肝脏组织中的表达水平是LWH显著高于LWL(P<0.05),在肌肉组织中则是LWH显著高于LWI和LWL(P<0.05)。PID1基因在莱芜猪品种内3个组织中mRNA表达量与IMF含量相关均不显著,而在品种间3个组织中mRNA表达量与IMF含量呈显著正相关(P<0.05)。结果提示:PID1的表达可能与脂肪沉积性状存在一定的关系。 展开更多
关键词 PID1基因 组织表达 肌内脂肪
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β-防御素caBD-1 mRNA在骆驼组织器官中的表达 被引量:14
9
作者 杨银凤 唐博 +1 位作者 余兴邦 曹贵方 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第11期3-6,共4页
根据已知的骆驼 β 防御素caBD 1cDNA序列设计了 1对预计扩增产物为 2 0 3bp的引物 ,通过RT PCR检测骆驼的整个消化道黏膜、肝、胰腺、气管黏膜、肺、肾、膀胱黏膜、卵巢、子宫内膜、脾、淋巴结、心等器官内caBD 1mRNA的表达。结果显示 ... 根据已知的骆驼 β 防御素caBD 1cDNA序列设计了 1对预计扩增产物为 2 0 3bp的引物 ,通过RT PCR检测骆驼的整个消化道黏膜、肝、胰腺、气管黏膜、肺、肾、膀胱黏膜、卵巢、子宫内膜、脾、淋巴结、心等器官内caBD 1mRNA的表达。结果显示 :caBD 1mRNA在整个消化道、气管、膀胱、子宫等管状器官内的黏膜层有表达 ,而在实质性器官如心、肝、胰腺、肺、脾、淋巴结、卵巢、肾中无表达。提示 。 展开更多
关键词 Β-防御素 骆驼 组织表达
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中红侧沟茧蜂非典型气味受体的克隆及组织特异性表达 被引量:16
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作者 张帅 张永军 +2 位作者 苏宏华 高希武 郭予元 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1639-1645,共7页
【目的】研究中红侧沟茧蜂Microplitis mediator非典型气味受体的表达谱。【方法】使用RT-PCR法克隆得到中红侧沟茧蜂非典型气味受体基因序列。使用实时荧光定量PCR法研究其表达谱。【结果】克隆得到中红侧沟茧蜂非典型气味受体全长基... 【目的】研究中红侧沟茧蜂Microplitis mediator非典型气味受体的表达谱。【方法】使用RT-PCR法克隆得到中红侧沟茧蜂非典型气味受体基因序列。使用实时荧光定量PCR法研究其表达谱。【结果】克隆得到中红侧沟茧蜂非典型气味受体全长基因。该基因在触角中特异性表达。在雌虫触角中羽化当天达到最大表达量,雄虫触角中在羽化前d阶段达到最大表达量。【结论】该非典型气味受体在中红侧沟茧蜂触角中特异存在。 展开更多
关键词 中红侧沟茧蜂 嗅觉 非典型气味受体 组织表达
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黄颡鱼HSC70基因及其组织表达分析 被引量:15
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作者 张娟 张其中 +1 位作者 张占会 崔淼 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期426-434,共9页
热休克蛋白70(HSP70)与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白(HSC70)基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3... 热休克蛋白70(HSP70)与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白(HSC70)基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3′非编码区225bp,开放阅读框(ORF)1938bp,编码645个氨基酸组成的蛋白质。黄颡鱼HSC70基因含有8个内含子,与人、鼠、虹鳟和花斑溪鳉的HSC70基因内含子数目相同,位置相似。其中,最长内含子(873bp)位于5′端非编码区,其余内含子(长度在80—251bp之间不等)均在编码区以内。黄颡鱼HSC70基因编码的氨基酸序列与南方鲶的相似度最高,达96.13%,与欧洲银鲫和团头鲂的相似度分别为94.45%和94.14%。RT-PCR检测显示,正常情况下黄颡鱼HSC70在血细胞、心脏、肝、头肾、脾、鳃、肌肉和脑中均有表达,但表达量在鳃中最高,肌肉中最低;统计结果显示,热激后HSC70在血细胞、肝、头肾和脑中的表达量显著上升(p<0.05),而在其余组织中热激前后的表达差异不显著(p>0.05)。 展开更多
