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贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法分离纯化鉴定大鼠纤维环源干细胞
被引量:
1
1
作者
马东
陈祁青
+5 位作者
赵继荣
黄军凯
杨云云
朱宝
赵宁
马同
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2024年第31期4980-4986,共7页
背景:目前,细胞疗法治疗椎间盘退变多以骨髓间充质干细胞为主。但是,使用骨髓间充质干细胞作为纤维环再生的种子细胞存在修复部位形成异位骨化和畸胎瘤的危险。因此,寻找一种新的纤维环组织工程种子细胞对椎间盘退变的治疗将具有巨大的...
背景:目前,细胞疗法治疗椎间盘退变多以骨髓间充质干细胞为主。但是,使用骨髓间充质干细胞作为纤维环再生的种子细胞存在修复部位形成异位骨化和畸胎瘤的危险。因此,寻找一种新的纤维环组织工程种子细胞对椎间盘退变的治疗将具有巨大的经济和社会意义。目的:通过贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附筛选法分离纯化大鼠纤维环源干细胞,观察纯化效果及细胞的生物学特性。方法:从SD大鼠椎间盘中获取纤维环组织,机械-酶消化法获取原代纤维环源干细胞,通过贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法纯化纤维环源干细胞,在显微镜下观察细胞形态变化及增殖情况,应用细胞免疫荧光技术和qPCR技术检测干细胞表面标志物的表达,对筛选后的细胞进行多系诱导分化和特征性基因检测。结果与结论:①纯化后细胞生长良好,形态多以角形和星形多突起细胞为主,具有较好的增殖能力;②细胞膜表面抗原CD73、CD90、CD105呈阳性表达,CD45、CD34呈阴性表达;③经特定诱导后,细胞可以成功分化为成骨细胞、成软骨细胞及成脂细胞;④成骨诱导后Collagen-Ⅰ、Runx2、成软骨诱导后Collagen-Ⅱ、Sox-9和成脂诱导后PPAR-γ、LPL各特征性基因均在细胞中呈高表达,与诱导前比较,差异有显著性意义(P<0.05);⑤结果表明,贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法能够有效筛选、纯化大鼠纤维环源干细胞,所得的细胞生物学性能良好,具有较好的增殖及多向分化潜能。
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关键词
纤维
环
源
干细胞
培养
纤维
连接蛋白
差别黏附法
大鼠
下载PDF
职称材料
脱细胞纤维环基质对兔纤维环源干细胞分化的影响
被引量:
1
2
作者
王晟昊
王奕彬
+4 位作者
过倩萍
刘晨
王天鹏
杨惠林
李斌
《国际骨科学杂志》
2015年第3期211-217,共7页
目的观察脱细胞纤维环基质(DAFM)对纤维环源干细胞(AFSC)分化行为的影响,为新型纤维环组织工程支架材料的开发提供依据。方法将从新西兰大白兔获得的AFSC接种于由猪纤维环组织制备的DAFM膜和无DAFM膜培养皿,分别进行成脂、成骨、成软骨...
目的观察脱细胞纤维环基质(DAFM)对纤维环源干细胞(AFSC)分化行为的影响,为新型纤维环组织工程支架材料的开发提供依据。方法将从新西兰大白兔获得的AFSC接种于由猪纤维环组织制备的DAFM膜和无DAFM膜培养皿,分别进行成脂、成骨、成软骨分化诱导,考察DAFM对AFSC分化行为的影响。结果 AFSC在DAFM膜上生长良好。DAFM膜上AFSC成脂、成软骨诱导分化水平低于无DAFM膜者,而成骨诱导分化水平显著高于无DAFM膜者;DAFM膜上的成脂、成骨及成软骨诱导比值(诱导组基因表达量/对照组基因表达量)均高于无DAFM膜者。结论猪DAFM有利于促进兔AFSC成骨分化,抑制其成脂及成软骨分化,较好地维持AFSC的差异性分化潜能。
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关键词
脱
细胞
纤维
环
基质
纤维
环
源
干细胞
分化
下载PDF
职称材料
题名
贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法分离纯化鉴定大鼠纤维环源干细胞
被引量:
1
1
作者
马东
陈祁青
赵继荣
黄军凯
杨云云
朱宝
赵宁
马同
机构
甘肃中医药大学
甘肃省中医院
出处
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2024年第31期4980-4986,共7页
基金
