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急性胰腺炎与分子水平标志物研究进展 被引量:3
1
作者 汪镜静 李倩 《沈阳医学院学报》 2018年第6期541-544,549,共5页
目前临床上主要通过血尿淀粉酶、血清脂肪酶、炎症指标等实验室检测结果和腹部B超、CT等影像学检查诊断评估急性胰腺炎。与传统的诊断评估方法相比,分子生物学的快速发展为急性胰腺炎早期诊断和病情评估提供了新的思路途径。本文对国内... 目前临床上主要通过血尿淀粉酶、血清脂肪酶、炎症指标等实验室检测结果和腹部B超、CT等影像学检查诊断评估急性胰腺炎。与传统的诊断评估方法相比,分子生物学的快速发展为急性胰腺炎早期诊断和病情评估提供了新的思路途径。本文对国内外急性胰腺炎的新型生物分子标志物的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 基质金属蛋白酶-9 micro-RNAs 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 胃饥饿素 B7-H3 糖蛋白-2
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HSV-2 gD重组腺病毒疫苗的构建及免疫原性分析 被引量:2
2
作者 刘微 赵东海 +3 位作者 王紫琰 李艳 王皓 王会岩 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期267-272,共6页
Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus 2,HSV-2)是引起生殖器疱疹(Genital herpes,GH)的主要病原体,研制有效的HSV-2疫苗是控制病毒传播的有效途径,本研究通过穿梭载体pDC316将糖蛋白D2(Glucoprotein D2,gD2)基因连接到腺病毒载体上,... Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus 2,HSV-2)是引起生殖器疱疹(Genital herpes,GH)的主要病原体,研制有效的HSV-2疫苗是控制病毒传播的有效途径,本研究通过穿梭载体pDC316将糖蛋白D2(Glucoprotein D2,gD2)基因连接到腺病毒载体上,制备HSV-2重组腺病毒rAd-gD2,经PCR和Western blot的方法在基因和蛋白水平上鉴定正确后,分别于第0、2、4周免疫小鼠,以PBS和空白腺病毒载体(AdV)为对照,第7周取血,通过检测小鼠血清中gD2特应性IgG和中和抗体评价体液免疫应答,检测Th1/Th2型细胞因子评价细胞免疫应答。结果显示经过3次免疫,小鼠产生了高水平的gD2特应性IgG和较高水平的中和抗体,Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2明显高于对照组,Th2型细胞因子IL-4、IL-5和IL-10均高于对照组,P<0.01,具有显著的统计学意义。本研究制备的rAd-gD2既可以刺激小鼠产生体液免疫应答,也可以产生细胞免疫应答,与预期设想一致,为未来HSV-2疫苗的研发提供了数据基础。 展开更多
关键词 生殖器疱疹 Ⅱ型单纯疱疹病毒 重组腺病毒 糖蛋白D2
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糖蛋白-2与胰腺炎
3
作者 丁震 候晓华 《临床内科杂志》 CAS 北大核心 2004年第6期429-430,共2页
关键词 糖蛋白-2 胰腺炎
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天麻糖蛋白的抗凝与抗栓作用 被引量:24
4
作者 丁诚实 沈业寿 +2 位作者 李赓 卫自 魏凤 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1060-1064,共5页
目的:观察天麻糖蛋白(PGE2-1)的抗血凝与抗血栓作用。方法:玻片法、减尾法检测小鼠凝血时间(CT)和出血时间(BT);减尾测5 min后的出血量吸光度(A_(540));小鼠体内测定血浆复钙时间(RT);ADP诱导血小板聚集(PAG);试剂盒测定血浆凝血酶原时... 目的:观察天麻糖蛋白(PGE2-1)的抗血凝与抗血栓作用。方法:玻片法、减尾法检测小鼠凝血时间(CT)和出血时间(BT);减尾测5 min后的出血量吸光度(A_(540));小鼠体内测定血浆复钙时间(RT);ADP诱导血小板聚集(PAG);试剂盒测定血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、部分凝血活酶时间(AFTT);体外血栓仪测定大鼠体外形成血栓的长度、湿重、干重;实验性动静脉旁路血栓模型测定血栓的湿重及PGE2-1对其的抑制率。结果:60,120 mg·kg^(-1)的PGE2-1能显著延长小鼠的凝血时间、出血时间,增大出血量(A_(540))(P<0.05或P<0.01)。30,60,120 mg·kg^(-1)的PGE2-1能延长小鼠血浆复钙时间,降低血小板聚集率(P<0.05或P<0.01)。10, 20,40 mg·mL^(-1)的PGE2-1能使TT和APTT显著延长(P<0.05或P<0.01),但对PT的影响无统计学意义。30, 60,120 mg·kg^(-1)的PGE2-1能使小鼠消除血栓症状、恢复自主活动时间明显缩短(P<0.05或P<0.01);使大鼠体外形成的血栓长度显著减短、湿重和干中显著减小(P<0.05或P<0.01);极显著减小大鼠实验性动脉血栓的湿重(P<0.01),各药物组抑制率分别为32.5%,49.0%和61.5%。结论:PGE2-1具有显著的抗凝、抗栓作用,可能为天麻提取物在抗栓方面的主要成分。 展开更多
