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芍药苷对糖尿病周围神经病变状态下线粒体输入途径蛋白TOM20的作用
1
作者 刘东齐 闫仕祺 +1 位作者 刘浩龙 杨鑫伟 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2987-2995,共9页
目的探究芍药苷对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经和高糖环境下雪旺细胞(Schwann cells,SCs)线粒体输入途径蛋白线粒体外膜转位酶20(translocase of outer mitochondrial membrane 20,TOM20)的影... 目的探究芍药苷对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经和高糖环境下雪旺细胞(Schwann cells,SCs)线粒体输入途径蛋白线粒体外膜转位酶20(translocase of outer mitochondrial membrane 20,TOM20)的影响。方法以25、100、150 mmol/L葡萄糖分别干预RSC96雪旺细胞株12、24、48 h,用高内涵分析法检测TOM20和线粒体硫氧还蛋白2(mitochondrial thioredoxin 2,Trx2)的表达;设置对照组(给予25 mmol/L葡萄糖)、TOM20 siRNA组、TOM20 siRNA+芍药苷24 h组和TOM20 siRNA+芍药苷48 h组,转染TOM20 siRNA后给予10 mmol/L芍药苷分别干预24、48 h,利用Western blotting检测TOM20和Trx2蛋白表达;设置对照组(给予25 mmol/L葡萄糖)、高糖组(给予150 mmol/L葡萄糖)和芍药苷组(给予150 mmol/L葡萄糖和10 mmol/L芍药苷),利用高内涵分析法检测TOM20和Trx2蛋白表达。制备DPN大鼠模型,给予白芍总苷后,利用免疫荧光法检测大鼠坐骨神经中TOM20和Trx2蛋白表达。结果高内涵分析结果显示,150 mmol/L葡萄糖干预12、24 h后,TOM20和Trx2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01),且2种蛋白的表达变化存在相关性。与对照组比较,高糖组TOM20和Trx2蛋白表达均显著降低(P<0.01);与高糖组比较,芍药苷组TOM20和Trx2蛋白表达均显著升高(P<0.01)。Western blotting结果显示,与对照组比较,TOM20 siRNA组TOM20和Trx2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01);与TOM20 siRNA组比较,芍药苷干预24、48 h后TOM20和Trx2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05、0.01)。与对照组比较,模型组大鼠坐骨神经中TOM20和Trx2蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,白芍总苷组TOM20和Trx2蛋白表达均显著升高(P<0.01)。结论芍药苷能够通过上调SCs以及大鼠坐骨神经中TOM20蛋白的表达,促进Trx2蛋白的线粒体输入,从而有效对抗线粒体氧化应激干预DPN。 展开更多
关键词 芍药苷 雪旺细胞 糖尿病周围神经病变 线粒体膜外转位酶20 线粒体硫氧还蛋白
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线粒体硫氧还蛋白对于神经退行性病变干预机制研究进展
2
作者 任伟硕 杨鑫伟 《医学研究杂志》 2023年第3期174-176,180,共4页
线粒体硫氧还蛋白(thioredoxin2,Trx2)是存在于线粒体的一种硫氧还蛋白家族的小分子蛋白质,广泛参与了细胞内抗氧化应激、核酸代谢、细胞生长与凋亡等多种生物学过程。目前研究表明,Trx2可能通过抗氧化或与其他蛋白质相互作用的方式参... 线粒体硫氧还蛋白(thioredoxin2,Trx2)是存在于线粒体的一种硫氧还蛋白家族的小分子蛋白质,广泛参与了细胞内抗氧化应激、核酸代谢、细胞生长与凋亡等多种生物学过程。目前研究表明,Trx2可能通过抗氧化或与其他蛋白质相互作用的方式参与多种神经退行性病变如阿尔茨海默病、帕金森病等的发生、发展过程。本文就Trx2在线粒体中的功能及线粒体互作网络参与神经退行性疾病的作用机制进行介绍。 展开更多
