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题名产对香豆酸酿酒酵母工程菌株的构建与优化
被引量：3
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作者
张思琪
周景文
张国强
陈坚
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机构
江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室
江南大学生物工程学院
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出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第9期1838-1848,共11页
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基金
国家优秀青年科学基金(No.21822806)
国家自然科学基金(No.31670095)资助。
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文摘
对香豆酸是黄酮类、芪类等天然活性化合物的重要前体,在生物医药、食品等行业应用广泛。与传统植物提取和化学合成相比,微生物合成对香豆酸因其具有生产周期短、转化效率高等优势而得到广泛关注。为构建高产对香豆酸酵母工程菌株,以酿酒酵母为出发菌,通过敲除酪氨酸合成竞争路径基因ARO10和PDC5,突变芳香族氨基酸合成调控基因ARO4K229L与ARO7G141S、解除酪氨酸负反馈抑制、并整合酪氨酸解氨酶FjTAL,获得的工程菌C001对香豆酸产量为296.73 mg/L。为进一步提高对香豆酸合成前体积累,分别敲除8个与氨基酸、糖类等转运相关基因并强化糖异生途径,分析其对对香豆酸积累的影响。结果表明,敲除GAL2及过表达EcppsA,对香豆酸产量提高至475.11 mg/L。最后,分析了FjTAL蛋白锚定至酵母液泡对产物积累的影响,结果表明其定位液泡后对香豆酸产量明显提升,达到593.04mg/L。通过强化前体物供应,阻断竞争旁路途径,利用亚细胞定位等策略有效提高对香豆酸产量,为后续黄酮类及芪类化合物的合成提供高效平台菌株,具有重要的应用前景。
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关键词
酿酒酵母
对香豆酸
转运蛋白
糖异生途径
亚细胞定位
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Keywords
Saccharomyces cerevisiae
p-coumaric acid
transporter
gluconeogenesis
subcellular localization
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分类号
TQ921
[轻工技术与工程—发酵工程]
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