关键词 HSC70基因 克隆 组织表达 黄颡鱼
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桑树查尔酮异构酶基因的克隆与原核表达分析 被引量:14
12
作者 刘长英 赵爱春 +5 位作者 李军 吕蕊花 余亚圣 王茜龄 鲁成 余茂德 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第2期39-45,共7页
以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编... 以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编码219个氨基酸。预测MaCHI编码蛋白质的分子质量为23.8ku,理论等电点为5.29。采用RT-PCR法分析MaCHI在不同组织中的表达水平,在叶片和果中的表达量较高,在根中表达量较低。构建pET-28a(+)-MaCHI原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。 展开更多
关键词 桑树 查尔酮异构酶 基因克隆 组织表达 原核表达
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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin-6的克隆、序列分析和组织表达 被引量:11
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作者 刘衬丽 王东 +5 位作者 李兵 管京敏 俞燕芳 査宏贤 许雅香 沈卫德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-9,共9页
本文利用RT-PCR和RACE方法,获得了家蚕Bombyxmori丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(serpin)的开放读码框(ORF)和5′UTR序列。根据该基因与其他昆虫serpin的同源性关系将其命名为家蚕serpin-6基因,GenBank登录号EU159447。为了研究serpin-6与家蚕... 本文利用RT-PCR和RACE方法,获得了家蚕Bombyxmori丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(serpin)的开放读码框(ORF)和5′UTR序列。根据该基因与其他昆虫serpin的同源性关系将其命名为家蚕serpin-6基因,GenBank登录号EU159447。为了研究serpin-6与家蚕免疫反应的相关机理,对serpin-6基因的组织表达和免疫刺激反应进行了研究。结果表明该基因在家蚕的头部和生殖腺中mRNA表达量非常高,在中肠,脂肪体,丝腺和血淋巴表达量较低。用脂多糖(LPS)刺激5龄第3d家蚕后,serpin-6基因在脂肪体和血淋巴中都被显著诱导表达,且都在刺激6h后表达量最高。推测该基因在家蚕细胞免疫反应中起着一定的作用。 展开更多
关键词 家蚕 serpin-6 基因克隆 半定量RT-PCR 组织表达 免疫反应
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山羊FTO基因克隆及其表达谱 被引量:14
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作者 林亚秋 廖红海 +2 位作者 贺庆华 李倩 王永 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期888-898,共11页