关键词 线粒体硫氧还蛋白 氧化应激 神经退行性病变 线粒体
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Trx2、GSH和GSH-PX与大鼠肝移植术后肾损伤修复的相关性研究 被引量：3
3
作者 原冬冬 葛缅 +3 位作者 孙国亮 张政 池信锦 黑子清 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期666-671,共6页
【目的】探讨线粒体型硫氧还蛋白(Trx2),谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)对肝移植术后急性肾损伤的保护作用。【方法】建立大鼠肝移植模型,将雄性SD大鼠35只,随机均分为假手术组(n=7)和移植后4 h组(n=7),移植后8 h组(n=7),... 【目的】探讨线粒体型硫氧还蛋白(Trx2),谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)对肝移植术后急性肾损伤的保护作用。【方法】建立大鼠肝移植模型,将雄性SD大鼠35只,随机均分为假手术组(n=7)和移植后4 h组(n=7),移植后8 h组(n=7),移植后16 h组(n=7)和移植后24 h组(n=7)。假手术组只进行开腹和血管的分离,各移植组接受自体肝移植。观察大鼠自体肝移植后不同时期肾脏病理、活性氧水平、Trx2表达、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性。【结果】肝移植术后8h肾脏损伤最为严重,移植术后24 h肾脏损伤有所恢复。肝移植术后4 h开始,肾脏·OH、H2O2、MDA和LDH的含量明显增加,逐渐达到最高水平,术后24 h逐渐恢复正常。而具有保护作用的GSH以及GSH-PX的含量在肝移植术后4 h即开始明显下降,术后24 h逐渐恢复至正常水平。肾脏Trx2的表达在肝移植术后4 h反应性的增高,术后8 h达到最高峰,而后逐渐下降。相关性分析显示,肝移植术后肾脏GSH、GSH-PX的含量与肾损伤病理评分呈负相关(P<0.01);肾脏Trx2蛋白表达与肾损伤病理评分呈正相关(P<0.05)。【结论】肝移植术后4 h即可发生明显的肾损伤,术后8 h最为明显,而后逐渐恢复。其损伤的严重程度与GSH和GSH-PX的含量呈负相关;与Trx2的表达呈正相关,Trx2表达的增加有利于抗氧化酶合成,减轻肝移植术后的急性肾损伤。 展开更多
关键词 肝移植 急性肾损伤 线粒体型硫氧还蛋白 谷胱甘肽 谷胱甘肽过氧化物酶
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肉鸡线粒体型硫氧还蛋白的原核表达及抗氧化特性评价
4
作者 胡莲美 余文兰 +3 位作者 李雅枫 李英 郭剑英 唐兆新 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期429-434,共6页
为了研究肉鸡线粒体型硫氧还蛋白(GgTrx2)的功能,提取肉鸡肝总RNA,经RT-PCR扩增去除信号肽序列的GgTrx2基因,构建原核表达载体pET-28a(+)-GgTrx2,转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;以Ni-NTA纯化重组蛋白并评价其活性;分析GgTrx2对... 为了研究肉鸡线粒体型硫氧还蛋白(GgTrx2)的功能,提取肉鸡肝总RNA,经RT-PCR扩增去除信号肽序列的GgTrx2基因,构建原核表达载体pET-28a(+)-GgTrx2,转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;以Ni-NTA纯化重组蛋白并评价其活性;分析GgTrx2对脂多糖(LPS)诱导的鸡肝细胞氧化应激的影响。结果显示,构建的原核表达载体pET-28a(+)-GgTrx2在37℃经1.0mmol/L IPTG诱导4h蛋白表达效果最好,经Ni-NTA柱纯化后纯度达90%以上,质量浓度为5.0mg/mL。该重组蛋白具有较高的还原胰岛素二硫键的能力,并呈现浓度效应。抗氧化功能分析表明,GgTrx2预处理能显著降低LPS诱导的鸡肝细胞膜脂过氧化和保护抗氧化酶SOD和CAT的活性。结果表明,本研究原核表达的GgTrx2蛋白具有良好的生物学活性和抗氧化应激特性,为进一步阐明其生物学功能和用于治疗氧化应激性疾病奠定了基础。 展开更多
关键词 肉鸡 线粒体型硫氧还蛋白 原核表达 蛋白纯化
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低硒大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶的活性和表达 被引量：6
