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Atg7-siRNA通过调节精氨酸循环干扰食管癌ECA109细胞放疗敏感性 被引量：4
1
作者 张小红 周云 +2 位作者 杜秋莹 任慧欣 王超群 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2021年第4期28-34,共7页
目的探讨siRNA干扰自噬相关基因7(Atg7)后,对ECA109细胞放疗敏感性的影响以及对精氨酸循环相关通路的调控。方法食管癌ECA109细胞分为Ctrl组、siRNA组、Ctrl+R8Gy组(8Gy放射剂量处理的转染Atg7-Ctrl的ECA109细胞)和siRNA+R8Gy组(8Gy放... 目的探讨siRNA干扰自噬相关基因7(Atg7)后,对ECA109细胞放疗敏感性的影响以及对精氨酸循环相关通路的调控。方法食管癌ECA109细胞分为Ctrl组、siRNA组、Ctrl+R8Gy组(8Gy放射剂量处理的转染Atg7-Ctrl的ECA109细胞)和siRNA+R8Gy组(8Gy放射剂量处理的转染Atg7-siRNA的ECA109细胞);采用Western blotting法分别检测各组细胞Atg7、Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、精氨酸琥珀酸合成酶1(ASS1)和精氨酸琥珀酸裂解酶(ASL)蛋白的表达。CCK8实验检测精氨酸对ECA109细胞的影响,绘制不同浓度(0、8、16、32、64、128 mmol/L)精氨酸处理下的细胞存活曲线,并计算其IC50和IC10,将IC10作为后续实验的作用浓度。采用精氨酸和siRNA分别处理细胞,对细胞进行8Gy照射,24 h后通过计算细胞数量评估细胞的死亡率。结果无论放疗前后,siRNA干扰均可使细胞的Atg7蛋白下调(P<0.01)。与Ctrl组相比,Ctrl+R8Gy组自噬相关蛋白Beclin-1和LC3Ⅱ上调(P<0.01);与Ctrl+R8Gy组相比,siRNA+R8Gy组自噬相关蛋白Beclin-1和LC3Ⅱ下调(P<0.01)。与Ctrl+R8Gy组相比,siRNA+R8Gy组精氨酸循环相关通路蛋白ASS1和ASL上调(P<0.01)。精氨酸对ECA109细胞具有增殖抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。放疗后24 h,细胞死亡量分析显示,siRNA干扰可以提高细胞死亡率(F=73.59,P<0.001),添加精氨酸可以提高细胞死亡率(F=158.72,P<0.001),siRNA和精氨酸同时作用时细胞死亡率最高(F=7.88,P=0.02)。结论放疗可以诱导ECA109细胞发生自噬,Atg7敲低可以拮抗放疗诱导的自噬,提高放疗诱导的ECA109细胞死亡率,增加ECA109细胞对放疗的敏感性。Atg7敲低可以调控ECA109细胞放疗后精氨酸循环相关通路蛋白,提高精氨酸浓度增加ECA109细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 siRNA干扰自噬相关基因7 精氨酸琥珀酸合成酶1 精氨酸琥珀酸裂解酶 食管癌 精氨酸 放疗敏感性
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血清精氨酸代琥珀酸裂解酶的测定在肝病诊断中的意义 被引量：7
2
作者 俸家富 陈婷梅 涂植光 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期521-524,共4页
目的探讨血清精氨酸代琥珀酸裂解酶（ASL）对肝病的诊断效能。方法测定291例肝病患者、247例非肝病患者和32名健康对照血清ASL和ALT、AST、GGT、LDH、ALP活性及TBil浓度；其中31例肝病患者进行了病理组织学检查。结果ROC曲线显示ASL对... 目的探讨血清精氨酸代琥珀酸裂解酶（ASL）对肝病的诊断效能。方法测定291例肝病患者、247例非肝病患者和32名健康对照血清ASL和ALT、AST、GGT、LDH、ALP活性及TBil浓度；其中31例肝病患者进行了病理组织学检查。结果ROC曲线显示ASL对判断肝病的敏感度为100．0％，特异性为91．1％（分界值=8．0U／L）；ALT和AST的敏感度为97．60%和83．8％，特异性仅分别为24．7％和28．3％（分界值=40．0U／L）。ASL在不同肝病的变化情况是肝癌〉急性肝炎〉肝硬化〉慢性肝炎；ASL浓度[（86．9±26．5）u／L]与肝病理组织学炎症活动度计分（9．83±3．36）呈正相关（r=0．417，P=0．019）。结论ASL诊断肝病的敏感度、特异性优于AST和ALT，是肝病诊断的有用指标。 展开更多
关键词 丙氨酸氨基转移酶 天冬氨酸氨基转移酶 精氨酸代琥珀酸裂解酶
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血清精氨酸代琥珀酸裂解酶速率测定法的建立及初步临床应用 被引量：3
3
作者 俸家富 陈婷梅 +2 位作者 余晓林 王箭 涂植光 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期217-221,共5页