本研究旨在阐明山羊FTO基因的表达特性,并分析其表达与肌内脂肪沉积的相关性。以简州大耳羊为试验动物,采用RT-PCR方法克隆FTO基因,利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测其组织表达差异,同时检测该基因在不同发育阶段不同部... 本研究旨在阐明山羊FTO基因的表达特性,并分析其表达与肌内脂肪沉积的相关性。以简州大耳羊为试验动物,采用RT-PCR方法克隆FTO基因,利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测其组织表达差异,同时检测该基因在不同发育阶段不同部位山羊肌肉组织中的表达水平,并与IMF含量进行相关分析。结果表明,山羊FTO基因CDS区为1 518bp,编码505个氨基酸,为无跨膜结构的非分泌蛋白。FTO mRNA在山羊的脂肪、脾和肺中表达水平较高(P〈0.01),在背最长肌中表达最低;FTO蛋白在背最长肌和脾中表达较高(P〈0.01),脂肪组织中表达次之。同时结果显示,FTO mRNA在24月龄山羊背最长肌和股二头肌中表达水平显著高于1-3和8-10月龄的表达水平(P〈0.05)。FTO mRNA表达量与背最长肌IMF含量呈显著负相关(P〈0.05),与股二头肌及臂三头肌IMF含量呈不同程度的正相关。本研究指出,FTO基因表达与IMF含量存在相关性,推测可作为IMF沉积的候选基因。 展开更多
关键词 山羊 FTO 克隆 组织表达 肌内脂肪含量
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表达序列标签数据库搜索鉴定小鼠UBAP1基因及其数字化表达分析 被引量:13
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作者 钱骏 董利 +6 位作者 张必成 王洁如 周鸣 李忠花 李伟芳 李小玲 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期323-327,共5页
UBAP1(ubiquitinassociatedprotein 1)基因是最近克隆的一个定位于人类染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失高频区的泛肽相关蛋白家族新成员 .为了深入研究UBAP1基因的功能 ,利用计算机对表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)、UniGen... UBAP1(ubiquitinassociatedprotein 1)基因是最近克隆的一个定位于人类染色体 9p2 1 2 2鼻咽癌杂合性丢失高频区的泛肽相关蛋白家族新成员 .为了深入研究UBAP1基因的功能 ,利用计算机对表达序列标签(expressedsequencetag ,EST)、UniGene等数据库进行综合搜索分析 ,结合cDNA克隆测序的方法 ,成功地获得了UBAP1基因在小鼠中的同源基因 .小鼠UBAP1基因cDNA全长为 2 6 76bp ,编码一个由 44 1个氨基酸组成的蛋白质 ,在其蛋白质C端只有一个泛肽相关功能域 (UBAdomain) .与人UBAP1基因相比 ,两者编码的氨基酸序列有 89%相同 .基于EST的数字化表达分析显示UBAP1基因在小鼠正常组织中广泛高表达 . 展开更多
关键词 表达序列标签 数据库搜索 小鼠 UBAP1基因 数字化表达分析 鼻咽癌 组织表达 基因克隆
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应用自体脂肪干细胞修复猪关节软骨缺损的初步实验研究 被引量:9
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作者 伍耀豪 刘广鹏 +1 位作者 刘波 崔磊 《组织工程与重建外科杂志》 2006年第3期163-166,共3页
目的探索自体脂肪干细胞修复猪关节软骨缺损的可行性。方法从猪背部脂肪组织中获取脂肪干细胞,经过体外培养扩增,以50×106/ml的浓度将脂肪干细胞接种于PLGA(polylacticacid/polyglycolicaid.PLA/PGA,PLGA)中,细胞材料复合物在体... 目的探索自体脂肪干细胞修复猪关节软骨缺损的可行性。方法从猪背部脂肪组织中获取脂肪干细胞,经过体外培养扩增,以50×106/ml的浓度将脂肪干细胞接种于PLGA(polylacticacid/polyglycolicaid.PLA/PGA,PLGA)中,细胞材料复合物在体外成软骨诱导2周。于猪膝关节软骨非负重区形成2个直径8mm的环形、全层软骨缺损,实验组回植经诱导后的细胞材料复合物,对照组放置单纯支架材料。术后12周取材,缺损修复区行大体观察、组织学HE及藏红花染色、免疫组化检测。结果术后12周实验组缺损区大部分被修复,缺损被软骨组织填充,修复区表面光滑。组织学染色显示有典型的透明软骨样结构。藏红花染色发现修复组织表达丰富的聚合蛋白多糖。对照组则未能修复关节软骨缺损,缺损区面积增大,表面覆盖薄层纤维组织。结论猪自体脂肪干细胞可以作为组织工程种子细胞,修复猪关节软骨缺损。 展开更多
关键词 应用 自体脂肪 细胞修复 关节软骨缺损 实验研究 ARTICULAR Cartilage 脂肪干细胞 组织 实验组 染色 免疫组化检测 复合物 对照组 藏红花 支架材料 膝关节软骨 成软骨诱导 组织工程 组织表达 种子细胞
