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高密度发酵P.pastoris组成型表达纤维素二糖水解酶
1
作者 崔艳艳 易国辉 +3 位作者 屠发志 张添元 罗进贤 张爱联 《热带作物学报》 CSCD 2010年第8期1293-1297,共5页
用PCR法扩增里氏木霉cbhⅡ基因,并将其克隆到P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP9K-cbhⅡ。通过电转法将cbhⅡ基因整合到P.pastoris的基因组中,然后筛选高G418抗性的克隆作为工程菌菌种。在生物反应器中生产CBHⅡ,将20L发... 用PCR法扩增里氏木霉cbhⅡ基因,并将其克隆到P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP9K-cbhⅡ。通过电转法将cbhⅡ基因整合到P.pastoris的基因组中,然后筛选高G418抗性的克隆作为工程菌菌种。在生物反应器中生产CBHⅡ,将20L发酵液装入50L的发酵罐中,在发酵过程中连续64h补加甘油-PTM4,放罐时生物量为A600=170,CBHⅡ的表达量为75mg/L。其表达产物具有酶解羧甲基纤维素的活性。 展开更多
关键词 纤维素二糖水解酶 毕赤酵母 基因表达 纤维素酶活力
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用pGAP启动子在P.pastoris中组成型表达cbhⅡ基因
2
作者 易国辉 屠发志 +3 位作者 张爱联 张添元 屈直 罗进贤 《工业微生物》 CAS CSCD 2010年第4期29-33,共5页
用套叠PCR法扩增木霉的cbh Ⅱ基因,以EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP-cbh Ⅱ。通过电转法将其cbhⅡ基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性的克隆作为工程菌。用葡萄糖作为碳源摇瓶发... 用套叠PCR法扩增木霉的cbh Ⅱ基因,以EcoR I和Not I双酶切将其克隆进P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAP-cbh Ⅱ。通过电转法将其cbhⅡ基因重组于P.pastoris基因组,筛选高G418抗性的克隆作为工程菌。用葡萄糖作为碳源摇瓶发酵3 d,分泌的重组蛋白CBHⅡ达到50 mg/L。用CMC酶活法测定发酵液中的CMC酶活力为2.05 U/mL。 展开更多
关键词 纤维素二糖水解酶 毕赤酵母 基因表达 酶活力
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用酶改性浆料中的碳水化合物以提高TMP粗渣的磨浆效果
3
《纸和造纸》 北大核心 2004年第2期95-96,共2页
关键词 TMP粗渣 酶改性 碳水化合物 磨浆能耗 纸浆 纤维素二糖水解酶
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