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钙敏感受体及紧密连接蛋白-14的表达对肾草酸钙结石形成的影响 被引量：7
1
作者 孙稳 王勤章 +2 位作者 丁国富 钱彪 彭心宇 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第11期1143-1147,共5页
目的肾结石中草酸钙型结石最为常见。文中通过构建大鼠肾草酸钙结石模型,初步探讨钙敏感受体-紧密连接蛋白-14(calcium-sensing receptor-Claudin-14,Ca SR-Claudin-14)调节通路在肾草酸钙结石形成中的作用。方法 30只雄性SD大鼠随机分... 目的肾结石中草酸钙型结石最为常见。文中通过构建大鼠肾草酸钙结石模型,初步探讨钙敏感受体-紧密连接蛋白-14(calcium-sensing receptor-Claudin-14,Ca SR-Claudin-14)调节通路在肾草酸钙结石形成中的作用。方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组和结石组,每组15只。采用1%乙二醇自由饮水+2%氯化铵(2 m L)灌胃诱导大鼠肾草酸钙结石模型形成;HE染色鉴定模型;全自动生化分析仪检测各组尿生化指标;免疫组化学检测Ca SR蛋白表达;RT-PCR检测Claudin-14mRNA表达;Western blot检测Ca SR和Claudin-14蛋白表达。结果光镜下结石组有大量结石结晶形成,结石组24 h尿钙排泄量高于对照组[(9.66±1.10)mmol vs(3.26±0.60)mmol,P<0.01]、结石组24 h尿量显著高于对照组[(21.27±1.08)m L vs(13.2±0.55)m L,P<0.01],2组尿p H差异无统计学意义(P>0.05);结石组Claudin-14 mRNA相对表达量显著高于对照组[(0.150±0.004)vs(0.047±0.008),P<0.01]、结石组Claudin-14蛋白含量高于对照组[(1.526±0.089)vs 0,P<0.01];结石组Ca SR蛋白含量高于对照组[(6.697±0.051)vs(5.016±0.053),P<0.05]。结论 Ca SR可通过上调Claudin-14表达增加肾小管尿钙排泄从而参与肾草酸钙结石形成。 展开更多
关键词 钙敏感受体 紧密连接蛋白-14 肾结石 大鼠 Claudin-14
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探讨钙敏感受体及紧密连接蛋白-14在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用 被引量：3
2
作者 李朋 高存祥 +6 位作者 王勤章 钱成 徐浩 申茂磊 郝志强 傅家豪 钱彪 《川北医学院学报》 CAS 2018年第6期811-814,共4页
目的:动态观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,Ca SR)及紧密连接蛋白-14(Claudin-14)在大鼠肾草酸钙结石形成过程中的表达,探讨Ca SR及Claudin-14在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用。方法:选取60只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照... 目的:动态观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,Ca SR)及紧密连接蛋白-14(Claudin-14)在大鼠肾草酸钙结石形成过程中的表达,探讨Ca SR及Claudin-14在大鼠肾草酸钙结石形成中的作用。方法:选取60只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组和结石组,每组各30只。正常对照组以正常饮水每日每只2 m L灌胃,结石组大鼠给予1%乙二醇和2%氯化铵每日每只2 m L灌胃,诱导建立Wistar大鼠肾草酸钙结石模型。连续10周观察大鼠的一般情况,每组每周处死3只大鼠并收集双侧肾脏标本,采用光学显微镜、HE切片染色动态观察结石形成情况。免疫组织化学染色技术对Ca SR及Claudin-14在肾组织的表达水平进行动态监测。结果:第3周起,结石组大鼠肾脏开始肿大,慢慢可见淡黄色颗粒沉积在皮髓交界处,触之有沙粒样感觉,表面出现结晶或钙化; 1～10周正常对照组均无上述形态学改变。第3周开始,结石组大鼠肾脏切片HE染色可见明亮晶体,主要分布于远曲小管和近曲小管,肾组织可见肾小管轻度扩张,偶见肾小管上皮脱落或肾间质有淋巴细胞浸润; 1～10周正常对照组肾组织未见病理性改变。免疫组织化学染色结果:第1、2周,两组大鼠肾组织内Ca SR的表达没有明显差异,第3周开始,结石组肾组织内Ca SR的表达明显高于对照组; 1～10周对照组肾组织内均无Claudin-14的表达,第3周起,结石组肾组织Claudin-14呈高度表达。结论:Ca SR及Claudin-14的高度表达可能在大鼠肾草酸钙结石形成过程中起重要作用。 展开更多