关键词 天麻糖蛋白PGE2-1 抗血凝 抗血栓
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重症急性胰腺炎cf-DNA/NETs、sTREM-1及GP-2α水平与病情关系 被引量:13
5
作者 陈广生 赵琳 +1 位作者 何凤棣 许海 《中华实用诊断与治疗杂志》 2020年第6期584-587,共4页
目的探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cell-free DNA/nertrophil extracellular traps,cf-DNA/NETs)、可溶性髓系细胞触发受体-1(soluble triggering receptor expresses on my... 目的探讨重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者血清游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cell-free DNA/nertrophil extracellular traps,cf-DNA/NETs)、可溶性髓系细胞触发受体-1(soluble triggering receptor expresses on myeloid cell-1,sTREM-1)、糖蛋白-2α(glycoprotein-2,GP-2α)水平变化,分析cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α与SAP病情进展的关系。方法105例胰腺炎患者,其中58例SAP患者为SAP组,47例单纯急性胰腺炎患者为胰腺炎组,根据28 d生存情况将SAP组分为生存组46例和死亡组12例。采用ELISA法检测血清sTREM-1和GP-2α水平,采用PicoGreen荧光染料定量分析检测cf-DNA/NETs表达水平;绘制ROC曲线,评估cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α单独和联合检测预测SAP病情严重程度的效能;采用多因素logistic回归分析影响SAP患者预后的因素。结果SAP组患者入院第1天血清cf-DNA/NETs[(1175.53±274.26)μg/L]、sTREM-1[(91.66±20.49)ng/L]、GP-2α[(5.09±1.82)u]水平均高于胰腺炎组[(623.17±178.35)μg/L、(63.25±15.92)ng/L、(3.53±1.26)u](P<0.05);入院第1、3、7天,死亡组血清cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α水平均高于生存组(P<0.05);当cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α最佳截断值分别为1262.15μg/L、98.19 ng/L、6.88 u时,预测SAP病情严重程度的AUC分别为0.824(95%CI:0.706~0.943,P=0.001)、0.857(95%CI:0.705~1.000,P<0.001)、0.689(95%CI:0.506~0.873,P=0.045),灵敏度分别为75.00%、91.7%、60.00%,特异度分别为80.4%、80.4%、93.4%,三者联合预测SAP病情严重程度的AUC为0.940,敏感度为91.7%、特异度为82.6%;cf-DNA/NETs(OR=2.37,95%CI:1.45~3.89,P=0.006)、sTREM-1(OR=2.32,95%CI:1.24~4.36,P=0.004)和GP-2α(OR=3.19,95%CI:1.72~5.91,P<0.001)是SAP患者预后的影响因素。结论SAP患者血清cf-DNA/NETs、sTREM-1、GP-2α呈高表达,且随病情加重而升高,均是影响SAP患者预后的危险因素,可用于评估SAP病情严重程度。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网 可溶性髓系细胞触发受体-1 糖蛋白-2α
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汉滩病毒囊膜糖蛋白G_2基因重组腺病毒的构建与表达 被引量:7
6
作者 吴兴安 张芳琳 +5 位作者 于澜 胡刚 白文涛 史梦远 王海涛 徐志凯 《科学技术与工程》 2004年第5期363-366,370,共5页