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错配修复基因hMSH2和hMLH1在胃癌组织中的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系 被引量:8
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作者 马坚妹 王朝晖 +5 位作者 刘敏 王玫 张岩 吕申 刘丽娜 许国旺 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第5期535-539,共5页
背景与目的:胃癌是一种多因素相关疾病,幽门螺杆菌(Helicobactorpylori,HP)感染是导致胃癌发生的原因之一,但其分子机制不明。错配修复基因是保证DNA复制高保真度的重要基因,与消化道肿瘤发生具有密切关系。本研究通过检测HP感染和非感... 背景与目的:胃癌是一种多因素相关疾病,幽门螺杆菌(Helicobactorpylori,HP)感染是导致胃癌发生的原因之一,但其分子机制不明。错配修复基因是保证DNA复制高保真度的重要基因,与消化道肿瘤发生具有密切关系。本研究通过检测HP感染和非感染胃癌组织及癌旁粘膜组织和慢性浅表性胃炎粘膜组织中错配修复基因hMSH2和hMLH1蛋白的表达,探讨hMSH2、hMLH1基因在胃癌发生中的作用和HP致癌的可能机制。方法:采用尿素酶快速检验法对HP感染情况进行检测;利用免疫组化方法检测胃癌及癌旁粘膜和胃炎粘膜组织中hMSH2和hMLH1的表达情况,采用χ2检验对数据进行统计学分析。结果:hMSH2在胃癌组织中的阳性率(67.1%),显著高于癌旁粘膜组织(35.5%)和胃炎粘膜组织(42.1%)(P<0.05),而后两者无显著性差异(P>0.05)。癌组织中低分化腺癌的hMSH2阳性率(81.1%)显著高于高中分化腺癌(54.5%)和粘液癌(52.9%)(P<0.05);后两者间无显著性差异(P>0.05)。hMLH1的阳性率在胃癌组织(81.6%)、癌旁粘膜组织(90.8%)和胃炎组织(89.5%)间无显著性差异(P>0.05)。hMLH1在粘液癌中的阳性率(47.1%)显著低于高中分化腺癌(81.8%)和低分化腺癌(97.3%)(P<0.05),而后两者间无显著性差异(P>0.05)。在HP感染和非感染胃癌组织中,hMSH2的阳性率分别为56.8%和81.3%, 展开更多
关键词 错配修复基因 HMSH2 HMLH1 胃癌组织 组织表达 幽门螺杆菌 细菌感染
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杨梅Cu/Zn超氧化物歧化酶基因(MrSOD1)cDNA的克隆及表达分析 被引量:12
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作者 王芳 董乐 +2 位作者 戴聪杰 林娈 林静 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第22期27-33,共7页
以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/... 以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/ZnSOD的特征信号序列;序列同源性分析表明,其与GenBank中注册的Cu/ZnSOD序列的同源性均在77%以上。该基因命名为MrSOD1(GenBank登录号:GQ404510)。半定量RT-PCR分析显示,MrSOD1在4种组织中表达量为:果>叶>花>枝条。本试验为进一步研究MrSOD1的时空表达特性、调控途径及杨梅抗氧化伤害的分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 杨梅 Cu/Zn超氧化物歧化酶 基因克隆 组织表达
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建鲤生长激素受体基因分离、转录子多态性以及组织表达特性 被引量:13
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作者 俞菊华 李红霞 +2 位作者 唐永凯 李建林 董在杰 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期218-228,共11页