关键词 钙敏感受体 紧密连接蛋白-14 草酸钙肾结石
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钙敏感受体及紧密连接蛋白-14在草酸钙结石大鼠肾组织中的表达及意义 被引量：1
3
作者 孙稳 王勤章 丁国富 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第7期657-660,共4页
目的初步探讨钙敏感受体(CaSR)和紧密连接蛋白(Claudin)-14在肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达及意义。方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组和结石组各15只,采用1%乙二醇和2%氯化铵每日2 mL灌胃诱导制作大鼠肾草酸钙结石模型。免疫组织化... 目的初步探讨钙敏感受体(CaSR)和紧密连接蛋白(Claudin)-14在肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达及意义。方法 30只雄性SD大鼠随机分为对照组和结石组各15只,采用1%乙二醇和2%氯化铵每日2 mL灌胃诱导制作大鼠肾草酸钙结石模型。免疫组织化学检测CaSR蛋白表达;RT-PCR检测Claudin-14 mRNA表达;West-ern-Blotting分别检测CaSR和Claudin-14蛋白表达;全自动生化分析仪检测2组大鼠肾功能、血及尿生化指标。结果光镜下结石组有大量结石结晶形成,血清肌肝(Cr)、尿素氮(BUN)、24 h尿钙及尿量较对照组升高(P<0.01),2组间血钙、尿pH差异无统计学意义。结石组Claudin-14 mRNA及CaSR蛋白表达较对照组升高(P<0.01),Claudin-14蛋白在结石组大鼠肾组织中呈特异性高表达,对照组未检测到Claudin-14蛋白表达;结石组大鼠肾组织中CaSR和Claudin-14蛋白表达呈正相关,同时,CaSR、Claudin-14蛋白表达与24 h尿钙排泄量也呈正相关。结论 CaSR和Claudin-14表达增高可通过增加尿钙排泄量,进而参与结石的形成。 展开更多
关键词 肾结石 草酸钙 受体 钙敏感 大鼠 SPRAGUE-DAWLEY 紧密连接蛋白-14
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肾草酸钙结石大鼠肾组织中Claudin-14的表达变化及意义 被引量：1
4
作者 孙稳 丁国富 王勤章 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第3期340-344,共5页
为构建大鼠肾草酸钙结石模型,从基因和蛋白水平初步探讨紧密连接蛋白-14(Claudin-14)在肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达变化及意义。采用30只雄性S-D大鼠随机分为对照组(n=15)和结石组(n=15),采用乙二醇和氯化铵灌胃诱导制作大鼠肾草酸... 为构建大鼠肾草酸钙结石模型,从基因和蛋白水平初步探讨紧密连接蛋白-14(Claudin-14)在肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达变化及意义。采用30只雄性S-D大鼠随机分为对照组(n=15)和结石组(n=15),采用乙二醇和氯化铵灌胃诱导制作大鼠肾草酸钙结石模型。分别采用RT-PCR检测Claudin-14 mRNA表达;Western-Blotting检测Claudin-14蛋白表达;全自动生化分析仪检测各组大鼠24 h尿钙排泄。结果显示:光镜下结石组有大量结石结晶形成,且24h尿钙较对照组显著升高(P<0.01),Claudin-14 mRNA表达较对照组显著升高(P<0.01);Claudin-14蛋白在结石组高表达,在对照组未见表达;相关性分析发现结石组Claudin-14蛋白表达与24 h尿钙排泄呈显著正相关。由此可知,Claudin-14在肾草酸钙结石大鼠肾组织中高表达,可能是肾小管内尿钙增高,结石形成的机制之一。 展开更多
关键词 肾结石 大鼠 紧密连接蛋白-14
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Claudin-14在纳米细菌肾结石形成中表达的动态研究 被引量：3
5
作者 申茂磊 王勤章 +4 位作者 钱成 徐浩 郝志强 李鹏 钱彪 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2019年第1期64-67,共4页