获得汉滩病毒G2 基因 ,构建其重组腺病毒并在HEK2 93细胞中包装表达 ,为研究汉滩病毒基因疫苗提供了实验基础。设计引物采用PCR从含汉滩病毒 \|76 1 1 8株M基因的M5 6质粒扩增出糖蛋白G2 基因片段 ,并将其克隆入腺病毒载体Adeno XviralD... 获得汉滩病毒G2 基因 ,构建其重组腺病毒并在HEK2 93细胞中包装表达 ,为研究汉滩病毒基因疫苗提供了实验基础。设计引物采用PCR从含汉滩病毒 \|76 1 1 8株M基因的M5 6质粒扩增出糖蛋白G2 基因片段 ,并将其克隆入腺病毒载体Adeno XviralDNA ,筛选获得重组腺病毒DNA ,转染HEK2 93细胞 ,包装、扩增后得到汉滩病毒G2 基因重组腺病毒原种 ;并在感染细胞内初步表达 ,用ELISA检测表达产物。得到了含汉滩病毒G2 基因的重组腺病毒 ,其滴度约为 1 0 10 pfu/mL ,同时在感染的HEK2 93细胞中检测到汉滩病毒糖蛋白G2 的表达。含汉滩病毒糖蛋白G2 基因重组腺病毒的成功构建 。 展开更多
关键词 汉滩病毒 毒囊膜糖蛋白G2 基因重组 腺病毒 基因构建 基因表达 肾综合征出血热
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异质性细胞核核糖蛋白A2/B1在非小细胞肺癌的表达研究 被引量:7
7
作者 卢兆桐 付强 +3 位作者 耿明 丁吉元 寇仁业 邹志强 《实用医药杂志》 2003年第3期161-163,共3页
目的观察异质性细胞核核糖蛋白A2/B1(HeterogeneousnuclearribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)在非小细胞肺癌的表达,探讨hnRNPA2/B1对非小细胞肺癌的诊断价值及与非小细胞肺癌临床分期、淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检... 目的观察异质性细胞核核糖蛋白A2/B1(HeterogeneousnuclearribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)在非小细胞肺癌的表达,探讨hnRNPA2/B1对非小细胞肺癌的诊断价值及与非小细胞肺癌临床分期、淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检测83例原发性非小细胞肺癌(肺癌组)、32例肺良性肿瘤(肺良性肿瘤组)及20例正常肺(正常肺组)组织中hnRNPA2/B1的表达。结果肺癌组hnRNPA2/B1表达阳性率79.50%(66/83),肺良性肿瘤组阳性率43.80%(14/32),正常肺组阳性率40.05%(8/20)。肺癌组阳性率显著高于肺良性肿瘤组及正常肺组(均P<0.05);肺良性肿瘤组阳性率与正常肺组无显著性差异(P>0.05)。Ⅰ~Ⅱ期肺癌的hnRNPA2/B1表达阳性率为67.60%(25/37),Ⅲ~Ⅳ期肺癌的阳性率为89.10%(41/46)。Ⅲ~Ⅳ期肺癌的阳性率显著高于Ⅰ~Ⅱ期肺癌(P<0.05)。有淋巴结转移患者的hnRNPA2/B1表达阳性率为88.00%(44/55),无淋巴结转移者的阳性率为66.70%(22/33)。有淋巴结转移患者的阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。结论hnRNPA2/B1过量表达与非小细胞肺癌的发生、发展和转移密切相关。检测hnRNPA2/B1对非小细胞肺癌的早期诊断、病情预测有重要的临床意义。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 肿瘤标志物 异质性细胞核核糖蛋白A2/B1
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血清糖蛋白-2α对于重症急性胰腺炎的诊断及预后评估价值 被引量:7
8
作者 张成 许东伟 高泽立 《安徽医药》 CAS 2018年第11期2141-2144,共4页
目的对血清糖蛋白-2α(GP-2α)在重症急性胰腺炎(SAP)中的诊断及预后中的评估价值进行研究。方法选择2012年6月至2016年6月上海市浦东新区周浦医院48例SAP患者,在入院第1、3、5、7、14天检测外周静脉血中GP-2α水平,并与同期40例轻症急... 目的对血清糖蛋白-2α(GP-2α)在重症急性胰腺炎(SAP)中的诊断及预后中的评估价值进行研究。方法选择2012年6月至2016年6月上海市浦东新区周浦医院48例SAP患者,在入院第1、3、5、7、14天检测外周静脉血中GP-2α水平,并与同期40例轻症急性胰腺炎(MAP)患者作对照研究。结果 SAP患者的血清GP-2α水平在入院后第3天[(22.70±5.92)U vs.(12.91±3.78)U]、第5天[(25.61±11.23)U vs.(13.25±7.94)U]、第7天[(15.60±6.22)U vs.(6.69±5.53)U]、第14天[(14.37±6.79)U vs.(3.41±1.08)U]均显著高于MAP患者;治愈的SAP组患者入院后血清GP-2α水平逐渐升高,于第5天[(25.61±11.23)U]达到峰值,随后逐渐下降,在第14天[(14.37±6.79)U]仍显著高于MAP组患者;死亡组的SAP患者GP-2α升高后不再降低。第3天的GP-2α水平[(38.44±16.98)U]对于辨别SAP和MAP价值高于糖蛋白-2水平。结论GP-2α对于重症急性胰腺炎的早期诊断及预后特异性高,持续时间较长,可能具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 重症 糖蛋白-2α
