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UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5酶活性及酶反应动力学分析
被引量：
3
1
作者
岑咏一
刘震
+1 位作者
李旭锋
杨毅
《四川大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期169-174,共6页
运用PCR扩增获得了属于尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(UGT)家族UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5的cDNA序列,构建了三种基因的GST融合表达载体,使用大肠杆菌对三种基因进行原核表达,从裂解液上清中获得具有活性的目的蛋白.分别以ABA、对氨基苯甲...
运用PCR扩增获得了属于尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(UGT)家族UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5的cDNA序列,构建了三种基因的GST融合表达载体,使用大肠杆菌对三种基因进行原核表达,从裂解液上清中获得具有活性的目的蛋白.分别以ABA、对氨基苯甲酸作为反应底物,通过高效液相色谱法,测定三种蛋白的酶活力.结果发现除了UGT75B1对对氨基苯甲酸表现出很高的活性以外,另外两种蛋白仅表现出了低水平的活性.三种蛋白对ABA都表现出了活性,UGT71B6具有最高的酶活力.对UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5三种蛋白对ABA的作用进行了体外酶反应动力学分析,测定出它们的Km值分别为:0.73、0.43和0.45mM.以上结果说明UGT75B1对对氨基苯甲酸的活性明显高于ABA,对氨基苯甲酸是其专一底物.UGT71B6和UGT71C5对ABA都有较高的活性,两者Km值差距不大.
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关键词
高效液相色谱(HPLC)
拟南芥
尿苷二磷酸
糖基转移酶
(U
gt
)
糖基转移酶
(
gt
)
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职称材料
箭叶淫羊藿EsUF3GT基因的克隆及表达分析
被引量：
15
2
作者
王应丽
黄文俊
王瑛
《植物科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期602-611,共10页
类黄酮3-O-糖基转移酶（flavonoid 3-O-glucosyltransferase,UF3GT）可以把不稳定的花色素催化成花色素苷。本研究采用同源基因克隆技术获得箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum（Sieb. and Zucc.） Maxim. UF3GT基因cDNA开放阅读框（Open R...
类黄酮3-O-糖基转移酶（flavonoid 3-O-glucosyltransferase,UF3GT）可以把不稳定的花色素催化成花色素苷。本研究采用同源基因克隆技术获得箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum（Sieb. and Zucc.） Maxim. UF3GT基因cDNA开放阅读框（Open Reading Frame,ORF）序列,命名为EsUF3GT（GenBank注册号为KJ648620）。序列分析表明,该基因ORF全长为1356 bp,编码451个氨基酸,与其它植物中UF3GT蛋白序列的相似性为40%~50%。进化树分析发现,EsUF3GT同催化类黄酮3-O糖基化的糖基转移酶聚为一枝。qRT-PCR分析结果显示,EsUF3GT在花中的表达量最高,约为叶片、花蕾中表达水平的2.3倍,果实及根中表达水平的19倍。花青素含量检测表明,花蕾中的含量最高（130.4 mg/100 g）,分别是叶片、花、果实及根中含量的3.5、5.2、72、87倍。我们推测EsUF3GT参与了箭叶淫羊藿花色素苷的生物合成,此结果为深入开展EsUF3GT的生化功能研究奠定了基础。
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关键词
箭叶淫羊藿
花色素苷
类黄酮3-O-
糖基转移酶
(UF3
gt
)
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职称材料
题名
UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5酶活性及酶反应动力学分析
被引量：
3
1
作者
岑咏一
刘震
李旭锋
杨毅
机构
四川大学生命科学学院与生物资源与生态环境教育部重点实验室
出处
《四川大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第1期169-174,共6页
基金
国家自然科学基金(31171586)
文摘
运用PCR扩增获得了属于尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶(UGT)家族UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5的cDNA序列,构建了三种基因的GST融合表达载体,使用大肠杆菌对三种基因进行原核表达,从裂解液上清中获得具有活性的目的蛋白.分别以ABA、对氨基苯甲酸作为反应底物,通过高效液相色谱法,测定三种蛋白的酶活力.结果发现除了UGT75B1对对氨基苯甲酸表现出很高的活性以外,另外两种蛋白仅表现出了低水平的活性.三种蛋白对ABA都表现出了活性,UGT71B6具有最高的酶活力.对UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5三种蛋白对ABA的作用进行了体外酶反应动力学分析,测定出它们的Km值分别为:0.73、0.43和0.45mM.以上结果说明UGT75B1对对氨基苯甲酸的活性明显高于ABA,对氨基苯甲酸是其专一底物.UGT71B6和UGT71C5对ABA都有较高的活性,两者Km值差距不大.
关键词
高效液相色谱(HPLC)
拟南芥
尿苷二磷酸
糖基转移酶
(U
gt
)
糖基转移酶
(
gt
)
Keywords
High performance liquid chromatography （HPLC）
Arabidopsis thaliana
UDP glycosyltransferase （U
gt
）
Glycosyltransferase（
gt
）
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
箭叶淫羊藿EsUF3GT基因的克隆及表达分析
被引量：
15
2
作者
王应丽
黄文俊
王瑛
机构
中国科学院植物种质创新与特色农业重点实验室中国科学院武汉植物园
中国科学院大学
出处
《植物科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第6期602-611,共10页
基金
国家自然科学基金(31270340,31200225)
中国科学院科研装备研制项目(YZ201227)
文摘
类黄酮3-O-糖基转移酶（flavonoid 3-O-glucosyltransferase,UF3GT）可以把不稳定的花色素催化成花色素苷。本研究采用同源基因克隆技术获得箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum（Sieb. and Zucc.） Maxim. UF3GT基因cDNA开放阅读框（Open Reading Frame,ORF）序列,命名为EsUF3GT（GenBank注册号为KJ648620）。序列分析表明,该基因ORF全长为1356 bp,编码451个氨基酸,与其它植物中UF3GT蛋白序列的相似性为40%~50%。进化树分析发现,EsUF3GT同催化类黄酮3-O糖基化的糖基转移酶聚为一枝。qRT-PCR分析结果显示,EsUF3GT在花中的表达量最高,约为叶片、花蕾中表达水平的2.3倍,果实及根中表达水平的19倍。花青素含量检测表明,花蕾中的含量最高（130.4 mg/100 g）,分别是叶片、花、果实及根中含量的3.5、5.2、72、87倍。我们推测EsUF3GT参与了箭叶淫羊藿花色素苷的生物合成,此结果为深入开展EsUF3GT的生化功能研究奠定了基础。
关键词
箭叶淫羊藿
花色素苷
类黄酮3-O-
糖基转移酶
(UF3
gt
)
Keywords
Epimedium sagittatum （Sieb. and Zucc.） Maxim.
Anthocyanin
Flavonoid 3-O-glucosyltransferase （UF3
gt
）
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
UGT75B1、UGT71B6、UGT71C5酶活性及酶反应动力学分析
岑咏一
刘震
李旭锋
杨毅
《四川大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016
3
下载PDF
职称材料
2
箭叶淫羊藿EsUF3GT基因的克隆及表达分析
王应丽
黄文俊
王瑛
《植物科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
15
下载PDF
职称材料
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