5
作者 邹宁 赵文然 +3 位作者 滕宗艳 周立华 周令望 于维汉 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期213-215,共3页
目的探讨低硒状态下大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶(TR2)的活性和表达变化,分析体内硒水平改变对TR2活性的影响及其可能的机制。方法用低硒饲料喂养断乳2周的Wistar大鼠14周,分别采用生物化学方法、Western blot和Northern blot杂交... 目的探讨低硒状态下大鼠心肌线粒体型硫氧还蛋白还原酶(TR2)的活性和表达变化,分析体内硒水平改变对TR2活性的影响及其可能的机制。方法用低硒饲料喂养断乳2周的Wistar大鼠14周,分别采用生物化学方法、Western blot和Northern blot杂交检测心肌组织中TR2的活性改变及TR2蛋白、基因表达变化。结果低硒组大鼠心肌TR2活性降低至对照组的69.3%,差异有非常显著意义。蛋白杂交的峰面积密度扫描结果显示,常硒组为3 538,低硒组为2 167。Northern blot结果显示,低硒组与对照组差异无显著意义。结论低硒能够降低心肌TR2的活性和蛋白表达水平,但并不影响此酶的基因表达。提示低硒导致心肌TR2活性降低可能是由于TR2蛋白合成过程中SeCys插入减少所致。 展开更多
关键词 低硒 大鼠 心肌 线粒体型硫氧还蛋白还原酶活性 基因表达 检测
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硒和蛋白质对大鼠心肌形态结构及谷胱甘肽过氧化物酶和线粒体型硫氧还蛋白还原酶表达的影响 被引量：4
6
作者 刘春旭 王艺如 +9 位作者 裴俊瑞 周令望 侯杰 张立君 王铜 张辉 刘明法 李少臣 陈洁 闫丽佳 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期40-45,共6页
目的观察硒和蛋白质对大鼠心肌形态结构及谷胱甘肽过氧化物酶（GPX1）、线粒体型硫氧还蛋白还原酶（TR2）表达的影响。方法选取健康纯系断乳雄性Wistar大鼠60只，按2×2析因设计分为4组，每组15只。饮水分为低硒（0mg／L）、常硒（0... 目的观察硒和蛋白质对大鼠心肌形态结构及谷胱甘肽过氧化物酶（GPX1）、线粒体型硫氧还蛋白还原酶（TR2）表达的影响。方法选取健康纯系断乳雄性Wistar大鼠60只，按2×2析因设计分为4组，每组15只。饮水分为低硒（0mg／L）、常硒（0．25mg／L）2个水平；饲料分别为低蛋白（10％蛋白＋0．008mg／kg硒）、常蛋白（20％蛋白＋0．015～0．026mg／kg硒）2个水平。饲养1年后处死，光镜下观察心肌组织病理改变。免疫组化法和Westernblot法检测GP1和TR2在大鼠心肌组织的表达水平。结果各组大鼠心肌坏死率比较，差异有统计学意义（X^2=11．04，P〈0．05），其中低硒低蛋白组[66．7％（8／12）]明显高于常硒常蛋白组[7．1％（1／14），X^2=11．06，P〈0．05]。免疫组化法检测，低硒低蛋白组、常硒低蛋白组、低硒常蛋白组、常硒常蛋白组大鼠心肌组织GPXl表达阳性率分别为0（0／12）、81．8％（9／11）、10．0％（1／10）、100．0％（14／14），其中常硒低蛋白组和常硒常蛋白组阳性率明显高于低硒低蛋白组和低硒常蛋白组（x。值分别为12．88、8．14和35．89、32．60，P均〈0．05）；TR2阳性率分别为0（0／12）、81．8％（9／11）、0（0／10）、100．0％（14／14），其中常硒低蛋白组和常硒常蛋白组阳性率明显高于低硒低蛋白组和低硒常蛋白组（）（：值分别为28．67、18．25和35．89、32．60，P均〈0．05）。Western blot法检测，上述4组大鼠心肌组织GPX1蛋白表达分别为0．87±0．13、1．18±0．13、0．95±0．13、1．74±0．23，经析因分析，硒和蛋白质水平对心肌细胞GPX1表达具有影响作用（F值分别为124．93、43．16，P均〈0．05），且硒和蛋白质间有交互作用（F=24．10，P〈0．05）；TR2蛋白表达分别为0．63±0．19、0．97±0．24、0．55±0．08、1．03±0．31，经析因分析，硒因素对心肌细胞TR2表 展开更多
关键词 硒 蛋白质 心肌 谷胱甘肽过氧化酶 线粒体型硫氧还蛋白还原酶
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