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庚型肝炎病毒包膜糖蛋白E2基因在昆虫细胞中的表达 被引量:5
9
作者 朱诗应 潘卫 戚中田 《中国病毒学》 CSCD 1999年第2期135-139,共5页
用PCR扩增出HGVE2全基因,克隆进杆状病毒表达载体pFASTBACHTa中,构建成重组转座载体pFASTBACE2,转化DH10BAC大肠杆菌感受态细胞,筛选阳性菌落,抽提大分子质粒DNA,获得含HGVE2基因... 用PCR扩增出HGVE2全基因,克隆进杆状病毒表达载体pFASTBACHTa中,构建成重组转座载体pFASTBACE2,转化DH10BAC大肠杆菌感受态细胞,筛选阳性菌落,抽提大分子质粒DNA,获得含HGVE2基因的重组杆状病毒穿梭载体,转染昆虫草地夜蛾Sf9细胞,出现细胞病变后,收集含有重组病毒颗粒的培养上清,重新感染草地夜蛾Sf9单层细胞及甜菜夜蛾幼虫,分别收集Sf9细胞和甜菜夜蛾幼虫体内的血淋巴细胞,进行12%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,可见表达的融合蛋白带,经亲和层析进行蛋白纯化,用ELISA方法检测各类血清标本。 展开更多
关键词 庚型肝炎病毒 包膜糖蛋白E2 昆虫细胞 基因表达
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汉滩病毒G_2重组腺病毒的表达及其基因免疫的研究 被引量:3
10
作者 吴兴安 于澜 +4 位作者 胡刚 张芳琳 白文涛 史梦远 徐志凯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期415-417,共3页
目的:在VeroE6细胞中表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白G2重组腺病毒(AdenoG2),并探讨其诱导免疫应答特性。方法:以HTNVAdenoG2病毒原种(滴度约1×1013pfu/L)感染VeroE6细胞,用IFA法检测其表达产物。以表达产物免疫BALB/c小鼠后,用ELIS... 目的:在VeroE6细胞中表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白G2重组腺病毒(AdenoG2),并探讨其诱导免疫应答特性。方法:以HTNVAdenoG2病毒原种(滴度约1×1013pfu/L)感染VeroE6细胞,用IFA法检测其表达产物。以表达产物免疫BALB/c小鼠后,用ELISA、微量细胞培养中和试验及淋巴细胞增殖试验检测体液及细胞免疫应答。结果:用HTNVAdenoG2感染VeroE6细胞后,可检测到HTNV糖蛋白G2的表达。用HTNVAdenoG2免疫小鼠后,可诱导产生抗HTNV糖蛋白G2的特异性抗体,抗体效价为1∶40。微量细胞培养中和试验的结果表明,HTNVAdenoG2还可刺激小鼠产生低水平的中和抗体;但淋巴细胞的增殖反应不明显。结论:在VeroE6细胞中成功地表达了HTNV糖蛋白G2。以HTNVAdenoG2免疫小鼠后,主要刺激小鼠产生特异性的抗HTNV体液免疫应答,而特异性的细胞免疫应答不明显。本研究结果为HTNV基因工程疫苗的研制提供了实验依据。 展开更多
关键词 汉滩病毒 糖蛋白G2 重组腺病毒 免疫
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玻璃体内注射原纤维蛋白-2(FBN2)重组蛋白对FBN2缺陷型视网膜病变的影响
11
作者 张瑞雪 蒋文君 +3 位作者 郭大东 石永伟 毕宏生 温莹 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第6期428-432,共5页
目的探讨玻璃体内注射原纤维蛋白-2(FBN2)重组蛋白对FBN2缺陷型视网膜病变的影响。方法取SPF级C57BL/6J小鼠32只,随机分为4组:正常对照组、阴性对照组、FBN2敲减组、FBN2重组蛋白组,每组8只小鼠,取右眼作为实验眼。入组后,正常对照组小... 目的探讨玻璃体内注射原纤维蛋白-2(FBN2)重组蛋白对FBN2缺陷型视网膜病变的影响。方法取SPF级C57BL/6J小鼠32只,随机分为4组:正常对照组、阴性对照组、FBN2敲减组、FBN2重组蛋白组,每组8只小鼠,取右眼作为实验眼。入组后,正常对照组小鼠不进行干预,阴性对照组小鼠玻璃体内注射3μL空载体(1 mg·L^(-1)),FBN2敲减组及FBN2重组蛋白组小鼠玻璃体内注射3μL腺相关病毒(AAV)(1 mg·L^(-1)),4周后FBN2重组蛋白组小鼠玻璃体内注射3μL FBN2重组蛋白(1 mg·L^(-1))。采用视网膜电图(ERG)视觉电生理仪和光学相干断层扫描(OCT)仪分别检测小鼠视网膜Rod-b、Max-a波振幅和视网膜结构变化;RT-PCR、Western blot检测小鼠视网膜中FBN2、微原纤维相关糖蛋白(MAGP-2)、Ⅰ型胶原蛋白(COL1)mRNA和蛋白表达变化。