甘肃省自然科学基金项目(17JR5RA051),项目负责人:陈祁青
国家自然科学基金地区科学基金项目(81760877),项目负责人:赵继荣
甘肃省中医院博士启动基金项目(2018-1),项目负责人:陈祁青。
文摘
背景:目前,细胞疗法治疗椎间盘退变多以骨髓间充质干细胞为主。但是,使用骨髓间充质干细胞作为纤维环再生的种子细胞存在修复部位形成异位骨化和畸胎瘤的危险。因此,寻找一种新的纤维环组织工程种子细胞对椎间盘退变的治疗将具有巨大的经济和社会意义。目的:通过贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附筛选法分离纯化大鼠纤维环源干细胞,观察纯化效果及细胞的生物学特性。方法:从SD大鼠椎间盘中获取纤维环组织,机械-酶消化法获取原代纤维环源干细胞,通过贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法纯化纤维环源干细胞,在显微镜下观察细胞形态变化及增殖情况,应用细胞免疫荧光技术和qPCR技术检测干细胞表面标志物的表达,对筛选后的细胞进行多系诱导分化和特征性基因检测。结果与结论:①纯化后细胞生长良好,形态多以角形和星形多突起细胞为主,具有较好的增殖能力;②细胞膜表面抗原CD73、CD90、CD105呈阳性表达,CD45、CD34呈阴性表达;③经特定诱导后,细胞可以成功分化为成骨细胞、成软骨细胞及成脂细胞;④成骨诱导后Collagen-Ⅰ、Runx2、成软骨诱导后Collagen-Ⅱ、Sox-9和成脂诱导后PPAR-γ、LPL各特征性基因均在细胞中呈高表达,与诱导前比较,差异有显著性意义(P<0.05);⑤结果表明,贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法能够有效筛选、纯化大鼠纤维环源干细胞,所得的细胞生物学性能良好,具有较好的增殖及多向分化潜能。
关键词
纤维
环
源
干细胞
培养
纤维
连接蛋白
差别黏附法
大鼠
Keywords
annulus fibrosus-derived stem cell
cultivation
fibronectin
differential adhesion method
rat
分类号
R459.9 [医药卫生—治疗学]
R331 [医药卫生—临床医学]
R332
下载PDF
职称材料
题名
脱细胞纤维环基质对兔纤维环源干细胞分化的影响
被引量:
1
2
作者
王晟昊
王奕彬
过倩萍
刘晨
王天鹏
杨惠林
李斌
机构
苏州大学附属第一医院骨科
苏州大学骨科研究所
出处
《国际骨科学杂志》
2015年第3期211-217,共7页
基金
国家自然科学基金(81171479)
江苏省自然科学基金(BK2011291)
+1 种基金
国家级大学生创新创业训练计划项目(SG31554412
5731554412)
文摘
目的观察脱细胞纤维环基质(DAFM)对纤维环源干细胞(AFSC)分化行为的影响,为新型纤维环组织工程支架材料的开发提供依据。方法将从新西兰大白兔获得的AFSC接种于由猪纤维环组织制备的DAFM膜和无DAFM膜培养皿,分别进行成脂、成骨、成软骨分化诱导,考察DAFM对AFSC分化行为的影响。结果 AFSC在DAFM膜上生长良好。DAFM膜上AFSC成脂、成软骨诱导分化水平低于无DAFM膜者,而成骨诱导分化水平显著高于无DAFM膜者;DAFM膜上的成脂、成骨及成软骨诱导比值(诱导组基因表达量/对照组基因表达量)均高于无DAFM膜者。结论猪DAFM有利于促进兔AFSC成骨分化,抑制其成脂及成软骨分化,较好地维持AFSC的差异性分化潜能。
关键词
脱
细胞
纤维
环
基质
纤维
环
源
干细胞
分化
Keywords
Decellularized annulus fibrosus matrix
Annulus fibrosus-derived stem cell
Differentiation
分类号
R318.08 [医药卫生—生物医学工程]
R681.5 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
贴壁法联合纤维连接蛋白差别黏附法分离纯化鉴定大鼠纤维环源干细胞
马东
陈祁青
赵继荣
黄军凯
杨云云
朱宝
赵宁
马同
《中国组织工程研究》
CAS
北大核心
2024
1
下载PDF
职称材料
2
脱细胞纤维环基质对兔纤维环源干细胞分化的影响
王晟昊
王奕彬
过倩萍
刘晨
王天鹏
杨惠林
李斌
《国际骨科学杂志》
2015
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
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