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MCFP慢病毒干涉载体及HepG2稳定细胞系的构建
1
作者
笪倩
于淼
+1 位作者
杨晓明
汪思应
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2011年第11期1115-1121,共7页
目的:研究线粒体转运蛋白质超家族新成员SLC25A40(MCFP)RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体对人肝癌细胞系HepG2细胞中MCFP基因的沉默效果.方法:通过RNAi序列设计软件进行MCFP干涉片段设计,筛选出MCFP基因的RNAi有效靶序列,进一步合成靶序列的...
目的:研究线粒体转运蛋白质超家族新成员SLC25A40(MCFP)RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体对人肝癌细胞系HepG2细胞中MCFP基因的沉默效果.方法:通过RNAi序列设计软件进行MCFP干涉片段设计,筛选出MCFP基因的RNAi有效靶序列,进一步合成靶序列的OligoDNA,构建pSiCoR-MCFP慢病毒载体并包装产生慢病毒干涉毒液.运用病毒感染HepG2细胞获得稳定干涉MCFP的细胞株,利用PCR和Westernblot方法检测稳定细胞株中MCFP的干涉效果.结果:成功构建具有MCFP干涉效果的慢病毒干涉载体并获得了稳定干涉MCFP及对照的HepG2细胞株.收集慢病毒上清,流式测定干涉病毒滴度为1.45×1010pfu/L,对照病毒滴度为1.78×1010pfu/L.PCR和Westernblot实验均证实干涉MCFP后,HepG2细胞株中MCFP蛋白表达水平明显降低(P<0.001).结论:成功构建具有MCFP干涉效果的慢病毒干涉载体及稳定干涉MCFP的HepG2细胞株.
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关键词
慢病毒
线粒体
转运蛋白
超家族
成员
RNA干扰
人肝癌细胞系HEPG2
下载PDF
职称材料
题名
MCFP慢病毒干涉载体及HepG2稳定细胞系的构建
1
作者
笪倩
于淼
杨晓明
汪思应
机构
中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所
安徽医科大学病理生理学教研室
出处
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2011年第11期1115-1121,共7页
基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)基金资助项目
No.2006CB910802
+1 种基金
国家高技术研究发展计划(863计划)基金资助项目
No.2006AA02A310~~
文摘
目的:研究线粒体转运蛋白质超家族新成员SLC25A40(MCFP)RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体对人肝癌细胞系HepG2细胞中MCFP基因的沉默效果.方法:通过RNAi序列设计软件进行MCFP干涉片段设计,筛选出MCFP基因的RNAi有效靶序列,进一步合成靶序列的OligoDNA,构建pSiCoR-MCFP慢病毒载体并包装产生慢病毒干涉毒液.运用病毒感染HepG2细胞获得稳定干涉MCFP的细胞株,利用PCR和Westernblot方法检测稳定细胞株中MCFP的干涉效果.结果:成功构建具有MCFP干涉效果的慢病毒干涉载体并获得了稳定干涉MCFP及对照的HepG2细胞株.收集慢病毒上清,流式测定干涉病毒滴度为1.45×1010pfu/L,对照病毒滴度为1.78×1010pfu/L.PCR和Westernblot实验均证实干涉MCFP后,HepG2细胞株中MCFP蛋白表达水平明显降低(P<0.001).结论:成功构建具有MCFP干涉效果的慢病毒干涉载体及稳定干涉MCFP的HepG2细胞株.
关键词
慢病毒
线粒体
转运蛋白
超家族
成员
RNA干扰
人肝癌细胞系HEPG2
Keywords
Lentivirus
Mitochondrial transporters
RNA interference
HepG2
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MCFP慢病毒干涉载体及HepG2稳定细胞系的构建
笪倩
于淼
杨晓明
汪思应
《世界华人消化杂志》
CAS
北大核心
2011
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