目的建立适用于自动生化分析仪的血清精氨酸代琥珀酸裂解酶（ASL）活性速率测定法，并进行方法学评价和初步临床研究。方法根据ASL催化的化学反应，以及自动生化分析仪工作特点，建立特异性的偶联酶促反应体系，并对建立的方法进行方法... 目的建立适用于自动生化分析仪的血清精氨酸代琥珀酸裂解酶（ASL）活性速率测定法，并进行方法学评价和初步临床研究。方法根据ASL催化的化学反应，以及自动生化分析仪工作特点，建立特异性的偶联酶促反应体系，并对建立的方法进行方法学评价。共测定309例肝病患者、269例非肝病患者和40名健康人血清ASL和传统的肝病酶学指标ALT、AST活性。结果建立了一种新的可在全自动生化分析仪上测定血清ASL活性的动力学方法。方法学评价研究表明，本法的批内变异系数均值为4．0％，天问变异系数均值为5．9％，平均回收率是100．5％，在0—167．7U／L间有良好的线性范围，最低检测限为0U／L。干扰试验提示：胆红素〈342μmol／L、常用抗凝剂在抗凝浓度内不会产生干扰，Hb〉0．06g／L时产生明显干扰。初步临床分析显示非肝病患者血清ASL水平与对照组问差异无统计学意义（q=0．027，P=0．979），而与ATL和AST间差异均有统计学意义（ALT：q=6．461，P=0．000；AST：q=6．481，P=0．000）。结论成功建立了适用于自动生化分析仪完成的ASL活性速率测定法，其有可能是一个较好的肝病实验诊断指标。 展开更多
关键词 精氨酸代琥珀酸裂解酶 酶活性动力学测定法 血清 方法学评价 肝病
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肝病患者精氨酸代琥珀酸裂解酶分泌及与肝病相关血清学指标的关系
4
作者 唐晚若 陈江 +1 位作者 朱益斌 杨国英 《中外医学研究》 2011年第24期32-33,共2页
目的探讨肝脏疾病时精氨酸代琥珀酸裂解酶(argininosuccinate lyase,ASL)分泌及与肝病相关血清学指标的关系。方法随机选择102例明确诊断的肝病患者,测定血清ASL、甘氨酸胆酸(GCA)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),与71例非肝病患者... 目的探讨肝脏疾病时精氨酸代琥珀酸裂解酶(argininosuccinate lyase,ASL)分泌及与肝病相关血清学指标的关系。方法随机选择102例明确诊断的肝病患者,测定血清ASL、甘氨酸胆酸(GCA)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST),与71例非肝病患者以及40例健康体检者(健康对照组)进行对照比较。结果肝病组血清ASL水平显著高于非肝病组和健康对照组(均P<0.01),而非肝病组和健康对照组间差异无统计学意义;GCA、ALT和AST三组间差异有统计学意义(均P<0.01)。受试者工作特征曲线(ROC Curve)显示ASL诊断肝病疾病的诊断效率高于GCA、ALT和AST,相关性分析显示肝病患者血清ASL水平与GCA、ALT、AST呈正相关性(r=0.618,P<0.01;r=0.473,P<0.01;r=0.433,P<0.01)。结论 ASL是反映肝脏疾病的灵敏指标,与常见的肝病血清学诊断指标有关联性,且诊断效率最高,适合临床开展。 展开更多
关键词 精氨酸代琥珀酸裂解酶 肝病 血清
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肝病患者精氨酸代琥珀酸裂解酶水平与肝病血清学指标的相关性研究
5
作者 林爱丽 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2012年第4期162-164,共3页
[目的]探讨肝脏疾病时患者精氨酸代琥珀酸裂解酶(argininosuccinate lyase,ASL)的分泌及与肝病血清学指标的关系。[方法]102例明确诊断的肝病患者,测定血清ASL、甘氨酸胆酸(GCA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),并与71例... [目的]探讨肝脏疾病时患者精氨酸代琥珀酸裂解酶(argininosuccinate lyase,ASL)的分泌及与肝病血清学指标的关系。[方法]102例明确诊断的肝病患者,测定血清ASL、甘氨酸胆酸(GCA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),并与71例非肝病患者以及40例健康体检者(健康对照组)进行对照比较。[结果]肝病组血清ASL水平显著高于非肝病组和健康对照组(均P<0.01),而非肝病组和健康对照组间差异无统计学意义;GCA、ALT和AST 3组间差异均有统计学意义(均P<0.01)。受试者工作特征曲线(ROC Curve)显示ASL诊断肝脏疾病的诊断效率高于GCA、ALT和AST,相关性分析显示肝病患者血清ASL水平与GCA、ALT、AST呈正相关(均P<0.01)。[结论]ASL是反映肝脏疾病的灵敏指标,与常见的肝病血清学诊断指标有关联性,且诊断效率最高,适合临床开展肝病的鉴别诊断。 展开更多
关键词 肝疾病 精氨酸代琥珀酸裂解酶 血清
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