结果ERG检测结果显示,与阴性对照组和正常对照组相比,FBN2敲减组和FBN2重组蛋白组小鼠视网膜ERG Rod-b、Max-a波振幅均变小(均为P<0.05);与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组视网膜ERG Rod-b、Max-a波振幅均明显增加(均为P<0.05)。OCT检测结果显示,与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组小鼠视网膜色素上皮层组织结构恢复正常,光反射变规则。RT-PCR检测结果显示,与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组小鼠视网膜组织FBN2 mRNA表达明显升高,COL1、MAGP-2 mRNA表达均明显降低(均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,与FBN2敲减组相比,FBN2重组蛋白组小鼠视网膜组织FBN2蛋白表达明显升高,COL1、MAGP-2蛋白表达均明显降低(均为P<0.05)。结论玻璃体内注射FBN2重组蛋白可以弥补FBN2缺陷型视网膜病变小鼠FBN2内源性缺失,通过调控COL1、MAGP-2表达可达到治疗疾病的作用。 展开更多
关键词 原纤维蛋白-2 重组蛋白 视网膜病变 微原纤维相关糖蛋白-2 Ⅰ型胶原蛋白
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汉滩病毒糖蛋白G2酵母双杂交诱饵载体的构建及初步鉴定 被引量:2
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作者 白文涛 张芳琳 +5 位作者 吴兴安 胡刚 于澜 史梦远 王海涛 徐志凯 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第2期105-107,共3页
目的利用Ras募集系统(RRS),构建并鉴定含汉滩病毒囊膜糖蛋白G2的诱饵载体。方法将汉滩病毒76-118株囊膜糖蛋白G2基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G2及Ras-G2’(G2’无前导肽序列)。将两个嵌合基因分别克隆入酵母表达载体pMet25,并转... 目的利用Ras募集系统(RRS),构建并鉴定含汉滩病毒囊膜糖蛋白G2的诱饵载体。方法将汉滩病毒76-118株囊膜糖蛋白G2基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G2及Ras-G2’(G2’无前导肽序列)。将两个嵌合基因分别克隆入酵母表达载体pMet25,并转化至酵母温度敏感株cdc25-2,检测其对RRS系统的激活作用。结果限制性内切酶酶切鉴定表明,Met-G2和Met-G2’载体构建正确。激活试验结果为阴性。结论Met-G2和Met-G2’载体可用于从cDNA文库中筛选汉滩病毒受体。 展开更多
关键词 汉滩病毒 糖蛋白G2 酵母双杂交 Ras募集系统(RRS)
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血清GP-2α、S100A12、MAP1-LC3和IP6K1水平在重症急性胰腺炎患者预后预测中的应用价值 被引量:3
13
作者 马晓莹 朱芳丽 +3 位作者 乔红 刘烨 杨悦 韩俊岭 《国际消化病杂志》 CAS 2022年第6期366-371,共6页
目的探究血清糖蛋白-2α(GP-2α)、S100钙结合蛋白A12(S100A12)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)和肌醇六磷酸激酶1(IP6K1)的表达水平在重症急性胰腺炎(SAP)患者预后预测中的应用价值。方法选择2020年2月至2021年10月秦皇岛市第一医院收... 目的探究血清糖蛋白-2α(GP-2α)、S100钙结合蛋白A12(S100A12)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)和肌醇六磷酸激酶1(IP6K1)的表达水平在重症急性胰腺炎(SAP)患者预后预测中的应用价值。方法选择2020年2月至2021年10月秦皇岛市第一医院收治的148例SAP患者作为研究对象。采用ELISA法检测患者入院时血清GP-2α、S100A12、MAP1-LC3和IP6K1的表达水平。采用多因素logistic回归模型分析影响SAP患者预后的危险因素。采用ROC曲线评估血清GP-2α、S100A12、MAP1-LC3和IP6K1单独及联合检测对SAP患者预后的判断效能。结果随访结果显示,148例SAP患者中有44例预后不良,104例预后良好。预后不良组入院时血清GP-2α、S100A12、MAP1-LC3和IP6K1的表达水平均高于预后良好组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,MAP1-LC3(OR=151.849,95%CI:15.578~1480.156)、IP6K1(OR=3.035,95%CI:1.477~6.233)、GP-2α(OR=1.819,95%CI:1.200~2.758)和S100A12(OR=1.016,95%CI:1.008~1.024)均为影响SAP患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,4项联合检测结果判断SAP患者预后的AUC为0.947(95%CI:0.905~0.988),均大于单独检测(P均<0.05)。结论血清GP-2α、S100A12、MAP1-LC3和IP6K1联合检测可准确预测SAP患者的预后情况。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 糖蛋白-2α S100钙结合蛋白A12 微管相关蛋白1轻链3 肌醇六磷酸激酶1