目的本实验通过尾静脉注射用肾结石患者尿液培养的纳米细菌构建肾结石模型检测肾脏组织中Claudin-14(紧密连接蛋白-14)蛋白的表达情况,初步探讨Claudin-14在纳米细菌形成结石中的作用。方法 60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和纳... 目的本实验通过尾静脉注射用肾结石患者尿液培养的纳米细菌构建肾结石模型检测肾脏组织中Claudin-14(紧密连接蛋白-14)蛋白的表达情况,初步探讨Claudin-14在纳米细菌形成结石中的作用。方法 60只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组和纳米细菌组,每组30只。正常对照组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射0.9%氯化钠注射液1.2mL,纳米细菌组Wistar雄性大鼠一次性给予尾静脉注射等量的纳米细菌悬浊液。两组Wistar雄性大鼠注射后的10周内每周处死3只。每周采用病理组织学方法评估每组3只Wistar雄性大鼠成石情况,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组化方法连续10周检测紧密连接蛋白-14(Claudin-14)mRNA和蛋白的表达。结果 (1)病理组织学检查结果:第4周以后纳米细菌组Wistar雄性大鼠肾小管内发现晶体颗粒,且主要分布于近、远曲小管,1～10周对照组Wistar雄性大鼠未见晶颗粒。(2)实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和免疫组化结果:3周内Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中几乎未见表达,从第4周起Claudin-14mRNA和蛋白在纳米细菌组中表达水平增高并且对照组明显增高,1～10周间Claudin-14mRNA和蛋白在对照组中几乎未见表达。结论 Claudin-14表达的增加可能在纳米细菌形成结石中起重要作用。 展开更多
关键词 紧密连接蛋白14 纳米细菌 肾结石
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四环素对纳米细菌感染的人肾小管上皮细胞HK-2中CaSR、Claudin-14表达的影响 被引量：1
6
作者 申茂磊 高存祥 +5 位作者 郑丽英 王勤章 徐浩 郝志强 傅家豪 钱彪 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第19期2607-2611,共5页
目的:研究四环素对纳米细菌(NB)感染的人肾小管上皮细胞HK-2中钙敏感受体(CaSR)、紧密连接蛋白14(Claudin-14)表达的影响,为抑制肾结石的形成提供参考。方法:将HK-2细胞分为空白对照组、NB组和四环素组(NB+四环素),每组3个复孔,各组分... 目的:研究四环素对纳米细菌(NB)感染的人肾小管上皮细胞HK-2中钙敏感受体(CaSR)、紧密连接蛋白14(Claudin-14)表达的影响,为抑制肾结石的形成提供参考。方法:将HK-2细胞分为空白对照组、NB组和四环素组(NB+四环素),每组3个复孔,各组分别加入相应NB和药物后共培养24 h。采用透射电子显微镜观察各组细胞的形态和超微结构变化,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和Western blot法分别检测细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白的表达水平。结果:与空白对照组比较,NB组细胞膜结构破损,胞核裸露在外,微绒毛基本消失,线粒体数量较少,结构肿胀,细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05);四环素组细胞膜结构完整,微绒毛结构稍紊乱,局部绒毛消失,部分线粒体结构肿胀不明显,细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与NB组比较,四环素组细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:NB可能通过上调HK-2细胞中CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白的表达促进肾结石的形成,而四环素可能通过作用于NB降低CaSR、Claudin-14 mRNA和蛋白的表达抑制肾结石的形成。 展开更多
关键词 四环素 纳米细菌 人肾小管上皮细胞HK-2 钙敏感受体 紧密连接蛋白14
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