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小肠黏膜下层脱细胞基质复合外泌体构建组织工程尿道
1
作者 王丹 朱小军 +1 位作者 李志成 李娜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第23期4907-4914,共8页
背景:小肠黏膜下层脱细胞基质已被临床与基础研究证实可用于尿道的修复重建,但其单独应用时存在宿主细胞生长缓慢、支架血管化不足而成活困难、重建尿道狭窄梗阻等问题,仅适用于较短的尿道狭窄。目的:探讨应用小肠黏膜下层脱细胞基质复... 背景:小肠黏膜下层脱细胞基质已被临床与基础研究证实可用于尿道的修复重建,但其单独应用时存在宿主细胞生长缓慢、支架血管化不足而成活困难、重建尿道狭窄梗阻等问题,仅适用于较短的尿道狭窄。目的:探讨应用小肠黏膜下层脱细胞基质复合外泌体构建组织工程尿道的可行性。方法:从新西兰大白兔骨髓间充质干细胞中分离提取外泌体;制备猪小肠黏膜下层脱细胞基质,将外泌体负载于小肠黏膜下层脱细胞基质上。将小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体(PKH26染料标记)复合物与脐静脉内皮细胞共培养12 h,观察细胞摄取外泌体情况。选取生长状态良好的脐静脉内皮细胞,分3组培养:空白组常规培养,对照组加入小肠黏膜下层脱细胞基质,实验组加入小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体复合物,通过划痕实验、成管实验、血管生成因子分泌检测评估血管生成情况。取30只新西兰大白兔,建立长段(3 cm)尿道缺损模型,采用随机数字表法分3组干预(n=10):单独材料组植入小肠黏膜下层脱细胞基质,对照组植入小肠黏膜下层脱细胞基质-骨髓间充质干细胞复合物,实验组植入小肠黏膜下层脱细胞基质-外泌体复合物,植入后12周进行尿道造影、尿动力学检查及重建尿道切片病理观察。结果与结论:(1)荧光显微镜下可见小肠黏膜下层脱细胞基质中的外泌体可被脐静脉内皮细胞摄取。(2)与空白组、对照组相比,实验组材料可促进脐静脉内皮细胞的迁移、成血管能力以及成血管因子血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、白细胞介素8的分泌(P <0.05)。(3)尿道造影结果显示,单独材料组10只兔均出现尿道狭窄,对照组10只兔中2只出现尿道狭窄,实验组10只兔均未出现尿道狭窄。尿动力检查结果显示,单独材料组兔材料植入后12周的最大尿道压高于术前(P <0.05),对照组、实验组兔植入后12周的 展开更多
关键词 尿道损伤 尿道狭窄 小肠黏膜下层脱细胞基质 细胞外基质 外泌体 组织工程尿道
构建血管内皮因子修饰的组织工程尿道修复大鼠尿道缺损
2
作者 李航旭 刘小燕 《锦州医科大学学报》 CAS 2024年第2期51-55,共5页
目的探讨血管内皮因子修饰的组织工程尿道修复大鼠尿道缺损的效果。方法取SD大鼠尿道,共20根,每段长1.5 cm,采用化学去细胞法处理大鼠尿道的细胞成分,保留细胞外基质,制备组织工程尿道。将10只Wistar大鼠尿道制成1.5 cm整段缺损模型,用S... 目的探讨血管内皮因子修饰的组织工程尿道修复大鼠尿道缺损的效果。方法取SD大鼠尿道,共20根,每段长1.5 cm,采用化学去细胞法处理大鼠尿道的细胞成分,保留细胞外基质,制备组织工程尿道。将10只Wistar大鼠尿道制成1.5 cm整段缺损模型,用SD大鼠经过血管内皮因子修饰的组织工程尿道修复(处理组)。将10只Wistar大鼠尿道制成1.5 cm整段缺损模型,用SD大鼠去细胞同种异体尿道移植修复Wistar大鼠尿道的整段缺损(对照组)。结果处理组与对照组相比VG染色结果显示,处理组尿道吻合口断端被染成红色,肌纤维排列整齐分布均一,大量再生肌纤维长入远端尿道。对照组吻合口肌纤维形态均一,肌纤维排列整齐分布均一,可见少量肌纤维长入远端尿道。HE染色结果处理组可见大小不等血管长入去细胞尿道内,部分有形成血窦的倾向;而对照组未见尿道被吸收,可见少量血管形成倾向。电生理检测结果测电极刺激S1神经。处理组:潜伏期(1.62±0.47)ms,波幅(1.11±0.67)mv。对照组:潜伏期(2.31±0.17)ms,波幅(2.51±0.23)mv。经过血管内皮因子修饰的组织工程尿道具有免疫原性弱、细胞膜残片去除完全、尿道基底膜保存完好等优点。结论以鼠的脱细胞尿道为基质,构建组织工程尿道,可以修复1.5 cm长的鼠尿道整段缺损,并可降低并发症的发生率,且术后能获得良好的粘膜覆盖,形成类似于正常尿道的组织结构。 展开更多
关键词 血管内皮因子 尿道缺损 鼠 组织工程尿道
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应用组织工程口腔黏膜重建尿道的初步实验研究 被引量：6
3
作者 李超 徐月敏 +2 位作者 宋鲁杰 崔磊 尹烁 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1242-1245,共4页
目的探讨兔口腔黏膜细胞的体外培养方法,并以其为种子细胞与异体膀胱黏膜下脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)复合,构建组织工程尿道。方法18只10周龄雄性新西兰大耳白兔,体重0.3～0.5kg。取其中12只兔口腔黏膜组织,分... 目的探讨兔口腔黏膜细胞的体外培养方法,并以其为种子细胞与异体膀胱黏膜下脱细胞基质(bladder acellular matrix graft,BAMG)复合,构建组织工程尿道。方法18只10周龄雄性新西兰大耳白兔,体重0.3～0.5kg。取其中12只兔口腔黏膜组织,分离获得口腔黏膜细胞。将口腔黏膜细胞分别接种于有3T3细胞及无3T3细胞的培养皿进行培养,接种后第2天于倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,绘制细胞生长曲线,观察生长增殖情况,并行免疫荧光组织化学染色鉴定。取余6只兔膀胱,经脱细胞处理制备BAMG,随机取1cm×1cm组织行HE染色,观察脱细胞效果。将接种于有3T3细胞培养皿培养获得的第2代口腔黏膜细胞种植于BAMG上,培养1周后,行HE染色及扫描电镜观察口腔黏膜细胞与BAMG的复合状况。结果倒置相差显微镜下观察,接种于有3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞可传至7～8代,其细胞形态均一,功能良好;无3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞形态多样,传至第2代时,即开始出现老化。细胞生长曲线显示,两种方法培养的口腔黏膜细胞均于第8天开始呈对数增长,第14天达峰值。接种于有3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞,培养至融合时所获得细胞数量明显多于接种于无3T3细胞培养皿的口腔黏膜细胞。两种方法培养的口腔黏膜细胞行免疫荧光染色,均呈绿色荧光。HE染色观察,BAMG经脱细胞处理后未见细胞,脱细胞效果良好。复合培养1周后,HE染色及扫描电镜观察口腔黏膜细胞与BAMG复合良好。结论兔口腔黏膜细胞可在体外成功培养、扩增,与同种异体BAMG复合后生长良好,为构建组织工程尿道提供了一种新的选择。 展开更多
关键词 组织工程尿道 口腔黏膜细胞 膀胱黏膜下脱细胞基质 体外复合 兔
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