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猪瘟病毒HCLV株E_2核苷酸序列与结构分析 被引量:2
14
作者 傅烈振 朱燕 +3 位作者 王家富 张芄玮 王宁 张楚瑜 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1999年第4期509-512,共4页
用 R T P C R技术从 C S F V H C L V 株 F482 代感染兔脾的细胞总 R N A 中分段扩增出了 C S F V E2 基因特异的3 个部分重叠的 D N A 片段(大小分别为 499 bp、572 bp 和 245 bp... 用 R T P C R技术从 C S F V H C L V 株 F482 代感染兔脾的细胞总 R N A 中分段扩增出了 C S F V E2 基因特异的3 个部分重叠的 D N A 片段(大小分别为 499 bp、572 bp 和 245 bp),并将之分别克隆到p G E M T 载体上 经核苷酸序列测定和片段重叠完成了包含 E2 全长基因的 1 144 bp 序列的测定,其 G C含量为49.0% :核苷酸序列与国外报道的各株病毒的 E2 基因同源性分别为83.5% ~97.5% ;其推导的氨基酸序列的同源性也分别为89.3%~96.2% ,变异主要分布在 E2 蛋白的 N 展开更多
关键词 猪瘟病毒 囊膜糖蛋白E2 核苷酸序列 抗原漂变
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猪瘟病毒浙江分离株体外生长特性及其囊膜糖蛋白E2分子的变异分析 被引量:4
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作者 万婧 陈宁 +4 位作者 童超 廖迅 谢文绮 李肖梁 方维焕 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期794-798,共5页
为了研究分离于浙江省衢州和杭州的2株猪瘟病毒基因2型流行毒株QZ-07、HZ1-08在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)中的生长特性及其囊膜糖蛋白E2的分子进化特征,采用间接免疫荧光、效价测定和进化分析等分子生物学方法将基因2型流行毒株... 为了研究分离于浙江省衢州和杭州的2株猪瘟病毒基因2型流行毒株QZ-07、HZ1-08在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)中的生长特性及其囊膜糖蛋白E2的分子进化特征,采用间接免疫荧光、效价测定和进化分析等分子生物学方法将基因2型流行毒株与基因1型石门株进行了比较。结果表明,石门株在PK-15细胞中的增殖效率明显高于ST细胞;感染PK-15细胞后第48小时,细胞内的效价可达107TCID50/mL,而在ST细胞中的效价只有105.25 TCID50/mL。基因2型毒株在PK-15细胞中的增殖水平明显低于ST细胞,尤其以HZ1-08株更为明显;感染ST细胞后第48小时,细胞内的效价为105 TCID50/mL,而PK-15细胞中的效价只有102.75 TCID50/mL。两基因型毒株E2的核苷酸同源性低于90%,氨基酸同源性约为90%。表明,基因2型毒株的体外生长特性及其E2的分子特性均与基因1型毒株存在差异。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 生长特性 囊膜糖蛋白E2 分子变异
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基于生物信息学分析异质性细胞核核糖蛋白A2B1在前列腺癌中的表达及其作用机制探索
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作者 王苏贵 皇立媛 +3 位作者 姜福 金吴自 余张先 云李强 《中华转移性肿瘤杂志》 2023年第1期52-59,共8页