使用PCR、RT-PCR和RACE方法分离克隆了建鲤基因组内的4个jlGHRs基因,同源性分析和系统树表明它们两两分属于鱼类GHR1和GHR2,命名为jlGHR1a、jlGHR1b;jlGHR2a、jlGHR2b。jlGHR1s和jlGHR2s的两个旁系同源基因间氨基酸差异分别为5%和11%,... 使用PCR、RT-PCR和RACE方法分离克隆了建鲤基因组内的4个jlGHRs基因,同源性分析和系统树表明它们两两分属于鱼类GHR1和GHR2,命名为jlGHR1a、jlGHR1b;jlGHR2a、jlGHR2b。jlGHR1s和jlGHR2s的两个旁系同源基因间氨基酸差异分别为5%和11%,但功能保守区FGVFS基序、Box1、Box2基本一致,jlGHR1s和jlGHR2s氨基酸差异为41%。jlGHRs和斑马鱼GHRs基因结构相同,在阅读框内存在7个内含子,两旁系同源基因间内含子长度或序列存在差异。jlGHR1s、jlGHR2s与不同鱼类GHR1、GHR2同源性高低与传统分类地位一致。实验过程中发现建鲤肝脏存在jlGHRs的多种转录子,包括丢失了外显子4的jlGHR1b'、保留了内含子3的jlGHR2a'、丢失了部分外显子8的jlGHR2as。实时定量RT-PCR组织表达结果显示4个jlGHRs在脑、肝、心、头肾、肾、肠、脾、肌肉各组织中均有表达,但表达量差异明显,其中肌肉组织中4个基因表达量均最高,脑中4个基因的表达水平相当,其余各组织中jlGHR2b的表达量均最高。从多转录子和较低表达量推测jlGHR2a所受的选择压力低于jlGHR2b。鲤鱼基因组内分离到GHR1、GHR2的两个旁系同源基因在功能基因方面证实了鲤鱼体内存在两套基因,表明鲤鱼是研究同源基因变异分化的好材料,也为今后正确查找jlGHRs基因上的SNP位点奠定了基础。 展开更多
关键词 建鲤 生长激素受体基因 旁系同源基因 组织表达
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吉富罗非鱼两种生长激素受体基因的分离及与增重相关的SNPs位点 被引量:13
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作者 阮瑞霞 俞菊华 +3 位作者 李红霞 李建林 唐永凯 魏可鹏 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期37-46,共10页
实验分离了吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)两种生长激素受体基因GHR1和GHR2的全长cDNA以及GHR1阅读框中外显子2~9、GHR2阅读框外显子2~8的DNA序列。在GHR1和GHR2分别找到6个和16个SNPs位点,其中只有2个位点在外显子部分。使用PCR-... 实验分离了吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)两种生长激素受体基因GHR1和GHR2的全长cDNA以及GHR1阅读框中外显子2~9、GHR2阅读框外显子2~8的DNA序列。在GHR1和GHR2分别找到6个和16个SNPs位点,其中只有2个位点在外显子部分。使用PCR-RFLP方法检测了5个家系共120尾吉富罗非鱼在8个SNPs(GHR1内含子3_A612G、内含子3_A989T、内含子7_A599C;GHR2内含子3_C330T、内含子3_A645G、内含子3_G687T、内含子3_A967G、内含子7_C107T)的基因型。不同基因型与雌、雄吉富罗非鱼增重的相关性分析显示,GHR1内含子3_A612G及内含子3_A989T与雄鱼增重极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)相关,杂合型个体增重最大,在雌鱼群体中有类似趋势,但差异不显著;内含子7_A599C与雄鱼、雌鱼增重分别呈现极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)相关,CC型雌雄鱼增重均大于AA型;GHR2上只有内含子3_G687T与雌鱼增重显著相关(P<0.05),GT型个体增重显著大于GG型。检测了60个家系共356尾吉富罗非鱼在3_A612G、3_A989T、7_A599C和3_G687T的基因型与增重性状的相关性,结果具有相同趋势,因样本少、遗传背景多样,导致差异性显著降低。实时定量PCR结果显示,GHR1在雄鱼肝的表达量是雌鱼的1.36倍;除肾外,GHR2在雄鱼各组织的表达量均低于雌鱼,这部分解释了GHR1和GHR2基因上SNP位点对雌、雄吉富罗非鱼增重的不同影响。此外,GHR1、GHR2对生长影响程度的不同,导致只在GHR2上找到1个SNP位点对增重有影响。 展开更多
关键词 吉富罗非鱼 生长激素受体 单核苷酸多态性 增重 组织表达
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