目的基于生物信息学分析异质性细胞核核糖蛋白A2B1(HNRNPA2B1)在前列腺癌中的表达及其作用机制探索。方法从癌症基因图谱数据库(TCGA)和人类蛋白组图谱(THPA)获取HNRNPA2B1在前列腺癌组织及正常前列腺组织当中的基因与蛋白水平。分析HNR... 目的基于生物信息学分析异质性细胞核核糖蛋白A2B1(HNRNPA2B1)在前列腺癌中的表达及其作用机制探索。方法从癌症基因图谱数据库(TCGA)和人类蛋白组图谱(THPA)获取HNRNPA2B1在前列腺癌组织及正常前列腺组织当中的基因与蛋白水平。分析HNRNPA2B1与前列腺癌患者临床病理特征的相关性及在前列腺癌不同亚组的表达情况,评估HNRNPA2B1在前列腺癌中的诊断及预后价值。通过基因富集分析对HNRNPA2B1在前列腺癌中的作用机制进行初步探索。结果在TCGA和THPA数据库中,HNRNPA2B1mRNA和蛋白水平在前列腺癌组织中明显高于正常前列腺组织。HNRNPA2B1与T分期、N分期及Gleason评分显著相关并显著高表达。HNRNPA2B1的表达情况可以有效区分前列腺癌组织与正常前列腺组织(AUC=0.764)。HNRNPA2B1表达较高患者具有较差的无进展生存。HNRNPA2B1在前列腺癌中可能与钙离子信号通路、氧化磷酸化信号通路、氨基酸及其衍生物代谢信号通路和蛋白质翻译信号通路有关。结论HNRNPA2B1在前列腺癌中高表达,且具有较高的诊断及预后价值,并可能通过参加肿瘤相关信号通路在前列腺癌中发挥作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 异质性细胞核核糖蛋白A2B1 生物信息学
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异质性细胞核核糖蛋白A2B1在前列腺癌中的作用及其靶向中药活性成分筛选研究
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作者 王苏贵 皇立媛 +4 位作者 姜福金 吴自余 张先云 李强 严大理 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 北大核心 2023年第6期731-736,共6页
目的探讨异质性细胞核核糖蛋白A2B1(HNRNPA2B1)在前列腺癌中的作用,并进一步筛选靶向治疗前列腺癌的中药活性成分。方法通过GEPIA、UALCAN和THPA数据库分析HNRNPA2B1在前列腺癌组织及正常组织中的表达水平及与前列腺癌预后关系,并分析HN... 目的探讨异质性细胞核核糖蛋白A2B1(HNRNPA2B1)在前列腺癌中的作用,并进一步筛选靶向治疗前列腺癌的中药活性成分。方法通过GEPIA、UALCAN和THPA数据库分析HNRNPA2B1在前列腺癌组织及正常组织中的表达水平及与前列腺癌预后关系,并分析HNRNPA2B1表达水平与前列腺癌患者临床特征关系。使用TIMER数据库分析HNRNPA2B1与前列腺癌免疫细胞浸润的相关性。使用LinkedOmics和DAVID数据库分析HNRNPA2B1基因的正相关基因和KEGG通路。使用比较毒理基因组数据库(CTD)筛选能靶向作用于HNRNPA2B1的中药活性成分。结果HNRNPA2B1在前列腺癌中高表达,与前列腺癌预后相关,且与淋巴结转移及Gleason评分有关。HNRNPA2B1与细胞纯度、B细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞均呈正相关(r=0.197、0.355、0.363、0.114、0.327、0.258,均P<0.05),其参与前列腺癌细胞的免疫浸润。KEGG通路分析HNRNPA2B1及其正相关基因主要参与剪切体通路和泛素介导的蛋白水解通路。进一步通过比较毒理基因组数据库筛选发现槲皮素、白藜芦醇、染料木黄酮等可能是靶向作用于HNRNPA2B1的中药活性成分。结论HNRNPA2B1在前列腺癌中高表达,与前列腺癌预后及免疫浸润有关。槲皮素、白藜芦醇、染料木黄酮等中药活性成分可能通过靶向作用于HNRNPA2B1在前列腺癌中发挥作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 异质性细胞核核糖蛋白A2B1 生物信息学 中药活性成分
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乙型肝炎病毒X蛋白与去唾液酸糖蛋白受体2突变体相互作用的研究 被引量:3
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作者 陆荫英 陈天艳 +7 位作者 成军 梁耀东 王琳 刘妍 张健 邵清 李克 张玲霞 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第8期1126-1130,共5页
目的:筛选并克隆鉴定人肝细胞中与乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBxAg)相互作用蛋白的基因,明确HBxAg在HBV感染及致癌过程中的具体作用。方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增HBxAg基因,连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH10... 目的:筛选并克隆鉴定人肝细胞中与乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBxAg)相互作用蛋白的基因,明确HBxAg在HBV感染及致癌过程中的具体作用。方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增HBxAg基因,连接入酵母表达载体pGBKT7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出阳性目的片段并测序,进行生物信息学分析。根据Genbank中的序列信息设计引物,从HepG2细胞的mRNA中逆转录出去唾液酸蛋白受体2(ASGPR2)突变体的完整序列,克隆到另一酵母表达载体pGADT7中,体外免疫共沉淀再次证明HBxAg与ASGPR2突变体的结合作用。结果:成功克隆出HBxAg基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在四缺(SD/-Trp-Leu-His-Ade)培养基又能分解X-α-半乳糖(X-α-gal)变成蓝色的真阳性菌落41个,其中有一个是ASGPR2的新突变体。HepG2细胞的mRNA中能逆转录出ASGPR2的全基因序列, 体外免疫共沉淀结果证实该突变体与HBxAg在体外也有结合作用。结论:成功克隆出HBxAg的肝细胞结合蛋白,发现一新的ASGPR2突变体,并证实HBxAg与ASGPR2突变体在体外及酵母细胞内均有结合作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 X蛋白 基因 去唾液酸糖蛋白受体2 突变体样互作用 多聚酶链反应
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HCV结构蛋白E2在果蝇S2细胞中的稳定表达 被引量:2
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作者 边奕鑫 何作萍 +2 位作者 杜鹏 王文敬 黎诚耀 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期972-975,共4页
目的获得在果蝇S2(S2)细胞中稳定表达的重组丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白2(rE2)。方法 PCR扩增截短型E2基因,克隆至pCR2.1-T载体,将测序正确的基因亚克隆至表达载体pMT/Bip/V5-HisC,构建重组表达载体pMT-E2。用FuGENE HD转染试剂将pMT-E... 目的获得在果蝇S2(S2)细胞中稳定表达的重组丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白2(rE2)。方法 PCR扩增截短型E2基因,克隆至pCR2.1-T载体,将测序正确的基因亚克隆至表达载体pMT/Bip/V5-HisC,构建重组表达载体pMT-E2。用FuGENE HD转染试剂将pMT-E2转染至S2细胞,并筛选抗性细胞,然后诱导目的蛋白表达;以Western-blotting法鉴定表达产物与HCV感染者血清反应性。结果成功构建截短型HCV E2表达载体pMT-E2,并获得到稳定表达rE2蛋白的S2细胞株,Western-blotting法证明rE2具有良好的免疫学活性。结论在S2细胞成功表达的HCV rE2蛋白可用于HCV感染者血清的鉴定,为HCV诊断性抗原的优化和重组疫苗的研发提供了实验材料。 展开更多
关键词 HCV 包膜糖蛋白E2 果蝇S2细胞 蛋白表达
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胚胎期氟他胺暴露对SD大鼠支持细胞增殖和成熟的影响 被引量:2
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作者 赵丹 何大维 +2 位作者 张永波 何文飞 魏光辉 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第8期505-508,共4页
目的:探讨胚胎期暴露于氟他胺(Flu)对SD雄性仔鼠睾丸支持细胞的影响。方法:将妊娠的SD大鼠随机分为Flu组和正常组,Flu组自妊娠后第12~21日每日皮下注射25 mg/kg Flu以建立生殖发育障碍模型,正常组不作任何处理。分别在雄性幼仔出生后... 目的:探讨胚胎期暴露于氟他胺(Flu)对SD雄性仔鼠睾丸支持细胞的影响。方法:将妊娠的SD大鼠随机分为Flu组和正常组,Flu组自妊娠后第12~21日每日皮下注射25 mg/kg Flu以建立生殖发育障碍模型,正常组不作任何处理。分别在雄性幼仔出生后第13日(PD 13)、PD15、PD 17随机颈椎脱臼法处死幼仔鼠,收集雄仔鼠睾丸组织。免疫组织化学检测雄仔鼠BrdU并计算支持细胞增殖指数,Real-time PCR检测各组雄仔鼠SGP-2基因的表达。结果:随着生长发育,正常组和Flu组雄仔鼠睾丸支持细胞增殖指数均呈下降趋势,PD 17正常组支持细胞增殖已经停止,Flu组PD 13、PD 15、PD 17支持细胞增殖指数升高,明显高于正常组(P<0.05)。PD13 Flu组支持细胞SGP-2 mRNA表达量较正常组无明显差异(P>0.05);PD 15、PD 17 Flu组支持细胞中SGP-2 mRNA表达量明显低于正常组(P<0.01)。结论:胚胎期Flu暴露导致支持细胞增殖期延长、成熟延迟,这可能是导致其生殖细胞发育障碍的重要原因之一。 展开更多
关键词 氟他胺(Flu) 支持细胞 细胞增殖 硫酸糖蛋白-2(SGP-2)
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